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猪流行性腹泻病毒、猪肠道病毒9型及猪嵴病毒三重RT-PCR检测方法建立及初步应用 被引量:9
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作者 任玉鹏 张斌 +1 位作者 岳华 刘燕 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期603-608,共6页
旨在建立一种同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪肠道病毒9型(PEV-9)、猪嵴病毒(PKV)的三重RT-PCR法,并初步应用于临床样品检测。根据GenBank中PEDV和PKV基因序列保守区设计2对引物,参照文献合成1对PEV-9引物,在同一体系进行RT-PCR扩增... 旨在建立一种同时检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪肠道病毒9型(PEV-9)、猪嵴病毒(PKV)的三重RT-PCR法,并初步应用于临床样品检测。根据GenBank中PEDV和PKV基因序列保守区设计2对引物,参照文献合成1对PEV-9引物,在同一体系进行RT-PCR扩增,对引物浓度、退火温度、灵敏度、特异性等进行优化,应用该法对采自四川省6个猪场46份样品进行检测。结果表明引物量分别为PEDV 0.5μL、PEV-9 0.25μL、PKV0.25μL,退火温度为55℃时扩增效果最理想;本方法最低检测量分别为PEDV 5.97pg、PEV-9 0.11pg、PKV0.74pg;用该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒、猪萨佩罗病毒、猪博卡病毒、猪环曲病毒、猪源大肠杆菌、猪源沙门菌、副猪嗜血杆菌、猪链球菌和空肠弯曲杆菌等病原进行RT-PCR扩增时,均无非特异性扩增条带出现。对46份腹泻样品的检测结果显示,PEDV感染率为76.1%、PEV-9为73.9%、PKV为39.1%,3种病原在同一样本检出率达29.1%,表明存在混合感染或协同致病的可能;与单项RT-PCR法相比,阳性样本的检出符合率均在91%以上,表明该方法具较高可信度。建立的方法可快速、准确地检测3种猪腹泻病毒性病原,为病原学诊断和分子流行病学调查提供了有效技术支持。 展开更多
关键词 多重RT-PCR PEDV pev-9 PKV 检测
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福建省厦门市猪场15种腹泻相关病毒感染情况调查
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作者 彭小莉 赵冉 +9 位作者 戴丽丽 许秋贝 陈琼 王仍瑞 陈雅婷 石文志 孔繁德 蔡振鸿 刘捷 李宏 《中国动物检疫》 2026年第4期25-31,共7页
为了解福建省厦门市猪场腹泻相关病毒感染情况,2023年8—9月及2024年12月,从49家猪场采集腹泻猪粪便样品75份,采用15种猪腹泻相关病毒多重核酸鉴别检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)进行病原检测。结果显示:在全部75份样品中检出12种腹泻... 为了解福建省厦门市猪场腹泻相关病毒感染情况,2023年8—9月及2024年12月,从49家猪场采集腹泻猪粪便样品75份,采用15种猪腹泻相关病毒多重核酸鉴别检测试剂盒(荧光PCR熔解曲线法)进行病原检测。结果显示:在全部75份样品中检出12种腹泻相关病毒;阳性率最高的为猪博卡病毒(PBoV),高达86.7%;其次为猪捷申病毒(PTV)、猪肠道病毒9型(PEV-9)、猪嵴病毒(PKV)、猪萨佩罗病毒(PSV)、猪札幌病毒(PSaV)、猪星状病毒Ⅰ型(PAstV Ⅰ)和猪轮状病毒A(PoRVA),阳性率均高于50.0%;在所有样品中均未检出猪肠道阿尔法冠状病毒(PEAV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒B(PoRVB)。2023年8—9月以PEV-9与PBoV混合检出为主,而2024年-12月则以PBoV、PTV和PSV混合检出为主,单一样品中同时检出4种及以上病毒的超过90.0%。结果表明:厦门市猪场中腹泻相关病毒流行严重,病毒种类复杂,且混合流行状况突出。建议加强腹泻相关病毒的监测与控制,深入排查猪群中的隐性带毒情况,为猪群腹泻的精准防控提供依据。 展开更多
关键词 猪腹泻 病毒性腹泻 感染调查 猪捷申病毒 猪嵴病毒 猪博卡病毒 猪肠道病毒9
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