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PIGK与PCNA在成釉细胞瘤中的表达与意义
1
作者 赵尔杨 王姗 +2 位作者 孟琰 施磊 强冬霞 《口腔医学》 CAS 2020年第1期26-30,共5页
目的探讨PIGK与PCNA蛋白在成釉细胞瘤中的表达。方法采用HE染色与免疫组化染色检测45例成釉细胞瘤中PIGK与PCNA的表达,统计学分析染色指标与疾病病理分型的相关性及指标之间相关性。结果在成釉细胞瘤中,PIGK只在3例中呈现阳性表现,且与... 目的探讨PIGK与PCNA蛋白在成釉细胞瘤中的表达。方法采用HE染色与免疫组化染色检测45例成釉细胞瘤中PIGK与PCNA的表达,统计学分析染色指标与疾病病理分型的相关性及指标之间相关性。结果在成釉细胞瘤中,PIGK只在3例中呈现阳性表现,且与病理分型不相关(P>0.05),PCNA在所有成釉细胞瘤中均出现阳性表达,但也与病理分型不相关(P>0.05);由于病例数限制不认为PIGK与PCNA的表达存在相关性。结论 PIGK与PCNA的免疫组化染色结果与成釉细胞病理分型不存在相关性,两指标之间表达不存在相关性。 展开更多
关键词 成釉细胞瘤 免疫组化 pigk PCNA
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不同标签对致病疫霉PiGK5胞外端表达及稳定性的影响
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作者 张乐乐 刘惠荣 +1 位作者 韩晓东 陈阳 《生物过程》 CAS 2022年第2期40-53,共14页
马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉的PiGK5蛋白是一类跨膜蛋白,该蛋白在致病疫霉的致病性、无性生殖及有性生殖方面均有重要作用,但其结构与详细功能目前尚未可知。本研究通过PCR扩增PiGK5胞外端编码区,分别构建融合His标签及MBP和His双标签... 马铃薯晚疫病病原菌致病疫霉的PiGK5蛋白是一类跨膜蛋白,该蛋白在致病疫霉的致病性、无性生殖及有性生殖方面均有重要作用,但其结构与详细功能目前尚未可知。本研究通过PCR扩增PiGK5胞外端编码区,分别构建融合His标签及MBP和His双标签的原核表达载体,比较了不同标签对PiGK5胞外端表达水平、可溶性及稳定性的影响。结果显示,融合His标签的PiGK5胞外端蛋白主要以包涵体形式存在于沉淀中,仅有少量以可溶性蛋白的形式存在,1 L大肠杆菌表达的蛋白总量为28.11 mg,其中可溶性蛋白总量约为2.73 mg,而纯化后可获得纯蛋白量为0.1175 mg。纯化后的重组蛋白稳定性较好,可在96小时内维持蛋白结构稳定。融合MBP、His双标签的PiGK5胞外端蛋白主要以可溶性蛋白的形式存在,1 L大肠杆菌表达的蛋白总量为49.93 mg,其中可溶性蛋白总量约为44.73 mg,而纯化后可获得纯蛋白量为6.0125 mg。但重组蛋白的稳定性较差,仅在1.5小时就出现了蛋白降解现象。因此,虽然融合His标签的PiGK5胞外端蛋白的可溶性蛋白量较低,但重组蛋白更稳定,融合His标签更适合于PiGK5胞外端的原核表达及后续结构与功能研究。本研究比较了不同标签对PiGK5蛋白胞外端表达的影响,建立了该蛋白的原核表达条件,为其结构与功能的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 致病疫霉 pigk5蛋白胞外端 标签 表达纯化 稳定性
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利用PiggyBac转座子系统快速控制GPI锚定蛋白的表达
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作者 Matabaro Emmanuel 柳艺石 +2 位作者 张慧杰 高晓冬 藤田盛久 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期927-932,共6页
GPI锚定蛋白的合成是一个发生在内质网中多步骤、多基因参与的过程。PIGK是GPI锚定蛋白转酰胺酶复合物的一个催化亚基,负责把GPI前体转移到蛋白质上。作者在人体胚胎肾细胞(HEK 293)中获得了PIGK敲除的细胞株,敲除PIGK的细胞不能表达GP... GPI锚定蛋白的合成是一个发生在内质网中多步骤、多基因参与的过程。PIGK是GPI锚定蛋白转酰胺酶复合物的一个催化亚基,负责把GPI前体转移到蛋白质上。作者在人体胚胎肾细胞(HEK 293)中获得了PIGK敲除的细胞株,敲除PIGK的细胞不能表达GPI锚定蛋白。利用piggyBac(PB)转座子系统,在细胞中重新插入PIGK基因,细胞膜表面的GPI锚定蛋白恢复表达。实验成功构建了HEK293pB-PIGK细胞株并命名为G36,通过引入PB转座酶或FLP重组酶,可以控制GPI锚定蛋白的表达。本系统可以快速调控细胞表面蛋白质的表达并能够用于基础研究和工业应用。 展开更多
关键词 GPI锚定蛋白 PIGGYBAC转座子 pigk
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