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蛇床子素通过调控PKM2的乳酸化修饰减轻阿尔茨海默病神经炎症
1
作者 宋欢 夏丽秀 +1 位作者 黄雨威 胡媛媛 《广州中医药大学学报》 2025年第3期732-740,共9页
【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组... 【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组织化学法检测脑组织Iba1阳性表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测脑组织白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β水平,Weatern Blot法检测脑组织Pan乳酸化修饰(Pan-kla)以及PKM2乳酸化修饰(PKM2-kla)水平。(2)细胞实验:使用LPS/Aβ1-42处理小胶质细胞(BV2细胞)构建体外AD模型,并使用蛇床子素处理。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Weatern Blot法检测小胶质细胞激活标志物Iba1的表达,Griess试剂评估一氧化氮(NO)的产生,ELISA法检测细胞IL-6、TNF-α和IL-1β水平。将BV2细胞条件培养基(CM)与神经母细胞瘤细胞(Na2细胞)共培养,评估蛇床子素对Na2细胞的保护作用。(3)将蛇床子素与PKM2做分子对接,并进行实验验证。【结果】动物实验中,与WT组比较,APP/PS1组小鼠学习和记忆缺陷加重,加入蛇床子素处理则改善了APP/PS1组小鼠的学习和记忆缺陷。此外,与WT组比较,APP/PS1组小鼠脑组织Iba1阳性细胞增加,促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平升高,Pan-kla以及PKM2-kla水平升高,而蛇床子素处理则抑制了上述指标水平。细胞实验中,蛇床子素在浓度不超过100µmol/L时对BV2细胞活力无明显影响。LPS/Aβ1-42处理上调BV2中Iba1的表达、NO的产生以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平,而蛇床子素可显著抑制LPS/Aβ1-42诱导的上述指标的表达。同时,蛇床子素减弱BV2-CM对Na2细胞的损伤。分子对接结果显示,蛇床子素与PKM2结合良好。蛇床子素处理后下调AD细胞模型中乳酸、Pan-kla和PKM2-kla的水平。【结论】蛇床子素通过抑制PKM2的乳酸化修饰减轻AD神经炎症。 展开更多
关键词 蛇床子素 阿尔茨海默病 神经炎症 pkm2 乳酸化 小鼠 BV2细胞
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温肾阳方通过HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达治疗CKD肾阳虚证的作用机制
2
作者 靳鸽 王思童 +6 位作者 周楷栋 张新江 蔡炎沫 周鑫 刘运华 张新雪 赵宗江 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2135-2144,共10页
目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58... 目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58只SD大鼠,随机分为正常组10只,造模组48只;造模组给予阿霉素(DOX)尾静脉注射(4 mg/kg)构建CKD模型,在此基础上复合肌注氢化可的松(HYD)(10 mg/kg)构建CKD肾阳虚证模型;将成模动物随机分为DOX组、HYD组、真武汤(ZWT)组(5.55 g·kg^(-1)·d^(-1))、WSY组(2.38 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组12只;观察大鼠一般状况,检测24 h尿蛋白定量(24 h UPro);收集血清检测肾功能及其相关指标[血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、血尿素(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)];采用HE染色、Mallory染色和透射电镜观察肾组织病理形态;借助转录组学和血清代谢组学预测关键信号通路;采用ELISA检测大鼠血清糖酵解代谢酶乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶-1(PFK-1)水平;采用免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR验证大鼠肾组织中HIF-1α、PKM2、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达。结果:与DOX和HYD比较,WSY大鼠一般状态改善,体质量、体温、肾脏指数显著提升(P<0.01,P<0.05),血清Scr、UA、BUN含量显著降低(P<0.05,P<0.01),TP、ALB显著上升(P<0.05,P<0.01);病理染色显示肾脏损伤减轻,电镜观察发现肾小球基底膜节段性增厚减轻、足突融合减轻。转录组学和代谢组学分析结果显示,WSY治疗CKD肾阳虚证作用机制可能与HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡基因相关。ELISA结果显示,WSY大鼠血清中LDH、PFK-1较DOX和HYD水平显著降低(P<0.01);免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR结果显示,与DOX和HYD比较,ZWT、WSY大鼠肾组织HIF-1α、PKM2、GLUT1、Bax蛋白和mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:WSY可以保护CKD肾阳虚证大鼠肾功能,改善肾脏损伤,其机制可能是通过调控HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程,影响Bcl-2/Bax线粒体凋亡途径,从而延缓CKD疾病进展。 展开更多
关键词 温肾阳方 慢性肾脏病 转录组学 代谢组学 代谢重编程 HIF-1α/pkm2信号通路 线粒体 机制
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血清PKM2、Gal-3、CitH3水平升高可预测机械通气并发肺部感染 被引量：2
3
作者 黄航栋 厉丹瑜 朱晓锋 《基础医学与临床》 CAS 2025年第1期86-90,共5页
目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并... 目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并发肺部感染分为肺部感染组(n=50)和非肺部感染组(n=70),ELISA检测血清PKM2、Gal-3、CitH3水平;收集临床资料;预后随访并分为预后良好组(n=79)和预后不良组(n=41);多因素Logistic回归分析影响MV患者发生预后不良的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PKM2、Gal-3、CitH3对MV患者发生预后不良的预测价值。结果与非肺部感染组相比,肺部感染组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);预后不良组较预后良好组临床肺部感染评分(CPIS)升高(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3皆为MV患者发生预后不良的危险因素(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3及联合预测患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.839、0.779、0.925,3者联合诊断的AUC优于各自单独检测(Z=4.261、2.521、3.676,P<0.001、0.05、0.001)。结论MV并发肺部感染患者血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均较未发生肺部感染患者升高,三者对MV患者发生预后不良有一定的预测价值。 展开更多
关键词 机械通气 肺部感染 丙酮酸激酶M2(pkm2) 乳糖凝集素-3(Gal-3) 瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3) 预后
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PKM2/STAT3在实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠中的表达和作用
4
作者 李金清 张秋瑾 +3 位作者 郑柳 杨彬彬 廖娟媛 丁芝祥 《眼科新进展》 北大核心 2025年第12期938-942,共5页
目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 ... 目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 d状态),实验A组与实验B组[均使用光感受器间视黄醇结合蛋白651-670肽段、完全弗氏佐剂和百日咳毒素共同构建稳定的EAU小鼠模型,分别设为造模后14 d与21 d状态],每组6只。裂隙灯显微镜观察小鼠眼前节表现,眼底照相机观察小鼠眼底表现,苏木精-伊红染色后评估小鼠临床评分及组织病理学评分;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-17A的蛋白表达水平;免疫组织化学法检测小鼠视网膜组织PKM2蛋白表达水平;Western blot检测小鼠视网膜组织中PKM2、磷酸化STAT3(pSTAT3)以及STAT3蛋白表达水平。结果实验A组与实验B组小鼠眼前节临床评分、眼底临床评分以及视网膜组织病理学评分均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。对照组、实验A组以及实验B组小鼠血清中的IL-17A蛋白表达水平分别为(69.05±0.45)ng·L^(-1)、(75.06±0.46)ng·L^(-1)以及(72.04±0.82)ng·L^(-1);视网膜组织中PKM2蛋白表达的光密度值分别为(18.51±2.59)%、(37.35±4.67)%以及(29.75±2.17)%。实验A组与实验B组小鼠的血清IL-17A蛋白、视网膜PKM2蛋白以及STAT3与pSTAT3蛋白表达水平均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论PKM2/STAT信号通路中关键因子的表达水平与EAU的严重程度呈正相关,表明该信号通路作为免疫反应的正调节因子参与了EAU的病理进程。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性葡萄膜炎 自身免疫性疾病 pkm2/STAT3 小鼠
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膈肌超声参数联合血清PKM2水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值
5
作者 侯琼 崔存英 黄丹青 《航空航天医学杂志》 2025年第2期129-132,共4页
目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比... 目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比2组临床一般资料及入院时、入院7d时膈肌超声参数[膈肌活动度(DE)、呼吸末膈肌厚度(DTee)、吸气末膈肌厚度(DTei)、膈肌增厚率(DTF)]、血清PKM2水平;分析脓毒症患者发生转归不良的影响因素及对脓毒症患者疾病转归的预测价值。结果 转归不良患者急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、外周血白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)水平均高于转归良好患者(P<0.05);转归良好患者入院时及入院7d时膈肌超声参数DTee、DTei、DTF、DE水平均高于转归不良患者,血清PKM2水平均低于转归不良患者(P<0.05);入院时膈肌超声参数水平为患者发生转归不良的保护因素,血清PKM2、APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、CRP水平为患者发生转归不良的危险因素(P<0.05);入院时及入院7d时膈肌超声参数联合血清PKM2水平联合预测患者预后不良的AUC为0.913、0.945。结论 隔机超声参数在脓毒症预后不良患者中显著下降,血清PKM2及膈肌超声参数在脓毒症预后不良患者中显著升高,是脓毒症患者预后的影响因素,临床上联合检测血清PKM2及膈肌超声参数可为脓毒症患者预后的预测提供新思路和新方法。 展开更多
关键词 膈肌超声参数 pkm2 脓毒症 疾病转归
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巴基斯坦PKM高速公路项目交通量后评价研究
6
作者 张伟 李志容 《交通企业管理》 2025年第2期69-71,共3页
“中巴经济走廊”是共建“一带一路”的重要先行先试项目。巴基斯坦PKM高速公路(苏库尔至木尔坦段)是“中巴经济走廊”中规模最大的交通基础设施项目,由中国建筑股份有限公司采用EPC模式承建。项目南起巴基斯坦信德省苏库尔,北至旁遮普... “中巴经济走廊”是共建“一带一路”的重要先行先试项目。巴基斯坦PKM高速公路(苏库尔至木尔坦段)是“中巴经济走廊”中规模最大的交通基础设施项目,由中国建筑股份有限公司采用EPC模式承建。项目南起巴基斯坦信德省苏库尔,北至旁遮普省木尔坦,全长392公里,于2016年8月开工建设,2019年6月建成通车。 展开更多
关键词 巴基斯坦 pkm高速公路 交通量后评价 交通量预测
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RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解 被引量：1
7
作者 颜秋霞 曾鹏 +9 位作者 黄树强 谭翠钰 周秀琴 乔静 赵晓英 冯玲 朱振杰 张国志 胡鸿 陈彩蓉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期9-16,共8页
目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采... 目的探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用。方法采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞)。采用RT-qPCR和Westernblotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功。通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Westernblotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响。结果RT-qPCR和Westernblotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05)。过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反。Westernblotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反。葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05)。结论RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标。 展开更多
关键词 X连锁RNA结合基序蛋白 M2型丙酮酸激酶 膀胱癌 pkm2 糖酵解
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高危型HPV分型联合宫颈分泌物PKM2、Stat3在宫颈癌筛查中的意义 被引量：3
8
作者 叶永生 徐燕 +1 位作者 孙君华 倪鸣 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第1期98-101,共4页
目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型联合宫颈分泌物丙酮酸激酶M2型(PKM2)、信号传导与转录激活因子3(Stat3)在宫颈癌筛查中的意义。方法选取2019年1月至2021年1月406例在河南省南阳市中心医院接受宫颈癌筛查者作为研究对象,根据病理... 目的探讨高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型联合宫颈分泌物丙酮酸激酶M2型(PKM2)、信号传导与转录激活因子3(Stat3)在宫颈癌筛查中的意义。方法选取2019年1月至2021年1月406例在河南省南阳市中心医院接受宫颈癌筛查者作为研究对象,根据病理结果分为宫颈癌组(n=136)、非宫颈癌组(n=270),收集两组临床资料,分析宫颈癌的相关影响因素及各指标的筛查价值。结果406例接受宫颈癌筛查者,病理结果正常208例,宫颈上皮内瘤变Ⅰ级22例,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级21例,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级19例,宫颈癌136例。单因素分析,家族性妇科肿瘤史、除配偶/男朋友外性关系对象数量、阴道清洁度、高危型HPV分型情况、PKM2、Stat3与宫颈癌的发生有关(P<0.05);Logistic多因素回归分析,将家族性妇科肿瘤史、除配偶/男朋友外性关系对象数量、阴道清洁度控制后,高危型HPV分型阳性、PKM2≥两组均值、Stat3≥两组均值是宫颈癌发生的相关独立危险因素(P<0.05);ROC分析,高危型HPV分型联合宫颈分泌物PKM2、Stat3筛查宫颈癌的AUC大于任一单一指标(P<0.05)。结论高危型HPV分型阳性、宫颈分泌物PKM2>39.33 U/mL、Stat3>0.07 ng/mL是宫颈癌相关独立危险因素,联合检测三者能为临床筛查宫颈癌高风险人群提供一定参考,从而改善患者预后。 展开更多
关键词 高危型HPV pkm2 STAT3 宫颈癌
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宫颈癌患者血清LOXL2、PKM2与根治术后远期复发的关系
9
作者 张娜 刘翠 +2 位作者 孟令军 李敏 孙长青 《现代生物医学进展》 CAS 2024年第18期3554-3558,共5页
目的:研究宫颈癌患者血清赖氨酰氧化酶样蛋白-2(LOXL2)及丙酮酸激酶M2型(PKM2)与根治术后远期复发的关系。方法:选取2017年1月至2018年3月山东大学齐鲁医院德州医院接受根治术治疗的宫颈癌患者305例作为观察对象,患者随访5年,失访3例。... 目的:研究宫颈癌患者血清赖氨酰氧化酶样蛋白-2(LOXL2)及丙酮酸激酶M2型(PKM2)与根治术后远期复发的关系。方法:选取2017年1月至2018年3月山东大学齐鲁医院德州医院接受根治术治疗的宫颈癌患者305例作为观察对象,患者随访5年,失访3例。根据患者是否远期复发分成复发组(72例)以及未复发组(230例)。比较复发组与未复发组两组血清LOXL2及PKM2水平。采用多因素Logistic回归分析根治术后远期复发的影响因素,以受试者工作特征曲线(ROC)分析血清LOXL2联合PKM2对根治术后患者远期复发的预测价值。结果:302例患者术后5年共复发72例,复发率为23.84%(72/302)。复发组血清LOXL2及PKM2水平均较未复发组更高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析发现,手术方式为腹腔镜术式、浸润深度≥1/2肌层、有淋巴结转移、LOXL2升高及PKM2升高均为患者术后远期复发的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清LOXL2联合PKM2对根治术后患者远期复发的预测价值最高,其中,曲线下面积(AUC)为0.921,敏感度为95.24%。结论:宫颈癌患者的血清LOXL2及PKM2水平升高,且是根治术后远期复发的危险因素。血清LOXL2联合PKM2对术后患者远期复发的预测价值较高。 展开更多
关键词 宫颈癌 LOXL2 pkm2 根治术 远期复发
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EGFRwt/vⅢ与PKM2在乳腺癌中表达的相关性
10
作者 曲鑫 韩璐 邸旭 《医学理论与实践》 2024年第10期1632-1634,1638,共4页
目的:探究表皮生长因子受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)与丙酮酸激酶亚型2(PKM2)在乳腺癌中表达的相关性。方法:选择2020年8月—2023年7月期间我院手术治疗的乳腺癌患者60例作为研究对象,通过免疫组化等实验检测EGFRwt、EGFRvⅢ、磷酸化EGFR、PKM... 目的:探究表皮生长因子受体突变体Ⅲ(EGFRvⅢ)与丙酮酸激酶亚型2(PKM2)在乳腺癌中表达的相关性。方法:选择2020年8月—2023年7月期间我院手术治疗的乳腺癌患者60例作为研究对象,通过免疫组化等实验检测EGFRwt、EGFRvⅢ、磷酸化EGFR、PKM2、β-连环蛋白(β-catenin)和磷酸化的β-catenin在乳腺癌和癌旁组织之间的表达差异,利用Spearman法相关性分析各变量间的相关性,从而验证乳腺癌中EGFRwt/vⅢ与PKM2的关系。结果:癌组织EGFRwt、EGFRvⅢ、磷酸化EGFR、PKM2、β-catenin磷酸化的β-catenin平均光密度值均高于癌旁组织(P<0.05)。癌组织EGFRwt、EGFRvⅢ、磷酸化EGFR、PKM2、β-catenin磷酸化的β-catenin表达阳性率均高于癌旁组织(P<0.05)。EGFRwt与EGFRvⅢ、磷酸化EGFR、PKM2、β-catenin、磷酸化的β-catenin均呈正相关(r=0.865、0.754、0.691、0.625、0.678,P<0.05),EGFRvⅢ与磷酸化EGFR、PKM2、β-catenin、磷酸化的β-catenin均呈正相关(r=0.582、0.564、0.817、0.756,P<0.05),PKM2与β-catenin、磷酸化的β-catenin均呈正相关(r=0.524、0.631,P<0.05)。结论:EGFRwt/vⅢ与PKM2的表达呈正相关。这一发现可能有助于进一步理解乳腺癌的发生机制,并为乳腺癌的诊断和治疗提供新的靶点和策略。 展开更多
关键词 EGFRwt/vⅢ pkm2 乳腺癌 相关性
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脊髓康通过激活星形胶质细胞的YAP/PKM2信号轴促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复 被引量：2
11
作者 满豪 王建伟 +5 位作者 吴毛 邵阳 杨俊锋 李绍烁 吕锦业 周悦 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期636-643,共8页
目的研究中药脊髓康含药血清联合SRY转录盒因子2(SOX2)诱导星形胶质细胞重编程为神经元的作用机制。方法将30只成年SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和治疗组,10只/组。SCI组和治疗组均采用改良Allen法构建脊髓损伤大鼠模... 目的研究中药脊髓康含药血清联合SRY转录盒因子2(SOX2)诱导星形胶质细胞重编程为神经元的作用机制。方法将30只成年SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和治疗组,10只/组。SCI组和治疗组均采用改良Allen法构建脊髓损伤大鼠模型,于术后分别给予生理盐水、脊髓康等量灌胃。在术前1 d、术后3、7、14 d进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分和斜板实验。相同方法构建脊髓损伤大鼠模型,提取损伤部位组织进行单细胞RNA测序,再使用生物信息学对“脊髓康”、“脊髓损伤”、“糖酵解”关联基因进行靶点分析。成年SD大鼠以生药量15 g·kg^(-1)·d^(-1)脊髓康灌胃,连续3 d后腹主动脉采血制备脊髓康含药血清。体外培养大鼠幼仔皮层脑组织三代星形胶质细胞,分为SOX2组、SOX2+JSK组。SOX2组加入10 mmol/LSOX2;SOX2+JSK组加入10mmol/LSOX2、2.5%脊髓康含药血清。培养21d后,Westernblot检测细胞中丙酮酸激酶M2型(PKM2)、磷酸化丙酮酸激酶M2型(p-PKM2)、Yes-相关蛋白(YAP)表达,使用免疫荧光多标染色观测PKM2与YAP共定位情况。结果治疗组大鼠的BBB评分与斜板实验角度明显提升,且各时段均优于SCI组(P<0.05)。SCI部位PKM2基因在各类细胞中均有高活性表达;生物信息学分析靶点指向HIPPO-YAP信号通路;与SOX2组比较,整个细胞中SOX2+JSK组PKM2表达增高(P<0.05)、p-PKM2、YAP表达亦升高(P<0.001),且更多PKM2磷酸化入核。SOX2+JSK组PKM2与YAP共定位情况高于SOX2组。结论中药脊髓康含药血清联合SOX2可能通过提高糖酵解中PKM2与YAP共定位,从而将星形胶质细胞重编程诱导为神经元细胞,促进神经损伤修复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 星形胶质细胞 有氧糖酵解 脊髓康 pkm2 YAP
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PKM1调控小细胞肺癌自噬与神经内分泌标志物表达 被引量：1
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作者 唐辰晨 金禹龙 +7 位作者 赵沛妍 田琳 李慧 杨长良 钟睿 柳菁菁 马丽霞 程颖 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期645-653,共9页
背景与目的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)恶性程度高,异质性强,被称为难治性肿瘤。免疫治疗改变了广泛期SCLC(extensive-disease SCLC,ED-SCLC)的治疗格局,但受益人群有限,因此,寻找新的治疗措施是目前SCLC亟待解决的临床问... 背景与目的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)恶性程度高,异质性强,被称为难治性肿瘤。免疫治疗改变了广泛期SCLC(extensive-disease SCLC,ED-SCLC)的治疗格局,但受益人群有限,因此,寻找新的治疗措施是目前SCLC亟待解决的临床问题。SCLC具有高度活跃的糖酵解代谢特征,而丙酮酸激酶M1(pyruvate kinase M1,PKM1)是糖酵解途径中重要的限速酶PK的同工酶之一。研究表明PKM1与自噬及药物敏感性有关,但PKM1如何调控SCLC药物敏感性及其作用机制尚不清楚。本研究旨在探讨PKM1在SCLC中的生物学功能,包括PKM1对SCLC的增殖、迁移、自噬、药物敏感性及神经内分泌(neuroendocrine,NE)相关标志物表达的影响。方法应用Western blot检测SCLC细胞中PKM1的表达水平;通过慢病毒稳定转染构建PKM1基因过表达的SCLC细胞株,MTT法检测细胞增殖能力及药物敏感性,Transwell实验测定细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞自噬水平,Western blot检测NE相关蛋白的表达水平。结果不同的SCLC细胞系PKM1表达具有差异性,H1092中PKM1表达较低(P<0.01)。与对照组相比,PKM1过表达的H1092细胞虽然增殖水平无明显差异,但迁移能力增高(P<0.001),药物敏感性降低,并且自噬水平受到抑制(P<0.001)。此外过表达PKM1可上调非神经内分泌(non-neuroendocrine,non-NE)相关蛋白表达(P<0.01),降低NE相关蛋白表达(P<0.01)。结论PKM1在SCLC细胞系中具有差异表达,PKM1高表达不影响SCLC的细胞增殖,但影响其迁移。PKM1可能通过抑制自噬,调节NE标志物的表达,从而影响药物敏感性,研究结果为探索PKM1在SCLC中的作用提供了理论依据。 展开更多
关键词 肺肿瘤 pkm1 自噬 神经内分泌 药物敏感性
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PKM2对心肌缺血保护作用的研究进展 被引量：2
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作者 孙菡阳 张艳 曾彬 《中国心血管杂志》 北大核心 2024年第2期178-182,共5页
PKM2是丙酮酸激酶的同工酶之一,在心血管系统的生理和病理过程中发挥重要作用。PKM2在缺血损伤心脏中的表达显著增加,可通过调节心肌细胞周期、抑制细胞凋亡、促进血管新生等保护心肌细胞免受缺血损伤。PKM2治疗心肌缺血具有潜在前景,... PKM2是丙酮酸激酶的同工酶之一,在心血管系统的生理和病理过程中发挥重要作用。PKM2在缺血损伤心脏中的表达显著增加,可通过调节心肌细胞周期、抑制细胞凋亡、促进血管新生等保护心肌细胞免受缺血损伤。PKM2治疗心肌缺血具有潜在前景,可能为患者提供新的治疗选择。 展开更多
关键词 pkm2 心肌缺血 缺氧诱导因子1Α 活性氧 血管新生
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大型国际EPC总承包项目设计工作要点分析——以巴基斯坦PKM项目为例 被引量：3
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作者 李杨 罗冰 《交通企业管理》 2024年第1期73-75,共3页
在中国传统基建行业管理体制下,建设项目的设计与施工分别由不同单位实施,设计与施工完全分离且相对独立。中国承包商承接国际工程项目,特别是需要承包商负责设计的项目中,由于自身多为施工企业或平台公司,往往需要将设计另行分包给设... 在中国传统基建行业管理体制下,建设项目的设计与施工分别由不同单位实施,设计与施工完全分离且相对独立。中国承包商承接国际工程项目,特别是需要承包商负责设计的项目中,由于自身多为施工企业或平台公司,往往需要将设计另行分包给设计单位,由设计单位承担设计工作。作为总承包下的设计分包是中国设计单位走出去的主要形式之一。如何做好设计工作,从总承包利益出发,全面推进项目的顺利实施,是设计单位需要提升的一个重点。笔者以巴基斯坦PKM项目(苏库尔—木尔坦段)为例。 展开更多
关键词 国际工程 EPC合同 总承包项目 设计工作要点 巴基斯坦pkm项目
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肺动脉高压大鼠模型中PKM2 Neddylation修饰促进右心室纤维化的研究 被引量：2
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作者 郭文昀 王丽霞 王金琳 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第2期108-114,共7页
目的探究PKM2拟素化(neddylation)修饰对肺动脉高压大鼠右心室纤维化的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和MLN4924组,HE染色法检测肺动脉,Masson染色检测右心室纤维化程度。提取大鼠原代心脏成纤维细胞,免疫荧光法检测α-平滑... 目的探究PKM2拟素化(neddylation)修饰对肺动脉高压大鼠右心室纤维化的影响。方法将SD大鼠随机分为对照组、模型组和MLN4924组,HE染色法检测肺动脉,Masson染色检测右心室纤维化程度。提取大鼠原代心脏成纤维细胞,免疫荧光法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,使用si-NC、si-PKM2、pcDNA3.1-PKM2转染原代心脏成纤维细胞后,蛋白质免疫印迹法检测PKM2及纤维化相关Ⅰ型胶原蛋白(Collagen Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen Ⅲ)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)等蛋白水平。蛋白质免疫共沉淀法检测PKM2 neddylation修饰。实时荧光定量PCR法检测大鼠心脏组织中PKM2的mRNA表达水平。蛋白质免疫印迹法检测PKM2蛋白质降解时间。结果HE染色结果显示,模型组肺小动脉(纤维层)和内膜(内转运蛋白)之间的距离显著加宽,中间层的厚度增加,Masson染色显示,与对照组相比,模型组显示更多的胶原沉积,纤维化更严重的。模型组的PKM2蛋白表达水平高于对照组,而mRNA水平无显著性差异。PKM2在大鼠肺动脉高压模型中右心室组织存在neddylation修饰。在心脏成纤维细胞中敲低Nedd8或用MLN4924抑制neddylation修饰可下调PKM2及纤维化相关蛋白Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、MMP2、MMP9等蛋白水平,促进PKM2蛋白质降解速率[(3.03±0.23)~(11.97±0.66)h,t=-12.82,P<0.001],过表达Nedd8则提高PKM2蛋白表达。MLN4924组大鼠右心室纤维化程度及α-SMA蛋白表达水平低于模型组。结论在肺动脉高压大鼠模型中,neddylation修饰增强了PKM2的蛋白质稳定性进而促进右心室纤维化过程。 展开更多
关键词 肺动脉高压 pkm2 拟素化修饰 右心室纤维化
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PKMv2协议研究 被引量：1
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作者 郎为民 靳焰 祁向宇 《数据通信》 2008年第6期19-22,共4页
IEEE802.16的安全子层采用了认证客户端/服务器密钥管理协议,在该协议中基站(服务器)能够对分发给客户端SS的密钥进行控制。IEEE802.16系列标准的安全性主要基于PKM协议。在初始授权密钥交换期间,BS使用基于数字证书的SS认证对客户端SS... IEEE802.16的安全子层采用了认证客户端/服务器密钥管理协议,在该协议中基站(服务器)能够对分发给客户端SS的密钥进行控制。IEEE802.16系列标准的安全性主要基于PKM协议。在初始授权密钥交换期间,BS使用基于数字证书的SS认证对客户端SS进行认证。PKM协议使用公钥密码技术建立SS与BS之间的共享密钥,SS也使用PKM协议支持周期性重认证和密钥更新。文章首先分析了PKMv2中安全子层的协议栈,然后给出了相互认证、授权密钥生成和安全认证的流程。同时,从支持的认证算法、安全关联种类和加密算法等方面将PKMv2和PKMv1进行了比较,并对PKMv2可能存在的安全威胁进行了详细的分析。 展开更多
关键词 全球微波接入互操作性(WiMAX) 密钥管理(pkm) pkmv2 pkmv1 相互认证
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不同细胞亚定位的PKM2在肿瘤细胞中发挥作用的研究进展
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作者 卢晓梅 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第2期182-185,共4页
PKM2(Pyruvate kinase M2)是M2型丙酮酸激酶的简称,参与无氧糖酵解代谢过程。作为一种代谢或非代谢(激酶)酶,PKM2因其在肿瘤细胞中的生物学作用(包括增殖、迁移、侵袭、代谢等)而受到广泛关注。PKM2在细胞核、细胞质、线粒体、外泌体甚... PKM2(Pyruvate kinase M2)是M2型丙酮酸激酶的简称,参与无氧糖酵解代谢过程。作为一种代谢或非代谢(激酶)酶,PKM2因其在肿瘤细胞中的生物学作用(包括增殖、迁移、侵袭、代谢等)而受到广泛关注。PKM2在细胞核、细胞质、线粒体、外泌体甚至体内循环中,可以作为一种RNA结合蛋白(RBP)来自我支持其代谢功能。目前已有大量研究从不同角度探讨了PKM2在肿瘤细胞中的生物学作用,但有关PKM2在其作为RNA结合蛋白、保护高尔基体和重塑微环境等方面的研究较少。本文就PKM2在非代谢研究方面取得的进展做一综述。 展开更多
关键词 pkm2 RNA结合蛋白(RBP) 非代谢 肿瘤细胞
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GLUT1和PKM2在二甲双胍抑制人乳头状甲状腺癌细胞增殖中的作用 被引量：9
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作者 郭慧玲 刘睿 +3 位作者 王红 关海霞 单忠艳 滕卫平 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第7期900-904,共5页
目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细... 目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细胞BCPAP和K1,分为对照组和不同浓度二甲双胍(1、5和10mmol/L)处理组,并分别培养24h、48h和72h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Annexin VFITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测GLUT1和PKM2 mRNA的表达,Western blot检测GLUT1和PKM2蛋白的表达。结果:与对照组相比,二甲双胍抑制PTC细胞增殖,随浓度及处理时间的增加,抑制效应加大,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍诱导PTC细胞凋亡,随浓度及处理时间的增加,其中晚期凋亡率明显增加,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2mRNA的表达水平,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2蛋白的表达水平,呈时间依赖性。结论:二甲双胍抑制人PTC细胞增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是抑制葡萄糖转运关键蛋白和糖酵解关键酶的表达,负面影响癌细胞生长的能量供应。 展开更多
关键词 二甲双胍 人乳头状甲状腺癌细胞 GLUT1 pkm2
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猪PKM2基因的序列分析与组织表达及亚细胞定位 被引量：3
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作者 赵为民 涂枫 +5 位作者 方晓敏 王学敏 付言峰 李碧侠 周李生 任守文 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期68-77,共10页
运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个... 运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个磷酸化位点,为稳定蛋白;PKM2蛋白含有丙酮酸激酶家族的barreldomain和alpha/beta domain 2个结构域,其蛋白二级结构中α–螺旋和无规则卷曲占主要类型;猪PKM2蛋白序列在物种间非常保守,系统进化树分析表明,该蛋白与兔的亲缘关系最近;组织表达显示,猪PKM2基因在肾、小肠中相对高表达,而在肝脏与肌肉中相对低表达;亚细胞定位显示,PKM2蛋白在猪3D4/21和PK15细胞中表达于细胞质,而不表达于细胞核。 展开更多
关键词 猪 pkm2基因 序列分析 组织表达 亚细胞定位
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ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达及临床意义 被引量：5
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作者 曾伟 高鹏 +5 位作者 朱小三 戴益琛 陈章兴 谢军培 詹晓娟 张如 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第5期570-572,共3页
目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管... 目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌组织中的阳性率分别为58.8%和64.7%,高于癌旁组织中的阳性率17.9%和21.4%,差异有统计学意义(P<0.05);ECHS1和PKM2蛋白与胆管癌患者性别、年龄及肿瘤直径无相关性,而与胆管癌分化程度、TNM分期及生存时间有相关性。结论 ECHS1和PKM2蛋白表达水平与胆管癌发生、发展及转移关系密切。 展开更多
关键词 胆管癌 ECHS1 pkm2 预后
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