期刊文献+
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
藏绵羊PFKM基因克隆、生物信息学及组织表达分析
1
作者 雒瑞瑞 齐兴财 +4 位作者 刘子龙 李讨讨 王彩莲 郎侠 宋淑珍 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第5期1-10,共10页
本研究旨在分析藏绵羊PFKM的序列特征、生物信息学及其在不同发育阶段(1日龄、3月龄、1岁龄和3岁龄)肌肉组织中的表达模式。以成年(3岁龄)藏绵羊的背最长肌cDNA为模板,克隆PFKM基因的编码区序列,并进行生物信息学分析。利用实时荧光定量... 本研究旨在分析藏绵羊PFKM的序列特征、生物信息学及其在不同发育阶段(1日龄、3月龄、1岁龄和3岁龄)肌肉组织中的表达模式。以成年(3岁龄)藏绵羊的背最长肌cDNA为模板,克隆PFKM基因的编码区序列,并进行生物信息学分析。利用实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测PFKM基因在背最长肌、心肌、冈上肌、肱二头肌、肺脏、肝脏、脾脏和肾脏中的表达情况,并检测不同发育阶段上述组织中PFKM mRNA表达水平的变化。同时,用Western Blot检测不同年龄阶段藏绵羊背最长肌中PFKM蛋白的表达水平。结果表明,藏绵羊PFKM基因的CDS区全长2556 bp,共编码851个氨基酸,与绵羊参考序列相比存在19个突变位点,与绵羊(98.82%)和山羊(98.59%)具有较近的亲缘关系;预测PFKM蛋白为亲水性蛋白,不存在信号肽,主要分布在细胞质中,蛋白的二级结构以α-螺旋为主,PFKM蛋白与10个糖酵解相关蛋白质分子间存在潜在的相互作用;RT-qPCR结果显示,随着年龄的增加,PFKM mRNA在藏绵羊各组织中基本呈现先上升后下降(1日龄<3月龄<1岁龄>3岁龄)的表达趋势,背最长肌中PFKM蛋白的表达也先上调后下调。本研究获得了藏绵羊PFKM基因完整的CDS区,发现其在物种间的保守性较高,并在藏绵羊肌肉生长发育过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 藏绵羊 pfkm基因 克隆 生物信息学分析 组织表达
在线阅读 下载PDF
利用CRISPR/Cas9系统构建猪PFKM基因定点突变细胞株 被引量:4
2
作者 许金蔓 徐磊 +2 位作者 彭玥晗 杨跃飞 鞠辉明 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2020年第4期36-39,共4页
肌型磷酸果糖激酶(PFKM)是作用于果糖-6-磷酸生成果糖-1,6-双磷酸的关键调节酶,在机体葡萄糖代谢、肌肉发育等多个生物过程中起关键作用。根据猪PFKM序列结构特点设计sgRNA序列并构建CRISPR/Cas9基因敲除质粒。敲除质粒转染猪PK15细胞... 肌型磷酸果糖激酶(PFKM)是作用于果糖-6-磷酸生成果糖-1,6-双磷酸的关键调节酶,在机体葡萄糖代谢、肌肉发育等多个生物过程中起关键作用。根据猪PFKM序列结构特点设计sgRNA序列并构建CRISPR/Cas9基因敲除质粒。敲除质粒转染猪PK15细胞并经嘌呤霉素筛选,极限稀释法筛选出单细胞克隆,提取各个细胞克隆DNA,利用PCR扩增敲除区域序列,通过序列测定确定是否敲除成功,利用实时荧光定量PCR及Western blot分别检测PFKM mRNA及蛋白质表达水平。结果表明:转染CRISPR/Cas9基因敲除质粒筛选到的单细胞克隆中,有2株细胞PFKM基因序列发生基因突变,其中1个克隆为碱基插入,另1个为碱基插入、替换及缺失;qRT-PCR定量检测结果表明,筛选到1株细胞PFKM mRNA表达量下降89.41%,差异极显著。Western blot检测结果表明,与正常细胞组相比,2组敲除细胞株中PFKM蛋白表达量分别下降78.77%、81.63%,差异显著。这一研究显示利用CRISPR/Cas9系统成功获得了2株PFKM基因敲除细胞株,为后续研究PFKM基因在猪肌肉发育、能量代谢及线粒体功能等方面的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 pfkm基因 CRISPR/Cas9 基因定点突变
在线阅读 下载PDF
伊犁马 PFKM 基因表达及酶活性分析 被引量:2
3
作者 王洁 孟军 +6 位作者 曾亚琦 王建文 吐尔逊江·吾木尔艾力 王川坤 袁鑫鑫 王彤亮 姚新奎 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2758-2764,共7页
【目的】测定PFKM基因在伊犁马不同组织部位中的差异表达,为该基因在伊犁马的糖酵解过程中功能提供一定基础。【方法】以伊犁马为试验动物,分别提取心脏、肝脏、夹肌、斜方肌、背阔肌、臀中肌、半腱肌以及腹外斜肌8种组织的总RNA,以伊... 【目的】测定PFKM基因在伊犁马不同组织部位中的差异表达,为该基因在伊犁马的糖酵解过程中功能提供一定基础。【方法】以伊犁马为试验动物,分别提取心脏、肝脏、夹肌、斜方肌、背阔肌、臀中肌、半腱肌以及腹外斜肌8种组织的总RNA,以伊犁马不同组织的RNA为模板,逆转录合成cDNA,GAPDH为内参基因,运用荧光定量PCR的方法检测PFKM基因mRNA在伊犁马不同组织间的相对表达量。运用酶联免疫法(Elisa)检测伊犁马不同组织中糖酵解相关酶的含量。【结果】伊犁马PFKM基因在以上8种组织部位中都有表达,在心脏中相对表达量最高,肝脏中相对表达量最低,心脏中PFKM基因mRNA相对表达量极显著高于马匹其他部位(P<0.01)。马匹心脏组织中6-磷酸果糖激酶的活性显著高于其他部位。【结论】在糖酵解途径中,PFKM基因6-磷酸果糖激酶对心脏组织的糖酵解有重要的影响。 展开更多
关键词 伊犁马 pfkm 糖酵解 6-磷酸果糖激酶 表达
在线阅读 下载PDF
Role of PFKM lactylation in glycolysis regulation in endometrial cancer cells
4
作者 Bin Wang Jian Ma Di Yang 《Genes & Diseases》 2025年第3期27-30,共4页
The incidence of endometrial cancer(EC)is increasing,particularly in high-risk cases with poor prognosis.1 Reprogramming glucose metabolism is the main feature of energy metabolism in EC cells,resulting in substantial... The incidence of endometrial cancer(EC)is increasing,particularly in high-risk cases with poor prognosis.1 Reprogramming glucose metabolism is the main feature of energy metabolism in EC cells,resulting in substantial lactate accumulation.2 Recent research indicates that the accumulation of lactic acid during the metabolic process can serve as a substrate.3 The high concentration of lactate accumulated by metabolites can promote the malignant progression of tumor cells by modifying key proteins through lactylation. 展开更多
关键词 lactic acid pfkm lactylation endometrial cancer ec reprogramming glucose metabolism glycolysis regulation metabolic process tumor cells modifying key proteins
原文传递
Linc00460通过海绵吸附影响miR-320a对乳腺癌细胞的有氧糖酵解作用
5
作者 芮一奇 邓飞 +4 位作者 王文文 许华 李晓伟 丁永斌 范姝琳 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2022年第10期1037-1042,共6页
目的探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌(BC)细胞有氧糖酵解作用的影响。方法qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平。qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶... 目的探讨Linc00460通过海绵吸附miR-320a对乳腺癌(BC)细胞有氧糖酵解作用的影响。方法qRT-PCR法检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A及5种BC细胞系中Linc00460和miR-320a表达水平。qRT-PCR检测干扰Linc00460对miR-320a表达的影响,双荧光素酶报告基因实验检测miR-320a和Linc00460的靶向关系。将si-Linc00460和miR-320a inhibitor共转染至MDA-MB-231细胞,qRT-PCR检测细胞中miR-320a表达水平;MTT法检测细胞增殖能力;2-NBDG法检测细胞葡萄糖摄取率;比色法检测细胞上清液中乳酸含量;酶活性试剂盒检测糖酵解关键酶的活性;Western blot检测酵解途径中关键蛋白表达水平。结果与MCF-10A细胞比较,5种BC细胞系中Linc00460高表达,而miR-320a低表达。干扰Linc00460后,MDA-MB-231细胞中miR-320a表达显著升高。双荧光素酶报告基因实验证实,miR-320a和Linc00460可靶向结合。干扰Linc00460表达后MDA-MB-231细胞增殖能力受到明显抑制(P=0.000),细胞葡萄糖摄取率和细胞上清液中乳酸含量降低(均P=0.000),PFK、PK和LDH酶活性受到抑制(均P=0.000),PFKM、GLUT1和LDHA蛋白表达水平下调(均P=0.000)。抑制miR-320a可明显逆转si-Linc00460对MDA-MB-231细胞增殖和糖酵解的抑制作用(均P=0.000或0.001)。结论Linc00460可能通过海绵吸附miR-320a,上调PFKM表达,从而促进BC细胞有氧糖酵解作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 Linc00460 miR-320a 糖酵解 肌肉磷酸果糖激酶
暂未订购
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部