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瘦肉型猪(PIC344)精液碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究 被引量：5
1
作者 国锦琳 刘克武 +5 位作者 岳碧松 张志和 侯容 李佳 陶科 黄跃武 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期37-41,共5页
用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE SepharoseFF和SephacrylS 200柱层系,从瘦肉型猪(PIC344)精液中提取出碱性磷酸酶。纯化倍数11 46,比活为81 23U/mg蛋白。提取液经PAGE和SDS PAGE检测,呈现一条带。该酶相对分子质量为90 12KD,亚基... 用正丁醇抽提、硫酸铵分级沉淀、DEAE SepharoseFF和SephacrylS 200柱层系,从瘦肉型猪(PIC344)精液中提取出碱性磷酸酶。纯化倍数11 46,比活为81 23U/mg蛋白。提取液经PAGE和SDS PAGE检测,呈现一条带。该酶相对分子质量为90 12KD,亚基分子质量为48 41KD,该酶为两个相同亚基组成。等电点为8 19,最适pH值9 5,最适温度为40℃,以磷酸苯二钠为底物测得Km值为3 98×10-4mol/L。经分析,Cu2+、Cd2+为酶的抑制剂,Ni2+、Ca2+、Mg2+为该酶的激活剂。选用CuSO4、Cd(NO3)2作酶的抑制类型判断,结果表明,CuSO4为非竞争性抑制,抑制常数为1 32×10-3mol/L,Cd(NO3)2为竞争性抑制,抑制常数为3 33×10-4mol/L。 展开更多
关键词 瘦肉型猪 pic344 精液 碱性磷酸酶 分离纯化
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瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶功能基团的化学修饰
2
作者 姜骅 张勇侠 +3 位作者 李佳 国锦琳 肖舸 刘克武 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期36-38,共3页
不同浓度化学修饰剂二巯基苏糖醇(DTT)、对氯汞苯甲酸(pCMB)、N 溴代琥珀酰亚胺(NBS)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、溴代乙酸(BrAc)的修饰能抑制瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶(ACPase,E C 3 1 3 2)的活力。同一浓度不同种类的修饰剂修饰酶活... 不同浓度化学修饰剂二巯基苏糖醇(DTT)、对氯汞苯甲酸(pCMB)、N 溴代琥珀酰亚胺(NBS)、苯甲基磺酰氟(PMSF)、溴代乙酸(BrAc)的修饰能抑制瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶(ACPase,E C 3 1 3 2)的活力。同一浓度不同种类的修饰剂修饰酶活力降低程度不同。化学修饰剂修饰ACPase不同时间后,酶活力均有不同程度的降低,其中PMSF作用60min后酶活力仅存18%,而BrAc的修饰对ACPase的活力无明显影响。 展开更多
关键词 瘦肉型猪精液(pic344) 酸性磷酸酶 化学修饰
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瘦肉型猪(PIC344)精液酸性磷酸酶部分性质研究 被引量：2
3
作者 黄新河 冯兴 +5 位作者 刘鑫 李佳 张勇侠 国锦琳 肖舸 刘克武 《四川动物》 CSCD 北大核心 2005年第1期17-21,26,共6页
　　 用纱网滤掉瘦肉型猪 (PIC344) 新鲜精液中胶状物得原精液, 该原精液经硫酸铵分段盐析、DEAE Sepharose F F 离子交换柱层析、Sephacryl S 200 凝胶过滤后分离纯化到酸性磷酸酶 (Acid Phosphatase, 简称ACPase)。纯化倍数为22 78, ... 　　 用纱网滤掉瘦肉型猪 (PIC344) 新鲜精液中胶状物得原精液, 该原精液经硫酸铵分段盐析、DEAE Sepharose F F 离子交换柱层析、Sephacryl S 200 凝胶过滤后分离纯化到酸性磷酸酶 (Acid Phosphatase, 简称ACPase)。纯化倍数为22 78, 酶液比活力为15 26U/mg蛋白。纯化酶液经非还原性SDS PAGE检测, 呈现单一蛋白着色带。测得该酶相对分子质量为52 3kD, 等电点为5 1, 米氏常数 (Km 值) 为3 08×10-3mol/L。测得该酶最适pH为3 6, 最适温度为52℃。ACPase在pH 3 5~6 0范围内稳定, 在40℃以下稳定, 50℃保温30min后酶活仍能保持59 2%。 展开更多
关键词 部分性 新鲜精液 酸性磷酸酶 离子交换柱层析 g蛋白 纯化 凝胶过滤 瘦肉型猪 纱网 胶状物
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