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鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族的研究 被引量:3
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作者 翁长江 毕丁仁 +5 位作者 沈青春 李自力 石德时 许青荣 刘梅 程峰 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期149-152,共4页
鸡毒霉形体 (Mycoplasma gallisepticum ,GM)基因组中存在着编码细胞表面血凝粘附素蛋白 (protein of My-coplasma gallisepticum adhesin,p MGA)相关基因组的多基因族。为筛选出含有完整的 p MGA基因片段 ,并估算出鸡毒霉形体 HS株基... 鸡毒霉形体 (Mycoplasma gallisepticum ,GM)基因组中存在着编码细胞表面血凝粘附素蛋白 (protein of My-coplasma gallisepticum adhesin,p MGA)相关基因组的多基因族。为筛选出含有完整的 p MGA基因片段 ,并估算出鸡毒霉形体 HS株基因组中 p MGA多基因族的基因数 ,本试验以 p UC1 8为载体 ,用 Eco R 限制性内切酶构建了鸡毒霉形体 HS株的基因组文库。根据 p MGA基因引导序列的保守区和 p MGA基因间隔区的序列 ,人工合成了 2个寡核苷酸探针 (探针 、探针 ) ,经标记后 ,双筛选所建的基因文库 ,从 6 0 0个转化子中共得到的 38个含有 p MGA基因的阳性克隆子 ,选其中 1个 7.5 kb的片段 (17号阳性克隆子 ,W17) ,用 4种限制性内切酶 (Eco R ,Hind ,Pst ,Bgl )酶切消化 ,绘制了该片段的物理图谱。该片段酶切产物经电泳、转膜后与探针 和探针 杂交 ,发现 2个探针杂交图谱基本相同 ,根据杂交带及放射信号的强度值 ,估测出该片段含有 4个 p MGA基因 ,以这个片段所含的 p MGA基因数为标准 ,估算出鸡毒霉形体 HS株含有 39个 p MGA基因。 展开更多
关键词 HS株 鸡毒霉形体 pmga基因 多基因族
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鸡毒霉形体pMGA基因中TGA的同义突变及其原核表达 被引量:3
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作者 胡思顺 肖运才 +1 位作者 李自力 毕丁仁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期188-191,共4页
为了进一步研究鸡毒霉形体黏附素蛋白(pMGA)基因的生物学特性,利用PCR对该基因进行分段扩增,同时同义突变编码色氨酸的TGA及另外2个氨基酸的编码子以便形成酶切位点。将扩增片段连入pMD18-T载体获得含不同长度片段的质粒pMD-Ⅰ,pMD-Ⅱ,p... 为了进一步研究鸡毒霉形体黏附素蛋白(pMGA)基因的生物学特性,利用PCR对该基因进行分段扩增,同时同义突变编码色氨酸的TGA及另外2个氨基酸的编码子以便形成酶切位点。将扩增片段连入pMD18-T载体获得含不同长度片段的质粒pMD-Ⅰ,pMD-Ⅱ,pMD-Ⅲ和pMD-Ⅳ,利用限制性内切酶消化pMD-Ⅰ和pMD-Ⅱ及pMD-Ⅲ和pMD-Ⅳ后回收相应的片段并进行连接获得pMD-Ⅴ(Ⅰ+Ⅱ)和pMD-Ⅵ(Ⅲ+Ⅳ)。再用限制性内切酶消化pMD-Ⅴ和pMD-Ⅵ,回收Ⅴ和Ⅵ,并将其插入表达载体pGEX-KG中构建了含突变基因的GST融合表达载体。同时分别构建了片段Ⅲ及Ⅳ的GST融合表达载体。在IPTG诱导下,构建的表达载体在BL21(DE3)中获得了高效表达。表达产物相对分子质量大小分别为92000、39000、60000,经Western blotting分析证明均具有免疫原性。 展开更多
关键词 pmga 同义突变 pGEX-KG
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鸡败血霉形D9604株pMGA基因的序列测定(英文) 被引量:1
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作者 丁铲 戴亚斌 +2 位作者 于圣清 刘晓文 王晓泉 《中国家禽》 北大核心 2003年第z1期60-71,共12页
对鸡败血霉形体(Mycoplasma gallisepticum,MG)D9604株基因文库中初步估测含有5个pMGA基因的重组质粒MD-411采用不同组合的限制性内切酶进行酶切,根据酶切片段大小及酶切位点绘制了9.2 kb外源片段的物理图谱。然后,选用Hind Ⅲ将该外源... 对鸡败血霉形体(Mycoplasma gallisepticum,MG)D9604株基因文库中初步估测含有5个pMGA基因的重组质粒MD-411采用不同组合的限制性内切酶进行酶切,根据酶切片段大小及酶切位点绘制了9.2 kb外源片段的物理图谱。然后,选用Hind Ⅲ将该外源片段酶解成1.7 kb、3.1 kb和4.2 kb 3个片段,将它们分别亚克隆到pBluescript SK(+)中,获得了3个亚克隆子M-1、M-2和M-3,并进一步采用核酸外切酶Ⅲ缺失法构建了M-2和M-3的缺失子系列。经测序和分析获得了外源片段全序列。结果表明,质粒MD-411中外源片段长度为9040 bp,其中含3个完整和2个不完整的pMGA基因,按顺序分别命名为D-pMGA1.1、D-pMGA1.2、D-pMGA1.3、D-pMGA1.4和D-pMGA1.5。D-pMGA1.2、D-pMGA1.3和D-pMGA1.4等3个完整的pMGA基因阅读框分别为1 959 bp、2 034 bp和2 109 bp。D-pMGA1.1首部不完整,阅读框长633 bp。D-pMGA1.5尾部不完整,阅读框长1 158 bp。将D-pMGA基因与已报道的MG S6株和F株的pMGA基因序列进行了比较分析,探讨了不同MG菌株间pMGA基因的相似性、基因启动子结构的差异以及间隔区GAA重复序列对转录调控的影响等。 展开更多
关键词 鸡败血霉形体 pmga多基因家族 序列分析
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鸡败血支原体pMGA多基因家族及其免疫逃逸机制的研究进展 被引量:1
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作者 陈鸿军 《动物医学进展》 CSCD 2002年第5期18-21,共4页
p MGA多基因家族主要编码一类黏附素 /血凝素蛋白 ,存在于鸡败血支原体的细胞表面 ,其主要功能是促进支原体黏附到宿主细胞上。近年来的相关研究发现 ,编码 p MGA的基因数量从 3 2~ 70不等 ,主要在转录水平上通过 ( GAA) n基序的数量... p MGA多基因家族主要编码一类黏附素 /血凝素蛋白 ,存在于鸡败血支原体的细胞表面 ,其主要功能是促进支原体黏附到宿主细胞上。近年来的相关研究发现 ,编码 p MGA的基因数量从 3 2~ 70不等 ,主要在转录水平上通过 ( GAA) n基序的数量改变引发 p MGA基因的选择性转录 ,造成 p MGA蛋白的抗原发生变异 ,从而干扰宿主正常免疫功能的发挥 ,使支原体对宿主产生严重的免疫逃逸。其中 ,( GAA) n基序已被证实在 p MGA基因表达调控中起重要作用。这一三联体重复基序数目的多少直接影响到 p MGA基因的 ON/OFF转录。本文通过对鸡败血支原体 p MGA多基因家族分子生物学研究进展进行浅要综述 ,以提出p MGA基因可能的转录调控机制。这对研究鸡败血支原体的分子致病机理及其免疫逃逸机制大有裨益。 展开更多
关键词 鸡败血支原体 pmga多基因家族 免疫逸机制 研究进展
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鸡毒霉形体HS株pMGA多基因族序列分析 被引量:3
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作者 沈青春 毕丁仁 +4 位作者 翁长江 李自力 石德时 许青荣 程峰 《兽医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期243-246,共4页
用限制性核酸内切酶对鸡毒霉形体 (MG) HS株基因文库中经初步估测可能含有的 4个鸡毒霉形体粘附蛋白(protein of Mycoplasma gallisepticumadhesin,p MGA)基因的 Mg W1 7重组质粒进行了不同组合的酶消化 ,根据消化片段的大小及酶切位点... 用限制性核酸内切酶对鸡毒霉形体 (MG) HS株基因文库中经初步估测可能含有的 4个鸡毒霉形体粘附蛋白(protein of Mycoplasma gallisepticumadhesin,p MGA)基因的 Mg W1 7重组质粒进行了不同组合的酶消化 ,根据消化片段的大小及酶切位点绘制了 7.5 kb外源片段的物理图谱 ;然后根据所得的物理图谱 ,选用 Pst 和 Eco R 将Mg W1 7外源片段酶解成 1 .3、2 .0、4 .2 kb3个部分 ,将它们分别亚克隆到 SK( + ) 质粒上 ,得到了 3个亚克隆子SGp1 0 0、SGp2 0 0、SGp30 0。使用核酸外切酶 缺失法构建缺失子系列 ,经序列分析后得到 Mg W1 7外源片段的全部序列。序列全长 74 34bp,中间含有 2个完整的 p MGA基因和另 2个不完整的 p MGA基因的首部和尾部 ,分别将它们顺次命名为 H- p MGA1 .1、H- p MGA1 .2、H- p MGA1 .3和 H- p MGA1 .4。 2个完整的 p MGA基因的阅读框长度分别为1 96 7bp(1 .2 )和 2 0 39bp(1 .3) ;H- p MGA1 .1首部不完整的阅读框的长度为 72 0 bp,尾部不完整的 H- p MGA1 .4的长度为 1 75 2 bp。将 H- p MGA基因与已报道的 MG.S6株、F株的 p MGA基因进行了比较 ,探讨了 p MGA基因在不同MG菌株中的相似性、基因启动子结构的差异、间隔区内 展开更多
关键词 鸡毒霉形体 HS株 pmga多基因族 序列分析
原文传递
PMGA and its application in area and power optimization for ternary FPRM circuit 被引量:2
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作者 汪鹏君 厉康平 张会红 《Journal of Semiconductors》 EI CAS CSCD 2016年第1期126-130,共5页
Based on the research of population migration algorithms (PMAs), a population migration genetic algo- rithm (PMGA) is proposed, combining a PMA with a genetic algorithm. A scheme of area and power optimization for... Based on the research of population migration algorithms (PMAs), a population migration genetic algo- rithm (PMGA) is proposed, combining a PMA with a genetic algorithm. A scheme of area and power optimization for a ternary FPRM circuit is proposed by using the PMGA. Firstly, according to the ternary FPRM logic function expression, area and power estimation models are established. Secondly, the PMGA is used to search for the best area and power polarity. Finally, 10 MCNC Benchmark circuits are used to verify the effectiveness of the proposed method. The results show that the ternary FPRM circuits optimized by the PMGA saved 13.33% area and 20.00% power on average than the corresponding FPRM circuits optimized by a whole annealing genetic algorithm. 展开更多
关键词 pmga temary FPRM circuit area and power optimization polarity search
原文传递
鸡毒霉形体分子生物学研究进展
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作者 李自力 毕丁仁 许青荣 《动物医学进展》 CSCD 1999年第1期1-4,共4页
本文对近年来有关鸡毒霉形体的基因组DNA酶切分析、酶切物理图谱的构建、rRNA基因的排列、细胞主要表面抗原和血凝素(pMGA)多基因家族的大小、基因定位和基因表达、DNA螺旋酶及两个主要蛋白p64和MGp1的研究进展... 本文对近年来有关鸡毒霉形体的基因组DNA酶切分析、酶切物理图谱的构建、rRNA基因的排列、细胞主要表面抗原和血凝素(pMGA)多基因家族的大小、基因定位和基因表达、DNA螺旋酶及两个主要蛋白p64和MGp1的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 鸡毒霉形体 物理图谱 RRNA pmga DNA螺旋酶
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基于Pareto多目标遗传的LEO卫星网络多业务Qos路由算法 被引量:2
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作者 张慧卿 彭宏利 《电子设计工程》 2017年第20期116-120,共5页
针对LEO卫星网络链路切换阻塞、流量分布不均、路由算法的负载均衡、以及卫星使用寿命期限问题,提出了一种基于Pareto多目标遗传的Qos路由算法。仿真结果表明,本文算法具有更低的呼叫阻塞率和流量分布指数,负载均衡性能较好并能有效减... 针对LEO卫星网络链路切换阻塞、流量分布不均、路由算法的负载均衡、以及卫星使用寿命期限问题,提出了一种基于Pareto多目标遗传的Qos路由算法。仿真结果表明,本文算法具有更低的呼叫阻塞率和流量分布指数,负载均衡性能较好并能有效减小卫星电池的放电深度,对于LEO卫星网络承载的多种业务类型,拥有更高的综合Qos。 展开更多
关键词 LEO卫星网络 多业务 多径路由 Pareto多目标遗传算法
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鸡胚组织膜蛋白与鸡毒霉形体黏附蛋白的结合分析
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作者 彭秀丽 高俊伟 +2 位作者 胡思顺 胡福利 毕丁仁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1748-1752,共5页
利用pGEX融合蛋白表达系统,将鸡毒霉形体黏附蛋白(pMGA)与GST的编码序列在大肠杆菌BL21中进行融合表达,经GST.Bind Resin纯化,GST-pMGA的纯度达96%。用蛋白酶Thrombin切掉GST标签,获得纯度为96%的pMGA,经Western-blot鉴定具有良好的免... 利用pGEX融合蛋白表达系统,将鸡毒霉形体黏附蛋白(pMGA)与GST的编码序列在大肠杆菌BL21中进行融合表达,经GST.Bind Resin纯化,GST-pMGA的纯度达96%。用蛋白酶Thrombin切掉GST标签,获得纯度为96%的pMGA,经Western-blot鉴定具有良好的免疫学活性。通过差速离心法提取SPF鸡胚的气管、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、法氏囊、胸腺和脾脏等组织膜蛋白,采用斑点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)检测各组织膜蛋白与pMGA的结合。结果表明:除脾脏外,其余组织的膜蛋白与pMGA之间存在特异性结合,说明这些组织膜蛋白中存在pMGA的受体蛋白。经SDS-PAGE分析发现,除脾脏外,其余9种组织的膜蛋白中均含有一条相对分子质量约为30 ku的主带,受体的相对分子质量可能为30 ku,可为深入研究pMGA的受体蛋白提供资料。 展开更多
关键词 鸡胚 组织膜蛋白 鸡毒霉形体黏附蛋白 Dot—ELISA
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