2015—2017年东北地区PKV流行情况调查及其VP1基因的遗传变异分析 被引量：2

1

作者 齐珊珊 苏明俊 +3 位作者 李春秋 翟军军 孔凡志 孙东波 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第10期69-73,共5页

为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行... 为了解我国东北地区猪嵴病毒(PKV)的流行情况及其VP1基因的遗传进化特征,试验通过巢式RT-PCR法对2015—2017年采集自中国东北地区(黑龙江省、吉林省、辽宁省)的122份样品进行PKV检测,分析PKV感染与腹泻的相关性,并针对PKV VP1基因进行遗传进化分析。结果表明:利用RT-PCR法检测本试验采集的122份样品,扩增PKV 3D基因的PCR产物经1.2%琼脂糖凝胶电泳,得到的目的片段与预期大小相符。PKV总检出率为88.5%(108/122),其中腹泻样品和健康样品的阳性率分别为87.9%(94/107)和93.3%(14/15)。通过卡方检验分析发现,PKV的感染与腹泻发生不存在统计学相关性(P>0.05)。本试验鉴定的7株PKV的VP1基因核苷酸同源性为80.8%～99.9%,推导氨基酸同源性为86.6%～99.6%。PKV毒株被划分为4个进化分支,本试验鉴定的7株PKV毒株在1,3,4分支均有分布。说明PKV在中国东北地区猪群中有较高的感染率,且其毒株呈现出遗传多样性。 展开更多

关键词 猪嵴病毒(pkv) VP1基因 巢式RT-PCR 遗传进化 腹泻

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PDCoV、PKV和MRV三重荧光定量PCR方法的建立及初步应用 被引量：2

2

作者 王利丽 李富强 +6 位作者 董明奇 任卫科 路超 张莉 江珊 田向学 鄢明华 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期823-830,共8页

为了快速同步检测猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪嵴病毒(PKV)和猪呼肠孤病毒(MRV),参考GenBank中PDCoV M、PKV 5’UTR和MRV L1基因保守序列,设计了特异性引物和探针并优化了反应条件,建立了同时检测PDCoV、PKV和MRV的三重荧光定量PCR方法... 为了快速同步检测猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)、猪嵴病毒(PKV)和猪呼肠孤病毒(MRV),参考GenBank中PDCoV M、PKV 5’UTR和MRV L1基因保守序列,设计了特异性引物和探针并优化了反应条件,建立了同时检测PDCoV、PKV和MRV的三重荧光定量PCR方法。该方法可特异性检出PDCoV、PKV和MRV,与PRRSV、CSFV、PCV2、PRV、PEDV、TGEV、RV等病原无交叉反应,3种病毒的最低检测量分别为2.7×10^(1)copies/μL、1.22×10^(1)copies/μL和1.26×10^(2)copies/μL,组内及组间变异系数为0.001~0.019。应用所建立的方法与行业标准及文献报道方法同时检测142份临床样本,结果显示与行业标准及文献报道方法阳性符合率为78%~94.92%。本研究建立的三重荧光定量PCR方法特异性强、敏感性高、重复性好,为临床PDCoV、PKV和MRV的鉴别诊断和流行病学调查提供了快速敏感的技术手段。 展开更多

关键词 猪德尔塔冠状病毒 猪嵴病毒 猪呼肠孤病毒 三重荧光定量PCR方法 同步检测

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PKV100型装载机电子秤

3

作者 高启斋 《港口装卸》 2001年第6期36-36,共1页

关键词 pkv100型 装载机 电子秤 港口机械

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PKV网关在Profibus-DP从站与Modbus TCP客户机通讯中的应用 被引量：1

4

作者 张鹏 王海波 《自动化信息》 2008年第12期76-77,79,共3页

本文介绍应用赫优讯PKV40-PB网关实现西门子Profibus-DP从站ET200M与Modbus TCP客户机之间的数据通讯，着重就PKV网关的软硬件结构和应用特点、应用PKV40-PB网关实现Profibus总线从站与M0dbusTCP的通讯、ModbusTCP客户机通讯等关键技术... 本文介绍应用赫优讯PKV40-PB网关实现西门子Profibus-DP从站ET200M与Modbus TCP客户机之间的数据通讯，着重就PKV网关的软硬件结构和应用特点、应用PKV40-PB网关实现Profibus总线从站与M0dbusTCP的通讯、ModbusTCP客户机通讯等关键技术问题进行了讨论。 展开更多

关键词 pkv40网关 Profibus-DP从站ET200M ModbusTCP客户机 数据通讯

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PEDV、TGEV、PoRV和PKV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量：8

5

作者 苗艳 陈亮 +4 位作者 朱庆贺 李阳 兰世捷 徐馨 李丹 《动物医学进展》 北大核心 2020年第3期66-70,共5页

为快速鉴别诊断猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪嵴病毒(PKV),根据PEDV的M基因、TGEV的N基因、PoRV的VP6基因和PKV的3D基因序列设计4对特异性引物,通过PCR扩增目的片段并构建重组质粒,建立了一... 为快速鉴别诊断猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PoRV)和猪嵴病毒(PKV),根据PEDV的M基因、TGEV的N基因、PoRV的VP6基因和PKV的3D基因序列设计4对特异性引物,通过PCR扩增目的片段并构建重组质粒,建立了一种可同时检测4种病毒的RT-PCR诊断方法,该方法可特异性扩增这4种病毒的相应片段,而对猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)均无扩增,最低检出量分别为1.33×10^4、1.33×10^3、1.33×10^4、1.33×10^5copies/μL。应用该方法对临床55份猪腹泻样品进行检测,结果检测出14份PEDV、1份PoRV和27份PKV,未检出TGEV,其中PEDV和PKV混合感染9份。上述结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法快速、特异、敏感,可用于以上4种腹泻病毒的临床检测和流行病学调查。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 猪轮状病毒 猪嵴病毒 多重RT-PCR

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人源性双亲性穿膜肽PKV14的合成及其对BHK-21细胞的影响

6

作者 陈莹 宋金春 刘岩松 《现代药物与临床》 CAS 2018年第10期2482-2486,共5页

目的合成人源性双亲性穿膜肽RRTLRRRRAAQRCG(PKV14),并研究其细胞穿膜效果和对细胞活性的影响。方法采用固相合成法合成PKV14,采用高效液相色谱和质谱对PKV14进行验证,使用荧光显微镜和酶标仪观察PKV14在BHK-21细胞系中的穿膜效果,采用... 目的合成人源性双亲性穿膜肽RRTLRRRRAAQRCG(PKV14),并研究其细胞穿膜效果和对细胞活性的影响。方法采用固相合成法合成PKV14,采用高效液相色谱和质谱对PKV14进行验证,使用荧光显微镜和酶标仪观察PKV14在BHK-21细胞系中的穿膜效果,采用MTT实验法检测PKV14的细胞毒性。结果合成了PKV14肽段,并且PKV14对于BHK-21细胞系的穿膜效率极高,细胞毒性实验表明PKV14对BHK-21细胞活性无影响。结论 PKV14是具有高穿膜活性,安全低毒的新型人源性细胞穿膜肽,有作为药物载体的潜力。 展开更多

关键词 人源性双亲性穿膜肽 pkv14 穿膜活性 BHK-21细胞

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应用PKV40-PB网关实现西门子PROFIBUS从站ET200M与ModbusTCP客户机的通讯

7

作者 张鹏 王海波 《国内外机电一体化技术》 2008年第2期17-18,76,共3页

本文介绍了如何利用赫优讯协议转换网关PKV40-PB实现西门子DP从站ET200M与ModbusTCP客户机的通讯。

关键词 现场总线 PROFIBUS-DP ModbusTCP ET200M 赫优讯pkv网关 嵌入式系统

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猪流行性腹泻病毒、猪肠道病毒9型及猪嵴病毒三重RT-PCR检测方法建立及初步应用 被引量：9

8

作者 任玉鹏 张斌 +1 位作者 岳华 刘燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期603-608,共6页

旨在建立一种同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪肠道病毒9型(PEV-9)、猪嵴病毒(PKV)的三重RT-PCR法,并初步应用于临床样品检测。根据GenBank中PEDV和PKV基因序列保守区设计2对引物,参照文献合成1对PEV-9引物,在同一体系进行RT-PCR扩增... 旨在建立一种同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪肠道病毒9型(PEV-9)、猪嵴病毒(PKV)的三重RT-PCR法,并初步应用于临床样品检测。根据GenBank中PEDV和PKV基因序列保守区设计2对引物,参照文献合成1对PEV-9引物,在同一体系进行RT-PCR扩增,对引物浓度、退火温度、灵敏度、特异性等进行优化,应用该法对采自四川省6个猪场46份样品进行检测。结果表明引物量分别为PEDV 0.5μL、PEV-9 0.25μL、PKV0.25μL,退火温度为55℃时扩增效果最理想;本方法最低检测量分别为PEDV 5.97pg、PEV-9 0.11pg、PKV0.74pg;用该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪萨佩罗病毒、猪博卡病毒、猪环曲病毒、猪源大肠杆菌、猪源沙门菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌和空肠弯曲杆菌等病原进行RT-PCR扩增时,均无非特异性扩增条带出现。对46份腹泻样品的检测结果显示,PEDV感染率为76.1%、PEV-9为73.9%、PKV为39.1%,3种病原在同一样本检出率达29.1%,表明存在混合感染或协同致病的可能;与单项RT-PCR法相比,阳性样本的检出符合率均在91%以上,表明该方法具较高可信度。建立的方法可快速、准确地检测3种猪腹泻病毒性病原,为病原学诊断和分子流行病学调查提供了有效技术支持。 展开更多

关键词 多重RT-PCR PEDV PEV-9 pkv 检测

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猪嵴病毒病原特性及检测技术研究进展 被引量：3

9

作者 黄晓星 王仙 金文杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3466-3472,共7页

猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)是近年来在健康猪和腹泻猪粪便中新检测到的小核糖核酸病毒科嵴病毒属成员,可能引起猪的腹泻,对养猪业造成重大经济损失。研究发现,PKV广泛分布在猪中,在腹泻和临床健康猪中均已被检测到,阳性率从3.9%~1... 猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)是近年来在健康猪和腹泻猪粪便中新检测到的小核糖核酸病毒科嵴病毒属成员,可能引起猪的腹泻,对养猪业造成重大经济损失。研究发现,PKV广泛分布在猪中,在腹泻和临床健康猪中均已被检测到,阳性率从3.9%~100.0%各不相同。一个典型的PKV病毒粒子直径为30nm,基因组全长为8120bp,包括1个含2488个氨基酸的开放性阅读框(ORF);PKV是典型的小RNA病毒科的基因组结构:1个5′非编码区,1个L蛋白,结构蛋白P1(VP0、VP3和VP1),非结构蛋白P2(2A、2B和2C)和P3(3A、3B、3C和3D),1个3′非编码区和1个Poly(A)尾巴。PKV的2B编码区存在30个氨基酸的缺失,VP1蛋白是小RNA病毒科变异最频繁的结构蛋白,其含有主要的抗原表位,可促进机体产生中和抗体。检测PKV的方法有反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR和逆转录环介导扩增(RT-LAMP)方法。作者对PKV的分类学、流行概况、基因组结构、遗传特性及检测技术等研究现状做一简要概述,以期为进一步研究及了解PKV提供参考。 展开更多

关键词 猪嵴病毒(pkv) 流行病学 基因组结构 遗传特性 检测技术

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江苏省七个县域猪嵴病毒感染的流行病学调查 被引量：5

10

作者 杨振 张笛 +7 位作者 于恩琪 赵振鹏 单玉平 洪枫 王秋生 邓建中 秦爱建 金文杰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期436-440,共5页

根据猪嵴病毒3D基因保守序列设计1对特异性引物,用RT-PCR方法对从江苏省7个县域采集的220份猪腹泻肛拭样品进行检测,调查猪嵴病毒在江苏省的流行情况,以进一步丰富猪嵴病毒在我国的流行病学调查数据。所有样品猪嵴病毒感染阳性率达52.73... 根据猪嵴病毒3D基因保守序列设计1对特异性引物,用RT-PCR方法对从江苏省7个县域采集的220份猪腹泻肛拭样品进行检测,调查猪嵴病毒在江苏省的流行情况,以进一步丰富猪嵴病毒在我国的流行病学调查数据。所有样品猪嵴病毒感染阳性率达52.73%(116/220),阳性猪场占79.41%(27/34)。对5个不同来源阳性样品中获得的3D基因序列进行测序分析,结果显示,5株猪嵴病毒3D序列与GenBank中已知的国内外猪嵴病毒的相应序列在核苷酸水平具有较高同源性。调查结果表明,猪嵴病毒在江苏省部分县域腹泻猪群中有较高感染率,但猪嵴病毒在其中的作用尚有待进一步的研究。 展开更多

关键词 猪嵴病毒 3D基因 腹泻 反转录-聚合酶链反应

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优化工业总线系统在高炉控制中的应用 被引量：1

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作者 王宏 王红军 李岩 《金属世界》 2009年第3期21-23,共3页

介绍了PROFIBUS-DP现场总线在高炉过程控制的技术特点以及OVATION系统结构,同时结合目前在冶金行业中普遍采用的PLC+现场总线(Profibus等)的方式,对DCS+PKV50+PROFIBUS-DP应用于大规模的工业场合特别是3200m3级高炉中进行了总结。重点... 介绍了PROFIBUS-DP现场总线在高炉过程控制的技术特点以及OVATION系统结构,同时结合目前在冶金行业中普遍采用的PLC+现场总线(Profibus等)的方式,对DCS+PKV50+PROFIBUS-DP应用于大规模的工业场合特别是3200m3级高炉中进行了总结。重点对西屋DCS系统和做为DP总线的主站PKV50的性能特点以及在高炉控制中需要注意的问题进行了有针对性的阐述。通过实际运行,系统比较稳定、可靠。 展开更多

关键词 现场总线 pkv50 DCS 组态软件 PROFIBUS-DP协议

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Profibus DP工业现场总线在高炉系统中的应用及优化

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作者 苗新海 张志安 《黑龙江科技信息》 2010年第25期36-36,共1页

介绍了Profibus DP工业现场总线在高炉生产过程控制中的应用,同时对DCS(OVATION)+PKV50(Hilscher)+PROFIBUS-DP(Phoenix)的构架系统大规模应用于3200m3级高炉上进行了总结。重点对Profibus-DP协议总线和做为DP总线的主站PKV50的性能特... 介绍了Profibus DP工业现场总线在高炉生产过程控制中的应用,同时对DCS(OVATION)+PKV50(Hilscher)+PROFIBUS-DP(Phoenix)的构架系统大规模应用于3200m3级高炉上进行了总结。重点对Profibus-DP协议总线和做为DP总线的主站PKV50的性能特点以及在高炉控制中需要注意和优化的问题进行了有针对性的阐述。通过实际运行,系统比较稳定、可靠,用少的投资取得了预期的效果。 展开更多

关键词 PROFIBUS-DP协议 工业现场总线 pkv50 组态软件

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猪嵴病毒VP1基因序列测定与分析 被引量：1

13

作者 易春华 谢齐斌 +4 位作者 唐薇薇 朱春刚 秦长串 伍和明 韦达有 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期670-673,共4页

【目的】对猪嵴病毒（PKV）VP1基因进行测序与同源性分析,确认其可能来源,为今后的生物学特性分析及仔猪腹泻防治工作提供科学依据。【方法】采用RT-PCR对GXPKV-1毒株VP1基因进行克隆,运用DNASTAR软件包中Megalign程序对测序获得的VP1... 【目的】对猪嵴病毒（PKV）VP1基因进行测序与同源性分析,确认其可能来源,为今后的生物学特性分析及仔猪腹泻防治工作提供科学依据。【方法】采用RT-PCR对GXPKV-1毒株VP1基因进行克隆,运用DNASTAR软件包中Megalign程序对测序获得的VP1基因进行核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分析。【结果】GXPKV-1毒株VP1基因全长762 bp,共编码254个氨基酸,与Gen Bank已公布的13株参考毒株VP1基因的核苷酸同源性为74.1%～85.4%,推导氨基酸同源性为81.1%～93.3%。根据VP1基因推导氨基酸序列进行系统发育进化分析,发现GXPKV-1毒株与Gansu-2012、JS1419等国内参考毒株同属于同一亚群,而与瑞士分离株Swine-S-1-2007、泰国分离株THA-2008、美国分离株H_24-2012-USA及四川分离株CHN-SC-2011-02等的亲缘关系较远。【结论】猪嵴病毒GXPKV-1毒株起源于国内流行毒株的传播,在新的环境下虽然其VP1基因核苷酸发生变异,但由于同义翻译,推导氨基酸的同源性仍然较高,说明碱基突变并未引起蛋白结构的改变。 展开更多

关键词 猪嵴病毒 VP1基因 序列测定 分析

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