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火针通过TRPV1/PKC-δ/p-Akt信号通路调节带状疱疹后神经痛大鼠痛觉敏化的机制研究 被引量:1
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作者 何伟 官菊梅 唐旭 《湖南中医药大学学报》 2025年第7期1271-1279,共9页
目的基于瞬时受体电位香草酸受体1(TRPV1)/蛋白激酶C-δ(PKC-δ)/磷酸化Akt蛋白(p-Akt)信号通路探讨火针疗法对带状疱疹后神经痛(PHN)大鼠的潜在作用机制。方法采用香草素受体激动剂(RTX)腹腔注射法构建PHN大鼠模型。将成功建模的24只... 目的基于瞬时受体电位香草酸受体1(TRPV1)/蛋白激酶C-δ(PKC-δ)/磷酸化Akt蛋白(p-Akt)信号通路探讨火针疗法对带状疱疹后神经痛(PHN)大鼠的潜在作用机制。方法采用香草素受体激动剂(RTX)腹腔注射法构建PHN大鼠模型。将成功建模的24只大鼠随机分为3组:模型组(RTX)、阳性药物组(RTX+加巴喷丁)、火针组(RTX+火针疗法),每组8只。再随机选取8只健康大鼠为对照组。采用机械缩足反射阈值(PWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)评估火针疗法对PHA大鼠的痛敏程度;采用HE染色评估大鼠脊髓背角组织病理变化;采用TUNEL染色检测脊髓背角GABA能神经元细胞凋亡情况;采用ELISA检测大鼠脊髓背角组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;采用Western blot检测各组大鼠脊髓背角组织中关键蛋白TRPV1、PKC-δ、p-Akt表达。结果与对照组相比,模型组PWT值降低(P<0.05),TWL值升高(P<0.05),GABA细胞凋亡数量增多(P<0.05),TNF-α、IL-1β含量升高(P<0.05),TRPV1、PKC-δ、p-Akt表达升高(P<0.05);与模型组相比,阳性药物组和火针组PWT值升高(P<0.05),TWL值降低(P<0.05),GABA细胞凋亡数量减少(P<0.05),TNF-α、IL-1β含量降低(P<0.05),TRPV1、PKC-δ、p-Akt表达降低(P<0.05);阳性药物组与火针组相比,PWT值、TWL值、GABA细胞凋亡数量以及TNF-α、IL-1β、TRPV1、PKC-δ、p-Akt水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论火针疗法通过抑制TRPV1/PKC-δ/p-Akt信号通路,减轻PHN大鼠炎症反应,进而缓解PHN痛觉敏化。 展开更多
关键词 带状疱疹后神经痛 香草素受体激动剂 火针 TRPV1/pkc-δ/p-Akt信号通路 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β 痛觉敏化
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抑肝扶脾汤调控PKA/PKC-CREB通路修复肠道屏障降低IBS敏感性的机制研究
2
作者 陈宇 施佳君 +6 位作者 富丹婷 杨钦钦 傅睿 朱佳杰 朱明锦 刘忻颖 陈明显 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第4期512-521,共10页
目的研究抑肝扶脾汤(Yigan Fupi decoction,YGFP)对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的改善作用,并从PKA/PKC-CREB通路深入研究其修复肠道屏障降低IBS敏感性的作用机制。方法将母婴分离后的大鼠随机分为模型对照(M)组、抑肝... 目的研究抑肝扶脾汤(Yigan Fupi decoction,YGFP)对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)的改善作用,并从PKA/PKC-CREB通路深入研究其修复肠道屏障降低IBS敏感性的作用机制。方法将母婴分离后的大鼠随机分为模型对照(M)组、抑肝扶脾汤(YGFP)组和未母婴分离的大鼠作为正常对照(N)组,YGFP组予YGFP连续4周。腹壁撤退反射(abdominal withdraw reflux,AWR)评估肠道敏感性,LC-MS/MS法检测胆汁酸代谢物浓度,ELISA法检测IL-6和CXCL1的血清水平,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理学变化,Western Blot和免疫组化检测PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R、ZO-1、Claudin 1的蛋白相对表达。结果与N组比,M组的内脏疼痛阈值降低,总胆汁酸代谢物、IL-6和CXCL1含量明显升高,PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R蛋白相对表达显著升高,ZO-1、Claudin 1的蛋白相对表达明显下降。与M组相比,抑肝扶脾汤可显著增加IBS大鼠的内脏疼痛阈值,显著降低总胆汁酸代谢物、IL-6和CXCL1含量,使PKA、PKC、CREB、5HT2AR、5-HT7R蛋白相对表达明显降低,ZO-1、Claudin 1的蛋白相对表达升高。结论抑肝扶脾汤可有效改善IBS,其机制可能是通过调控PKA/PKC-CREB通路修复肠道屏障降低其敏感性实现的。 展开更多
关键词 抑肝扶脾汤 肠道屏障 IBS敏感性 PKA/PKC CREB
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PKC-α和PKC-δ在不同发育阶段小鼠睾丸中的差异性表达 被引量:5
3
作者 冯晨 付伟 +3 位作者 赵咏梅 陈菲 宗志宏 于秉治 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期780-782,共3页
Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse tes... Protein kinase C (PKC) is a family of serine/threonine protein kinases, and its multiple isoforms are expressed in various mammalian tissues. The expressions of PKC α and PKC δ at protein and mRNA level in mouse testis were identified by Western blotting and RT\|PCR. The expression of both PKC isoenzymes in the developing mouse testis was also examined. In testes of mouse at various developmental stages, both the protein and the mRNA of PKC\|α were uniformity; but the PKC\|δ expression occurred in the testes of 3\|week old, perhaps even relatively late in spermatid development. The results suggest that each isoenzyme may have different roles in processing and modulating physiological cellular responses of spermatogenesis. 展开更多
关键词 pkc-Α pkc-δ 发育阶段 小鼠睾丸 差异性表达
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β-细辛醚与远志皂苷组分配伍对阿尔茨海默病模型小鼠PKC-Nrf2信号通路的影响及机制研究
4
作者 王明希 李玥 +2 位作者 张潍鹏 郭科东 董海影 《齐齐哈尔医学院学报》 2025年第11期1009-1016,共8页
目的基于Nrf2信号通路,探讨β-细辛醚与远志皂苷组分配伍对APP/PS1双转基因AD模型小鼠的神经保护作用及分子机制,为中药组分配伍治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)提供科学依据。方法采用15只6月龄C57BL/6小鼠和75只APP/PS... 目的基于Nrf2信号通路,探讨β-细辛醚与远志皂苷组分配伍对APP/PS1双转基因AD模型小鼠的神经保护作用及分子机制,为中药组分配伍治疗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)提供科学依据。方法采用15只6月龄C57BL/6小鼠和75只APP/PS1双转基因小鼠,分为对照组、模型组、β-细辛醚组、远志皂苷组、联合用药组及全方对照组(每组各15只)并连续灌胃28 d。Morris水迷宫实验评估小鼠认知功能;HE染色观察海马神经元变化情况;Western blot分析PKC-Nrf2通路蛋白及磷酸化水平;qPCR检测PKC-Nrf2下游基因表达情况。结果联合用药组Morris水迷宫逃避潜伏期显著缩短[(32.57±4.25)s vs模型组(58.74±6.53)s,P<0.001],目标象限停留时间提升(34.67±4.14)%,效果优于单药组(P<0.05)。HE染色结果显示,与对照组比较,模型组小鼠海马区神经元数量明显减少。与模型组比较,联合用药组和单药组的小鼠海马区神经元结构异常有所改善,且细胞分布均匀,排列整齐,神经元数目和锥体细胞数量有所增加,小胶质细胞增生减少。Western blot与qPCR实验证实联合用药组可上调PKC、Nrf2、p-Nrf2及GCLc的表达(均P<0.01)且联合用药组Nrf2磷酸化水平显著升高。结论β-细辛醚与远志皂苷组分配伍激活PKC-Nrf2信号通路,促进Nrf2-Keap1复合体解离及Nrf2核转位,进而上调下游抗氧化酶(SOD、GCLc)表达并抑制氧化损伤,最终改善AD小鼠空间学习记忆及认知灵活性。其配伍策略在抗氧化通路激活及认知功能恢复方面表现出优于单一成分与传统复方的协同效应,为AD的精准治疗提供了新的组分中药研究思路。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 pkc-Nrf2通路 组分配伍 Β-细辛醚 远志皂苷
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三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡对PKC-ε的影响 被引量:7
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作者 范玉华 杭鹏洲 杜智敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期782-786,共5页
目的探讨三氧化二砷诱导新生乳鼠心室肌细胞(NRVCs)凋亡过程中对PKC-ε的影响。方法 NRVCs随机分为6组:正常组(Ctrl)、三氧化二砷高、中、低剂量组(10、5、2μmol.L-1)、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)+三氧化二砷(5μmol.L-1)组、PKC-ε... 目的探讨三氧化二砷诱导新生乳鼠心室肌细胞(NRVCs)凋亡过程中对PKC-ε的影响。方法 NRVCs随机分为6组:正常组(Ctrl)、三氧化二砷高、中、低剂量组(10、5、2μmol.L-1)、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)+三氧化二砷(5μmol.L-1)组、PKC-ε抑制剂(100 nmol.L-1)组。采用MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色和TUNEL法检测细胞凋亡。应用Western blot技术检测PKC-ε蛋白表达水平。结果三氧化二砷(5、10μmol.L-1)孵育24 h剂量依赖性地降低NRVCs活力,诱导NRVCs凋亡。此外,三氧化二砷(5μmol.L-1)增加PKC-ε蛋白的表达。而抑制PKC-ε能够进一步促进三氧化二砷降低NRVCs活力,并加重NRVCs凋亡。结论三氧化二砷上调PKC-ε蛋白水平,而抑制PKC-ε促进三氧化二砷加重心肌细胞凋亡。本研究表明三氧化二砷能够引起PKC-ε表达异常改变,提示PKC-ε可能参与三氧化二砷诱导心肌细胞凋亡的病理过程。 展开更多
关键词 三氧化二砷 pkc-ε 凋亡 pkc-ε抑制肽 心室肌细胞 Hoechst 33342 TUNEL
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Rottlerin在哮喘气道重塑模型中对PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路的影响 被引量:13
6
作者 李良昌 金光玉 +3 位作者 郑明昱 秦向征 李光昭 延光海 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期588-592,共5页
目的探讨PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路在喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法 40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只,分别为正常对照组;哮喘模型组;PKCδ抑制剂Rottlerin治疗组;mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)治疗组。... 目的探讨PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路在喘小鼠气道重塑中的作用机制。方法 40只雄性清洁级Balb/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只,分别为正常对照组;哮喘模型组;PKCδ抑制剂Rottlerin治疗组;mTOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)治疗组。在末次激发24 h后小鼠肺组织行HE染色、PAS染色。用图像分析软件测定支气管壁厚度(WAt/Pbm)、支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm)及杯状细胞百分比。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-5、IL-13含量以及用Western blot检测肺组织PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达。结果哮喘模型组小鼠与正常对照组小鼠相比较BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平增高;肺组织WAt/Pbm、WAm/Pbm、杯状细胞百分比和PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达水平显著增高(P<0.05)。Rottlerin和Rapamycin治疗组与哮喘模型组相比较BALF中IL-4、IL-5、IL-13水平降低;肺组织WAt/Pbm、WAm/Pbm、杯状细胞百分比和PKC-δ、mTOR、NF-κB蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。而Rottlerin治疗组和Rapamycin治疗组之间上述各指标无显著性差异(P>0.05)。结论 Rottlerin抑制哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能部分是通过抑制PKC-δ/mTOR/NF-κB信号通路而实现的。 展开更多
关键词 气道重塑 pkc-δ MTOR NF-κB
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大鼠视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达 被引量:4
7
作者 蔡艳 张恩东 +4 位作者 王晓晟 伍校琼 王慧 杨静 罗学港 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期251-255,共5页
为了探讨视神经切断后视网膜内部是否存在突触可塑性改变,本实验采用大鼠视神经切断模型,通过免疫组织化学方法检测视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达变化。结果显示:正常视网膜中,PKC-α和recoverin阳性产物主要见于... 为了探讨视神经切断后视网膜内部是否存在突触可塑性改变,本实验采用大鼠视神经切断模型,通过免疫组织化学方法检测视神经切断后视网膜双极细胞PKC-α和recoverin的表达变化。结果显示:正常视网膜中,PKC-α和recoverin阳性产物主要见于视网膜内核层、内网层及节细胞层,另外外核层也可见少量recoverin阳性细胞。视神经切断后3d,大鼠视网膜内网层高倍镜下可见PKC-α和recoverin免疫阳性终末的数量开始增加,14d时增至最高,21d、28d呈现逐渐减少的趋势。本研究结果提示视神经切断后视网膜双极细胞与节细胞之间的突触可能存在早期增生,后期溃变的可塑性变化。 展开更多
关键词 视神经切断 pkc-Α RECOVERIN 视网膜 大鼠
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PKC-βⅡ、NF-κBp50在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其意义 被引量:7
8
作者 孟伟 石雨薇 +3 位作者 顾霞 王富强 叶子茵 谢心苗 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期56-59,共4页
目的研究蛋白激酶C-βⅡ(Protein kinase C-βⅡ,PKC-βⅡ)、核因子κBp50(Nuclear factor of kappa Bp50,NF-κBp50)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况与其意义。方法采用免疫组化方法检测68例D... 目的研究蛋白激酶C-βⅡ(Protein kinase C-βⅡ,PKC-βⅡ)、核因子κBp50(Nuclear factor of kappa Bp50,NF-κBp50)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(Diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中的表达情况与其意义。方法采用免疫组化方法检测68例DLBCL,7例淋巴结反应性增生中PKC-βⅡ、NF-κBp50的表达。结果 PKC-βⅡ、NF-κBp50在68例DLBCL的阳性表达率分别为77.94%(53/68)和70.59%(48/68)。PKC-βⅡ在DLBCL亚型中表达的差异有统计学意义(P<0.001),NF-κBp50在DL-BCL亚型中表达的差异具有统计学意义(P<0.05),PKC-βⅡ、NF-κBp50在DLBCL中non-GCB(非生发中心型)中表达高于GCB(生发中心型)。它们在性别、民族、年龄、部位方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。PKC-βⅡ与NF-κBp50在DLBCL中的表达呈正相关(rs=0.429,P<0.001)。结论 PKC-βⅡ和NF-κBp50在DLBCL不同亚型之间表达的差异,可能有助于DLBCL亚型的诊断和预后的判断。PKC-βⅡ对NF-κBp50表达有正向调节作用,在DLBCL的发生和发展中起着重要的作用。 展开更多
关键词 弥漫性大B细胞淋巴瘤 pkc-βⅡ NF-ΚBP50 免疫组织化学
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肺癌组织中PKC-α蛋白的表达与肺癌临床病理特征的关系 被引量:8
9
作者 宋兴福 黄骥 王燕燕 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期490-492,共3页
目的检测肺癌组织中PKC-α(protein kinase C-alpha)蛋白的表达,探讨PKC-α蛋白与肺癌的组织类型、分化程度肺癌临床病期和淋巴结转移的关系.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)和荧光染色、激光扫描共聚焦技术,检... 目的检测肺癌组织中PKC-α(protein kinase C-alpha)蛋白的表达,探讨PKC-α蛋白与肺癌的组织类型、分化程度肺癌临床病期和淋巴结转移的关系.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶法(SP法)和荧光染色、激光扫描共聚焦技术,检测60例肺癌组织(肺癌组)、17例肺良性病变的正常肺组织(对照组)中PKC-α蛋白表达.结果肺癌组和对照组PKC-α蛋白表达的阳性率分别为76.7%(46/60)和17.6%(3/17),两组间差异具有高度显著性(P<0.01).PKC-α蛋白表达在肺癌不同病理类型即鳞癌和腺癌中,差异无显著性(P>0.05).在高分化、中分化和低分化肺癌之间比较,PKC-α蛋白表达阳性率差异亦无显著性(P>0.05).PKC-α蛋白在IA+IB、IIA+IIB和ⅢA+ⅢB期阳性率分别为50.0%、82.6%和90.5%,阳性率随TNM分期而上升,差异有显著性(P<0.05).PKC-α阳性率在N0和N1~3肺癌分别为42.1%、92.7%,两者差异有高度显著性(P<0.01).41例伴有淋巴结转移的病例中,PKC-α蛋白表达在肺原发灶和淋巴结转移灶之间比较,差异无显著性(P>0.05).结论肺癌组织中存在PKC-α蛋白的高表达;PKC-α蛋白的高表达与肺癌组织类型和分化程度无关,而与肺癌病期、淋巴结转移有密切关系. 展开更多
关键词 肺肿瘤 pkc-Α 免疫组化 激光共聚焦显微镜
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PKC-412卤代衍生物的合成及细胞毒活性研究 被引量:4
10
作者 王立平 庄以彬 +1 位作者 孙坤来 朱伟明 《有机化学》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1603-1608,共6页
从海洋微生物发酵产物十字孢碱出发,合成12个新的PKC-412卤代衍生物1~12,其结构经1H NMR,13C NMR,IR和HRESIMS确定.用噻唑蓝(MTT)法测定了12个卤代衍生物对肿瘤细胞株HL-60,A549和Hela的细胞毒活性.结果表明,化合物4和10具有良好的细胞... 从海洋微生物发酵产物十字孢碱出发,合成12个新的PKC-412卤代衍生物1~12,其结构经1H NMR,13C NMR,IR和HRESIMS确定.用噻唑蓝(MTT)法测定了12个卤代衍生物对肿瘤细胞株HL-60,A549和Hela的细胞毒活性.结果表明,化合物4和10具有良好的细胞毒活性,对HL-60和A549两种肿瘤细胞株的IC50值在0.5~0.95μmol·L-1,与PKC-412活性相当,且苯甲酰胺片段的苯环上直接卤代提高了化合物对A549细胞的选择性,值得深入研究. 展开更多
关键词 十字孢碱 pkc-412 卤代衍生物 肿瘤细胞毒活性
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P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义 被引量:6
11
作者 金晶 吴绪峰 陈惠祯 《现代肿瘤医学》 CAS 2006年第3期325-329,共5页
目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵... 目的探讨P-gp、PKC-α和MRP在上皮性卵巢癌中的表达及其临床意义。方法运用免疫组织化学技术(S-P法)检测P-gp、PKC-α和MRP在50例上皮性卵巢癌、20例卵巢良性肿瘤和10例正常卵巢组织中的表达。结果P-gp、PKC-α和MRP三个指标在上皮性卵巢癌组织中阳性率分别为48.0%、56.0%、60.0%,显著高于正常卵巢和良性肿瘤(P<0.05);P-gp和PKC-α表达存在密切的相关关系(P<0.01);卵巢癌P-gp、PKC-α和MRP表达阳性者的化疗反应率分别为25.0%、25.0%、33.3%,低于阴性表达组(P<0.05);复发患者P-gp和PKC-α阳性表达率明显高于未复发的患者(P<0.05),MRP表达与复发无关(P>0.05)。单因素分析表明,P-gp、PKC-α和MRP与卵巢癌患者的生存期和不良预后有关。多因素分析表明,P-gp及三个指标共同表达与患者的生存率有关。结论卵巢恶性肿瘤中P-gp、PKC-α和MRP阳性表达与临床化疗耐药有关,并影响患者的生存率。联合检测三个指标对临床化疗疗效判断和患者预后估计具有积极的指导作用。 展开更多
关键词 P—gp pkc-Α MRP 卵巢肿瘤 免疫组织化学 预后
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植物表达载体pKC-3的构建及大分子DNA连接策略 被引量:7
12
作者 范钦 邱国华 +1 位作者 许新萍 李宝健 《生物技术》 CAS CSCD 2000年第4期1-3,共3页
以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌... 以根癌农杆菌双元载体pCAMBIA130 0为基础 ,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂 -Ⅱ基因 (PⅡ )、苏云金杆菌毒蛋白基因 (B .tcryI(A) )及雪花莲外源凝集素基因 (GNA)的完整表达片段 ,构建了抗多种稻田害虫的表达载体pKC - 3,将其导入根癌农杆菌LBA4 4 0 4 ,可进一步用于水稻抗虫基因转化的研究。载体构建过程采用多次的大分子DNA片段连接 ,总结出了一套适合大片段连接转化的可行策略。 展开更多
关键词 植物表达载体 pkc-3 构建 大分子D2A连接
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PKC-α、PKA-Ⅰ反义核酸对鼻咽癌CNE-2Z细胞生长增殖的影响 被引量:4
13
作者 祝葆华 黄培春 +1 位作者 鲍波 陈锦 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期494-498,共5页
目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPK... 目的 :探讨PKC -α和PKA -Ⅰ反义核酸 (asODN)对鼻咽癌CNE - 2Z细胞生长增殖的影响。方法 :分别用脂质体 (lipofectin ,LP)介导asODN转染鼻咽癌CNE - 2Z细胞。实验组 :① 0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKC -αasODN ;②0 0 1- 1 0 0 μmol/LPKA -ⅠasODN ;③ 0 5 0 μmol/LPKC -αasODN +0 5 0 μmol/LPKA -ⅠasODN。对照组 :相应浓度的随机序列 (rODN)。用免疫组化法检测CNE - 2Z细胞PKC -α和PKA -Ⅰ的表达 ,MTT法检测其生长指数 (growthin dex ,GI) ,软琼脂克隆形成率检测其体外增殖能力。结果 :PKC -αasODN或 /和PKA -ⅠasODN均可阻断其相应PKC-α或PKA -Ⅰ的表达 (P <0 0 5 )。PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN均能显著降低CNE - 2Z细胞GI和软琼脂克隆形成率 (P <0 0 5 ) ,且具有量效依赖关系。PKC -αasODN +PKA -ⅠasODN共同作用可使其GI和软琼脂克隆形成率非常显著降低 (P <0 0 1) ,无明显量效依赖关系 ,两者对CNE - 2Z生长抑制作用强于PKC -αasODN或PKA -Ⅰa sODN(P <0 0 5 ) ,对其软琼脂克隆形成率的抑制作用与PKC -αasODN或PKA -ⅠasODN无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PKC -αasODN和PKA -ⅠasODN均可抑制CNE - 2Z细胞体外生长和增殖 ,两者具有协同作用。 展开更多
关键词 pkc-Α PKA-I 反义核酸 鼻咽癌 CNE-2Z细胞 蛋白激酶C 免疫组化法
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一氧化氮对体外培养大鼠软骨细胞Caspase-3及PKC-α表达的影响 被引量:4
14
作者 周建林 方洪松 +3 位作者 刘世清 邱波 明江华 彭昊 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期618-622,共5页
目的:研究NO对大鼠软骨细胞Caspase-3及蛋白激酶C(PKC)-α(PKC-α)表达的影响,探讨NO诱导软骨凋亡的机制。方法:软骨细胞用不同浓度的NO处理24h后,用TUNEL、MTT法和流式细胞术检测细胞凋亡和细胞活力。Western blot检测Caspase-3及PKC-... 目的:研究NO对大鼠软骨细胞Caspase-3及蛋白激酶C(PKC)-α(PKC-α)表达的影响,探讨NO诱导软骨凋亡的机制。方法:软骨细胞用不同浓度的NO处理24h后,用TUNEL、MTT法和流式细胞术检测细胞凋亡和细胞活力。Western blot检测Caspase-3及PKC-α的表达。结果:NO处理后软骨细胞TUNEL阳性率明显增高,细胞核片段损害明显,Caspase-3的表达升高,同时抑制PKC-α的表达。结论:NO诱导的软骨细胞凋亡可能通过促进Caspase-3表达,作用机制与抑制PKC-α有关。 展开更多
关键词 软骨细胞 一氧化氮 凋亡 CASPASE-3 pkc-a
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PKC-β抑制剂LY333531对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响 被引量:2
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作者 雷少青 苏娃婷 +4 位作者 徐金金 刘慧敏 夏中元 夏正远 徐波 《临床和实验医学杂志》 2014年第16期1305-1308,共4页
目的观察PKC-β抑制剂LY333531(LY)对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)及糖尿病LY治疗组。4周后生化检测血浆甘油三酯(TG)、炎症因子TNF-α与IL-6水平,心脏超声评价心... 目的观察PKC-β抑制剂LY333531(LY)对糖尿病大鼠心肌功能及Caveolins蛋白的影响。方法 24只SD雄性大鼠随机分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)及糖尿病LY治疗组。4周后生化检测血浆甘油三酯(TG)、炎症因子TNF-α与IL-6水平,心脏超声评价心脏功能,Western Blot分析心肌组织Cav-1、Cav-3,PKC-β2蛋白表达水平。结果与C组比较,D组大鼠血浆TG、TNF-α与IL-6水平均增高,心脏舒张功能降低,心肌组织p-PKC-β2、Cav-1表达水平增加而Cav-3表达水平降低。与D组比较,LY除了不能降低糖尿病大鼠血浆TNF-α与IL-6水平外,均可明显抑制上述变化。结论 PKC-β抑制剂LY明显改善糖尿病心肌舒张功能,其机制可能与抑制PKC-β2过度活化并恢复Caveolins蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 大鼠 糖尿病 pkc-β抑制剂 LY333531 心肌功能 Caveolins
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PKC-θ在胃肠间质瘤中的表达及意义 被引量:8
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作者 梁建芳 郑绘霞 《诊断病理学杂志》 CSCD 2007年第1期56-59,共4页
目的探讨PKC-θ在胃肠间质瘤(GIST)中的表达及意义。方法对87例GIST、2例平滑肌瘤、2例平滑肌肉瘤、5例神经鞘瘤、6例恶性神经鞘瘤、3例胸腺瘤及精原细胞瘤、5例肾透明细胞癌、5例恶性黑色素瘤进行CD117、PKC-θ染色。结果87例GIST中77... 目的探讨PKC-θ在胃肠间质瘤(GIST)中的表达及意义。方法对87例GIST、2例平滑肌瘤、2例平滑肌肉瘤、5例神经鞘瘤、6例恶性神经鞘瘤、3例胸腺瘤及精原细胞瘤、5例肾透明细胞癌、5例恶性黑色素瘤进行CD117、PKC-θ染色。结果87例GIST中77例PKC-θ(+),72例CD117(KIT)(+);15例CD117阴性的GIST中12例PKC-θ(+),其中11例上皮样细胞型中9例PKC-θ表达与CD117表达无相关性(P>0.05),其阳性表达例数与Fletcher分级和进行性疾病(PD)呈正相关关系(P<0.01)。在除神经鞘瘤和恶性神经鞘瘤的其他类型肿瘤中CD117均(+),而PKC-θ除神经鞘瘤3例和恶性神经鞘瘤2例(+)外,在其他类型肿瘤中均(-)。结论PKC-θ可能是GIST的又一标记物,尤其是对于PDGFRA基因突变的上皮样细胞型和CD117阴性的病例,PKC-θ与KIT联合检测能使大多数GIST确诊。 展开更多
关键词 pkc-θ CD117 胃肠间质瘤
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2类多巴胺受体通过促进PKC-ε转位参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡 被引量:3
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作者 李鸿珠 高君 +2 位作者 郝晓敏 张丽敏 陈俊亭 《中国医刊》 CAS 2014年第9期60-63,共4页
目的以蛋白激酶C-ε(PKC-ε)转位为切入点,探讨2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后适应抑制细胞凋亡中的作用及可能机制。方法复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧和缺血后适应模型。MTT检测心肌细胞的存活率;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡... 目的以蛋白激酶C-ε(PKC-ε)转位为切入点,探讨2类多巴胺受体(DR2)在心肌缺血后适应抑制细胞凋亡中的作用及可能机制。方法复制原代培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧和缺血后适应模型。MTT检测心肌细胞的存活率;Hoechst 33342染色观察细胞凋亡;Western blotting检测Bcl-2、caspase-3、caspase-9、PKC-ε蛋白的表达和细胞色素C(Cyt c)的释放;免疫共沉淀检测PKC-ε和DR2的相互作用。结果与正常组比较,缺氧/复氧组细胞存活率降低,细胞凋亡增加,促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达增加,抑凋亡因子(Bcl-2)表达亦增加,PKC-ε没有转位到细胞膜,PKC-ε和DR2不存在相互作用。与缺氧/复氧组比较,缺血后适应明显升高细胞存活率,降低细胞凋亡,抑制促凋亡因子(Cyt c、caspase-3、caspase-9)表达,促进抑凋亡因子(Bcl-2)表达,PKC-ε转位到细胞膜,PKC-ε和DR2存在相互作用。与缺血后适应组比较,DR2激动剂进一步增加缺血后适应的保护作用,而DR2抑制剂则取消了DR2激动剂的作用。结论DR2参与心肌缺血后适应抑制细胞凋亡,其机制与DR2促进PKC-ε转位及DR2和PKC-ε存在相互作用有关。 展开更多
关键词 2类多巴胺受体 心肌缺血后适应 细胞凋亡 pkc-ε转位
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红景天苷抑制胃癌细胞SGC7901增殖及对PKC-α的影响 被引量:4
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作者 王海燕 王刚 +3 位作者 张晓岩 李菊英 贺菊香 贾霜凯 《青海医学院学报》 CAS 2014年第3期178-182,共5页
目的观测红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖和PKC-α表达的影响,为红景天苷治疗恶性肿瘤提供实验依据。方法采用细胞形态学方法及MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用;Western Blot法检测对照组、... 目的观测红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖和PKC-α表达的影响,为红景天苷治疗恶性肿瘤提供实验依据。方法采用细胞形态学方法及MTT法、流式细胞术检测分析不同浓度红景天苷对胃癌细胞SGC7901增殖的抑制作用;Western Blot法检测对照组、红景天苷10-40μmol/L各组PKC-α蛋白表达水平。并对上述结果做相关分析。结果红景天苷作用SGC7901细胞24 h后细胞变圆,贴壁生长状态变差,死亡细胞数增多。MTT示红景天苷浓度在10-100μmol/L时,细胞死亡率随药物浓度增加而增多,细胞生存率与红景天浓度呈负相关。流式细胞术结果显示,红景天干预后凋亡细胞随着药物浓度增加而增多(P〈0.05)。Western blot检测结果示PKC-α蛋白的表达随红景天苷浓度(10、20、40μmol/L)的增加逐渐降低(P〈0.05)。结论红景天苷对胃癌细胞SGC7901具有抑制增殖并诱导凋亡的作用。红景天苷对SGC7901细胞有抑制PKC-α蛋白表达的作用。红景天苷对恶性肿瘤具有相关治疗作用。 展开更多
关键词 红景天苷 肿瘤 SGC7901 pkc-Α
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SDF-1通过活化PKC-ζ趋化人表皮干细胞定向迁移的实验研究 被引量:1
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作者 郭锐 曹川 +4 位作者 王珍祥 李喆 甘露 柴琳琳 李世荣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期335-338,共4页
目的探讨信号蛋白PKC-ζ在间质细胞衍生因子1(stromal-derived factor 1,SDF-1)趋化人表皮干细胞定向迁移中的作用及机制。方法Ⅳ型胶原快速分选,无血清培养基(DK-SFM)培养表皮干细胞,免疫组化染色观察表皮干细胞β1整合素(β1 integrin... 目的探讨信号蛋白PKC-ζ在间质细胞衍生因子1(stromal-derived factor 1,SDF-1)趋化人表皮干细胞定向迁移中的作用及机制。方法Ⅳ型胶原快速分选,无血清培养基(DK-SFM)培养表皮干细胞,免疫组化染色观察表皮干细胞β1整合素(β1 integrin)和角蛋白19(K19)的表达;Transwell实验观察SDF-1对钙和DAG依赖性和非依赖性PKC亚型抑制剂(chelerythrine chloride)、钙和DAG依赖性PKC亚型抑制剂(staurosporine)和PKC-ζ特异性抑制剂(PS-ζ)处理后人表皮干细胞的趋化作用;Western blot法检测SDF-1诱导后不同时段的人表皮干细胞PKC-ζ的磷酸化水平变化;采用Phal-loidin-Rhodamine显示细胞骨架,激光共聚焦显微镜观察PS-ζ对人表皮干细胞极化的影响。结果体外分离培养出人表皮干细胞,免疫组化染色显示,细胞质中β1整合素及K19均呈阳性表达。Transwell实验表明chelerythrine chloride和PS-ζ能够抑制SDF-1趋化的表皮干细胞运动,与阳性对照组比较差异有显著性(P<0.05)。SDF-1作用表皮干细胞能够引起PKC-ζ的磷酸化水平变化,随时间增加逐渐增强;激光共聚焦扫描显示SDF-1处理过的表皮干细胞骨架明显变化,经PS-ζ预处理后细胞骨架变化不明显。结论 SDF-1通过诱导信号蛋白PKC-ζ的磷酸化,影响细胞肌动蛋白的极化,趋化人表皮干细胞的定向迁移。 展开更多
关键词 pkc- ζ趋化运动 人表皮干细胞 间质细胞衍生因子1
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大肠癌PKC-α、CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系 被引量:4
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作者 陈爱军 孟庆华 刘文明 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第1期55-57,共3页
目的:探讨大肠癌PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法对PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果:PKC-α在大肠癌组织中阳性表达率31/47(66.0%)与大肠正常组织3/15(20.0%)及腺瘤10/21(47.... 目的:探讨大肠癌PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达与临床病理学特征的关系。方法:应用免疫组织化学SP法对PKC-α,CyclinD1和Cdk4的表达进行检测。结果:PKC-α在大肠癌组织中阳性表达率31/47(66.0%)与大肠正常组织3/15(20.0%)及腺瘤10/21(47.6%)对比有显著性差异(P<0.05),与大肠癌分化程度,Dukes分期,淋巴结转移及CEA水平明显相关(P<0.05)。CyclinD1和Cdk4在大肠癌中阳性表达率分别为26/47(55.5%),28/47(59.6%),与正常组织中表达2/15(13.3%),1/15(6.70%)及腺瘤组织中表达8/21(38.1%),9/21(42.9%)相比呈递增趋势(P<0.05)。大肠癌中CyclinD1阳性表达与肿瘤分化程度,Dukes分期,淋巴结转移呈正相关关系(P<0.05),而与CEA水平关系不大(P>0.05);Cdk4阳性表达则与分化程度,Dukes分期有关(P<0.05),与淋巴结转移及CEA水平关系不密切(P>0.05)。结论:PKC-α,Cy-clinD1和Cdk4的高表达与大肠癌分化程度,Dukes分期呈明显相关,对判断大肠肿瘤恶性程度具有一定的临床意义。 展开更多
关键词 pkc-Α CYCLIND1 CDK4 结直肠癌
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