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蛇床子素通过调控PKM2的乳酸化修饰减轻阿尔茨海默病神经炎症 被引量:2
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作者 宋欢 夏丽秀 +1 位作者 黄雨威 胡媛媛 《广州中医药大学学报》 2025年第3期732-740,共9页
【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组... 【目的】探讨蛇床子素通过调控丙酮酸激酶M2(PKM2)的乳酸化修饰对阿尔兹海默病(AD)神经炎症的影响。【方法】(1)动物实验:将18只小鼠分为野生型(WT)组、APP/PS1组和APP/PS1+蛇床子素组。比较各组学习和记忆相关生物行为学指标。免疫组织化学法检测脑组织Iba1阳性表达,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测脑组织白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α和IL-1β水平,Weatern Blot法检测脑组织Pan乳酸化修饰(Pan-kla)以及PKM2乳酸化修饰(PKM2-kla)水平。(2)细胞实验:使用LPS/Aβ1-42处理小胶质细胞(BV2细胞)构建体外AD模型,并使用蛇床子素处理。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活力,Weatern Blot法检测小胶质细胞激活标志物Iba1的表达,Griess试剂评估一氧化氮(NO)的产生,ELISA法检测细胞IL-6、TNF-α和IL-1β水平。将BV2细胞条件培养基(CM)与神经母细胞瘤细胞(Na2细胞)共培养,评估蛇床子素对Na2细胞的保护作用。(3)将蛇床子素与PKM2做分子对接,并进行实验验证。【结果】动物实验中,与WT组比较,APP/PS1组小鼠学习和记忆缺陷加重,加入蛇床子素处理则改善了APP/PS1组小鼠的学习和记忆缺陷。此外,与WT组比较,APP/PS1组小鼠脑组织Iba1阳性细胞增加,促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平升高,Pan-kla以及PKM2-kla水平升高,而蛇床子素处理则抑制了上述指标水平。细胞实验中,蛇床子素在浓度不超过100µmol/L时对BV2细胞活力无明显影响。LPS/Aβ1-42处理上调BV2中Iba1的表达、NO的产生以及促炎因子IL-6、TNF-α和IL-1β水平,而蛇床子素可显著抑制LPS/Aβ1-42诱导的上述指标的表达。同时,蛇床子素减弱BV2-CM对Na2细胞的损伤。分子对接结果显示,蛇床子素与PKM2结合良好。蛇床子素处理后下调AD细胞模型中乳酸、Pan-kla和PKM2-kla的水平。【结论】蛇床子素通过抑制PKM2的乳酸化修饰减轻AD神经炎症。 展开更多
关键词 蛇床子素 阿尔茨海默病 神经炎症 pkm2 乳酸化 小鼠 BV2细胞
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温肾阳方通过HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡相关基因Bcl-2/Bax表达治疗CKD肾阳虚证的作用机制
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作者 靳鸽 王思童 +6 位作者 周楷栋 张新江 蔡炎沫 周鑫 刘运华 张新雪 赵宗江 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2135-2144,共10页
目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58... 目的:应用转录组学和代谢组学,分析预测温肾阳方(WSY)治疗慢性肾脏病(CKD)肾阳虚证的关键信号通路,并结合动物实验探究其对CKD肾阳虚证大鼠的保护作用及对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/丙酮酸激酶M2(PKM2)信号通路的调节作用。方法:将58只SD大鼠,随机分为正常组10只,造模组48只;造模组给予阿霉素(DOX)尾静脉注射(4 mg/kg)构建CKD模型,在此基础上复合肌注氢化可的松(HYD)(10 mg/kg)构建CKD肾阳虚证模型;将成模动物随机分为DOX组、HYD组、真武汤(ZWT)组(5.55 g·kg^(-1)·d^(-1))、WSY组(2.38 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组12只;观察大鼠一般状况,检测24 h尿蛋白定量(24 h UPro);收集血清检测肾功能及其相关指标[血肌酐(Scr)、尿酸(UA)、血尿素(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)];采用HE染色、Mallory染色和透射电镜观察肾组织病理形态;借助转录组学和血清代谢组学预测关键信号通路;采用ELISA检测大鼠血清糖酵解代谢酶乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸果糖激酶-1(PFK-1)水平;采用免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR验证大鼠肾组织中HIF-1α、PKM2、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、B淋巴细胞肿瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)蛋白及mRNA表达。结果:与DOX和HYD比较,WSY大鼠一般状态改善,体质量、体温、肾脏指数显著提升(P<0.01,P<0.05),血清Scr、UA、BUN含量显著降低(P<0.05,P<0.01),TP、ALB显著上升(P<0.05,P<0.01);病理染色显示肾脏损伤减轻,电镜观察发现肾小球基底膜节段性增厚减轻、足突融合减轻。转录组学和代谢组学分析结果显示,WSY治疗CKD肾阳虚证作用机制可能与HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程调控凋亡基因相关。ELISA结果显示,WSY大鼠血清中LDH、PFK-1较DOX和HYD水平显著降低(P<0.01);免疫组织化学染色、Western Blot和Real-time PCR结果显示,与DOX和HYD比较,ZWT、WSY大鼠肾组织HIF-1α、PKM2、GLUT1、Bax蛋白和mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白及mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:WSY可以保护CKD肾阳虚证大鼠肾功能,改善肾脏损伤,其机制可能是通过调控HIF-1α/PKM2信号通路介导的代谢重编程,影响Bcl-2/Bax线粒体凋亡途径,从而延缓CKD疾病进展。 展开更多
关键词 温肾阳方 慢性肾脏病 转录组学 代谢组学 代谢重编程 HIF-1α/pkm2信号通路 线粒体 机制
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血清PKM2、Gal-3、CitH3水平升高可预测机械通气并发肺部感染 被引量:2
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作者 黄航栋 厉丹瑜 朱晓锋 《基础医学与临床》 CAS 2025年第1期86-90,共5页
目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并... 目的探讨血清丙酮酸激酶M2(PKM2)、乳糖凝集素-3(Gal-3)、瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3)水平与机械通气(MV)患者并发肺部感染的关系及预后评估价值。方法将2022年10月至2024年3月于金华市中心医院收治的120例行MV的患者纳入研究,根据是否并发肺部感染分为肺部感染组(n=50)和非肺部感染组(n=70),ELISA检测血清PKM2、Gal-3、CitH3水平;收集临床资料;预后随访并分为预后良好组(n=79)和预后不良组(n=41);多因素Logistic回归分析影响MV患者发生预后不良的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清PKM2、Gal-3、CitH3对MV患者发生预后不良的预测价值。结果与非肺部感染组相比,肺部感染组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均升高(P<0.05);预后不良组较预后良好组临床肺部感染评分(CPIS)升高(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3皆为MV患者发生预后不良的危险因素(P<0.05);PKM2、Gal-3、CitH3及联合预测患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.839、0.779、0.925,3者联合诊断的AUC优于各自单独检测(Z=4.261、2.521、3.676,P<0.001、0.05、0.001)。结论MV并发肺部感染患者血清PKM2、Gal-3、CitH3水平均较未发生肺部感染患者升高,三者对MV患者发生预后不良有一定的预测价值。 展开更多
关键词 机械通气 肺部感染 丙酮酸激酶M2(pkm2) 乳糖凝集素-3(Gal-3) 瓜氨酸化组蛋白H3(CitH3) 预后
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PKMv2协议研究 被引量:1
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作者 郎为民 靳焰 祁向宇 《数据通信》 2008年第6期19-22,共4页
IEEE802.16的安全子层采用了认证客户端/服务器密钥管理协议,在该协议中基站(服务器)能够对分发给客户端SS的密钥进行控制。IEEE802.16系列标准的安全性主要基于PKM协议。在初始授权密钥交换期间,BS使用基于数字证书的SS认证对客户端SS... IEEE802.16的安全子层采用了认证客户端/服务器密钥管理协议,在该协议中基站(服务器)能够对分发给客户端SS的密钥进行控制。IEEE802.16系列标准的安全性主要基于PKM协议。在初始授权密钥交换期间,BS使用基于数字证书的SS认证对客户端SS进行认证。PKM协议使用公钥密码技术建立SS与BS之间的共享密钥,SS也使用PKM协议支持周期性重认证和密钥更新。文章首先分析了PKMv2中安全子层的协议栈,然后给出了相互认证、授权密钥生成和安全认证的流程。同时,从支持的认证算法、安全关联种类和加密算法等方面将PKMv2和PKMv1进行了比较,并对PKMv2可能存在的安全威胁进行了详细的分析。 展开更多
关键词 全球微波接入互操作性(WiMAX) 密钥管理(pkm) pkmv2 pkmv1 相互认证
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臭椿酮通过HSP90/PKM2/STAT3信号通路抑制HCC细胞的活性
5
作者 林城 于耕艺 +4 位作者 林楚涵 万悦 王恬恬 汪康 程秀 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第24期1862-1868,共7页
目的:探讨臭椿酮(Ailanthone,AIL)诱导人肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及潜在的作用机制。方法:体外培养SMMC-7721细胞,实验分为对照组和AIL给药组;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;试剂盒检... 目的:探讨臭椿酮(Ailanthone,AIL)诱导人肝癌SMMC-7721细胞死亡的作用及潜在的作用机制。方法:体外培养SMMC-7721细胞,实验分为对照组和AIL给药组;采用CCK-8法检测细胞增殖活性;Transwell侵袭和划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;试剂盒检测乳酸生成量和葡萄糖含量;流式细胞术检测细胞凋亡水平的变化;Western blot检测HSP90/PKM2/STAT3信号通路及凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达;免疫荧光检测各组细胞中PKM2和HSP90及PKM2与STAT3蛋白之间的相互作用。结果:AIL抑制SMMC-7721细胞活性,减弱细胞侵袭和迁移的能力,抑制乳酸生成及增加葡萄糖含量(P<0.05);流式细胞术结果表明AIL呈浓度依赖性诱导SMMC-7721细胞凋亡,且凋亡相关蛋白Bax表达增加,Bcl-2表达降低(P<0.05)。此外,AIL显著抑制PKM2和STAT3蛋白表达(P<0.05),但对HSP90的抑制作用无明显影响(P>0.05);免疫荧光双染实验结果表明,AIL抑制PKM2/HSP90和PKM2/STAT3复合体形成。结论:AIL通过HSP90/PKM2/STAT3信号通路来调控细胞糖酵解诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡。 展开更多
关键词 臭椿酮 糖酵解 肝癌 pkm2
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PKM2/STAT3在实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠中的表达和作用
6
作者 李金清 张秋瑾 +3 位作者 郑柳 杨彬彬 廖娟媛 丁芝祥 《眼科新进展》 北大核心 2025年第12期938-942,共5页
目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 ... 目的探讨M2型丙酮酸激酶(PKM2)/信号转导及转录激活蛋白(STAT3)信号通路在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)发展过程中的表达情况和作用机制。方法选取18只4~5周龄C57BL/6J小鼠,采用随机数字表法将小鼠分为对照组(正常饲养,设为造模后的0 d状态),实验A组与实验B组[均使用光感受器间视黄醇结合蛋白651-670肽段、完全弗氏佐剂和百日咳毒素共同构建稳定的EAU小鼠模型,分别设为造模后14 d与21 d状态],每组6只。裂隙灯显微镜观察小鼠眼前节表现,眼底照相机观察小鼠眼底表现,苏木精-伊红染色后评估小鼠临床评分及组织病理学评分;ELISA法检测小鼠血清白细胞介素(IL)-17A的蛋白表达水平;免疫组织化学法检测小鼠视网膜组织PKM2蛋白表达水平;Western blot检测小鼠视网膜组织中PKM2、磷酸化STAT3(pSTAT3)以及STAT3蛋白表达水平。结果实验A组与实验B组小鼠眼前节临床评分、眼底临床评分以及视网膜组织病理学评分均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。对照组、实验A组以及实验B组小鼠血清中的IL-17A蛋白表达水平分别为(69.05±0.45)ng·L^(-1)、(75.06±0.46)ng·L^(-1)以及(72.04±0.82)ng·L^(-1);视网膜组织中PKM2蛋白表达的光密度值分别为(18.51±2.59)%、(37.35±4.67)%以及(29.75±2.17)%。实验A组与实验B组小鼠的血清IL-17A蛋白、视网膜PKM2蛋白以及STAT3与pSTAT3蛋白表达水平均较对照组升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论PKM2/STAT信号通路中关键因子的表达水平与EAU的严重程度呈正相关,表明该信号通路作为免疫反应的正调节因子参与了EAU的病理进程。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性葡萄膜炎 自身免疫性疾病 pkm2/STAT3 小鼠
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膈肌超声参数联合血清PKM2水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值
7
作者 侯琼 崔存英 黄丹青 《航空航天医学杂志》 2025年第2期129-132,共4页
目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比... 目的 分析膈肌超声参数联合血清丙酮酸激酶M2(PKM2)水平检测对脓毒症患者疾病转归的预测价值。方法 2021年04月-2023年11月择取我院107例脓毒症患者为研究对象,根据患者28d生存情况,将患者分为转归良好组(n=35)及转归不良组(n=72)。对比2组临床一般资料及入院时、入院7d时膈肌超声参数[膈肌活动度(DE)、呼吸末膈肌厚度(DTee)、吸气末膈肌厚度(DTei)、膈肌增厚率(DTF)]、血清PKM2水平;分析脓毒症患者发生转归不良的影响因素及对脓毒症患者疾病转归的预测价值。结果 转归不良患者急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、序贯器官衰竭评估(SOFA)评分、外周血白细胞(WBC)、C反应蛋白(CRP)水平均高于转归良好患者(P<0.05);转归良好患者入院时及入院7d时膈肌超声参数DTee、DTei、DTF、DE水平均高于转归不良患者,血清PKM2水平均低于转归不良患者(P<0.05);入院时膈肌超声参数水平为患者发生转归不良的保护因素,血清PKM2、APACHEⅡ评分、SOFA评分、WBC、CRP水平为患者发生转归不良的危险因素(P<0.05);入院时及入院7d时膈肌超声参数联合血清PKM2水平联合预测患者预后不良的AUC为0.913、0.945。结论 隔机超声参数在脓毒症预后不良患者中显著下降,血清PKM2及膈肌超声参数在脓毒症预后不良患者中显著升高,是脓毒症患者预后的影响因素,临床上联合检测血清PKM2及膈肌超声参数可为脓毒症患者预后的预测提供新思路和新方法。 展开更多
关键词 膈肌超声参数 pkm2 脓毒症 疾病转归
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巴基斯坦PKM高速公路项目交通量后评价研究
8
作者 张伟 李志容 《交通企业管理》 2025年第2期69-71,共3页
“中巴经济走廊”是共建“一带一路”的重要先行先试项目。巴基斯坦PKM高速公路(苏库尔至木尔坦段)是“中巴经济走廊”中规模最大的交通基础设施项目,由中国建筑股份有限公司采用EPC模式承建。项目南起巴基斯坦信德省苏库尔,北至旁遮普... “中巴经济走廊”是共建“一带一路”的重要先行先试项目。巴基斯坦PKM高速公路(苏库尔至木尔坦段)是“中巴经济走廊”中规模最大的交通基础设施项目,由中国建筑股份有限公司采用EPC模式承建。项目南起巴基斯坦信德省苏库尔,北至旁遮普省木尔坦,全长392公里,于2016年8月开工建设,2019年6月建成通车。 展开更多
关键词 巴基斯坦 pkm高速公路 交通量后评价 交通量预测
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GLUT1和PKM2在二甲双胍抑制人乳头状甲状腺癌细胞增殖中的作用 被引量:9
9
作者 郭慧玲 刘睿 +3 位作者 王红 关海霞 单忠艳 滕卫平 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第7期900-904,共5页
目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细... 目的:观察不同浓度二甲双胍对人乳头状甲状腺癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞增殖、凋亡的影响,检测细胞中葡萄糖转运关键蛋白—葡萄糖转运体1(GLUT1)和糖酵解关键酶—M2型丙酮酸激酶(PKM2)表达水平的变化。方法:体外培养人PTC细胞BCPAP和K1,分为对照组和不同浓度二甲双胍(1、5和10mmol/L)处理组,并分别培养24h、48h和72h。四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,Annexin VFITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR检测GLUT1和PKM2 mRNA的表达,Western blot检测GLUT1和PKM2蛋白的表达。结果:与对照组相比,二甲双胍抑制PTC细胞增殖,随浓度及处理时间的增加,抑制效应加大,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍诱导PTC细胞凋亡,随浓度及处理时间的增加,其中晚期凋亡率明显增加,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2mRNA的表达水平,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。二甲双胍可抑制PTC细胞中GLUT1和PKM2蛋白的表达水平,呈时间依赖性。结论:二甲双胍抑制人PTC细胞增殖并诱导凋亡,其机制之一可能是抑制葡萄糖转运关键蛋白和糖酵解关键酶的表达,负面影响癌细胞生长的能量供应。 展开更多
关键词 二甲双胍 人乳头状甲状腺癌细胞 GLUT1 pkm2
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猪PKM2基因的序列分析与组织表达及亚细胞定位 被引量:3
10
作者 赵为民 涂枫 +5 位作者 方晓敏 王学敏 付言峰 李碧侠 周李生 任守文 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期68-77,共10页
运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个... 运用RT–PCR技术克隆猪PKM2基因的编码区序列,对该序列进行生物信息学分析,研究PKM2基因的组织表达及亚细胞定位。结果显示:猪PKM2基因CDS全长1 596 bp,编码531个氨基酸;预测其蛋白相对分子质量为5.79×104,等电点为7.96,含有多个磷酸化位点,为稳定蛋白;PKM2蛋白含有丙酮酸激酶家族的barreldomain和alpha/beta domain 2个结构域,其蛋白二级结构中α–螺旋和无规则卷曲占主要类型;猪PKM2蛋白序列在物种间非常保守,系统进化树分析表明,该蛋白与兔的亲缘关系最近;组织表达显示,猪PKM2基因在肾、小肠中相对高表达,而在肝脏与肌肉中相对低表达;亚细胞定位显示,PKM2蛋白在猪3D4/21和PK15细胞中表达于细胞质,而不表达于细胞核。 展开更多
关键词 pkm2基因 序列分析 组织表达 亚细胞定位
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ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达及临床意义 被引量:5
11
作者 曾伟 高鹏 +5 位作者 朱小三 戴益琛 陈章兴 谢军培 詹晓娟 张如 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第5期570-572,共3页
目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管... 目的探讨ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌中的表达特点与预后的关系。方法采用免疫组化方法检测17例胆管癌及其癌旁正常胆管组织中ECHS1和PKM2蛋白的表达情况,并分析两种蛋白表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。结果ECHS1和PKM2蛋白在胆管癌组织中的阳性率分别为58.8%和64.7%,高于癌旁组织中的阳性率17.9%和21.4%,差异有统计学意义(P<0.05);ECHS1和PKM2蛋白与胆管癌患者性别、年龄及肿瘤直径无相关性,而与胆管癌分化程度、TNM分期及生存时间有相关性。结论 ECHS1和PKM2蛋白表达水平与胆管癌发生、发展及转移关系密切。 展开更多
关键词 胆管癌 ECHS1 pkm2 预后
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前扣带皮层PKMζ在慢性痛伴发痛情绪中的作用研究进展 被引量:4
12
作者 温存 邵晓梅 +2 位作者 方剑乔 房军帆 杜俊英 《中国疼痛医学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期366-370,共5页
慢性疼痛是临床上常见的症状之一,通常伴随不愉快的感觉和心理体验。它既是一种生理反应,也是一种主观的自觉症状。慢性痛的发生发展通常会加重痛情绪,痛情绪则又会进一步加重疼痛,逐步形成疼痛与情绪的恶性循环。多项研究证明前扣带皮... 慢性疼痛是临床上常见的症状之一,通常伴随不愉快的感觉和心理体验。它既是一种生理反应,也是一种主观的自觉症状。慢性痛的发生发展通常会加重痛情绪,痛情绪则又会进一步加重疼痛,逐步形成疼痛与情绪的恶性循环。多项研究证明前扣带皮层(anterior cingulated cortex,ACC)与慢性痛痛情绪有着密切的联系。ACC内蛋白激酶M(protein kinase M zeta,PKMζ)及其相关信号分子通路在慢性痛痛情绪的形成和维持中扮演着重要的角色。本综述简要回顾了该领域的主要研究进展,为治疗慢性痛痛情绪提供了新的治疗思路。 展开更多
关键词 慢性痛 痛情绪 pkmζ 前扣带皮层
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丙酮酸激酶M2型(PKM2)入核机制和核内作用的研究进展 被引量:4
13
作者 詹成 时雨 +2 位作者 马军 王琳 王群 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期133-137,共5页
传统观点认为丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)通过催化肿瘤细胞糖代谢来促进肿瘤细胞生长。近年来研究发现除了酶催化功能外,PKM2还能通过多种途径进入细胞核,在核内作为蛋白激酶广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。本文将就... 传统观点认为丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase M2,PKM2)通过催化肿瘤细胞糖代谢来促进肿瘤细胞生长。近年来研究发现除了酶催化功能外,PKM2还能通过多种途径进入细胞核,在核内作为蛋白激酶广泛参与转录调控、蛋白修饰等过程。本文将就这方面的研究成果作一综述。 展开更多
关键词 丙酮酸激酶M2型(pkm2) 细胞核 糖酵解
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PKM2 siRNA对人甲状腺乳头状癌细胞生长和增殖的影响 被引量:6
14
作者 刘睿 王晓楠 +1 位作者 张薇 关海霞 《现代肿瘤医学》 CAS 2014年第2期278-282,共5页
目的:研究PKM2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达特性及其在PTC中的作用。方法:用抗PKM2的小干扰RNA转染PTC细胞。Western blot和RT-PCR技术分析细胞中PKM2的表达。MTT法和细胞平板克隆形成实验评估细胞的生长和增殖。采用乳酸、ATP和葡萄... 目的:研究PKM2在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达特性及其在PTC中的作用。方法:用抗PKM2的小干扰RNA转染PTC细胞。Western blot和RT-PCR技术分析细胞中PKM2的表达。MTT法和细胞平板克隆形成实验评估细胞的生长和增殖。采用乳酸、ATP和葡萄糖试剂盒分别测定细胞代谢产生的乳酸、ATP及消耗的葡萄糖。结果:PKM2在PTC中异常高表达。在PTC细胞系中应用特异性抗PKM2 siRNA可延缓细胞生长并降低其克隆形成能力。PKM2 siRNA可降低PTC细胞乳酸、ATP的产生,减少葡萄糖的消耗。结论:PKM2高表达可通过激活糖酵解的方式使PTC细胞具有选择性生长优势。PKM2异常高表达可能作为新的生物标记物,并成为PTC的潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 pkm2 RNA干扰 糖酵解
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基于Pkm2/Nrf2通路探讨补肺益肾方改善线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病的机制 被引量:7
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作者 刘杨 张蓝熙 +5 位作者 卢瑞龙 邵雪洁 燕苗苗 崔莉莉 张彩丽 田燕歌 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1973-1981,共9页
目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合... 目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合肺炎克雷伯杆菌反复感染的方法制备COPD大鼠模型。9~16周,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃(0.5 mL/100 g),BYF组和NAC组分别给予补肺益肾方灌胃(11.61 g·kg^(-1)·d^(-1))和乙酰半胱氨酸溶液灌胃(54 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每日1次,16周结束后取材。检测肺功能、肺病理、线粒体超微结构、氧化应激相关指标、线粒体功能相关指标、Pkm2/Nrf2通路相关指标。结果:COPD大鼠肺功能降低(VT、PEF、EF50、FVC和FEV0.3降低,FRC升高),肺组织病理损伤(MLI、BWt升高,MAN降低),肺组织氧化损伤(T-SOD、T-AOC、GSH-Px、SOD2降低,MDA升高),线粒体功能受损(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性下降),Pkm2/Nrf2信号通路表达降低(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达下降)(P<0.05,P<0.01)。BYF和NAC均可改善COPD大鼠肺功能(VT、PEF、EF50、FVC、FEV0.3升高,FRC降低),减轻肺组织病理损伤(MAN升高,MLI、BWt降低),提高肺组织抗氧化水平(T-SOD、GSH-Px、SOD2升高),保护线粒体功能(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、线粒体呼吸链复合物Ⅲ升高),激活Pkm2/Nrf2信号通路(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达升高)(P<0.05,P<0.01);BYF组T-AOC显著升高,MDA显著降低(P<0.01,P<0.05);BYF在升高MAN、GSH-Px、T-AOC、Pkm2 mRNA表达及降低MLI的作用方面优于NAC组(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方和乙酰半胱氨酸均可减轻COPD大鼠肺组织氧化应激,改善线粒体功能,提高抗氧化能力,其机制可能与调控Pkm2/Nrf2信号通路有关,补肺益肾方在改善肺泡结构及提高抗氧化酶活性方面优于乙酰半胱氨酸。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 补肺益肾方 氧化应激 线粒体损伤 pkm2/Nrf2信号通路
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PKM2基因在非小细胞肺癌中表达及其与放疗敏感性的关系 被引量:3
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作者 李宏敏 安宁 +2 位作者 于瑞莲 何阳科 邓红彬 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期421-425,共5页
目的:研究PKM2在非小细胞肺癌组织中的表达及其与放疗敏感性的关系。方法:选取2011年5月至2013年10月四川省人民医院非小细胞肺癌120例患者,术后进行2个月的放射治疗,按照疗效将患者分为4组。RT-PCR检测患者放疗前手术切除的肿瘤组织和... 目的:研究PKM2在非小细胞肺癌组织中的表达及其与放疗敏感性的关系。方法:选取2011年5月至2013年10月四川省人民医院非小细胞肺癌120例患者,术后进行2个月的放射治疗,按照疗效将患者分为4组。RT-PCR检测患者放疗前手术切除的肿瘤组织和癌旁组织中PKM2 m RNA表达水平。Western blot和免疫组织化学检测肿瘤组织和癌旁组织中PKM2蛋白表达。RT-PCR和Western blot方法检测不同疗效组PKM2表达水平。结果:非小细胞肺癌放疗2个月后,治疗有效率为49.2%。PKM2在非小细胞肺癌癌组织中表达显著高于相应的癌旁组织。PKM2表达水平与患者放疗疗效呈负相关。结论:PKM2在非小细胞肺癌中表达高于癌旁组织,PKM2低表达患者对放疗敏感性高。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 pkm2 放疗敏感性
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miR-133b靶向PKM2基因对肺癌A549干细胞增殖及药物敏感性的影响 被引量:8
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作者 米永华 何苗 刘北忠 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期376-381,共6页
背景与目的已有研究表明miR-133b可抑制肺癌细胞生长,miR-133b表达水平在肺癌组织及患者血清中显著降低,miR-133b通过靶向丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)基因提高鳞癌细胞的放疗敏感性,但其机制尚未明了。本研... 背景与目的已有研究表明miR-133b可抑制肺癌细胞生长,miR-133b表达水平在肺癌组织及患者血清中显著降低,miR-133b通过靶向丙酮酸激酶M2型(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)基因提高鳞癌细胞的放疗敏感性,但其机制尚未明了。本研究通过提取非小细胞肺癌细胞株A549的CD133^+/CD34^+干细胞,研究miR-133b对其增殖及顺铂类药物(cisplatin,DDP)敏感性的影响,探讨miR-133b与PKM2基因的关系,以及它们在肺癌干细胞中的作用。方法使用miRBase和miRNAMap数据库进行miR-133b与PKM2基因的序列比对。应用免疫磁珠分选法从A549细胞中分选出CD133^+/CD34^+肺癌干细胞,流式细胞仪检测纯度。转染miR-133b进入CD133^+/CD34^+细胞,qRT-PCR检测验证miR-133b表达情况,CCK8法检测细胞增殖情况;15μg/mL DDP处理转染miR-133b细胞,检测0 h、12 h、24 h、72 h的细胞凋亡情况;采用Western blot检测PKM2蛋白水平的表达。结果PKM2基因可能为miR-133b的靶基因;流式结果显示CD133^+/CD34^+细胞的纯度为(92.15+4.27)%。qRT-PCR结果显示,与对照组相比,过表达miR-133b后,miR-133b明显上调,miR-133b抑制表达后,miR-133b明显下调(P<0.05)。细胞增殖实验及Western blot结果显示,与对照组相比,miR-133b mimics组细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),PKM2蛋白水平明显降低(P<0.05);而抑制miR-133b表达则明显增加细胞的增殖能力及PKM2蛋白水平(P<0.05)。DDP处理12 h后miR-133b mimics组细胞的凋亡持续明显高于对照组(P<0.05)。miR-133b mimics+DDP组PKM2蛋白的表达明显低于对照组及miR-133b inhibitor组(P<0.05)。结论过表达miR-133b能够通过下调PKM2而抑制肺癌干细胞的生长和增殖,并且可以增强肺癌干细胞对DDP的敏感性。 展开更多
关键词 MiR-133b A549 pkm2 DDP
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PKM2在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系 被引量:5
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作者 刘妍芳 张谦 +2 位作者 韩振魁 斯坎德尔 罗苏明 《海南医学》 CAS 2014年第2期161-163,共3页
目的探讨PKM2在人胃腺癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测67例胃腺癌组织、53例癌旁组织中PKM2蛋白的表达及其与临床病例参数之间的关系。结果 PKM2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达(67.2%,45/67)明显... 目的探讨PKM2在人胃腺癌组织中的表达及其与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测67例胃腺癌组织、53例癌旁组织中PKM2蛋白的表达及其与临床病例参数之间的关系。结果 PKM2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达(67.2%,45/67)明显高于癌旁组织中PKM2蛋白的表达(28.3%,15/53),PKM2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达与患者的性别、年龄、分化程度均无关(P>0.05),而与患者的淋巴结(χ2=12.103,P=0.001)是否转移与肿瘤侵润深度(χ2=4.030,P=0.045)密切相关。结论 PKM2蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达明显高于癌旁组织,且其阳性表达与患者淋巴结与否、肿瘤侵犯深度密切相关,有望成为胃腺癌诊断与治疗的靶向标志物。 展开更多
关键词 胃腺癌 pkm2 免疫组织化学
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异丙酚下调PKM2抑制人肺腺癌细胞系增殖、迁移和侵袭 被引量:3
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作者 胡智慧 李建芹 +2 位作者 韩鲁军 张静 张红欣 《基础医学与临床》 CSCD 2020年第3期334-339,共6页
目的探讨异丙酚对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 MTT法检测异丙酚(60、100、120μmol/L)处理的人肺腺癌细胞系A549、Anip973的抑制率或增殖;将si-NC组(转染si-NC)、si-PKM2(丙酮酸激酶M2)组(转染si-PKM2)、pc DNA3. 1组(转染p... 目的探讨异丙酚对肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法 MTT法检测异丙酚(60、100、120μmol/L)处理的人肺腺癌细胞系A549、Anip973的抑制率或增殖;将si-NC组(转染si-NC)、si-PKM2(丙酮酸激酶M2)组(转染si-PKM2)、pc DNA3. 1组(转染pc DNA3. 1)、pc DNA3. 1-PKM2组(转染pc DNA3. 1-PKM2)用脂质体法转染至Anip973细胞,部分组用120μmol/L异丙酚处理;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;RT-qPCR检测细胞中PKM2的mRNA的表达;Western blot检测细胞中PKM2、E-cadherin、MMP-2的蛋白表达。结果异丙酚(60、100和120μmol/L)呈浓度依赖性抑制人肺腺癌细胞A549、Anip973增殖(P <0. 05),Anip973细胞对异丙酚的敏感性较强,最适浓度为120μmol/L;异丙酚可抑制Anip973细胞迁移和侵袭,并下调PKM2、MMP-2蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达;敲减PKM2具有与异丙酚相同的抑制Anip973细胞的增殖、迁移和侵袭作用,下调MMP-2蛋白表达,上调E-cadherin蛋白表达的作用;过表达PKM2可减轻异丙酚对Anip973细胞增殖、迁移和侵袭及E-cadherin、MMP-2蛋白表达。结论异丙酚可抑制肺腺癌细胞系的增殖、迁移和侵袭,其机制与下调PKM2表达相关。 展开更多
关键词 异丙酚 pkm2 肺腺癌 增殖 迁移 侵袭
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猪PKM2基因在肺炎支原体感染3D4/21细胞后的互作蛋白质鉴定与分析 被引量:2
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作者 赵为民 涂枫 +6 位作者 王丽 任守文 付言峰 李碧侠 徐小波 陈哲 方晓敏 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第6期1381-1389,共9页
通过构建含有HA标签的PKM2过表达质粒转染3D4/21细胞,利用免疫共沉淀(Co-IP)与液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术分析与鉴定猪PKM2基因在肺炎支原体感染猪肺泡巨噬细胞3D4/21后的互作蛋白质,并对这些互作蛋白质进行GO与KEGG通路分析。结... 通过构建含有HA标签的PKM2过表达质粒转染3D4/21细胞,利用免疫共沉淀(Co-IP)与液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)技术分析与鉴定猪PKM2基因在肺炎支原体感染猪肺泡巨噬细胞3D4/21后的互作蛋白质,并对这些互作蛋白质进行GO与KEGG通路分析。结果显示肺炎支原体感染3D4/21细胞后,PKM2在mRNA水平和蛋白质水平上表达上调,其表达水平呈现剂量与时间依懒性。免疫共沉淀反应结果显示IP与IgG组共鉴定到72个蛋白质,这2组鉴定到的蛋白质数分别为60和19,其中7个蛋白质在2组中同时鉴定到。GO分析结果表明IP组的互作蛋白质主要参与了NAD代谢过程、NADH代谢过程、肌原纤维组装、NADH再生和葡萄糖代谢丙酮酸等生物过程,其中大多数与能量代谢有关。KEGG pathway分析结果表明互作蛋白质参与了致病性大肠杆菌感染、军团杆菌病、糖酵解/糖异生、丙酮酸代谢和癌症中的中枢碳代谢等通路,这些通路与细菌感染和能量代谢有关。 展开更多
关键词 pkm2基因 肺炎支原体 互作蛋白质 免疫共沉淀
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