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PEP-PCR法及其在法医学中应用的可行性研究 被引量：3
1
作者 郑秀芬 叶健 +2 位作者 吉冈尚文 季安全 进藤祥子 《中国法医学杂志》 CSCD 2000年第1期18-21,共4页
提高微量检材的利用率 ,建立PEP方法并对其法医学应用进行可行性研究。用 15个随机寡核苷酸的序列作为引物 ,低特异性下扩增出微量DNA ,以此扩增物作为模扳 ,进行特异基因座扩增。经PMCT118,GABAR ,DYS19,D18S849,D3S1744,D12S10 90 ,D8... 提高微量检材的利用率 ,建立PEP方法并对其法医学应用进行可行性研究。用 15个随机寡核苷酸的序列作为引物 ,低特异性下扩增出微量DNA ,以此扩增物作为模扳 ,进行特异基因座扩增。经PMCT118,GABAR ,DYS19,D18S849,D3S1744,D12S10 90 ,D8S1179,D2 1S11,D18S5 1,D5S818,D13S3 17,D7S82 0 ,D3S13 5 8,vWA ,FGA ,TH0 1,CSF1PO ,TPOX ,D16S5 3 9及Amelogene等 2 0个基因座的PEP PCR与直接的PCR分析比较 ,二者分型结果一致 ,即使 1ngDNA也能得到正确分型。PEP方法可用于法医学检验 ,有利于微量物证的利用 。 展开更多
关键词 PEP pep-pcr 法医学 应用
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黑曲霉W3350脯氨酰内肽酶在大肠杆菌中的表达 被引量：2
2
作者 周丽娜 张鹭 +2 位作者 路福平 王晓娟 杨剑芳 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第2期15-17,共3页
目的:构建pET-PEP重组原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法:采用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)W3350中扩增出脯氨酰内肽酶(PEP)的基因,插入表达载体pET-22b(+),经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和DNA序列测定验证,将正确的重组质... 目的:构建pET-PEP重组原核表达载体,并对表达产物进行鉴定。方法:采用RT-PCR技术从黑曲霉(Aspergillus niger)W3350中扩增出脯氨酰内肽酶(PEP)的基因,插入表达载体pET-22b(+),经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和DNA序列测定验证,将正确的重组质粒转入大肠杆茵BL21(DE3)中,IPTG(终浓度1mmol/L)诱导获得表达。结果:表达产物进行超声破碎,经SDS-PAGE电泳检测,PEP分子质量大约为57kDa,与理论值相符,通过酶活方法测定脯氨酰内肽酶酶活为0.656U/ml,约是出发菌株的5倍。结论:首次成功构建表达载体pET-PEP并在原核细胞中表达,为进一步研究PEP的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 RT-PCR 黑曲霉 脯氨酰内肽酶 基因表达
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一起一犬伤13人狂犬病暴露事件的综合处置及效果评价 被引量：10
3
作者 李幸乐 李凤丽 +3 位作者 周瑞清 普海燕 黄学勇 许汴利 《河南预防医学杂志》 2017年第1期4-7,共4页
目的综合处置一起一犬伤13人的狂犬病暴露事件,评价预防处置措施效果,为规范化处置一犬伤多人事件提供依据。方法根据《狂犬病暴露后预防处置工作规范(2009版)》对一犬伤13人事件中的13人进行伤口清洗、狂犬病疫苗和/或狂犬病免疫球蛋... 目的综合处置一起一犬伤13人的狂犬病暴露事件,评价预防处置措施效果,为规范化处置一犬伤多人事件提供依据。方法根据《狂犬病暴露后预防处置工作规范(2009版)》对一犬伤13人事件中的13人进行伤口清洗、狂犬病疫苗和/或狂犬病免疫球蛋白接种;分别采用RT-PCR方法和RFFIT方法进行伤人犬的实验室诊断和狂犬病暴露后处置人群免疫效果评价。结果伤人犬被打死、焚烧后深埋处理。犬脑组织标本经RT-PCR检测狂犬病病毒N、L基因均有特异性条带出现。13例伤者均为Ⅲ级暴露,均在24 h内主动至当地狂犬病预防处置门诊进行暴露后预防处置,其全程免疫后第15 d的血清抗狂犬病病毒中和抗体水平均>0.5 IU/mL。结论伤人犬为狂犬病病犬,13例狂犬病暴露后免疫人群全程免疫后血清中和抗体均达到保护性水平。及时、有效的多部门合作对一犬伤多人事件的处置具有积极意义。 展开更多
关键词 一犬伤多人 暴露后免疫 RT—PCR RFFIT
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甘蓝型油菜PEP基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建及转基因油菜的获得 被引量：3
4
作者 张燕 刘桂珍 +1 位作者 陈正华 安黎哲 《激光生物学报》 CAS CSCD 2007年第3期315-321,348,共8页
丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制PEP基因的表达,可提高种子的含油量。本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,并与载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,通... 丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制PEP基因的表达,可提高种子的含油量。本研究利用PCR法从甘蓝型油菜花油5号(H045)克隆了PEP基因片段,并与载体pBI121-B构建了反义PEP基因的种子特异性植物表达载体,通过激光微束穿刺法将其转化到甘蓝型油菜中,目前已获得了转基因植株。 展开更多
关键词 丙酮酸羧化酶 反义PEP PCR 种子特异性表达载体 激光微束穿刺法
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单细胞PCR技术的研究进展
5
作者 吴国华 朱宝长 《生物学杂志》 CAS CSCD 2002年第6期7-8,共2页
快速、准确、敏感和可靠的单细胞PCR技术是开展法医学、古微生物学、种植前遗传学诊断 (PGD)等的前提。综述一些常用的单细胞PCR策略 ,并对这些技术的研究进展作一些介绍。
关键词 单细胞 PCR技术 研究进展 引物延伸预扩增
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湖羊消化道各段T1R1、T1R3及PepT1基因表达水平的分析 被引量：5
6
作者 张吉顺 刘念 +4 位作者 谈姣嫣 张春雷 房兴堂 李勇 李忠昌 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第2期51-56,共6页
为分析T1R1(味觉受体1家族Ⅰ型)、T1R3(味觉受体1家族Ⅲ型)及PepT1(Ⅰ型寡肽转运载体)基因对湖羊氨基酸吸收的影响,以6月龄的湖羊为试验材料,采用荧光定量PCR技术对湖羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠... 为分析T1R1(味觉受体1家族Ⅰ型)、T1R3(味觉受体1家族Ⅲ型)及PepT1(Ⅰ型寡肽转运载体)基因对湖羊氨基酸吸收的影响,以6月龄的湖羊为试验材料,采用荧光定量PCR技术对湖羊瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠的T1R1、T1R3和PepT1基因的表达量进行相对定量分析。结果表明:T1R1和T1R3基因在检测的各段组织中均有表达,而PepT1基因在结肠中不表达;其中T1R1和T1R3基因在十二指肠中表达量最高,其次是空肠,并且两者差异显著极显著(P<0.01);T1R1和T1R3基因在十二指肠(P<0.01)和空肠(P<0.05)中的表达量与消化道其他部位相比差异极显著或显著;Pep T1基因在空肠中表达量最高,其次是回肠,并且两者差异极显著(P<0.01);Pep T1基因在空肠和回肠中的表达量与消化道其他部位相比差异极显著(P<0.01)。该结果为进一步研究T1R1、T1R3和Pep T1基因对湖羊氨基酸吸收相关功能影响奠定基础。 展开更多
关键词 湖羊 T1R1 T1R3 PepT1 MRNA表达量 荧光定量PCR
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