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SIRT5介导的PKM2对香烟烟雾提取物诱导的巨噬细胞极化的影响及其作用机制
1
作者 崔萌萌 徐丹 李风森 《新疆医科大学学报》 2026年第1期9-15,共7页
目的 观察沉默信息调节因子5(Silent information regulator 5,SIRT5)介导的丙酮酸激酶M2受体(Pyruvate kinase type 2,PKM2)通过调节巨噬细胞极化对香烟烟雾诱导的炎症水平的影响,探讨其可能存在的作用机制。方法 以小鼠巨噬细胞为研... 目的 观察沉默信息调节因子5(Silent information regulator 5,SIRT5)介导的丙酮酸激酶M2受体(Pyruvate kinase type 2,PKM2)通过调节巨噬细胞极化对香烟烟雾诱导的炎症水平的影响,探讨其可能存在的作用机制。方法 以小鼠巨噬细胞为研究对象,香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract, CSE)作为刺激因素,诱导体外炎症模型,分为空白对照组(正常培养RAW264.7细胞,不进行任何干预)、CSE干预组(培养细胞,并进行CSE干预)、SIRT5-NC组(CSE干预细胞,只用于感染过程中的对照)、SIRT5-siRNA-2组(CSE干预细胞,转染SIRT5-siRNA)和SIRT5-siRNA-2+OE-PKM2组(CSE干预细胞,转染SIRT5-siRNA后,加入PKM2激动剂)。实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测SIRT5及PKM2 mRNA的表达。蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞模型SIRT5和PKM2的蛋白表达。流式细胞术检测各组细胞M1、M2型巨噬细胞表型分布。酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、IL-10、IL-12和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果 在细胞模型中,与空白对照组和siRNA-NC组相比,SIRT5-siRNA-2组的PKM2表达水平明显降低,差异有统计学意义。CSE干预后M1型促炎巨噬细胞表达增高,M2型抑炎巨噬细胞减少。M1型巨噬细胞随着SIRT5沉默而减少,过表达PKM2后又增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与空白对照组相比,M2型巨噬细胞则在炎症模型中均降低,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果显示,与空白对照组相比,CSE干预组促炎因子IL-6、IL-12、TNF-α表达增高,抑炎因子IL-10表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与CSE干预组相比,SIRT5-siRNA-2组下调了促炎因子表达同时也上调了抑炎因子水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。SIRT5-siRNA-2+OE-PKM2组较SIRT5-siRNA-2组相比,又上调了IL-6、IL-12、TNF-α,同时IL-10的表达也增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 SIRT5介导的PKM2通过降低IL-6、IL-12、TNF-α表达,促进IL-10表达,从而减轻香烟烟雾提取物诱导的巨噬细胞极化产生的炎症反应。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 SIRT5 pkm2 巨噬细胞 炎症
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肝宝胶囊含药血清对巨噬细胞代谢重编程和Anx A5/PKM2通路的影响
2
作者 谢风帆 胡若莹 +4 位作者 林娜 范兴 黄枚 陈亚萍 南丽红 《福建中医药》 2026年第2期30-34,共5页
目的观察肝宝胶囊(GBC)含药血清对巨噬细胞代谢重编程和膜联蛋白A5(Anx A5)/丙酮酸激酶M2(PKM2)通路的影响。方法24只SD雄性大鼠适应性喂养7 d后,随机分为空白对照组、GBC组和双环醇片组各8只,分别予蒸馏水、1.47g/(kg·d)GBC、200 ... 目的观察肝宝胶囊(GBC)含药血清对巨噬细胞代谢重编程和膜联蛋白A5(Anx A5)/丙酮酸激酶M2(PKM2)通路的影响。方法24只SD雄性大鼠适应性喂养7 d后,随机分为空白对照组、GBC组和双环醇片组各8只,分别予蒸馏水、1.47g/(kg·d)GBC、200 mg/(kg·d)双环醇片灌胃,制备含药血清。RAW264.7细胞随机分为空白对照组,模型组,1.25%、2.5%、5%GBC含药血清组和双环醇片含药血清组。分别加入:10%空白血清培养基;含10 ng/mL LPS和10 ng/mL IFN-γ的10%空白血清培养基;含10 ng/mL LPS和10 ng/mL IFN-γ的1.25%、2.5%、5%GBC含药血清,血清浓度不足10%的用空白血清补齐;含10 ng/mL LPS和10 ng/mL IFN-γ的10%双环醇片含药血清。检测细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)含量,检测细胞外酸化率(ECAR)、氧消耗率(OCR)、ATP、乳酸脱氢酶(LDH)和乳酸(LD)水平,Western blot检测细胞中Anx A5、PKM2、p-PKM2和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白表达水平。结果与空白对照组比较,模型组细胞上清液中IL-1β含量升高(P<0.05),细胞OCR和ATP水平及Anx A5蛋白表达均下降(P<0.05),细胞ECAR、LDH、LD水平及HIF-1α、p-PKM2蛋白表达均升高(P<0.05)。与模型组比较,GBC各含药血清组和双环醇片含药血清组细胞上清液中IL-1β含量均下降(P<0.05),细胞OCR、ATP水平均升高(P<0.05),细胞ECAR、LDH、LD水平及HIF-1α、p-PKM2蛋白表达均下降(P<0.05),2.5%、5%GBC含药血清组和双环醇片含药血清组Anx A5蛋白表达均升高(P<0.05)。与1.25%GBC含药血清组比较,2.5%含药血清组细胞上清液中IL-1β含量较低(P<0.05),细胞ATP水平较高(P<0.05),细胞LDH水平较低(P<0.05);5%GBC含药血清组细胞上清液中IL-1β含量较低(P<0.05),细胞OCR和ATP水平均较高(P<0.05),细胞ECAR和LDH水平均较低(P<0.05)。结论GBC含药血清可能通过调控Anx A5/PKM2通路干预巨噬细胞代谢重编程,抑制巨噬细胞的促炎作用。 展开更多
关键词 脂肪肝 肝宝胶囊 Anx A5/pkm2通路 代谢重编程 巨噬细胞
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基于PTBP1/PKM2通路探讨君仁补肺益心颗粒防治低氧性肺动脉高压的作用机制
3
作者 郑润锈 王石中 +5 位作者 谭骏岚 曹闲雅 黄威 戴晴 宋岚 戴爱国 《中国中药杂志》 北大核心 2026年第2期543-552,共10页
基于多聚嘧啶片段结合蛋白1(PTBP1)/丙酮酸激酶M2(PKM2)通路,探讨君仁补肺益心颗粒(JRBF)对低氧性肺动脉高压(HPH)小鼠的治疗作用及分子机制。体内实验部分,将60只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分成正常组,模型组,西地那非组,JRBF低、中、... 基于多聚嘧啶片段结合蛋白1(PTBP1)/丙酮酸激酶M2(PKM2)通路,探讨君仁补肺益心颗粒(JRBF)对低氧性肺动脉高压(HPH)小鼠的治疗作用及分子机制。体内实验部分,将60只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分成正常组,模型组,西地那非组,JRBF低、中、高剂量组。每日给予药物灌胃后,进行常压低氧10%±0.5%造模8 h,连续4周,采用右心导管法检测各组小鼠右心室收缩压(RVSP),小动物B超机检测肺动脉加速时间(PAAT)、肺射血时间(PET)、三尖瓣环收缩期位移(TAPSE)和舒张期右心室前壁厚度(RVAWd),HE染色和Masson染色检测肺小动脉病理改变、心肌细胞面积和胶原沉积情况,Western blot检测小鼠肺组织中PTBP1、PKM2和PKM1表达,免疫荧光检测PTBP1和肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)标志蛋白α-SMA的共定位表达,乳酸测定试剂盒检测肺组织和血清中乳酸含量。体外实验部分,低氧(1%,48 h)诱导人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)建立模型,CCK-8实验筛选出JRBF含药血清最佳干预浓度(10%),进一步通过EdU、Transwell分别检测细胞增殖、迁移能力,Western blot检测小鼠肺组织中PTBP1、PKM2和PKM1表达,试剂盒检测乳酸生成。结果提示,JRBF显著改善HPH小鼠RVSP、PAAT/PET、TAPSE,减轻肺血管重塑、心肌细胞肥大及胶原纤维沉积;JRBF下调肺组织和PASMCs中PTBP1、PKM2表达,抑制乳酸蓄积;10%JRBF含药血清可抑制低氧诱导的hPASMCs增殖、迁移,降低细胞乳酸生成及PTBP1、PKM2表达。综上所述,JRBF可能通过抑制PTBP1/PKM2信号轴,调控糖酵解途径,从而拮抗HPH发生发展。 展开更多
关键词 君仁补肺益心颗粒 低氧性肺动脉高压 PTBP1/pkm2通路 肺动脉平滑肌细胞 糖酵解
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Expression and Clinical Significance of PKM2 and SERBP1 in Colorectal Cancer
4
作者 Yijie Li Ying Duan +3 位作者 Zhengyi Cheng Weichen Zuo Juan Yang Hangrong Fang 《Proceedings of Anticancer Research》 2026年第1期122-129,共8页
Objective:To investigate the expression of pyruvate kinase M2(PKM2)and RNA binding proteins 1(SERBP1)in colorectal cancer(CRC)and their clinical significance.Methods:A total of 101 cases of colorectal adenocarcinoma t... Objective:To investigate the expression of pyruvate kinase M2(PKM2)and RNA binding proteins 1(SERBP1)in colorectal cancer(CRC)and their clinical significance.Methods:A total of 101 cases of colorectal adenocarcinoma tissues and their corresponding adjacent tissues were collected from our hospital from December 2020 to December 2023.The immunohistochemical Elivision method was used to detect the expression of PKM2 and SERBP1 in CRC and corresponding adjacent tissues.The experimental data were analyzed using statistical software SPSS 27.0.Results:The expression rates of PKM2 and SERBP1 in CRC were higher than those in adjacent tissues.The expression of PKM2 was positively correlated with lymph node metastasis and TNM stage.The expression of SERBP1 was positively correlated with the degree of differentiation,lymph node metastasis,and TNM stage of CRC.Conclusion:PKM2 and SERBP1 may promote the occurrence and tumor progression of CRC,but further experimental research is still needed. 展开更多
关键词 pkm2 SERBP1 Colorectal cancer
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PKM2在牙周炎症中的作用机制研究进展
5
作者 高涵 周岳 《口腔医学》 2026年第2期148-151,160,共5页
糖酵解增强等宿主代谢重编程表现是驱动炎症持续的核心因素,丙酮酸激酶M2亚型(pyruvate kinase M2,PKM2)作为糖酵解限速酶,在牙周炎等多种慢性炎症性疾病中发挥重要作用。本文就PKM2在牙周炎症中的可能调控机制进行综述,并探讨相关靶向... 糖酵解增强等宿主代谢重编程表现是驱动炎症持续的核心因素,丙酮酸激酶M2亚型(pyruvate kinase M2,PKM2)作为糖酵解限速酶,在牙周炎等多种慢性炎症性疾病中发挥重要作用。本文就PKM2在牙周炎症中的可能调控机制进行综述,并探讨相关靶向药物治疗牙周炎的可能性,以期为牙周炎的发生发展机制研究及临床治疗提供新思路。 展开更多
关键词 牙周炎 丙酮酸激酶M2亚型 糖酵解 代谢重编程
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蛇床子素通过调控PKM2的乳酸化修饰减轻阿尔茨海默病神经炎症 被引量：2
6
作者 宋欢 夏丽秀 +1 位作者 黄雨威 胡媛媛 《广州中医药大学学报》 2025年第3期732-740,共9页
【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组... 【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组织化学法检测脑组织Iba1阳性表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测脑组织白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β水平,Weatern Blot法检测脑组织Pan乳酸化修饰(Pan-kla)以及PKM2乳酸化修饰(PKM2-kla)水平。(2)细胞实验:使用LPS/Aβ1-42处理小胶质细胞(BV2细胞)构建体外AD模型,并使用蛇床子素处理。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Weatern Blot法检测小胶质细胞激活标志物Iba1的表达,Griess试剂评估一氧化氮(NO)的产生,ELISA法检测细胞IL-6、TNF-α和IL-1β水平。将BV2细胞条件培养基(CM)与神经母细胞瘤细胞(Na2细胞)共培养,评估蛇床子素对Na2细胞的保护作用。(3)将蛇床子素与PKM2做分子对接,并进行实验验证。【结果】动物实验中,与WT组比较,APP/PS1组小鼠学习和记忆缺陷加重,加入蛇床子素处理则改善了APP/PS1组小鼠的学习和记忆缺陷。此外,与WT组比较,APP/PS1组小鼠脑组织Iba1阳性细胞增加,促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平升高,Pan-kla以及PKM2-kla水平升高,而蛇床子素处理则抑制了上述指标水平。细胞实验中,蛇床子素在浓度不超过100µmol/L时对BV2细胞活力无明显影响。LPS/Aβ1-42处理上调BV2中Iba1的表达、NO的产生以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平,而蛇床子素可显著抑制LPS/Aβ1-42诱导的上述指标的表达。同时,蛇床子素减弱BV2-CM对Na2细胞的损伤。分子对接结果显示,蛇床子素与PKM2结合良好。蛇床子素处理后下调AD细胞模型中乳酸、Pan-kla和PKM2-kla的水平。【结论】蛇床子素通过抑制PKM2的乳酸化修饰减轻AD神经炎症。 展开更多
关键词 蛇床子素 阿尔茨海默病 神经炎症 pkm2 乳酸化 小鼠 BV2细胞
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温肾阳方通过HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达治疗CKD肾阳虚证的作用机制
7
作者 靳鸽 王思童 +6 位作者 周楷栋 张新江 蔡炎沫 周鑫 刘运华 张新雪 赵宗江 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2135-2144,共10页
目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58... 目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58只SD大鼠,随机分为正常组10只,造模组48只;造模组给予阿霉素(DOX)尾静脉注射(4 mg/kg)构建CKD模型,在此基础上复合肌注氢化可的松(HYD)(10 mg/kg)构建CKD肾阳虚证模型;将成模动物随机分为DOX组、HYD组、真武汤(ZWT)组(5.55 g·kg^(-1)·d^(-1))、WSY组(2.38 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组12只;观察大鼠一般状况,检测24 h尿蛋白定量(24 h UPro);收集血清检测肾功能及其相关指标[血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、血尿素(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)];采用HE染色、Mallory染色和透射电镜观察肾组织病理形态;借助转录组学和血清代谢组学预测关键信号通路;采用ELISA检测大鼠血清糖酵解代谢酶乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶-1(PFK-1)水平;采用免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR验证大鼠肾组织中HIF-1α、PKM2、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达。结果:与DOX和HYD比较,WSY大鼠一般状态改善,体质量、体温、肾脏指数显著提升(P<0.01,P<0.05),血清Scr、UA、BUN含量显著降低(P<0.05,P<0.01),TP、ALB显著上升(P<0.05,P<0.01);病理染色显示肾脏损伤减轻,电镜观察发现肾小球基底膜节段性增厚减轻、足突融合减轻。转录组学和代谢组学分析结果显示,WSY治疗CKD肾阳虚证作用机制可能与HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡基因相关。ELISA结果显示,WSY大鼠血清中LDH、PFK-1较DOX和HYD水平显著降低(P<0.01);免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR结果显示,与DOX和HYD比较,ZWT、WSY大鼠肾组织HIF-1α、PKM2、GLUT1、Bax蛋白和mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:WSY可以保护CKD肾阳虚证大鼠肾功能,改善肾脏损伤,其机制可能是通过调控HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程,影响Bcl-2/Bax线粒体凋亡途径,从而延缓CKD疾病进展。 展开更多
关键词 温肾阳方 慢性肾脏病 转录组学 代谢组学 代谢重编程 HIF-1α/pkm2信号通路 线粒体 机制
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血清PKM2、Gal-3、CitH3水平升高可预测机械通气并发肺部感染 被引量：3
8
作者 黄航栋 厉丹瑜 朱晓锋 《基础医学与临床》 CAS 2025年第1期86-90,共5页
目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并... 目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并发肺部感染分为肺部感染组(n=50)和非肺部感染组(n=70),ELISA检测血清PKM2、Gal-3、CitH3水平;收集临床资料;预后随访并分为预后良好组(n=79)和预后不良组(n=41);多因素Logistic回归分析影响MV患者发生预后不良的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PKM2、Gal-3、CitH3对MV患者发生预后不良的预测价值。结果与非肺部感染组相比,肺部感染组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);预后不良组较预后良好组临床肺部感染评分(CPIS)升高(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3皆为MV患者发生预后不良的危险因素(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3及联合预测患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.839、0.779、0.925,3者联合诊断的AUC优于各自单独检测(Z=4.261、2.521、3.676,P<0.001、0.05、0.001)。结论MV并发肺部感染患者血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均较未发生肺部感染患者升高,三者对MV患者发生预后不良有一定的预测价值。 展开更多
关键词 机械通气 肺部感染 丙酮酸激酶M2(pkm2) 乳糖凝集素-3(Gal-3) 瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3) 预后
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QHF复方通过PKM2/HIF-1α通路促肝癌细胞凋亡的机制研究
9
作者 傅静云 陈涛 《中药材》 北大核心 2025年第9期2339-2345,共7页
目的:探讨QHF复方调控PKM2/HIF-1α通路促进肝癌细胞凋亡的机制。方法:通过体内外实验,采用CCK-8、流式细胞术、qRT-PCR、Western Blot等技术,检测QHF复方对Hepa1-6细胞增殖、凋亡及PKM2/HIF-1α通路相关基因和蛋白表达的影响;构建C57B... 目的:探讨QHF复方调控PKM2/HIF-1α通路促进肝癌细胞凋亡的机制。方法:通过体内外实验,采用CCK-8、流式细胞术、qRT-PCR、Western Blot等技术,检测QHF复方对Hepa1-6细胞增殖、凋亡及PKM2/HIF-1α通路相关基因和蛋白表达的影响;构建C57BL/6小鼠Hepa1-6移植瘤模型,观察QHF复方的抑瘤效果。结果:体外实验结果显示QHF复方(100μg/mL)能显著抑制Hepa1-6细胞增殖,促进细胞凋亡,降低PKM2、HIF-1αmRNA和蛋白表达,升高cleaved Caspase-3蛋白表达和Bax/Bcl-2水平,降低Caspase-3蛋白表达。体内实验结果显示,QHF复方能降低荷瘤小鼠瘤质量,促进肿瘤细胞死亡,降低荷瘤小鼠肿瘤组织PKM2、HIF-1α、Bcl-2表达和血清PKM2水平,升高肿瘤组织Bax表达。结论:QHF复方可通过抑制PKM2/HIF-1α通路促进肝癌细胞凋亡。 展开更多
关键词 肝细胞癌 细胞凋亡 QHF复方 pkm2 HIF-1Α
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臭椿酮通过HSP90/PKM2/STAT3信号通路抑制HCC细胞的活性
10
作者 林城 于耕艺 +4 位作者 林楚涵 万悦 王恬恬 汪康 程秀 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第24期1862-1868,共7页
目的:探讨臭椿酮(Ailanthone,AIL)诱导人肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及潜在的作用机制。方法:体外培养SMMC-7721细胞,实验分为对照组和AIL给药组;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;试剂盒检... 目的:探讨臭椿酮(Ailanthone,AIL)诱导人肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及潜在的作用机制。方法:体外培养SMMC-7721细胞,实验分为对照组和AIL给药组;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;试剂盒检测乳酸生成量和葡萄糖含量;流式细胞术检测细胞凋亡水平的变化;Western blot检测HSP90/PKM2/STAT3信号通路及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达;免疫荧光检测各组细胞中PKM2和HSP90及PKM2与STAT3蛋白之间的相互作用。结果:AIL抑制SMMC-7721细胞活性,减弱细胞侵袭和迁移的能力,抑制乳酸生成及增加葡萄糖含量(P<0.05);流式细胞术结果表明AIL呈浓度依赖性诱导SMMC-7721细胞凋亡,且凋亡相关蛋白Bax表达增加,Bcl-2表达降低(P<0.05)。此外,AIL显著抑制PKM2和STAT3蛋白表达(P<0.05),但对HSP90的抑制作用无明显影响(P>0.05);免疫荧光双染实验结果表明,AIL抑制PKM2/HSP90和PKM2/STAT3复合体形成。结论:AIL通过HSP90/PKM2/STAT3信号通路来调控细胞糖酵解诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡。 展开更多
关键词 臭椿酮 糖酵解 肝癌 pkm2
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PKM2/STAT3在实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠中的表达和作用
11
作者 李金清 张秋瑾 +3 位作者 郑柳 杨彬彬 廖娟媛 丁芝祥 《眼科新进展》 北大核心 2025年第12期938-942,共5页
目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 ... 目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 d状态),实验A组与实验B组[均使用光感受器间视黄醇结合蛋白651-670肽段、完全弗氏佐剂和百日咳毒素共同构建稳定的EAU小鼠模型,分别设为造模后14 d与21 d状态],每组6只。裂隙灯显微镜观察小鼠眼前节表现,眼底照相机观察小鼠眼底表现,苏木精-伊红染色后评估小鼠临床评分及组织病理学评分;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-17A的蛋白表达水平;免疫组织化学法检测小鼠视网膜组织PKM2蛋白表达水平;Western blot检测小鼠视网膜组织中PKM2、磷酸化STAT3(pSTAT3)以及STAT3蛋白表达水平。结果实验A组与实验B组小鼠眼前节临床评分、眼底临床评分以及视网膜组织病理学评分均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。对照组、实验A组以及实验B组小鼠血清中的IL-17A蛋白表达水平分别为(69.05±0.45)ng·L^(-1)、(75.06±0.46)ng·L^(-1)以及(72.04±0.82)ng·L^(-1);视网膜组织中PKM2蛋白表达的光密度值分别为(18.51±2.59)%、(37.35±4.67)%以及(29.75±2.17)%。实验A组与实验B组小鼠的血清IL-17A蛋白、视网膜PKM2蛋白以及STAT3与pSTAT3蛋白表达水平均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论PKM2/STAT信号通路中关键因子的表达水平与EAU的严重程度呈正相关,表明该信号通路作为免疫反应的正调节因子参与了EAU的病理进程。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性葡萄膜炎 自身免疫性疾病 pkm2/STAT3 小鼠
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膈肌超声参数联合血清PKM2水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值
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作者 侯琼 崔存英 黄丹青 《航空航天医学杂志》 2025年第2期129-132,共4页
目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比... 目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比2组临床一般资料及入院时、入院7d时膈肌超声参数[膈肌活动度(DE)、呼吸末膈肌厚度(DTee)、吸气末膈肌厚度(DTei)、膈肌增厚率(DTF)]、血清PKM2水平;分析脓毒症患者发生转归不良的影响因素及对脓毒症患者疾病转归的预测价值。结果 转归不良患者急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、外周血白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)水平均高于转归良好患者(P<0.05);转归良好患者入院时及入院7d时膈肌超声参数DTee、DTei、DTF、DE水平均高于转归不良患者,血清PKM2水平均低于转归不良患者(P<0.05);入院时膈肌超声参数水平为患者发生转归不良的保护因素,血清PKM2、APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、CRP水平为患者发生转归不良的危险因素(P<0.05);入院时及入院7d时膈肌超声参数联合血清PKM2水平联合预测患者预后不良的AUC为0.913、0.945。结论 隔机超声参数在脓毒症预后不良患者中显著下降,血清PKM2及膈肌超声参数在脓毒症预后不良患者中显著升高,是脓毒症患者预后的影响因素,临床上联合检测血清PKM2及膈肌超声参数可为脓毒症患者预后的预测提供新思路和新方法。 展开更多
关键词 膈肌超声参数 pkm2 脓毒症 疾病转归
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PSMA-PET/CT联合血清CTHRC1、PKM2对前列腺癌诊断价值
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作者 张粤 茆飞 +1 位作者 刘帅 傅广波 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第8期1555-1557,1561,共4页
目的研究前列腺特异性膜抗原正电子发射计算机断层扫描(PSMA-PET/CT)联合血清胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)、丙酮酸激酶M2(PKM2)对前列腺癌(PCa)的诊断价值。方法选取2022年1月至2024年6月于南京医科大学附属淮安第一医院泌尿外科就... 目的研究前列腺特异性膜抗原正电子发射计算机断层扫描(PSMA-PET/CT)联合血清胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)、丙酮酸激酶M2(PKM2)对前列腺癌(PCa)的诊断价值。方法选取2022年1月至2024年6月于南京医科大学附属淮安第一医院泌尿外科就诊的疑似PCa患者118例,根据穿刺活检结果分为PCa组(71例)和非PCa组(47例),比较两组患者的血清指标和PSMA-PET/CT结果。结果与非PCa组相比,PCa组的血清尿酸水平较低,总前列腺特异性抗原(tPSA)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、CTHRC1、PKM2及tPSA密度、前列腺/脾脏摄取比值(TSR)均高于非PCa组,差异有统计学意义(P<0.05);tPSA、CRP、IL-6、CTHRC1、PKM2、tPSA密度、TSR均为PCa的危险因素(P<0.05);受试者工作特征(ROC)分析显示,CTHRC1、PKM2、tPSA密度、TSR均对PCa具有诊断价值,上述指标联合诊断PCa的曲线下面积(AUC)、敏感度和特异度均最大,优于单一检测(P<0.05);相关性分析显示,CTHRC1、PKM2、tPSA密度、TSR均与PRIMARY分级正相关(P<0.05)。结论PCa患者的CTHRC1、PKM2水平及tPSA密度、TSR均高于非PCa患者,且相较于单一指标,PSMA-PET/CT联合血清CTHRC1、PKM2对PCa具有更好的诊断价值。 展开更多
关键词 前列腺癌 胶原三股螺旋重复蛋白1 丙酮酸激酶M2 前列腺特异性膜抗原正电子发射计算机断层扫描 影像学
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GLUT1和PKM2在二甲双胍抑制人乳头状甲状腺癌细胞增殖中的作用 被引量：9
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作者 郭慧玲 刘睿 +3 位作者 王红 关海霞 单忠艳 滕卫平 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第7期900-904,共5页
目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细... 目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细胞BCPAP和K1,分为对照组和不同浓度二甲双胍(1、5和10mmol/L)处理组,并分别培养24h、48h和72h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Annexin VFITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测GLUT1和PKM2 mRNA的表达,Western blot检测GLUT1和PKM2蛋白的表达。结果:与对照组相比,二甲双胍抑制PTC细胞增殖,随浓度及处理时间的增加,抑制效应加大,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍诱导PTC细胞凋亡,随浓度及处理时间的增加,其中晚期凋亡率明显增加,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2mRNA的表达水平,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2蛋白的表达水平,呈时间依赖性。结论:二甲双胍抑制人PTC细胞增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是抑制葡萄糖转运关键蛋白和糖酵解关键酶的表达,负面影响癌细胞生长的能量供应。 展开更多
关键词 二甲双胍 人乳头状甲状腺癌细胞 GLUT1 pkm2
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猪PKM2基因的序列分析与组织表达及亚细胞定位 被引量：3
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作者 赵为民 涂枫 +5 位作者 方晓敏 王学敏 付言峰 李碧侠 周李生 任守文 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期68-77,共10页
运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个... 运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个磷酸化位点,为稳定蛋白;PKM2蛋白含有丙酮酸激酶家族的barreldomain和alpha/beta domain 2个结构域,其蛋白二级结构中α–螺旋和无规则卷曲占主要类型;猪PKM2蛋白序列在物种间非常保守,系统进化树分析表明,该蛋白与兔的亲缘关系最近;组织表达显示,猪PKM2基因在肾、小肠中相对高表达,而在肝脏与肌肉中相对低表达;亚细胞定位显示,PKM2蛋白在猪3D4/21和PK15细胞中表达于细胞质,而不表达于细胞核。 展开更多
关键词 猪 pkm2基因 序列分析 组织表达 亚细胞定位
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丙酮酸激酶M2型(PKM2)入核机制和核内作用的研究进展 被引量：4
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作者 詹成 时雨 +2 位作者 马军 王琳 王群 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期133-137,共5页
传统观点认为丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)通过催化肿瘤细胞糖代谢来促进肿瘤细胞生长。近年来研究发现除了酶催化功能外,PKM2还能通过多种途径进入细胞核,在核内作为蛋白激酶广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。本文将就... 传统观点认为丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)通过催化肿瘤细胞糖代谢来促进肿瘤细胞生长。近年来研究发现除了酶催化功能外,PKM2还能通过多种途径进入细胞核,在核内作为蛋白激酶广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。本文将就这方面的研究成果作一综述。 展开更多
关键词 丙酮酸激酶M2型(pkm2) 细胞核 糖酵解
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基于Pkm2/Nrf2通路探讨补肺益肾方改善线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病的机制 被引量：7
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作者 刘杨 张蓝熙 +5 位作者 卢瑞龙 邵雪洁 燕苗苗 崔莉莉 张彩丽 田燕歌 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1973-1981,共9页
目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合... 目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合肺炎克雷伯杆菌反复感染的方法制备COPD大鼠模型。9~16周,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃(0.5 mL/100 g),BYF组和NAC组分别给予补肺益肾方灌胃(11.61 g·kg^(-1)·d^(-1))和乙酰半胱氨酸溶液灌胃(54 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每日1次,16周结束后取材。检测肺功能、肺病理、线粒体超微结构、氧化应激相关指标、线粒体功能相关指标、Pkm2/Nrf2通路相关指标。结果:COPD大鼠肺功能降低(VT、PEF、EF50、FVC和FEV0.3降低,FRC升高),肺组织病理损伤(MLI、BWt升高,MAN降低),肺组织氧化损伤(T-SOD、T-AOC、GSH-Px、SOD2降低,MDA升高),线粒体功能受损(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性下降),Pkm2/Nrf2信号通路表达降低(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达下降)(P<0.05,P<0.01)。BYF和NAC均可改善COPD大鼠肺功能(VT、PEF、EF50、FVC、FEV0.3升高,FRC降低),减轻肺组织病理损伤(MAN升高,MLI、BWt降低),提高肺组织抗氧化水平(T-SOD、GSH-Px、SOD2升高),保护线粒体功能(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、线粒体呼吸链复合物Ⅲ升高),激活Pkm2/Nrf2信号通路(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达升高)(P<0.05,P<0.01);BYF组T-AOC显著升高,MDA显著降低(P<0.01,P<0.05);BYF在升高MAN、GSH-Px、T-AOC、Pkm2 mRNA表达及降低MLI的作用方面优于NAC组(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方和乙酰半胱氨酸均可减轻COPD大鼠肺组织氧化应激,改善线粒体功能,提高抗氧化能力,其机制可能与调控Pkm2/Nrf2信号通路有关,补肺益肾方在改善肺泡结构及提高抗氧化酶活性方面优于乙酰半胱氨酸。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 补肺益肾方 氧化应激 线粒体损伤 pkm2/Nrf2信号通路
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ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达及临床意义 被引量：5
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作者 曾伟 高鹏 +5 位作者 朱小三 戴益琛 陈章兴 谢军培 詹晓娟 张如 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第5期570-572,共3页
目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管... 目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌组织中的阳性率分别为58.8%和64.7%,高于癌旁组织中的阳性率17.9%和21.4%,差异有统计学意义(P<0.05);ECHS1和PKM2蛋白与胆管癌患者性别、年龄及肿瘤直径无相关性,而与胆管癌分化程度、TNM分期及生存时间有相关性。结论 ECHS1和PKM2蛋白表达水平与胆管癌发生、发展及转移关系密切。 展开更多
关键词 胆管癌 ECHS1 pkm2 预后
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PKM2 siRNA对人甲状腺乳头状癌细胞生长和增殖的影响 被引量：6
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作者 刘睿 王晓楠 +1 位作者 张薇 关海霞 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第2期278-282,共5页
目的:研究PKM2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达特性及其在PTC中的作用。方法:用抗PKM2的小干扰RNA转染PTC细胞。Western blot和RT-PCR技术分析细胞中PKM2的表达。MTT法和细胞平板克隆形成实验评估细胞的生长和增殖。采用乳酸、ATP和葡萄... 目的:研究PKM2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达特性及其在PTC中的作用。方法:用抗PKM2的小干扰RNA转染PTC细胞。Western blot和RT-PCR技术分析细胞中PKM2的表达。MTT法和细胞平板克隆形成实验评估细胞的生长和增殖。采用乳酸、ATP和葡萄糖试剂盒分别测定细胞代谢产生的乳酸、ATP及消耗的葡萄糖。结果:PKM2在PTC中异常高表达。在PTC细胞系中应用特异性抗PKM2 siRNA可延缓细胞生长并降低其克隆形成能力。PKM2 siRNA可降低PTC细胞乳酸、ATP的产生,减少葡萄糖的消耗。结论:PKM2高表达可通过激活糖酵解的方式使PTC细胞具有选择性生长优势。PKM2异常高表达可能作为新的生物标记物,并成为PTC的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 pkm2 RNA干扰 糖酵解
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环境低温抑制PKM2活性损害PAM免疫功能加重仔猪呼吸道感染
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作者 吴文聪 邢琬群 +4 位作者 史慧莹 朱志奇 付洪霞 张曦月 徐彬 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第12期2740-2747,共8页
环境低温是猪呼吸道疾病综合征(porcinerespiratory disease complex,PRDC)秋冬季节高发的重要诱因之一,而猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是我国北方寒区冬季诱发PRDC的主要病原。尽管已有研究表明寒冷环境与... 环境低温是猪呼吸道疾病综合征(porcinerespiratory disease complex,PRDC)秋冬季节高发的重要诱因之一,而猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropneumoniae,APP)是我国北方寒区冬季诱发PRDC的主要病原。尽管已有研究表明寒冷环境与PRDC发病率存在关联,但冷应激如何通过代谢重编程影响猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAM)的免疫功能进而加剧APP感染的分子机制尚不清楚。本研究创新性地揭示了丙酮酸激酶M2(pyruvate kinase M2,PKM2)在冷应激下调控PAM免疫活性的关键作用。基于仔猪冷刺激模型,滴鼻感染APP-S1。提取仔猪肺脏组织,通过qRT-PCR、Western blot以及病理切片等方法,评估肺脏组织病理变化。结果显示,冷刺激可加剧APP感染所致的猪肺脏组织损伤。通过代谢组学,显示冷刺激后,仔猪糖代谢水平发生变化,PKM2是糖代谢过程中的关键酶,为探究PKM2是否会影响巨噬细胞的免疫活性从而干预冷刺激下仔猪感染APP进行体外试验。将PAM细胞系3D4/21作为研究对象,通过添加PKM2抑制剂紫草素Shikonin,感染APP,利用Western blot、qRT-PCR探究PAM的免疫活性,结果显示,与单独感染APP组相比,抑制PKM2后感染APP,PAM分泌炎症因子水平下降,同时抑制NF-κB信号通路活化。这些发现为理解环境温度影响宿主―病原体互作提供了新视角,并为开发靶向免疫代谢的PRDC干预策略奠定了理论基础。 展开更多
关键词 冷刺激 猪胸膜肺炎放线杆菌 丙酮酸激酶M2 猪肺泡巨噬细胞
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