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lncRNA PFN1-AS1在奶牛乳腺上皮细胞炎症反应中的作用
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作者 虎喜敏 罗仍卓么 +2 位作者 周冉 李宇航 王兴平 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第11期5875-5887,共13页
长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)... 长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在奶牛乳腺炎中存在差异表达,但其调控奶牛乳腺炎的分子机制尚不清楚。本研究旨在探究新发现的差异表达lncRNA TCONS_00062289在奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)炎症反应中的作用。因该lncRNA的序列与肌动蛋白单体结合蛋白反义链(profilin1 antisense, PFN1-AS1)相同,将其命名为lncRNA PFN1-AS1。采用RT-PCR技术克隆lncRNA PFN1-AS1,预测lncRNA PFN1-AS1的功能。采用脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导bMECs建立炎症细胞模型,探究在炎症模型中干扰lncRNA PFN1-AS1对细胞炎症、增殖和凋亡的影响。结果显示:lncRNA PFN1-AS1长度为811 bp,可能参与调控细胞凋亡和炎症过程。lncRNA PFN1-AS1主要分布于细胞质中。在LPS诱导的bMECs炎症模型中,lncRNA PFN1-AS1表达水平显著下降(P<0.05);干扰lncRNA PFN1-AS1后,促炎细胞因子白介素(interleukin, IL)6、IL-8和IL-1β的转录和分泌水平均显著增加(P<0.05)。增殖基因细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase,CDK)2、CDK4和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达水平显著下降(P<0.05),细胞活力值和增殖率显著下降(P<0.05);凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,CASP)3、CASP8和Bcl-2相关X蛋白(bcl-2-associated X protein,BAX)的表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率极显著增加(P<0.01)。干扰lncRNA PFN1-AS1后促进了IL-6、IL-8和IL-1β的转录和蛋白分泌,促进了细胞凋亡水平,同时降低了细胞活力和增殖能力,这些结果揭示了lncRNA PFN1-AS1在bMECs炎症中的作用,为进一步探究其在奶牛乳腺炎中的作用提供了科学依据。 展开更多
关键词 奶牛乳腺上皮细胞 lncRNA pfn1-as1 脂多糖 炎症反应
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