目的 :研究成石饲料对小鼠肝脏脂质代谢相关基因表达的影响,以及PDZK1(PDZ domain-containing 1)的表达对B族Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor B type 1,SRB1)的调节作用。方法:以成石饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠,观察肝脏基因表达的影...目的 :研究成石饲料对小鼠肝脏脂质代谢相关基因表达的影响,以及PDZK1(PDZ domain-containing 1)的表达对B族Ⅰ型清道夫受体(scavenger receptor B type 1,SRB1)的调节作用。方法:以成石饲料喂养C57BL/6J雄性小鼠,观察肝脏基因表达的影响。分别构建小鼠PDZK1基因过表达慢病毒载体和Si RNA干扰腺病毒载体,并以成石饲料喂养C57BL/6J小鼠。分别采用实时定量PCR检测小鼠肝脏脂质代谢相关基因的m RNA表达,Western印迹法检测肝脏PDZK1及SRB1的蛋白质表达。结果:成石饲料喂养4周后,小鼠肝脏胆固醇合成关键酶3-羟基-3甲基戊二酰辅酶A还原酶基因表达显著增加(P<0.01)、胆汁酸合成关键酶胆固醇7α-羟化酶基因表达显著下降(P<0.001);PDZK1基因的表达显著抑制,SRB1基因表达相应降低(P<0.001)。PDZK1过表达慢病毒载体经腹腔注射成石饲料喂养的小鼠,4周后肝脏PDZK1蛋白表达增加37%(P<0.01),SRB1在总蛋白的表达量未改变,但在膜蛋白中表达增加136%(P<0.05)。将PDZK1的Si RNA腺病毒载体经腹腔注射成石饲料喂养的小鼠,2周后肝脏PDZK1蛋白的表达量降低49%(P<0.05),SRB1在总蛋白中表达增加60%(P<0.05),但在膜蛋白中的表达则下降14%。结论:成石饲料影响小鼠肝脏脂质代谢相关基因的表达。SRB1表达降低可能与PDZK1的抑制有关。干预小鼠肝脏PDZK1的表达会影响SRB1在肝细胞膜上的表达。展开更多
目的应用微阵列比较基因组杂交技术探讨胎儿先天性泌尿系统畸形的遗传学病因。方法选取32例经产前超声检查提示发生不同程度泌尿系统畸形并且常规G显带核型分析方法未发现异常的胎儿病例及其父母的DNA，按照标准的Affymetri xcytogenet...目的应用微阵列比较基因组杂交技术探讨胎儿先天性泌尿系统畸形的遗传学病因。方法选取32例经产前超声检查提示发生不同程度泌尿系统畸形并且常规G显带核型分析方法未发现异常的胎儿病例及其父母的DNA，按照标准的Affymetri xcytogenetic2．7M芯片的操作手册进行杂交、洗涤及全基因组扫描，应用配套的CHAS软件分析结果。结果微阵列比较基因组杂交技术检测发现9例胎儿基因组发生了不平衡的拷贝数变异（copy number variations，CNVs），检出率为28％。其中4例CNVs遗传自亲代（12．5％）；2例CNVs在相关数据库中提示在正常人基因组中存在（6％）；3例是新发的致病性CNVs（9％），并且这3例胎儿样本均发生了染色体1q21．1微缺失和微重复，异常片段内包含与泌尿生殖系统功能密切相关的PDZK1基因。结论先天性泌尿系统畸形胎儿基因组发生不平衡畸变的几率约为28％，其中致病性的基因组不平衡异常约占9％。染色体lq21．1区带DNA拷贝数改变是导致先天性泌尿系统畸形的病因之一，其致病机制可能与PDZK1基因的异常表达有关。展开更多
基金Supported by Guangdong Natural Science Foundation(No.S2012010008170)Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education(No.20120001120096)National Basic Research Program of China(973 Program,No.2014CB910200)~~
文摘目的应用微阵列比较基因组杂交技术探讨胎儿先天性泌尿系统畸形的遗传学病因。方法选取32例经产前超声检查提示发生不同程度泌尿系统畸形并且常规G显带核型分析方法未发现异常的胎儿病例及其父母的DNA，按照标准的Affymetri xcytogenetic2．7M芯片的操作手册进行杂交、洗涤及全基因组扫描，应用配套的CHAS软件分析结果。结果微阵列比较基因组杂交技术检测发现9例胎儿基因组发生了不平衡的拷贝数变异（copy number variations，CNVs），检出率为28％。其中4例CNVs遗传自亲代（12．5％）；2例CNVs在相关数据库中提示在正常人基因组中存在（6％）；3例是新发的致病性CNVs（9％），并且这3例胎儿样本均发生了染色体1q21．1微缺失和微重复，异常片段内包含与泌尿生殖系统功能密切相关的PDZK1基因。结论先天性泌尿系统畸形胎儿基因组发生不平衡畸变的几率约为28％，其中致病性的基因组不平衡异常约占9％。染色体lq21．1区带DNA拷贝数改变是导致先天性泌尿系统畸形的病因之一，其致病机制可能与PDZK1基因的异常表达有关。
