湖北白猪导入OMT/PGH基因的整合、表达和遗传 被引量：27

1

作者 魏庆信 樊俊华 +4 位作者 陈东宝 李绍章 胡宏宇 华文君 王翀 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第6期606-611,共6页

以湖北白猪为实验材料,显微注射OMT/PGH基因(绵羊启动子和猪生长激素的融合基因)于1125枚1～4细胞期的早期胚胎核内,共产仔167头,产仔率14.8%。Dot(斑点杂交)和Southern blot(印迹转膜杂交)检测,29头阳性,阳性率17.9%。通过传代进行转... 以湖北白猪为实验材料,显微注射OMT/PGH基因(绵羊启动子和猪生长激素的融合基因)于1125枚1～4细胞期的早期胚胎核内,共产仔167头,产仔率14.8%。Dot(斑点杂交)和Southern blot(印迹转膜杂交)检测,29头阳性,阳性率17.9%。通过传代进行转基因的遗传分析。G_0×G_0的配种组合,产仔63头,其中阳性20头,阳性率31.7%;G_0×非转基因猪的组合,产仔66头,其中阳性10头,阳性率15.2%。对11头G_0猪血清用放射免疫法测定的结果,其生长激素的浓度相当于对照组的2.03～6.70倍。16头G_0猪180日龄的生长速度比同窝对照提高11.8%;11头G_1猪比同窝对照提高14.8%,饲料转化率提高10%,瘦肉率有提高的趋势。 展开更多

关键词 OMT/pgh 基因 表达 遗传 猪

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11个猪品种生长激素(pGH)基因多态性及其遗传分化研究 被引量：10

2

作者 帅素容 李学伟 +2 位作者 朱砺 李辉 赵中权 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期753-759,共7页

利用PCR和测序技术,检测了11个猪品种共65个个体的生长激素(pGH)基因全序列多态性,发现43个SNPs和1个位于内含子3的7 bp缺失片段。分析结果表明,pGH基因DNA序列不同功能区变异程度各不相同,外显子区、内含子区、5′和3′端非编码区SNPs... 利用PCR和测序技术,检测了11个猪品种共65个个体的生长激素(pGH)基因全序列多态性,发现43个SNPs和1个位于内含子3的7 bp缺失片段。分析结果表明,pGH基因DNA序列不同功能区变异程度各不相同,外显子区、内含子区、5′和3′端非编码区SNPs位点各占SNPs位点总数的18.60%、74.42%、6.98%;外显子区8个SNPs位点导致4个氨基酸位点变异,外显子2是编码区的高变域;各SNPs的变异属典型的中性突变;不同品种有其独特的单倍型。分子方差分析(AMOVA)结果表明,pGH基因DNA序列品种内的变异(方差比率73.45%)大于品种间的变异(方差比率26.55%),品种间差异极显著(P<0.01),存在较明显的遗传分化;pGH基因自身进化及品种进化主要体现在内含子区,品种间的遗传分化与地理分布和基因交流有关。 展开更多

关键词 猪 pgh基因 多态性 遗传分化

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藏猪生长激素基因(pGH)多态性研究 被引量：6

3

作者 张浩 强巴央宗 +4 位作者 张明明 彭俊飞 杨涛 达娃卓玛 吴常信 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期15-19,共5页

猪生长激素基因(pGH)是猪生长发育性状重要的候选基因之一。采用PCR-RFLP技术检测藏猪pGH基因+159^+734 bp片段的DraI、ApaI和MspI酶切多态性。结果显示,藏猪群体中DraI酶切全部切开,无多态;ApaI酶切具有4个等位基因,出现5种基因型,其... 猪生长激素基因(pGH)是猪生长发育性状重要的候选基因之一。采用PCR-RFLP技术检测藏猪pGH基因+159^+734 bp片段的DraI、ApaI和MspI酶切多态性。结果显示,藏猪群体中DraI酶切全部切开,无多态;ApaI酶切具有4个等位基因,出现5种基因型,其中CC基因型(299A/432C)频率最高,为0.7857;藏猪群体MspI酶切出现3种基因型,杂合性CT基因型频率最高,为0.5089,等位基因C和T频率分别为0.5580和0.4420。经比较,藏猪pGH基因DraI酶切位点与其他猪种一样无多态性,而ApaI酶切出现了特异的432突变位点,MspI酶切等位基因分布相对均衡,表现出与其他猪种的差异。 展开更多

关键词 藏猪 pgh基因 PCR-RFLP 多态性

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脂质体pGH的缓释及促增重作用初探 被引量：3

4

作者 李震 高明 +3 位作者 于瑞嵩 张德福 刘惠莉 周智爱 《上海农业学报》 CSCD 2003年第4期107-108,共2页

初步研究了采用脂质体包裹产物的处理方法进行pGH的缓释。去垂体大鼠的实验结果表明 ,pGH/脂质体可在 3～

关键词 猪生长激素 脂质体pgh 缓释 增重作用 蛋白类激素 垂体 剂量 生长 饲料转化

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转pGH基因猪与非转基因猪成纤维细胞系的建立及鉴定 被引量：3

5

作者 崔小荣 李晓玲 +5 位作者 于光辉 魏成晓 赵玲玲 巩建飞 张廷荣 孙金海 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第6期3-7,I0003,共6页

本试验采用组织块贴壁法对初生仔猪的耳组织进行原代培养,成功分离出转pGH基因猪与非转基因猪成纤维细胞,并对细胞进行形态学观察,冻存前和复苏后细胞活力检测,生长动力学分析,波形蛋白免疫组化,染色体计数以及微生物污染检测等生物学... 本试验采用组织块贴壁法对初生仔猪的耳组织进行原代培养,成功分离出转pGH基因猪与非转基因猪成纤维细胞,并对细胞进行形态学观察,冻存前和复苏后细胞活力检测,生长动力学分析,波形蛋白免疫组化,染色体计数以及微生物污染检测等生物学特性分析。结果表明,原代细胞经过胰蛋白酶消化和差速离心分离培养出成纤维细胞,7组细胞冻存前细胞活力均在为92%以上,冻存3个月后细胞复苏活力仍在89%以上;细胞生长总趋势呈"S"型,即经历了潜伏期、指数生长期和平台期3个阶段;细胞波形蛋白免疫组化在成纤维细胞中呈阳性反应;染色体计数结果表明,染色体数量稳定;成纤维细胞的细菌、真菌、病毒和支原体检测均为阴性。本试验成功建立了转pGH基因猪与非转基因猪成纤维细胞系。 展开更多

关键词 pgh基因 转基因猪 成纤维细胞系 细胞培养 生物学特性

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猪生长激素(PGH)基因全序列扩增及序列分析 被引量：10

6

作者 邢晋祎 帅素容 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第2期182-185,共4页

筛选了一对扩增PGH基因全序列的引物 ,用PCR法成功地扩增了PGH基因全序列 ,并对扩增产物进行了序列多态性分析。结果表明 ,与Vize等 1987年公布的序列存在 5 7bp的差异 ,同源性为 97.19% ;5个外显子间有 3bp的不同 ,同源性达 99.5 4 %。

关键词 猪 PCR pgh 基因全序列 生长激素 序列分析

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OMT/PGH基因导入湖北白猪后的整合与表达 被引量：4

7

作者 魏庆信 樊俊华 +2 位作者 李绍章 刘静平 胡宏宇 《湖北农业科学》 1992年第1期29-32,共4页

以湖北白猪为实验材料,采用显微注射和猪精子做载体两种方法导入OMT/PGH基因,共产仔161头。取仔猪耳、尾组织,用斑点杂交和Southern杂文检测,判定25头整合。显微注射法的转基因效率为2.96％,精子载体法的转基因效率为4％。用放射免疫法... 以湖北白猪为实验材料,采用显微注射和猪精子做载体两种方法导入OMT/PGH基因,共产仔161头。取仔猪耳、尾组织,用斑点杂交和Southern杂文检测,判定25头整合。显微注射法的转基因效率为2.96％,精子载体法的转基因效率为4％。用放射免疫法测定外周血清,在非诱导状态下,有11头转基因猪生长激素的浓度为对照组的2.03～6.7倍,其2～5月龄的生长速度平均提高15.23％。当饲料中Zn离子的含量达到1670ppm时,转基因猪的生长速度显著加快。 展开更多

关键词 湖北白猪 猪 繁殖 OMT/pgh基因

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pGH基因全序列ApaⅠ酶切位点多态性与生产性能的相关分析 被引量：5

8

作者 刘海峰 帅素容 +1 位作者 邢晋 侯万儒 《四川师范学院学报（自然科学版）》 2003年第3期330-334,共5页

本实验利用PCR-RFLP技术分析了约克夏和长白猪pGH基因ApaⅠ酶切位点多态性及其与生产性能的关系.结果表明,在pGH基因序列中共检测到5种基因型,4种等位基因,基因型频率和等位基因频率在2个猪品种间分布差异不显著;约克夏ApaⅠ酶切多态位... 本实验利用PCR-RFLP技术分析了约克夏和长白猪pGH基因ApaⅠ酶切位点多态性及其与生产性能的关系.结果表明,在pGH基因序列中共检测到5种基因型,4种等位基因,基因型频率和等位基因频率在2个猪品种间分布差异不显著;约克夏ApaⅠ酶切多态位点中,AC基因型个体在165日龄体重和70-165日龄日增重上显著高于AA基因型个体(P<0.1);但长白猪ApaⅠ多态位点不同基因型在这两个生产性状上的差异不显著. 展开更多

关键词 猪生长激素基因 pgh基因全序列 ApaⅠ酶切位点多态性 生产性能 PCR-RFLP技术 品种选育

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转pGH基因猪血清pGH含量的分析

9

作者 牛屹东 何新 +3 位作者 刘桂生 陈清轩 陈永福 魏庆信 《生物工程进展》 CSCD 2002年第2期85-87,共3页

用ELISA方法分别测定了 3头F0 代成年阳性猪和 8头F1代幼年阳性猪血清pGH的水平 ,发现阳性个体间在激素含量及变化趋势上有很大差别 ,其中F1代个体pGH变化趋势与阴性对照较为一致。研究结果表明阳性个体本身性别及生理状况与外源基因表... 用ELISA方法分别测定了 3头F0 代成年阳性猪和 8头F1代幼年阳性猪血清pGH的水平 ,发现阳性个体间在激素含量及变化趋势上有很大差别 ,其中F1代个体pGH变化趋势与阴性对照较为一致。研究结果表明阳性个体本身性别及生理状况与外源基因表达有关 。 展开更多

关键词 pgh基因 血清pgh 分析 转基因猪 生长激素 酶联免疫吸附测定法

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可控表达pGH基因转基因小鼠模型的建立与分析

10

作者 张建斌 刘颖 +2 位作者 白立景 牟玉莲 韩俊文 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1145-1153,共9页

旨在构建整合型可控表达猪生长激素(porcine growth hormone,pGH)基因转基因小鼠模型,通过控制GH的表达时间和表达量来减少GH过早表达产生的副作用,对于培育高饲料转化率大家畜具有重要研究意义。利用本课题组前期成功构建并在PK15细胞... 旨在构建整合型可控表达猪生长激素(porcine growth hormone,pGH)基因转基因小鼠模型,通过控制GH的表达时间和表达量来减少GH过早表达产生的副作用,对于培育高饲料转化率大家畜具有重要研究意义。利用本课题组前期成功构建并在PK15细胞系中验证的整合型诱导表达pGH四环素(Tet-on)载体,通过原核显微注射方法制备转基因小鼠。以Southern blot鉴定为阳性的Founder鼠为基础扩繁培育,对转基因后代鼠3~10周龄通过饮水中添加诱导底物强力霉素(DOX)进行诱导试验;利用RT-qPCR技术检测外源基因表达水平;利用放射性免疫检测方法对小鼠血液中猪生长激素水平进行定量检测,同时称重,评估转入基因对小鼠机体表型的影响。结果表明,转基因小鼠诱导组的体重与转基因小鼠非诱导组和同窝非转基因组小鼠相比显著增大(P<0.05),血清中pGH水平显著上升(P<0.05),说明外源GH有效表达并且调节动物机体的生长。结果提示,该模型的建立有助于深入研究GH对机体发育的影响以及机体中影响GH分泌的分子机制和信号通路,促进GH在家畜生产中的应用,也为制备安全、高效的GH转基因大家畜奠定理论基础。 展开更多

关键词 四环素可控表达系统 pgh基因 转基因小鼠

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F1代转pGH、IGF-1双基因猪的阳性鉴定及其差异性表达

11

作者 宋玉芹 范岩岩 +4 位作者 李晓玲 王友升 崔小荣 张廷荣 孙金海 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第1期37-41,共5页

为了探究转pGH、IGF-1双基因猪F1代阳性率及表达差异情况,试验采用PCR、测序及荧光定量PCR检测转pGH、IGF-1双基因猪的mRNA表达水平。结果表明:53头F1代猪中17头为阳性猪,阳性率为32.08%,证实外源pGH和IGF-1基因已遗传到F1代中;1月龄到... 为了探究转pGH、IGF-1双基因猪F1代阳性率及表达差异情况,试验采用PCR、测序及荧光定量PCR检测转pGH、IGF-1双基因猪的mRNA表达水平。结果表明:53头F1代猪中17头为阳性猪,阳性率为32.08%,证实外源pGH和IGF-1基因已遗传到F1代中;1月龄到4月龄转双基因猪与非转基因猪IGF-1和pGH基因平均表达量均无显著性差异(P>0.05);5月龄转双基因猪pGH和IGF-1基因平均表达量分别是非转基因猪的1.98倍和2.00倍,存在显著差异(P<0.05);6月龄转双基因猪pGH和IGF-1基因平均表达量分别是非转基因猪的1.67倍和1.73倍(P<0.05)。说明pGH、IGF-1双基因已遗传至F1代猪中,并且能够在猪体内稳定表达。 展开更多

关键词 转双基因猪 pgh基因 IGF-1基因 阳性鉴定 荧光定量PCR

原文传递

pGH基因在F_1代转基因金鱼中的整合及表达的分析 被引量：1

12

作者 王荣 李文雍 《阜阳师范学院学报（自然科学版）》 2003年第2期4-6,10,共4页

本实验对转基因金鱼进行分子生物学鉴定,所用实验材料转基因金鱼是采用显微注射的方法,将羊金属硫蛋白基因启动子与猪生长激素基因(pGH)重组而成的线形DNA片段导入金鱼的受精卵中,在合适的条件下培养获得的。为了鉴定外源基因在金鱼体... 本实验对转基因金鱼进行分子生物学鉴定,所用实验材料转基因金鱼是采用显微注射的方法,将羊金属硫蛋白基因启动子与猪生长激素基因(pGH)重组而成的线形DNA片段导入金鱼的受精卵中,在合适的条件下培养获得的。为了鉴定外源基因在金鱼体内整合、表达和遗传的情况,我们选择了相同生长期的F_1代转基因金鱼6条和普通金鱼2条,进行总DNA的提取和纯化,用特异引物对pGH基因进行PCR扩增,结果表明:外源基因(pGH)在部分受体金鱼中得到了整合,并通过有性繁殖稳定地遗传给下一代。同时将阳性金鱼与阴性金鱼进行身长和体重等形态上的比较,初步断定:pGH基因在部分受体鱼中得到了表达,且有显著的促生长作用。 展开更多

关键词 pgh基因 F1代转基因金鱼 基因整合 基因表达 遗传 转基因动物

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PGH/IGF-1轴与妊娠期胰岛素抵抗

13

作者 黄倩芳 淦明路 +4 位作者 任茜 马宇航 赵立 王育璠 彭永德 《世界临床药物》 CAS 2013年第8期495-499,共5页

妊娠期胎盘分泌大量胎盘生长激素(PGH)逐渐取代垂体分泌的生长激素,与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组成PGH/IGF-1轴。PGH/IGF-1轴在整个妊娠过程中具有重要作用,其通过调节母体代谢一方面影响胎儿生长,另一方面影响母体胰岛素敏感性。本... 妊娠期胎盘分泌大量胎盘生长激素(PGH)逐渐取代垂体分泌的生长激素,与胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组成PGH/IGF-1轴。PGH/IGF-1轴在整个妊娠过程中具有重要作用,其通过调节母体代谢一方面影响胎儿生长,另一方面影响母体胰岛素敏感性。本文综述PGH/IGF-1轴在正常妊娠及妊娠合并糖尿病中参与胎儿生长和母体胰岛素抵抗的作用。 展开更多

关键词 pgh IGF-1轴 妊娠合并糖尿病 胰岛素抵抗

原文传递

转pGH基因猪外源基因染色体定位研究 被引量：4

14

作者 牛屹东 何新 +3 位作者 陈清轩 林爱星 陈永福 魏庆信 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期318-321,共4页

应用地高辛标记探针对转pGH基因 (猪生长激素基因 )猪染色体进行原位杂交 ,经胶体金抗体、银增强放大系统检测外源pGH基因在染色体上的整合位点。研究表明 ,转基因阳性个体间外源基因整合位点存在差异 ,但对个体而言 ,外源基因总是集中... 应用地高辛标记探针对转pGH基因 (猪生长激素基因 )猪染色体进行原位杂交 ,经胶体金抗体、银增强放大系统检测外源pGH基因在染色体上的整合位点。研究表明 ,转基因阳性个体间外源基因整合位点存在差异 ,但对个体而言 ,外源基因总是集中分布于某一特定的染色体上。 展开更多

关键词 pgh基因 转基因猪 染色体原位杂交 基因定位

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湖北白猪导入OMT/PGH基因的整合与表达初报

15

作者 魏庆信 樊俊华 +2 位作者 李绍章 刘静平 胡宏宇 《湖北畜牧兽医》 1991年第3期1-3,共3页

一九八九年十月至十二月,以湖北白猪为实验材料,采用显微注射和猪精子做载体两种方法进行 OMT/PGH 基因导入。一九九○年春,共产仔161头。取仔猪的耳组织或尾组织,用斑点杂交和 Southern 杂交检测,判定有25头猪实现了外源基因的整合。... 一九八九年十月至十二月,以湖北白猪为实验材料,采用显微注射和猪精子做载体两种方法进行 OMT/PGH 基因导入。一九九○年春,共产仔161头。取仔猪的耳组织或尾组织,用斑点杂交和 Southern 杂交检测,判定有25头猪实现了外源基因的整合。显微注射法的转基因效率为2.96%,精子载体法的转基因效率为4%。用放射免疫法测定外周血清,在非诱导状态下,有11头转基因猪生长激素的浓度明显高于对照组,相当于对照组的2.03～6.7倍,2～5月龄的生长速度平均提高15.23%。当饲料中 Zn 离子的含量达到1670PPm 时,转基因猪的生长速度显著加快。 展开更多

关键词 OMT/pgh基因 转基因猪 显微注射法 基因导入 精子载体法 生长速度 外周血清 杂交检测 营养水平 细胞期

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转外源基因(pGH)在猪染色体上整合状况 被引量：1

16

作者 蒋亚军 吴明明 孙金海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1103-1107,共5页

应用地高辛标记技术,对通过睾丸注射法制备的转基因猪进行荧光原位杂交,确定外源pGH(猪生长激素)基因在染色体上的整合位点及数目。选用睾丸注射法制备的140日龄转基因长白猪6头与同期同龄非转基因猪2头进行血细胞培养及荧光原位杂交。... 应用地高辛标记技术,对通过睾丸注射法制备的转基因猪进行荧光原位杂交,确定外源pGH(猪生长激素)基因在染色体上的整合位点及数目。选用睾丸注射法制备的140日龄转基因长白猪6头与同期同龄非转基因猪2头进行血细胞培养及荧光原位杂交。结果显示,外源基因已整合于染色体上,但在染色体上的整合位点具有随机性,而且不同的转基因猪阳性个体外源基因在染色体上的整合位点有差异,但集中分布于1、6、8、13号染色体上;非转基因猪染色体上无杂交信号;个体杂交信号数越多,其生长速度越快。 展开更多

关键词 pgh基因 转基因猪 整合位点 地高辛 荧光原位杂交

原文传递

pGH和IGF-Ⅰ双基因共表达载体的构建及转双基因猪的获得与检测 被引量：2

17

作者 姚延珠 吴明明 孙金海 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2016年第3期94-100,共7页

旨在构建可高效表达pGH基因和IGF-I基因的双基因共表达载体，制备转双基因（pGH+IGF-I双)猪，以期探索pGH基因和IGF-I基因对猪生长发育的影响，为节粮型高痩肉率新品种猪的培育奠定理论基础。从长白猪耳样中提取总RNA，经反转录RT-PCR获... 旨在构建可高效表达pGH基因和IGF-I基因的双基因共表达载体，制备转双基因（pGH+IGF-I双)猪，以期探索pGH基因和IGF-I基因对猪生长发育的影响，为节粮型高痩肉率新品种猪的培育奠定理论基础。从长白猪耳样中提取总RNA，经反转录RT-PCR获得pGH基因不含终止密码子的编码序列和IGF-I基因完整的编码序列，经酶切连接克隆至pcDNA3.l(+)真核表达载体上，构建PcDNA3.l(+)-PGH-IGF-I双基因共表达载体。将其转染PK15细胞，Q-PCR检测2个目的基因在PK15细胞中的表达情况。将构建的双基因共表达载体用纳米材料包裹后转染长白猪精子，采用精子载体法制备转双基因猪。PCR及测序鉴定转双基因阳性个体，Q-PCR检测2个目的基因在转双基因猪体内的表达情况。PCR及测序鉴定追踪检测转双基因猪体内pGH和IGF-I基因的稳定情况。RT-PCR及测序结果表明，成功克隆了长白猪的pGH和IGF-I基因的编码序列。酶切和测序分析表明成功构建了双基因真核共表达载体，转染PK15细胞后，Q-PCR检测表明，pGH和IGF-I基因均在mRNA水平成功表达。母猪妊娠获得13头仔猪，经PCR及测序检测，其中4头仔猪为转双基因阳性，转双基因阳性率为30.76%。Q-PCR检测外源pGH和IGF-I基因在转双基因猪体内成功表达。1~7月龄均可检测到外源pGH和IGF-I基因，证明2个外源基因在转双基因猪体内稳定存在，并未随着生长而丢失。在转双基因公猪的精液中均能检测到2个外源基因，证明外源基因存在稳定传代的可能。 展开更多

关键词 pgh基因 IGF-I基因 共表达 转基因 长白猪

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转pGH基因猪繁殖性能及外源基因的传代

18

作者 姚延珠 刘国生 +4 位作者 吴明明 蒋亚军 戚顺民 马康 孙金海 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2160-2165,共6页

为探讨外源pGH基因对转基因猪繁殖性能的影响及其在F1代中的遗传情况,对转pGH基因长白猪与普通长白猪繁殖性能的各项指标进行了测定和比较,并对转基因猪F1代仔猪进行了外源基因的检测。结果显示,除转基因母猪F1代仔猪断奶个体质量差异显... 为探讨外源pGH基因对转基因猪繁殖性能的影响及其在F1代中的遗传情况,对转pGH基因长白猪与普通长白猪繁殖性能的各项指标进行了测定和比较,并对转基因猪F1代仔猪进行了外源基因的检测。结果显示,除转基因母猪F1代仔猪断奶个体质量差异显著(P<0.05)外,转pGH基因猪与非转基因猪繁殖性能其他指标均差异不显著;转基因公猪和转基因母猪F1代仔猪转基因阳性率分别为50.00%和47.83%,外源pGH基因对转基因猪的繁殖性能未产生显著影响,并可遗传给下一代。本研究为规范合理选育转pGH基因猪提供了理论依据,为进一步研究节粮型高瘦肉率转基因猪及其在实际生产中的应用奠定基础。 展开更多

关键词 pgh基因 转基因猪 繁殖性能

原文传递

猪pGH基因真核表达载体的构建及其表达 被引量：2

19

作者 吴明明 闫守庆 孙金海 《青岛农业大学学报（自然科学版）》 2010年第4期259-262,共4页

从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进... 从120日龄的长白猪脑垂体组织中扩增出pGH基因的cDNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-N1真核表达载体上,构建pEGFP-N1-pGH重组质粒。通过PCR扩增、酶切电泳分析和测序的方法对重组DNA进行鉴定,并将其转染PK15细胞,通过荧光素酶活性检测特异性表达强度.结果表明,成功构建了pEGFP-N1-pGH真核表达载体,为转基因猪的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 猪生长激素基因 真核表达 克隆 载体构建 转基因

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PGH类似物的一种新合成方法

20

作者 曾祎华 马兆扬 《合成化学》 CAS CSCD 1997年第A10期230-230,共1页

关键词 pgh2类似物 过氧化物 拮抗物 血栓素TXA2

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