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缺失pk-1影响AcMNPV启动子表达的分析
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作者 赵淑玲 戴雪娟 +1 位作者 薛亚男 郝佳慧 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期330-333,共4页
[目的]分析缺失pk-1对AcMNPV早期、晚期及极晚期基因表达的影响。[方法]将egfp基因片段分别插入到pFastBacDual载体上的p10和ph启动子下游,得到供体质粒pBac-Pp10-egfp和pBac-Pph-egfp。PCR扩增ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39启动子片段,... [目的]分析缺失pk-1对AcMNPV早期、晚期及极晚期基因表达的影响。[方法]将egfp基因片段分别插入到pFastBacDual载体上的p10和ph启动子下游,得到供体质粒pBac-Pp10-egfp和pBac-Pph-egfp。PCR扩增ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39启动子片段,插入到pBac-egfp载体上的egfp基因上游,得到供体质粒pBac-Pie1-egfp、pBac-Pie2-egfp、pBac-Plef2-egfp、pBac-Pp6.9-egfp、pBac-Pvp39-egfp。将供体质粒分别转化含缺失pk-1基因的AcMNPV bacmid和Helper质粒的大肠杆菌DH10Bac中,得到一系列重组的AcMNPV bacmid。提取Bacmid DNA,转染Sf9细胞,转染120h后荧光显微镜下观察eGFP蛋白的表达。[结果]缺失pk-1后ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39、p10、ph启动子均能启动下游egfp基因的表达。[结论]缺失pk-1不影响ie1、ie2、lef2、p6.9、vp39、p10、ph启动子启动的基因表达。 展开更多
关键词 ACMNPV pk-1 启动子 表达
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猪传染性胃肠炎病毒诱导PK-15细胞凋亡相关基因mRNA转录水平变化的研究
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作者 龚双燕 李小璟 +2 位作者 李幽幽 朱玲 徐志文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期256-260,共5页
为探究PK-15细胞感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)后相关凋亡基因Bcl-XL、MCL-1及PUMA mRNA转录水平差异以及TGEV增殖与细胞凋亡之间的关联,本研究在TGEV感染PK-15细胞前后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,结果显示TGEV具有诱导PK-15细胞发... 为探究PK-15细胞感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)后相关凋亡基因Bcl-XL、MCL-1及PUMA mRNA转录水平差异以及TGEV增殖与细胞凋亡之间的关联,本研究在TGEV感染PK-15细胞前后,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,结果显示TGEV具有诱导PK-15细胞发生凋亡的能力;并利用建立的q PCR方法对凋亡相关基因Bcl-XL、MCL-1和PUMA mRNA的转录水平进行测定,结果显示,感染TGEV (实验组)后Bcl-XL、MCL-1和PUMA mRNA转录水平与未感染病毒组(对照组)有明显差异,进一步表明TGEV感染PK-15细胞诱导了细胞凋亡的进程。本研究为了解TGEV诱导PK-15细胞凋亡的机制提供了实验依据。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒 pk-15 细胞凋亡 BCL-XL MCL-1 PUMA
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杆状病毒PK-1亚细胞定位分析
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作者 陈雅婷 郭凯 +3 位作者 李敏 赵淑玲 吕孝敏 梁昌镛 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期36-39,共4页
目的:制备苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒PK-1抗体,利用抗体分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。方法:根据pk-1基因序列设计引物,扩增全长序列,将其克隆到原核表达载体pMal—c2x。利用原核表达目的蛋白质,将产物进行亲和层析,获... 目的:制备苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒PK-1抗体,利用抗体分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。方法:根据pk-1基因序列设计引物,扩增全长序列,将其克隆到原核表达载体pMal—c2x。利用原核表达目的蛋白质,将产物进行亲和层析,获得纯化蛋白。将纯化的融合蛋白免疫兔子制备抗血清,利用PK-1抗血清进行免疫荧光分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。结果:成功原核表达并纯化PK-1融合蛋白,获得PK-1兔多克隆抗血清,并确定了PK-1在病毒的感染过程的亚细胞定位。结论:在杆状病毒感染后的16h,PK-1主要定位在细胞质中,随后扩散到细胞核中,在感染后24h分布在整个细胞中,到感染后48~72h,PK-1又重新定位在细胞质中,这些结果为进一步分析PK-1的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 杆状病毒 苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒 pk-1基因 原核表达 免疫荧光 亚细胞定位
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镉通过Nrf2/HO-1通路诱导猪肾PK-15细胞铁死亡
4
作者 宋圣哲 罗通旺 +5 位作者 沈灵俊 吴亚 王书杰 郁孝强 宋厚辉 邵春艳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期1992-1998,共7页
镉(Cd)是非必需且难降解的重金属元素之一,镉蓄积可导致肾损伤。本研究旨在揭示镉暴露诱导猪肾PK-15细胞铁死亡的作用机制。首先,CCK-8法检测梯度浓度氯化镉(CdCl_(2))对PK-15细胞活力的影响,以筛选出合适的工作浓度。其次,用10μmol/L ... 镉(Cd)是非必需且难降解的重金属元素之一,镉蓄积可导致肾损伤。本研究旨在揭示镉暴露诱导猪肾PK-15细胞铁死亡的作用机制。首先,CCK-8法检测梯度浓度氯化镉(CdCl_(2))对PK-15细胞活力的影响,以筛选出合适的工作浓度。其次,用10μmol/L CdCl_(2)处理PK-15细胞3、6和12 h,通过比色法检测细胞上清中乳酸脱氢酶(LDH)和细胞中丙二醛(MDA)的含量,Western blot检测铁死亡相关蛋白的表达水平,荧光探针法检测细胞中亚铁离子(Fe^(2+))含量。最后,用10μmol/L的HO-1抑制剂锌原卟啉(ZnPP)预处理PK-15细胞6 h,再用10μmol/L CdCl_(2)处理PK-15细胞12 h,通过相差显微镜观察细胞形态,Western blot检测铁死亡相关蛋白表达水平。结果显示,CdCl_(2)处理后细胞活力下降,LDH、MDA和Fe^(2+)水平极显著升高(P<0.01),Nrf2、HO-1和ALOX5蛋白表达水平极显著升高(P<0.01),FTH1蛋白表达水平极显著下降(P<0.01)。与CdCl_(2)处理组相比,ZnPP可以显著改善CdCl_(2)处理诱导的猪肾PK-15细胞铁死亡。ZnPP预处理组细胞形态明显好转,Nrf2、HO-1和ALOX5蛋白表达水平极显著下降(P<0.01),FTH1蛋白表达水平极显著升高(P<0.01)。结果表明,镉通过Nrf2/HO-1通路引发细胞铁过载和脂质过氧化,诱导猪肾PK-15细胞铁死亡。 展开更多
关键词 pk-15 HO-1 铁死亡
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镉诱导LLC-PK_1细胞凋亡与bcl-2、p53蛋白表达关系的研究 被引量:4
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作者 蔡云清 任香梅 +2 位作者 许冬青 王明艳 吴小丽 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期663-665,共3页
目的 探讨镉诱导LLC PK1 细胞凋亡及与bcl 2、p5 3(mtp5 3)蛋白表达的相互关系。方法 采用透射电镜观察凋亡小体、流式细胞仪分析凋亡率、琼脂糖凝胶DNA电泳方法确定镉对LLC PK1 细胞诱导的凋亡作用 ,以及流式细胞仪分别测定bcl 2和p... 目的 探讨镉诱导LLC PK1 细胞凋亡及与bcl 2、p5 3(mtp5 3)蛋白表达的相互关系。方法 采用透射电镜观察凋亡小体、流式细胞仪分析凋亡率、琼脂糖凝胶DNA电泳方法确定镉对LLC PK1 细胞诱导的凋亡作用 ,以及流式细胞仪分别测定bcl 2和p5 3基因表达产物bcl 2蛋白、mtp5 3蛋白。结果 透射电镜观察发现 4 0 μmol LCdCl2 作用LLC PK1 细胞 12h后 ,出现典型的凋亡小体 ;流式细胞仪分析其凋亡率为 32 6 1% ,并高于对照组 (1 0 8% ) (P <0 0 1) ;琼脂糖凝胶DNA电泳呈明显梯形条带。 0、10、2 0、4 0 μmol LCdCl2 作用LLC PK1 细胞 4h、8h ,8h后 ,bcl 2基因表达逐渐下降 ,并呈良好的剂量 -反应关系 (r=- 0 910 ,P <0 0 5 ) ;作用 4h、8h后mtp5 3蛋白表达均明显下降 ,并有剂量 -反应关系 (r值分别为 - 0 716、- 0 972 ,P值均 <0 0 5 )。结论 镉诱导LLC PK1 细胞凋亡可能与镉抑制bcl 2、mtp5 展开更多
关键词 镉LLC-PK 细胞凋亡 基因表达bcl-2和mtp53蛋白
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金属离子水解常数pK_1的人工神经网络研究 被引量:6
6
作者 杨兴华 印春生 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1334-1338,共5页
A functional-link net(FLN) was applied to study the relationships between the structural parameters of metal ions and their Hytrosis Constants pK1. These structural parameters such as radius, electric charge, electron... A functional-link net(FLN) was applied to study the relationships between the structural parameters of metal ions and their Hytrosis Constants pK1. These structural parameters such as radius, electric charge, electronegativity (electricity shouldering) and valence electron structure parameter of the metal ion. The results are satisfactory, and better than that obtained by using linearly statistic methods. Through comparing hytrolysis constants pK1 with hydration-energy ?H, the non-linear characteristic of pK1 have deeply discussed. 19 unknown pK1 of metal ion were predicted with the method. 展开更多
关键词 金属离子 水解常数 人工神经网络 结构 水溶液化学
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低氧对LLC-PK_1细胞增殖及去分化的影响
7
作者 梅长林 陈蕾 宋吉 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期84-86,共3页
目的:研究低氧对近端肾小管细胞株(LLC-PK1)细胞增殖和去分化的作用。方法:LLC-PK1细胞分别置于低氧(3%O2)和正常氧(18%O2)孵箱中培养,用3H-胸腺嘧啶掺入法和细胞计数,观察细胞增殖情况;以钠依赖... 目的:研究低氧对近端肾小管细胞株(LLC-PK1)细胞增殖和去分化的作用。方法:LLC-PK1细胞分别置于低氧(3%O2)和正常氧(18%O2)孵箱中培养,用3H-胸腺嘧啶掺入法和细胞计数,观察细胞增殖情况;以钠依赖葡萄糖和氨基异丁酸(AIB)转运为指标,观察细胞分化程度;用放射核素法测定蛋白激酶C(PKC)活性。结果:与正常氧培养比较,低氧培养16h,3H-胸腺嘧啶掺入显著增加;培养24h,细胞数显著增加;培养72h,细胞摄取α-甲基糖甙和AIB显著降低。细胞低氧培养4h,细胞膜与细胞质PKC活性比率增高,随后降至原先水平;但继续培养至24h,PKC活性再次增高,直至72h,表明PKC呈急性和持续双相激活。PKC抑制剂可显著抑制低氧诱导的3H-胸腺嘧啶掺入,并显著增加α-甲基糖甙和AIB转运。结论:慢性低氧可诱导LLC-PK1细胞的增殖和去分化。 展开更多
关键词 低氧 LLC-PK1细胞 细胞增殖 细胞分化 肾疾病
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PK—1显示系统控制机的设计方法
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作者 冯凤羚 《电脑》 1992年第6期61-63,共3页
关键词 pk-1 控制机 水文地图 显示系统
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CRISPR/Cas9介导的HO-1基因敲除细胞系的建立及其应用
9
作者 宋圣哲 罗通旺 +4 位作者 沈灵俊 王书杰 郁孝强 宋厚辉 邵春艳 《中国兽医学报》 CSCD 北大核心 2024年第11期2463-2469,共7页
利用CRISPR/Cas9系统构建HO-1基因敲除的猪肾细胞系(PK-15),为探究HO-1在镉诱导的PK-15细胞铁死亡中的作用及分子机制提供试验材料。设计并合成3条针对HO-1基因的sgRNA,分别连接到慢病毒载体Lenti CRISPRv2上;将构建好的慢病毒质粒转染... 利用CRISPR/Cas9系统构建HO-1基因敲除的猪肾细胞系(PK-15),为探究HO-1在镉诱导的PK-15细胞铁死亡中的作用及分子机制提供试验材料。设计并合成3条针对HO-1基因的sgRNA,分别连接到慢病毒载体Lenti CRISPRv2上;将构建好的慢病毒质粒转染至人胚胎肾细胞(HEK293FT),获得重组慢病毒并感染PK-15细胞;经嘌呤霉素筛选和有限稀释法获得HO-1敲除的单克隆细胞系,测序及Western blot验证HO-1基因的敲除情况。用10μmol/L氯化镉(CdCl_(2))处理构建好的HO-1基因敲除的细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,利用相差显微镜观察细胞形态,采用荧光探针法检测细胞中亚铁离子(Fe^(2+))的含量。结果显示,sgRNA2编辑效率最高,获得的5株敲除细胞HO-1基因均发生了碱基插入或缺失且引起了目的基因的移码,Western blot结果显示未检测到HO-1蛋白表达,表明成功构建了敲除HO-1基因的PK-15细胞系(PK-15^(HO-1 KO))。CdCl_(2)处理后,与对照细胞相比,PK-15^(HO-1KO)细胞活力显著升高,Fe^(2+)含量显著下降,表明HO-1基因敲除后可以显著缓解镉处理引起的铁代谢异常。综上所述,本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建了敲除HO-1基因的PK-15细胞系,并证实HO-1在镉处理诱导PK-15细胞铁代谢异常中发挥着重要作用,为后续进一步研究HO-1在镉暴露致PK-15细胞铁死亡的调控机制奠定了基础。 展开更多
关键词 HO-1 pk-15 基因敲除 CRISPR/Cas9
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RinPKS 1基因过表达载体的构建及遗传转化树莓
10
作者 张奋强 刘欢 +6 位作者 姜梦嫣 周义杰 吕鹤书 柳春梅 薛飞燕 杨明峰 马兰青 《北京农学院学报》 2018年第3期11-15,共5页
RinPKS 1基因编码的蛋白是具有催化合成柚皮素查尔酮和苯亚甲基丙酮的能力双功能酶,即具有CHS和BAS活性。BAS又是树莓酮生物合成途径中的关键酶。【目的】为了验证RinPKS 1在树莓酮生物合成途径中是否发挥作用。【方法】将RinPKS1基因与... RinPKS 1基因编码的蛋白是具有催化合成柚皮素查尔酮和苯亚甲基丙酮的能力双功能酶,即具有CHS和BAS活性。BAS又是树莓酮生物合成途径中的关键酶。【目的】为了验证RinPKS 1在树莓酮生物合成途径中是否发挥作用。【方法】将RinPKS1基因与pCambia 1304连接,构建成植物过表达载体PCA-RinPKS 1,通过根癌农杆菌介导,将RinPKS1遗传转化入树莓中,以提高树莓中树莓酮的含量。利用q-PCR分别检测转PCA-RinPKS1和阴性对照(空载体)的树莓材料中RinPKS 1基因的表达量。【结果】转RinPKS1基因树莓材料中RinPKS1的表达量比转阴性对照(空载体)有很大提高,分别是根高出15.8倍;茎高出3.17倍;叶高出4.39倍。【结论】RinPKS 1在树莓中得到转录水平过表达。 展开更多
关键词 树莓 遗传转化 Q-PCR 过表达载体 RinPKS 1
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胃癌患者血清CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP的表达和意义 被引量:3
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作者 屈重行 葛瑞瑞 +1 位作者 陈文霞 吴慧丽 《中国卫生工程学》 CAS 2021年第2期210-213,共4页
目的探讨胃癌患者血清细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)、肿瘤型M2丙酮酸激酶(TuM2-PK)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)的表达和意义。方法收集2016年2月至2017年4月本院收治的60例胃癌患者为研究组,选取同期健康志愿者40例为对照组;应用罗... 目的探讨胃癌患者血清细胞角蛋白19片段抗原(CYFRA21-1)、肿瘤型M2丙酮酸激酶(TuM2-PK)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)的表达和意义。方法收集2016年2月至2017年4月本院收治的60例胃癌患者为研究组,选取同期健康志愿者40例为对照组;应用罗氏化学发光仪检测血清CYFRA21-1、ProGRP水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清TuM2-PK的水平;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP水平对胃癌的诊断价值;Logistic回归分析影响胃癌患者预后的相关因素。结果与对照组比较,研究组患者血清CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP的水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、分化程度为低分化的胃癌患者血清CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP水平显著升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP联合检测诊断胃癌的敏感度为70.00%,特异度为95.00%,AUC面积为0.890。Logistic回归分析显示淋巴结转移、分化程度、CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP是影响胃癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论胃癌患者血清CYFRA21-1、TuM2-PK、ProGRP水平显著升高,其表达量与患者临床病理参数密切相关;3者联合检测能提高胃癌的诊断率,可作为评估患者预后的辅助指标。 展开更多
关键词 胃癌 细胞角蛋白19片段抗原 肿瘤型M2丙酮酸激酶 胃泌素释放肽前体 预后
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Effect of chronic hypoxia on LLC-PK_1 cell proliferatioll and dedifferentiation
12
作者 梅长林 陈蕾 宋吉 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1998年第3期196-201,共6页
Objective To explore the effect of chronic hypoxia on the proliferation and differentiation of LLCPK, cells. Methods: The cells were exposed either to hypoxia (3 % O2) or maintained in normoxia (18 % O2 )followed by t... Objective To explore the effect of chronic hypoxia on the proliferation and differentiation of LLCPK, cells. Methods: The cells were exposed either to hypoxia (3 % O2) or maintained in normoxia (18 % O2 )followed by the assessment of [3H]-thymidine incorporation and cell number as indices of cellular proliferation and sodium - dependent transport of glucose and aminoisobutyric acid (AIB) as indices of differentiation.Protein kinase C (PKC ) was determined with radionuclear technique. Results: Exposure of quiescent culturesto hypoxia for 16 h resulted in a significant increase in [3H]-thymldine followed by a significant increase incell number at 24 h in comparison with respective normoxic controls. Confluent cultures exposed to 72 h ofhypoxia exhibited significant inhibition of α--methyl glucose and AIB uptakes when compared with their respective norrnoxic counterparts. Hypoxia also activated PKC at 4 h followed by a subsequent return to baseline with reactivation at 24 h which remained sustained up to 72 h, suggesting a biphasic acute and sustainedactivation of PKC. Furthermore, the hypoxia--induced alterations in [H]-thymidine incorporation as well asα-methyl glucose and AId transport activities were mitigated by inhibitors of PKC. Conclusion: Chronic hypoxia induces both proliferation and dedifferentiation of LLC-PK, cells mediated, in part, by the sustained activation of PKC. 展开更多
关键词 HYPOXIA LLC-PK_1 cell PROLIFERATION DIFFERENTIATION
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Streptomyces sahachiroi ATCC 33158中一个Ⅲ型聚酮合酶基因的克隆及功能分析 被引量:2
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作者 强慧玲 原海亮 何璟 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期13-20,共8页
从链霉菌Streptomyces sahachiroi ATCC 33158基因组中克隆到1个聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因orf18。生物信息学及进化树分析表明它可能属于rppA类Ⅲ型PKS基因。通过RT-PCR证实了该基因在野生型S.sahachiroi中是可以进行转录... 从链霉菌Streptomyces sahachiroi ATCC 33158基因组中克隆到1个聚酮合酶(polyketide synthase,PKS)基因orf18。生物信息学及进化树分析表明它可能属于rppA类Ⅲ型PKS基因。通过RT-PCR证实了该基因在野生型S.sahachiroi中是可以进行转录表达的。HPLC和LC-MS分析的结果表明orf18在S.lividans中异源表达时可产生1,3,6,8-四羟基萘(THN),并且发现该基因也可以在革兰氏阴性菌Pseudomonas stutzeri中异源表达并产生明显的棕红色色素。证明orf18编码的蛋白属于RppA类Ⅲ型PKS,可催化THN的合成,而产物THN在革兰氏阴性菌P.stutzeri中可进一步氧化及聚合形成棕红色色素。 展开更多
关键词 链霉菌ATCC 33158 Ⅲ型PKS RT-PCR 异源表达 1 3 6 8-四羟基萘
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血清ESM-1、TuM2-PK水平与直肠癌患者病情严重程度和预后的关系
14
作者 王涛 段占峰 张巍巍 《实用癌症杂志》 2024年第12期1976-1979,共4页
目的探讨直肠癌患者血清ESM-1、TuM2-PK水平及临床意义。方法选取直肠癌患者120例,入院时TNM分期,Ⅰ~Ⅱ期18例、Ⅲ期58例、Ⅳ期44例,根据实体瘤治疗疗效评价标准评估预后分为预后良好组30例,预后不良组90例。比较不同临床分期血清ESM-1... 目的探讨直肠癌患者血清ESM-1、TuM2-PK水平及临床意义。方法选取直肠癌患者120例,入院时TNM分期,Ⅰ~Ⅱ期18例、Ⅲ期58例、Ⅳ期44例,根据实体瘤治疗疗效评价标准评估预后分为预后良好组30例,预后不良组90例。比较不同临床分期血清ESM-1、TuM2-PK水平,并分析其与临床分期的相关性,比较不同预后患者入院时、化疗1个周期后、化疗2个周期后血清ESM-1、TuM2-PK水平,并分析联合指标检测对直肠癌患者预后的判断价值。结果不同分期入院时患者血清ESM-1、TuM2-PK水平比较,P<0.05;入院时血清ESM-1、TuM2-PK水平与TNM分期成正比(γ=0.782,P<0.001;γ=0.320,P<0.001);不同预后患者入院时血清ESM-1、TuM2-PK水平比较,P>0.05,化疗1、2个周期后,预后不良组患者血清ESM-1、TuM2-PK水平均高于预后良好组,P<0.05;化疗1、2个周期后,血清ESM-1、TuM2-PK水平联合预测AUC为0.926、0.991,敏感度为94.4%、98.9%,特异度为83.3%、93.3%。结论直肠癌患者血清ESM-1、TuM2-PK水平与临床分期和预后有一定相关性,并且联合检测可以有效预测患者预后。 展开更多
关键词 直肠癌 ESM-1 TuM2-PK TNM分期 预后
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基于药动学方法支持用于肿瘤治疗的抗PD⁃1/PD⁃L1抗体可选给药方案的相关考虑
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作者 刘美霞 马婧怡 +2 位作者 刘淑洁 刘少丹 贺锐锐 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期2228-2233,共6页
为提高患者的依从性和给药的便利性,已有不少用于肿瘤治疗的抗程序性死亡受体1(pro⁃grammed cell death receptor⁃1,PD⁃1)/程序性死亡配体1(programmed cell death⁃ligand 1,PD⁃L1)抗体在研发过程中或获批上市后,通过改变给药剂量和/或... 为提高患者的依从性和给药的便利性,已有不少用于肿瘤治疗的抗程序性死亡受体1(pro⁃grammed cell death receptor⁃1,PD⁃1)/程序性死亡配体1(programmed cell death⁃ligand 1,PD⁃L1)抗体在研发过程中或获批上市后,通过改变给药剂量和/或给药间隔,提供更多可供选择的给药方案。本文结合国内外相关指导原则、已获批案例及该类品种在审评过程中出现的问题,对基于药动学方法支持用于肿瘤治疗的抗PD⁃1/PD⁃L1抗体可选给药方案的关注要点进行分析,以期为业界在探索用于肿瘤治疗的抗PD⁃1/PD⁃L1抗体可选给药方案时提供参考。 展开更多
关键词 抗PD⁃1/PD⁃L1抗体 给药方案 群体药动学 剂量/暴露⁃效应
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肾康注射液对肾小管上皮细胞转化生长因子-βmRNA基因表达的影响 被引量:25
16
作者 赵宗江 李宏 +5 位作者 张新雪 傅博 叶一舟 陈香美(指导) 叶传蕙(指导) 牛建昭(指导) 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期931-933,共3页
目的 :探讨肾康注射液对体外培养的肾小管上皮细胞LLC PK1转化生长因子 βmRNA(TGF βmRNA)基因表达的影响。 方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、Northern印迹杂交 (Northernblot)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注... 目的 :探讨肾康注射液对体外培养的肾小管上皮细胞LLC PK1转化生长因子 βmRNA(TGF βmRNA)基因表达的影响。 方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、Northern印迹杂交 (Northernblot)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因表达的影响。结果 :肾康注射液可以明显下调肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因的表达 ,并呈剂量依赖关系 ,肾康注射液作用明显优于同等含量的单味大黄注射液。结论 :肾康注射液下调肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因表达 ,是其防治慢性肾功能衰竭 (CRF)的机理之一。 展开更多
关键词 肾康注射注 慢性肾功能衰竭 LLC-PK1 中医药疗法
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应激和饲粮能量水平对肉仔鸡肝脏脂肪合成能力的影响 被引量:5
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作者 蔡元丽 林海 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期2512-2520,共9页
本研究旨在探讨应激和饲粮能量水平对肉仔鸡肝脏脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性以及腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AM P-activated protein kinase,AMPK)和固醇调节元件结合蛋白-1(sterol-regulatory element binding prot... 本研究旨在探讨应激和饲粮能量水平对肉仔鸡肝脏脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性以及腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AM P-activated protein kinase,AMPK)和固醇调节元件结合蛋白-1(sterol-regulatory element binding proteins-1,SREBP-1)基因mRNA表达量的影响,从而阐明应激造成肉仔鸡脂肪肝的原因,并寻找缓解应激的方法。本研究共有4个试验。前2个试验分别针对3~9日龄和28~34日龄的肉仔鸡,分别给予皮质酮和高、低能量水平饲粮的处理,试验结束后取肝脏,测定FAS活性。第3个试验选取7日龄体重相近的爱拔益加雄性肉鸡108只,随机分为3组:应激组(注射地塞米松)、对照组(注射生理盐水)和配对组(注射生理盐水,采食量与应激组前1 d的相同)。连续注射7 d。14日龄取肝脏,测定肝脏中甘油三酯的含量以及AMPK和SREBP-1 mRNA的表达量。最后1个试验给予3~9日龄肉仔鸡皮质酮和葡萄糖饮水处理,试验结束测定肝脏FAS活性。结果发现:1)皮质酮处理极显著提高了3~9日龄肉仔鸡肝脏FAS的活性(P〈0.01),对28~34日龄肉仔鸡的影响也有相似的趋势(P=0.0512)。2)与配对组相比,地塞米松处理显著增加了肝脏中甘油三酯的含量(P〈0.05),显著提高了肝脏中AMPK mRNA的表达量(P〈0.05);且地塞米松处理使得肝脏中SREBP-1 mRNA的表达量显著高于对照组和配对组(P〈0.05)。3)给应激组的肉仔鸡饮水中添加葡萄糖能显著降低肝脏FAS活性(P〈0.05)。结果表明:皮质酮处理会提高肉仔鸡肝脏FAS的活性,地塞米松处理则可显著提高肝脏SREBP-1mRNA的表达量,且能激活AM PK,而葡萄糖具有缓解应激的作用。 展开更多
关键词 肉仔鸡 应激 脂肪沉积 FAS AMPK SREBP-1
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石首长江公路大桥北边跨主梁施工关键技术 被引量:13
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作者 赵健 王元清 +2 位作者 宋伟俊 黄敏 朱永盛 《桥梁建设》 EI CSCD 北大核心 2018年第4期102-107,共6页
石首长江公路大桥主桥为主跨820m的双塔非对称混合梁斜拉桥,大桥中跨与南边跨主梁采用PK断面钢箱梁结构,北边跨主梁采用PK断面预应力混凝土箱梁结构(长251.5m)。受粉细砂地质条件影响,大桥北边跨主梁采用"1+1桥位短线法"进行... 石首长江公路大桥主桥为主跨820m的双塔非对称混合梁斜拉桥,大桥中跨与南边跨主梁采用PK断面钢箱梁结构,北边跨主梁采用PK断面预应力混凝土箱梁结构(长251.5m)。受粉细砂地质条件影响,大桥北边跨主梁采用"1+1桥位短线法"进行工厂化预制、胶拼施工。施工时,首先采用大型组合式移动模板进行预应力混凝土箱梁节段预制施工,然后利用1 100t特种龙门吊机将箱梁节段提升至墩顶滑移支架,最后进行预应力混凝土箱梁节段匹配、胶拼,并张拉纵向预应力钢筋进行体系转换,完成北边跨主梁施工。 展开更多
关键词 斜拉桥 公路桥 预应力混凝土梁 PK断面箱梁 1+1桥位短线法 桥梁施工
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Z_(p^2)上的循环码和负循环码
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作者 蒋春涛 辛小龙 《计算机工程与应用》 CSCD 北大核心 2009年第24期30-32,共3页
应用了Gray映射φ的概念,给出了Zpk+1中的1-pk-循环码与Fp上指标为pk-1长度为pkn的准循环码之间的关系;同时定义了Zp2→Zp2n的映射φ,并且研究了在它作用下负循环码与循环码的关系。
关键词 1-pk-循环码 GRAY映射 准循环码 循环码 负循环码
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肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC-PK_1分泌纤维连结蛋白的影响 被引量:10
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作者 赵宗江 张新雪 +3 位作者 傅博 陈香美 叶传蕙 牛建昭 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期32-33,42,共3页
探讨肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌纤维连接蛋白 (FN)的影响。采用酶连免疫吸附测定 (ELISA) ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC PK1分泌FN含量的影响。结果显示 :肾康注射液可以显著抑制肾... 探讨肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌纤维连接蛋白 (FN)的影响。采用酶连免疫吸附测定 (ELISA) ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC PK1分泌FN含量的影响。结果显示 :肾康注射液可以显著抑制肾小管上皮细胞LLC PK1分泌FN的含量 ,并呈剂量依赖关系 ;肾康注射液作用明显优于同等含量的单味大黄注射液。说明肾康注射液抑制肾小管上皮细胞LLC PK1分泌FN含量 ,是该方延缓慢性肾功能衰竭进展的机理之一。 展开更多
关键词 肾康注射液 肾小管上皮细胞 LLC-PK1 纤维连接蛋白
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