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闽楠PIF基因家族鉴定和表达模式研究
1
作者 吕丽 黄锦 +3 位作者 李欣蓓 童再康 张俊红 杨琪 《林业科学研究》 北大核心 2026年第1期32-42,共11页
[目的]对闽楠光敏色素相互作用因子PIF家族进行鉴定,并探究其在生长发育中的功能。[方法]利用生物信息学与荧光定量PCR等方法,对PbPIFs基因家族进行了全基因组鉴定,分析其蛋白理化特性、基因结构、进化关系、亚细胞定位及启动子顺式作... [目的]对闽楠光敏色素相互作用因子PIF家族进行鉴定,并探究其在生长发育中的功能。[方法]利用生物信息学与荧光定量PCR等方法,对PbPIFs基因家族进行了全基因组鉴定,分析其蛋白理化特性、基因结构、进化关系、亚细胞定位及启动子顺式作用元件和光响应下的表达模式。[结果]从闽楠全基因组中共鉴定出9个PbPIFs基因,具有高度保守的bHLH结构域,同时包含APA结构域或APB结构域。亚细胞定位结果显示PbPIFs蛋白均定位于细胞核。PbPIFs基因上游启动子区域存在光响应、干旱、低温及激素相关的顺式作用元件,其中ABA的响应元件数量最多。PbPIFs家族成员间表现出组织部位表达分化,同时荧光定量PCR结果表明PbPIF1、PbPIF3a、PbPIF3b和PbPIF5等在光照诱导下表达显著下调,表明这些基因可能参与光形态建成。[结论]闽楠9个PbPIFs基因间表现出功能分化,不同成员参与响应光信号及非生物胁迫等不同环境因子信号,研究结果为深入解析闽楠PIF家族成员的基因功能及其环境响应的调控机制提供科学依据。 展开更多
关键词 闽楠 pif家族 系统进化 光照 黑暗 表达分析
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狗牙根PIF基因家族鉴定及遮荫胁迫分析
2
作者 孙晓阳 刘彤生 +2 位作者 武轩阳 吴可 付金民 《北方园艺》 北大核心 2026年第2期27-36,共10页
以狗牙根品种‘A12359’为试材,采用生物信息学相关方法,研究了PIF基因亲缘关系、基因结构、保守基序、启动子顺式作用元件以及遮荫胁迫下基因的表达模式,以期揭示该基因家族在遮荫胁迫响应中的潜在作用,为狗牙根的品种改良和分子育种... 以狗牙根品种‘A12359’为试材,采用生物信息学相关方法,研究了PIF基因亲缘关系、基因结构、保守基序、启动子顺式作用元件以及遮荫胁迫下基因的表达模式,以期揭示该基因家族在遮荫胁迫响应中的潜在作用,为狗牙根的品种改良和分子育种提供参考依据。结果表明:狗牙根中鉴定了33个CdPIFs基因,与其他物种相比,数量较多,可能与其基因组复制历史和生境适应性相关。系统发育分析将33个基因分为4个亚家族。保守基序分析发现,CdPIF基因家族大多数包含motif 1、motif 3和motif 7,显示出高度的保守性。启动子顺式作用元件分析表明,启动子区域富含光响应、激素应答和胁迫响应元件,特别是光响应方面元件的数量最多,强调光在CdPIFs基因调控中的重要性。基因连锁分析与染色体定位结果表明,多个CdPIFs基因在染色体上分布不均。转录组分析表明,相较于其他处理,遮荫6h处理出现显著性差异表达基因,CdPIF15、CdPIF25、CdPIF26和CdPIF27基因在遮荫胁迫一直显著性高表达。 展开更多
关键词 狗牙根 pif基因 基因家族鉴定 遮荫胁迫
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山葡萄VaPIF3b基因的克隆及抗寒功能分析
3
作者 谭丽莎 周慧敏 +5 位作者 李青云 侯雨君 李文娟 辛海平 李吉涛 孟琳 《植物科学学报》 北大核心 2025年第4期502-511,共10页
光敏色素相互作用因子(Phytochrome-interacting factors,PIFs)是基本螺旋-环-螺旋(basic helixloop-helix,bHLH)转录因子家族的一个亚家族。低温是限制我国葡萄(Vitis vinifera L.)产业发展的重要因素之一。本研究基于转录组数据,以山... 光敏色素相互作用因子(Phytochrome-interacting factors,PIFs)是基本螺旋-环-螺旋(basic helixloop-helix,bHLH)转录因子家族的一个亚家族。低温是限制我国葡萄(Vitis vinifera L.)产业发展的重要因素之一。本研究基于转录组数据,以山葡萄(V.amurensis Rupr.)cDNA为模板克隆VaPIF3b基因,并对其进行生物信息学及瞬时沉默葡萄植株的抗寒功能分析,探究该基因的抗寒作用机制。结果显示,VaPIF3b全长1725 bp,编码574个氨基酸,蛋白质分子质量为61.90 kDa,等电点为8.44,平均亲水性为−0.487,蛋白不稳定系数为52.07,属于不稳定亲水蛋白质。VaPIF3b定位于细胞核,酵母转录活性分析发现其不具有转录自激活活性。利用VIGS技术沉默VaPIF3b后,葡萄的抗寒性降低。双荧光素酶实验结果显示,VaPIF3b可与VaCBF4基因启动子相结合,并激活其表达。研究结果表明,VaPIF3b通过CBF依赖途径参与葡萄对低温胁迫的应答。 展开更多
关键词 山葡萄 pifs 冷胁迫 CBFs
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PIFs转录因子功能研究进展
4
作者 许建闻 由云生 +4 位作者 徐亚伟 崔龙女 安佳倩 刘思格 刘雪梅 《防护林科技》 2025年第4期74-80,共7页
转录因子在控制植物对环境条件变化的反应中起着重要作用。光敏色素相互作用因子(phytochrome-interacting factors, PIFS)是调节植物发育和外部刺激生长的最重要的转录因子之一。介绍光敏色素相互作用因子在植物的光信号响应、避荫反... 转录因子在控制植物对环境条件变化的反应中起着重要作用。光敏色素相互作用因子(phytochrome-interacting factors, PIFS)是调节植物发育和外部刺激生长的最重要的转录因子之一。介绍光敏色素相互作用因子在植物的光信号响应、避荫反应、下胚轴不定根、种子萌发和非生物胁迫等方面的作用。综述近年来对PIFs功能的认识进展,包括PIFs通过结合光敏色素来介导的光形态发生和调控生长素合成基因的表达来参与下胚轴不定根的发生,并简述PIFs转录因子在应对高温、低温、干旱和盐等逆境做出的应答反应。PIFs不仅作为转录因子对相关基因的表达进行编程,而且还与各种因子相互作用,共同参与植物生长发育进程。展望今后光敏色素相互作用因子的研究方向。 展开更多
关键词 光敏色素相互作用因子 pifs 非生物胁迫 光敏色素 不定根
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谷子PIF基因家族的生物信息学及基因表达模式分析
5
作者 王玲宝 郝新格 +8 位作者 谢颖 刘泊禹 刘慧倩 李亚男 王茁悦 王在席 高佳凝 刘晔航 丁璨 《农业与技术》 2025年第21期26-30,共5页
植物光敏色素相互作用因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)调控生长相关的基因表达响应环境信号,在光形态建成、热形态发生及避荫反应等过程发挥重要作用。谷子作为短日照C4植物,其光响应调控因子PIF基因家族的研究还尚不清晰... 植物光敏色素相互作用因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)调控生长相关的基因表达响应环境信号,在光形态建成、热形态发生及避荫反应等过程发挥重要作用。谷子作为短日照C4植物,其光响应调控因子PIF基因家族的研究还尚不清晰。本研究通过序列比对,鉴定得到7个谷子PIF基因,分别命名为SiPIF1、SiPIF3、SiPIF4/5A、SiPIF4/5B、SiPIF4/5C、SiPIF4/5D、SiPIF8。对上述基因基本信息、蛋白保守结构域、系统发育进化及启动子顺式作用元件进行生物信息学分析,结果表明:谷子PIF蛋白含有2个保守结构域-APB和bHLH;在系统进化方面,SiPIF1和SiPIF3与拟南芥PIF家族成员亲缘关系最近;SiPIF4/5s和SiPIF8蛋白则与玉米、二穗短柄草和水稻同源性更高,呈现出复杂性和多样性;谷子PIF基因启动子区含有多个光响应元件,也发现脱落酸响应、干旱响应相关元件。基因转录水平表达分析显示,SiPIF4/5s和SiPIF8的转录水平表达呈现节律性。实时荧光定量PCR检测发现弱光下谷子幼苗中SiPIFs表达显著上调,说明SiPIFs参与谷子幼苗期光响应,暗示其在谷子光响应中发挥的功能。以上结果为进一步探究SiPIFs在谷子光及其他环境因子响应中的功能,解析禾本科单子叶C4植物光信号转导分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 谷子 pifs 生物信息学分析 基因表达
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PIF对华投资特征与启示
6
作者 严琰 关世龙 《中国外资》 2025年第13期52-56,共5页
近年来,PIF在全球投资舞台上日益活跃,成为推动沙特“2030愿景”战略转型的关键力量。如何借鉴PIF的战略投资模式,优化自身主权财富基金的运作机制,支持国内产业升级和经济内循环,值得深入探讨。近年来,沙特阿拉伯公共投资基金(Public I... 近年来,PIF在全球投资舞台上日益活跃,成为推动沙特“2030愿景”战略转型的关键力量。如何借鉴PIF的战略投资模式,优化自身主权财富基金的运作机制,支持国内产业升级和经济内循环,值得深入探讨。近年来,沙特阿拉伯公共投资基金(Public Investment Fund, PIF)在全球投资舞台上日益活跃,成为推动沙特“2030愿景”战略转型的关键力量。与传统主权财富基金以追求财务回报为主要目标不同,PIF更侧重于战略性投资,旨在通过培育新兴产业、推动经济多元化和增强国家竞争力,实现沙特从资源依赖型经济向创新驱动型经济的转型。其投资布局涵盖国内外多个关键领域,包括可再生能源、科技创新、基础设施建设和文化娱乐等,展现出强烈的国家战略导向。 展开更多
关键词 2030愿景 pif 新兴产业 经济内循环 华投资
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大豆PIF基因家族生物信息学分析
7
作者 张慧哲 齐慧龙 +1 位作者 刘泉龙 王希胤 《种子科技》 2025年第24期28-30,37,共4页
大豆(Glycine max L.)是全球重要的油料与蛋白来源作物,其生长受光、温度等环境信号的精密调控,深入探究相关信号传导机制对提升大豆生产潜力至关重要。PIF直接与植物光和温度信号传导相关联,系统预测解析PIF的功能和相关作用机制,可为... 大豆(Glycine max L.)是全球重要的油料与蛋白来源作物,其生长受光、温度等环境信号的精密调控,深入探究相关信号传导机制对提升大豆生产潜力至关重要。PIF直接与植物光和温度信号传导相关联,系统预测解析PIF的功能和相关作用机制,可为后期研究调控机制提供分析基础。 展开更多
关键词 大豆 pif基因家族 系统发育分析 表达模式 功能预测
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人类PIF1蛋白质N-末端多肽的表达纯化和生物学活性研究
8
作者 顾永清 朴金莲 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2009年第2期139-143,共5页
解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢，具有重要的生理功能。为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能，我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版，PCR扩增得到PIF1基因5’端含有1～534核苷酸的cDNA序列一PIFAC。在PIF△C的5’端引入六组... 解螺旋酶参与几乎体内所有的DNA代谢，具有重要的生理功能。为了从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能，我们以HeLa细胞的cDNA文库为模版，PCR扩增得到PIF1基因5’端含有1～534核苷酸的cDNA序列一PIFAC。在PIF△C的5’端引入六组氨酸标签后插入pET15b表达载体，得到重组质粒pET15-PIF△C。以此重组质粒转化Rosetta TM2（DE3）感受态细胞，使PIFAC蛋白质在大肠杆菌中得到表达。在4℃通过快速液相色谱纯化系统，通过一系列色谱层析柱纯化了PIFAC蛋白质。以纯化的PIFAC蛋白质免疫家兔制备了抗血清，并检测了纯化的PIFAC的生物化学活性。结果显示不含解旋酶模序的人类PIF1蛋白质的N-末端，具有使单链DNA复性的特性。PIF1解螺旋酶具有解开DNA双链和使双链DNA复性这一矛盾的特性，暗示了人类PIF1解螺旋酶可能参与损伤DNA的修复，包括断裂的双链DNA的修复。 展开更多
关键词 pif1解螺旋酶 pifΔC蛋白质 蛋白质纯化 单链DNA复性
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植物光敏色素作用因子PIFs的生物学功能 被引量：10
9
作者 江薇 肖宁 +4 位作者 陆怡 戴毅 吴美琴 陈建民 高勇 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期698-706,共9页
光敏色素作用因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)属于碱性-螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子家族中的一个亚家族成员,其通过调控基因的表达,在抑制种子发芽,提高幼苗暗形态发生,促进避荫反应等方面起作用。... 光敏色素作用因子(phytochrome-interacting factors,PIFs)属于碱性-螺旋-环-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)转录因子家族中的一个亚家族成员,其通过调控基因的表达,在抑制种子发芽,提高幼苗暗形态发生,促进避荫反应等方面起作用。本综述通过对PIFs转录因子的生物学功能研究进展的总结,为PIFs的进一步研究提供帮助。 展开更多
关键词 pifs 转录因子 光 赤霉素
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光敏色素互作因子PIFs是整合多种信号调控植物生长发育的核心元件 被引量：16
10
作者 杨剑飞 王宇 +1 位作者 杨琳 李玉花 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1109-1118,共10页
光敏色素互作因子(PIFs)蛋白家族隶属于bHLH转录因子家族,参与多种信号转导途径,调控植物的生长发育进程,如抑制种子萌发、促进幼苗的暗形态建成和调控开花时间等。作为一个胞内信号调控的重要组分,PIFs广泛参与到由多种植物内源激素如... 光敏色素互作因子(PIFs)蛋白家族隶属于bHLH转录因子家族,参与多种信号转导途径,调控植物的生长发育进程,如抑制种子萌发、促进幼苗的暗形态建成和调控开花时间等。作为一个胞内信号调控的重要组分,PIFs广泛参与到由多种植物内源激素如赤霉素、乙烯、生长素、油菜素内酯、脱落酸和外部环境因素如高温、光等所介导的信号网络中。本文从PIFs的结构、参与途径及调控植物发育进程3个方面,简要介绍近年来国内外对PIFs在信号网络调控方面的最新研究进展。 展开更多
关键词 pifs 信号转导 植物发育
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PIF效应对于具Holling Ⅲ类功能反应的捕食者-食饵系统的影响 被引量：3
11
作者 马智慧 李自珍 +1 位作者 李文龙 李芳军 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期43-46,共4页
研究了PIF(prey influx)效应对于具HollingⅢ类功能反应的捕食者—食饵系统的影响.主要讨论了PIF效应对于系统平衡点的稳定性及两种群平衡密度的影响.结果表明PIF效应不仅可以增加捕食者种群的平衡密度而且能增加系统的稳定性,这里系统... 研究了PIF(prey influx)效应对于具HollingⅢ类功能反应的捕食者—食饵系统的影响.主要讨论了PIF效应对于系统平衡点的稳定性及两种群平衡密度的影响.结果表明PIF效应不仅可以增加捕食者种群的平衡密度而且能增加系统的稳定性,这里系统稳定性增加是指系统的正平衡点随着PIF效应的增强由不稳定状态转变为渐进稳定状态;而且PIF效应对食饵种群的平衡密度几乎没有影响. 展开更多
关键词 捕食者—食饵系统 pif效应 平衡点 稳定性
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人PIF1及其截短体重组蛋白的真核表达及其细胞内定位 被引量：2
12
作者 李珊珊 刘旭 +5 位作者 张莹 王建校 刘晓丹 王豫 周平坤 顾永清 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期595-598,699,共5页
目的构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位。方法以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B... 目的构建人PIF1及其C末端解螺旋酶模序(PIF1C)和N末端PINT结构域(PIF1N)截短体真核表达重组质粒,进行真核表达,并确定PIF1、PIF1C、PIF1N在细胞内定位。方法以HeLa cDNA为模板PCR获取PIF1、PIF1C、PIF1N编码区cDNA,将其插入pCMV-Tag 2B质粒中构建PIF1、PIF1C、PIF1N真核表达重组质粒;通过lipofectamine2000将重组质粒转染人293细胞中,Western blot方法检测其在真核细胞内的表达,用免疫荧光法检测其细胞内定位。结果成功构建了PIF1及其截短体真核表达重组体,并在真核细胞内成功表达。确定PIF1定位于核内,PIF1C定位于整个细胞,呈弥散分布,PIF1N主要定位于核内。结论在真核细胞中成功表达了PIF1、PIF1C、PIF1N,且发现PIF1N对PIF1的入核起重要作用,为进一步研究其PIF1及其各结构域奠定了实验基础。 展开更多
关键词 解螺旋酶 pif1 重组质粒 蛋白表达 免疫荧光 真核表达
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新显色剂PIF的合成及用于钛的光度测定 被引量：2
13
作者 李先春 王敦清 《江西师范大学学报（自然科学版）》 CAS 1991年第2期156-161,共6页
本文报道了新显色剂——2,3,7—三羟基—9—洋茉莉基—6—荧光酮(简称 PIF)的合成及性质.详细研究了此试剂用于钛的光度测定.试验结果表明:在 pH2.7～4.0的介质中,试剂与钛形成可溶性的二元配合物,其最大吸收波长为550nm,表观摩尔系数为... 本文报道了新显色剂——2,3,7—三羟基—9—洋茉莉基—6—荧光酮(简称 PIF)的合成及性质.详细研究了此试剂用于钛的光度测定.试验结果表明:在 pH2.7～4.0的介质中,试剂与钛形成可溶性的二元配合物,其最大吸收波长为550nm,表观摩尔系数为9.84×10~4l·mol^(-1)·cm^(-1).钛浓度在0～6μg/25ml 范围内遵守比耳定律.试剂对钛具有高选择性.可不经分离直接进行含钛试样分析,所拟方法简单、快速. 展开更多
关键词 钛 测定 比色法 pif 荧光酮
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PIFS多分辨率特性研究 被引量：1
14
作者 孙怀江 杨静宇 《计算机学报》 EI CSCD 北大核心 1998年第11期1042-1046,共5页
本文在更一般的条件下（二维，不同大小range块）证明了分形图像压缩中PIFS（PartinonedIteratedFunctionSystem）不动点的多分辨率特性，即低分辨率不动点可以通过对高分辨率不动点进行收缩变换得到，高分辨率不动点可以通过对低分辨... 本文在更一般的条件下（二维，不同大小range块）证明了分形图像压缩中PIFS（PartinonedIteratedFunctionSystem）不动点的多分辨率特性，即低分辨率不动点可以通过对高分辨率不动点进行收缩变换得到，高分辨率不动点可以通过对低分辨率不动点进行仿射交换得到，所得结论是Baharav等文中结论的推广． 展开更多
关键词 分形 pifS 图像压缩 多分辨率 图像编码 计算机
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植物中与光敏色素相互作用的因子PIFs 被引量：11
15
作者 赵晓玲 《植物生理学通讯》 CSCD 北大核心 2009年第6期531-536,共6页
文章简要介绍了目前已知的植物中与植物光敏色素相互作用的一类bHLH家族因子即PIFs因子的结构、功能的研究进展。
关键词 光敏色素 pifs BHLH
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人PIF1全长基因及其截短体真核表达载体的构建及鉴定 被引量：1
16
作者 王攀 赵德根 +1 位作者 徐涛 顾永清 《中华实用诊断与治疗杂志》 2012年第5期430-432,共3页
目的构建人PIF1基因5端、3端及全长基因的真核表达载体。方法从pCR2.1-TOPO-PIF1原始质粒中,采用PCR方法扩增目的基因PIF1,PIF1N及PIF1C,将目的基因和目的载体pcDNA3.1(-)分别酶切;纯化酶切产物后定向连接,并将其转化大肠杆菌DH5α... 目的构建人PIF1基因5端、3端及全长基因的真核表达载体。方法从pCR2.1-TOPO-PIF1原始质粒中,采用PCR方法扩增目的基因PIF1,PIF1N及PIF1C,将目的基因和目的载体pcDNA3.1(-)分别酶切;纯化酶切产物后定向连接,并将其转化大肠杆菌DH5α,对生长出的克隆行特异限制性内切酶酶切鉴定,鉴定为阳性的克隆送样测序。结果凝胶成像结果显示重组基因pcDNA3.1(-)-PIF1,pcDNA3.1(-)-PIF1N及pcDNA3.1(-)-PIF1C酶切后条带大小分别为1 926,540,1 428bp。结论成功构建hPIF1基因5端、3端及全长基因表达载体,分别为pcDNA3.1(-)-PIF1N,pcDNA3.1(-)-PIF1C及pcDNA3.1(-)-PIF1。 展开更多
关键词 解螺旋酶 人pif1 质粒构建 pcDNA3.1(-)
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伪恒定物体(PIF)方法在遥感影像辐射匹配中的应用 被引量：5
17
作者 朱云燕 贺彬 赵碧云 《云南环境科学》 2002年第2期12-14,共3页
伪恒定物体 (PIF)方法基于影像上人造物体像元反射率的统计不变量 ,假定影像间同一人造物体像元的亮度值呈线性函数关系 ,通过数理统计方法 ,校正多时相、多波段影像之间的大气、光照和传感器参数差异 ,达成影像之间的辐射匹配。
关键词 伪恒定物体 pif 遥感影像 辐射匹配 滇池 环境监测
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不含氨基末端的PIF1解螺旋酶的纯化和初步功能研究 被引量：3
18
作者 顾永清 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期272-275,共4页
目的从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白——PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测。方法以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540～1 923的cDNA序列,在cDNA的5′端引入六... 目的从分子水平阐述人类PIF1解螺旋酶的生理功能,纯化只含有解螺旋酶模序,不含N-末端的PIF1蛋白——PIF1△N,并对其生物化学活性进行检测。方法以Hela细胞的cDNA文库为模版,PCR扩增得到PIF1的540～1 923的cDNA序列,在cDNA的5′端引入六聚组氨酸标签后插入pET20b表达载体,得到重组质粒pET20-PIF1△N。通过共转化此重组质粒和一个编码稀有rRNA的质粒,PIF1△N蛋白在大肠杆菌中得到表达。在4℃通过一系列亲和层析柱,用高效液相纯化系统纯化了PIF1△N蛋白,并检测其生物化学活性。结果从Hela细胞的cDNA文库中克隆了PIF1蛋白的540～1 923的基因片段,使其在大肠杆菌中成功表达。建立了纯化PIF1△N蛋白的亲和层析方法,并检测了其ATP酶活性。结论不含N-末端的PIF1蛋白-PIF1△N,具有依赖镁离子和DNA的ATP酶活性。 展开更多
关键词 pif1解螺旋酶 蛋白纯化 ATP酶
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人类重组PIF1蛋白的表达纯化和解螺旋酶活性的分析 被引量：3
19
作者 顾永清 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期268-273,共6页
Pif1解螺旋酶家族在酵母到人的进化中非常保守,在生物体内具有很多重要的生理作用。为了从生物化学水平研究人类PIF1的功能,从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到人类PIF1全长基因,通过共转化一个携带稀有遗传密码tRNA1的质粒和一个编码分子... Pif1解螺旋酶家族在酵母到人的进化中非常保守,在生物体内具有很多重要的生理作用。为了从生物化学水平研究人类PIF1的功能,从HeLa细胞的cDNA文库中克隆得到人类PIF1全长基因,通过共转化一个携带稀有遗传密码tRNA1的质粒和一个编码分子伴侣的质粒,增加了PIF1蛋白在大肠杆菌中的表达,最后通过快速液相色谱纯化系统,采用亲和层析和凝胶过滤,纯化了人类重组PIF1蛋白。生物化学活性检测证明了纯化的人类PIF1蛋白具有ATP酶及解螺旋酶活性。人类PIF1蛋白的纯化为我们从分子水平理解PIF1在体内的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 pif1解螺旋酶 蛋白表达和纯化 ATP酶活性 解螺旋酶活性
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大白菜转录因子基因BrPIF5功能验证及表达分析
20
作者 孟川 马小超 +5 位作者 吴芳 王清凤 马蕾 王洪乐 王明秋 刘晓东 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第6期18-26,共9页
大白菜叶球的抱合方式是决定商品器官外观形状、口感和抗逆性的主要性状。为探究大白菜抱合方式形成的内在分子机理,以叠抱和舒心大白菜为试验材料,克隆得到转录因子BrPIF5基因的全长序列,并进行生物信息学分析,构建植物过表达载体以及... 大白菜叶球的抱合方式是决定商品器官外观形状、口感和抗逆性的主要性状。为探究大白菜抱合方式形成的内在分子机理,以叠抱和舒心大白菜为试验材料,克隆得到转录因子BrPIF5基因的全长序列,并进行生物信息学分析,构建植物过表达载体以及利用农杆菌介导转化到烟草,获得阳性转化植株,通过qRT-PCR检测了BrPIF5基因在烟草中的表达水平。结果表明,BrPIF5基因编码的蛋白为亲水性蛋白,具有连续且完整的634 bp开放阅读框,蛋白内共含有210个氨基酸,该蛋白由较多α螺旋结构和无规则卷曲构成,其中存在1个AP2/ERF结构域。BrPIF5蛋白与其余9个基因家族成员共含有1个1号保守基序,且位置相较于其他基因家族成员存在差异,位于蛋白序列前端。系统进化树显示,BrPIF5基因与家族内的SoPIF15、BhPIF1、BoPIF4、AtPIF4和BrPIF4家族成员具有较近的进化关系。通过农杆菌介导的遗传转化方法获得过表达BrPIF5烟草株系,烟草阳性转化株表现出叶片向内卷曲,通过qRT-PCR检测发现,该基因在叠抱类型大白菜中表达量高于舒心大白菜,阳性烟草植株的基因表达量高于对照。进一步证明了BrPIF5基因控制大白菜叶片向内卷曲,从而促进叶球叠抱类型的形成。 展开更多
关键词 大白菜 Brpif5基因 表达分析 叶片发育 pif基因家族
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