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病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)在豌豆基因功能研究中的应用 被引量：1
1
作者 徐雷 姜波 《安徽农业科学》 CAS 2013年第29期11612-11614,共3页
病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)是近年发展起来的一种通过抑制基因转录研究植物基因功能的快速方法,豌豆早褐病毒(PEBV)的VIGS技术已经被成功的应用于豌豆发育调控基因功能的研究。该文在概述VIGS原理研究进展的基础上,对基于PEBV的VIGS... 病毒诱导的基因沉默技术(VIGS)是近年发展起来的一种通过抑制基因转录研究植物基因功能的快速方法,豌豆早褐病毒(PEBV)的VIGS技术已经被成功的应用于豌豆发育调控基因功能的研究。该文在概述VIGS原理研究进展的基础上,对基于PEBV的VIGS技术流程进行总结,并提出改善其缺陷的方法和合理的数据分析处理方式,认为基因的沉默效率与基因在调控网络中的位置,上下游基因的影响及基因间的功能冗余有关。 展开更多
关键词 VIGS pebv 豌豆 基因功能
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利用农杆菌侵染新技术在豌豆中瞬时表达ha FGF 被引量：9
2
作者 杨丽萍 金太成 周晓馥 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期71-75,共5页
采用一种操作简单的侵染方法,通过豌豆种子吸收携带病毒载体PEBV的农杆菌菌液进行ha FGF蛋白的表达,并采用半定量RT-PCR、Western blotting和考马斯亮蓝法对蛋白表达的结果进行定量分析。结果表明,利用来源于PEBV的病毒载体在豌豆(Pisum... 采用一种操作简单的侵染方法,通过豌豆种子吸收携带病毒载体PEBV的农杆菌菌液进行ha FGF蛋白的表达,并采用半定量RT-PCR、Western blotting和考马斯亮蓝法对蛋白表达的结果进行定量分析。结果表明,利用来源于PEBV的病毒载体在豌豆(Pisum sativumL.)中成功表达了GFP和ha FGF蛋白,对菌液浓度等条件的优化显著提高了GFP的表达效率,植物中药用蛋白ha FGF的表达水平占总可溶性蛋白的2.6%。该瞬时表达体系具有独特优势,如简便、高效、表达稳定,在生产药用蛋白方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 人酸性成纤维细胞生长因子 种子吸收法 豌豆早褐病毒 绿色荧光蛋白
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豌豆AGAMOUS同源基因功能的初步研究 被引量：5
3
作者 徐雷 宋伟杰 王利琳 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第20期3207-3212,共6页
豌豆是研究植物发育遗传的经典模式植物.虽然已经克隆到了一些与豌豆花发育有关的基因,但是由于豌豆基因组大、序列信息少以及缺少有效的遗传转化方法,豌豆花发育研究的发展受到了限制.病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing... 豌豆是研究植物发育遗传的经典模式植物.虽然已经克隆到了一些与豌豆花发育有关的基因,但是由于豌豆基因组大、序列信息少以及缺少有效的遗传转化方法,豌豆花发育研究的发展受到了限制.病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法.本文利用基于豌豆早褐病毒(pea early browning virus,PEBV)的VIGS体系研究了豌豆中AGAMOUS同源基因(Pisum sativum AGAMOUS homologous genes,PsAGs)的功能.在PsAGs沉默之后,豌豆花表现为雄蕊花瓣化,心皮开裂,内生出一朵不完整的花.半定量RT-PCR分析结果显示,在沉默植株中PsAGs的mRNA转录水平显著下降.mRNA原位杂交结果显示,花发育早期,PsAG基因在花原基中央表达,后期在第三、四轮花器官中表达,表明在豌豆有多个AGAMOUS同源基因.实验结果表明,豌豆中可能存在多个AGAMOUS同源基因,彼此间功能冗余且相对保守,同时暗示着在对基因家族成员进行功能研究时,VIGS是有效手段之一. 展开更多
关键词 豌豆 花 VIGS AGAMOUS pebv
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利用病毒诱导的基因沉默技术研究一个豌豆PI同源基因的功能 被引量：4
4
作者 宋伟杰 王峥 王利琳 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第14期1644-1648,共5页
在植物发育生物学研究中,对很多非模式植物基因功能的研究总是因为缺乏快速有效的方法而受到限制.病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法.本研究利用一种... 在植物发育生物学研究中,对很多非模式植物基因功能的研究总是因为缺乏快速有效的方法而受到限制.病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS)技术是近年来发展起来的一种反向遗传学快速研究基因功能的方法.本研究利用一种基于PEBV(pea early browning virus)的VIGS体系研究了豌豆PsPI基因的功能.豌豆在其PsPI基因沉默后出现了类似于拟南芥pi突变体/金鱼草glo突变体的表型,导致花瓣向萼片以及雄蕊向心皮转变.半定量RT-PCR分析发现,在VIGS-PsPI沉默植株花苞中,PsPI基因的mRNA水平显著下降.mRNA原位杂交结果显示,PsPI基因早期在起始共同原基的部位表达,后期在花器官第二、三轮表达.本研究结果证明了PsPI基因具有拟南芥PI/金鱼草GLO同源基因的功能,说明这类基因在进化和功能上是相当保守的,同时也表明VIGS是一种研究植物基因功能的快速有效的方法,特别是对于那些转化困难的非模式植物基因功能的研究具有更为重要的意义. 展开更多
关键词 豌豆 病毒诱导的基因沉默(VIGS) pebv PsPI基因 同源异型转变
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