目的:体内体外联合探讨黄芪-丹参通过调控线粒体生物发生改善环孢素A(CsA)慢性肾毒性的作用。方法:体内将雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:正常组、模型组、黄芪-丹参低剂量组、黄芪-丹参高剂量组及缬沙坦组。体外以黄芪-丹参干预CsA诱导的...目的:体内体外联合探讨黄芪-丹参通过调控线粒体生物发生改善环孢素A(CsA)慢性肾毒性的作用。方法:体内将雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:正常组、模型组、黄芪-丹参低剂量组、黄芪-丹参高剂量组及缬沙坦组。体外以黄芪-丹参干预CsA诱导的人肾小管近端上皮细胞HK-2肾毒性模型,进一步分别在体内、体外敲减PGC1-α后分为PGC1-α敲减组、PGC1-α敲减空载体组、PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组、PGC1-α敲减空载体+黄芪-丹参高剂量组,观察黄芪-丹参调控PGC1-α/Pck1/TGF-β通路稳定线粒体生物发生的作用。结果:①体内研究发现,与模型组比较,黄芪-丹参高剂量组显著回调了BUN、Scr、UACR、NAG、IL-6及M D A(P<0.01,P<0.05),改善了肾小球基底膜增厚、肾小管萎缩、肾组织凋亡及胶原沉积。与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Pck1蛋白表达下调,TGF-β1、Caspase9蛋白表达上调;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组显著改善了上述指标(P<0.05,P<0.01)。此外,与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Smad7蛋白表达量减少,COL1A1、COL3A1、FN、Smad3蛋白表达量增多;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组上述指标的表达均得到改善。②体外研究发现,CsA诱导下HK-2凋亡增加、迁移增强、线粒体数量减少,结构损伤、线粒体膜电位下降,线粒体呼吸及ATP产生障碍。黄芪-丹参干预后均有不同程度的改善。与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Pck1蛋白表达下调,TGF-β1、Caspase9蛋白表达上调,线粒体膜电位下降(P<0.05,P<0.01);与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参组显著改善了上述指标(P<0.01)。此外,与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组E-cadherin蛋白表达量减少,α-SMA蛋白表达量增多;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参组上述指标的表达均得到改善。结论:黄芪-丹参能够通过调控PGC1-α/Pck1/TGF-β通路稳定线粒体生物发生,改善肾小管上皮细胞EMT,抑制ECM沉积,保护肾功能。展开更多
文摘目的:体内体外联合探讨黄芪-丹参通过调控线粒体生物发生改善环孢素A(CsA)慢性肾毒性的作用。方法:体内将雄性C57BL/6小鼠随机分为5组:正常组、模型组、黄芪-丹参低剂量组、黄芪-丹参高剂量组及缬沙坦组。体外以黄芪-丹参干预CsA诱导的人肾小管近端上皮细胞HK-2肾毒性模型,进一步分别在体内、体外敲减PGC1-α后分为PGC1-α敲减组、PGC1-α敲减空载体组、PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组、PGC1-α敲减空载体+黄芪-丹参高剂量组,观察黄芪-丹参调控PGC1-α/Pck1/TGF-β通路稳定线粒体生物发生的作用。结果:①体内研究发现,与模型组比较,黄芪-丹参高剂量组显著回调了BUN、Scr、UACR、NAG、IL-6及M D A(P<0.01,P<0.05),改善了肾小球基底膜增厚、肾小管萎缩、肾组织凋亡及胶原沉积。与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Pck1蛋白表达下调,TGF-β1、Caspase9蛋白表达上调;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组显著改善了上述指标(P<0.05,P<0.01)。此外,与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Smad7蛋白表达量减少,COL1A1、COL3A1、FN、Smad3蛋白表达量增多;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参高剂量组上述指标的表达均得到改善。②体外研究发现,CsA诱导下HK-2凋亡增加、迁移增强、线粒体数量减少,结构损伤、线粒体膜电位下降,线粒体呼吸及ATP产生障碍。黄芪-丹参干预后均有不同程度的改善。与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组Pck1蛋白表达下调,TGF-β1、Caspase9蛋白表达上调,线粒体膜电位下降(P<0.05,P<0.01);与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参组显著改善了上述指标(P<0.01)。此外,与PGC1-α敲减空载体组比较,PGC1-α敲减组E-cadherin蛋白表达量减少,α-SMA蛋白表达量增多;与PGC1-α敲减组比较,PGC1-α敲减+黄芪-丹参组上述指标的表达均得到改善。结论:黄芪-丹参能够通过调控PGC1-α/Pck1/TGF-β通路稳定线粒体生物发生,改善肾小管上皮细胞EMT,抑制ECM沉积,保护肾功能。
