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pemt2-cDNA的转染抑制大鼠CBRH-7919肝癌细胞c-Met及Bcl-2的表达并诱发凋亡 被引量:6
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作者 邹伟 李兆育 +3 位作者 李亚丽 马克里 夏泉 崔肇春 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期661-665,共5页
为探讨磷脂酰乙醇胺 N 甲基转移酶 2 (phosphatidylethanolamine N methyltransferase 2 ,PEMT2 )的转染抑制大鼠肝癌CBRH 7919细胞增殖的分子机理 ,构建了带有完整的pemt2 cDNA基因质粒载体 ,经转染和鉴定 ,确知其在大鼠肝癌细胞系CB... 为探讨磷脂酰乙醇胺 N 甲基转移酶 2 (phosphatidylethanolamine N methyltransferase 2 ,PEMT2 )的转染抑制大鼠肝癌CBRH 7919细胞增殖的分子机理 ,构建了带有完整的pemt2 cDNA基因质粒载体 ,经转染和鉴定 ,确知其在大鼠肝癌细胞系CBRH 7919细胞中稳定高表达 .用细胞培养、免疫细胞化学、Western印迹、流式细胞仪和琼脂糖凝胶电泳等技术研究c Met(HGF的受体 )及抗凋亡蛋白Bcl 2在此过程中的表达和是否诱发凋亡 .免疫组织化学及Western印迹分析显示在转染高表达细胞中 ,c Met及Bcl 2的表达下调 .流式细胞仪分析表明 ,在转染pemt2 cDNA的高表达细胞中 ,G1期细胞增加 ,S期细胞减少 ,并在G0 期出现一个凋亡峰 .琼脂糖凝胶电泳谱显示梯状条带 .结果表明 :pemt2的转染可使大鼠肝癌细胞的c Met及Bcl 2的表达下调 ,并发生凋亡 . 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶-2 pemt2 磷脂酰胆碱 肝癌细胞 凋亡 C-MET Bcl-2 转染 表达抑制
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PEMT2过表达抑制大鼠肝癌细胞PI3K,Akt的表达 被引量:1
2
作者 李亚丽 邹伟 +2 位作者 马克里 夏泉 崔肇春 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第4期345-349,共5页
为探讨磷脂酰乙醇胺 N 甲基转移酶 2 (PEMT2 )过表达抑制大鼠肝癌细胞增殖的机制 ,构建了PEMT2高表达细胞克隆 ,并采用半定量RT PCR、免疫细胞化学及流式细胞仪技术 ,研究了PEMT2过表达对PI3K/Akt信号转导途径的影响 .实验结果显示 ,PE... 为探讨磷脂酰乙醇胺 N 甲基转移酶 2 (PEMT2 )过表达抑制大鼠肝癌细胞增殖的机制 ,构建了PEMT2高表达细胞克隆 ,并采用半定量RT PCR、免疫细胞化学及流式细胞仪技术 ,研究了PEMT2过表达对PI3K/Akt信号转导途径的影响 .实验结果显示 ,PEMT2过表达可抑制细胞PI3K和Akt的表达 ,并诱导细胞凋亡 .这一结果提示 ,PI3K/Akt信号转导途径下调可能是PEMT2抑制肝癌细胞增殖的部分机制 . 展开更多
关键词 磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2 pemt2 磷脂酰肌醇-3-激酶 大鼠 肝癌细胞 AKT 蛋白激酶B 凋亡
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磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2的表达抑制大鼠CBRH-7919肝癌细胞的增殖 被引量:4
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作者 邹伟 李兆育 +1 位作者 李亚丽 崔肇春 《辽宁师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2000年第2期158-162,共5页
利用磷酸钙沉淀法将重组的质粒 p CMV5 -pemt2与 p SV-neo共转染 ,经 G418筛选 ,免疫细胞化学和免疫印迹法检测蛋白表达 ,[3 H] -SAM掺入测定酶的活性 ,获得稳定表达 PEMT2的阳性克隆 .经台盼蓝排阻法测生长曲线 ,流式细胞仪测定细胞周... 利用磷酸钙沉淀法将重组的质粒 p CMV5 -pemt2与 p SV-neo共转染 ,经 G418筛选 ,免疫细胞化学和免疫印迹法检测蛋白表达 ,[3 H] -SAM掺入测定酶的活性 ,获得稳定表达 PEMT2的阳性克隆 .经台盼蓝排阻法测生长曲线 ,流式细胞仪测定细胞周期 ,MTT 法检测细胞生长抑制率 .观察了磷脂酰乙醇胺 N-甲基转移酶 2( phosphatidylethanolam ine N -m ethyltransferase 2 ,PEMT2 )的表达对大鼠甲胎蛋白阳性 ( AFP+ )肝癌细胞系 CBRH-7919增殖的影响 .结果表明 :PEMT2在 CBRH-7919肝癌细胞中已成功表达 ,细胞的增殖能力下降 ,S期明显减少 ,AFP含量减少 .说明 PEMT2的表达可明显抑制大鼠 CBRH -7919肝癌细胞的生长 . 展开更多
关键词 抑癌基因 肝癌细胞 增殖 PEMTZ 抑制
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