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左归丸调节Pdx1路径改善妊娠期糖尿病模型大鼠子代胰腺内分泌发育 被引量：1
1
作者 梁晚秋 陈让 +3 位作者 赵乐 任晓怡 苏倩慧 王永辉 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第18期10-19,共10页
目的:通过观察左归丸对妊娠期糖尿病(GDM)模型子代胰腺发育不同阶段关键调控因子表达的影响,探讨左归丸改善GDM模型子代胰腺发育的作用机制。方法:将Wistar孕鼠随机分为空白组、模型组、地特胰岛素组(20 U·kg^(-1))、左归丸组(1.89... 目的:通过观察左归丸对妊娠期糖尿病(GDM)模型子代胰腺发育不同阶段关键调控因子表达的影响,探讨左归丸改善GDM模型子代胰腺发育的作用机制。方法:将Wistar孕鼠随机分为空白组、模型组、地特胰岛素组(20 U·kg^(-1))、左归丸组(1.89 g·kg^(-1)),每组18只。除空白组外,其余孕鼠于胚胎期6.5 d(E6.5d)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导GDM,空白组予等体积柠檬酸钠缓冲液,通过测定孕鼠血糖判断是否造模成功。除空白组和模型组外,其余组孕鼠于E9.5d给药至分娩。监测孕鼠的随机血糖,于E12.5d、E18.5d和子鼠出生21 d(B21d)测量胚胎和子鼠体长并称体质量;计算B21d子鼠Lee's指数。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测B22d子鼠空腹胰岛素水平(FINS)并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。检测E18.5d孕鼠和B22d子鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)。苏木素-伊红(HE)染色观察E12.5d、E18.5d和B22d子鼠胰腺的病理变化。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测E12.5d胚胎胰腺中胰腺十二指肠同源盒1(Pdx1)、胰腺特异性转录因子1a(Ptf1a)、性别决定区Y框蛋白9(Sox9),E18.5d胚胎胰腺中Pdx1、Nkx2同源框2(Nkx2.2)、发状分裂相关增强子1(Hes1),B22d子鼠胰腺中Pdx1、肌腱膜纤维肉瘤癌基因同源物A(Mafa)、NK转录因子相关同源盒基因家族6基因座位1(Nkx6.1)表达。结果:与空白组比较,模型组孕鼠B0d、E9.5d、E12.5d、E15.5d、E18.5d血糖升高(P<0.05,P<0.01);模型组子代体质量、体长降低(P<0.01),Lee's指数升高;B22d子鼠FBG、FINS水平和HOMA-IR升高(P<0.01),AST、TG升高(P<0.01),HDL降低(P<0.01),胰腺腺泡细胞水肿疏松;E18.5d孕鼠ALT、AST、TG升高(P<0.05,P<0.01),HDL降低(P<0.05);E12.5d胚胎胰腺中Pdx1、Sox9、Ptf1a蛋白表达升高(P<0.01),E18.5d胚胎胰腺中Pdx1、Nkx2.2、Hes1蛋白表达降低(P<0.01),B22d子鼠胰腺中Pdx1、Nkx6.1、Mafa蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,胰岛素组孕鼠B0d、E15.5d、E18.5d血糖降低(P<0.05,P<0.01);各治疗组子代体质量、体长升高(P<0.01),Lee's指数降低;B22d子鼠胰岛素组FBG、FINS水平和HOMA-IR降低(P<0.01),左归丸组FBG水平和HOMA-IR降低(P<0.01);B22d子鼠各治疗组ALT、AST、TBIL、CHO、TG、LDL降低,HDL升高,胰腺腺泡细胞水肿减轻;E18.5d孕鼠胰岛素组TG、ALT降低(P<0.05,P<0.01),HDL升高(P<0.05);胰岛素组E12.5d胚胎胰腺中Pdx1、Sox9蛋白表达降低(P<0.05),Ptf1a蛋白表达升高(P<0.05),左归丸组E12.5d胚胎胰腺中Pdx1、Sox9、Ptf1a蛋白表达降低(P<0.01);各治疗组E18.5d胚胎胰腺中Pdx1、Nkx2.2、Hes1蛋白表达升高(P<0.01),B22d子鼠胰腺中Pdx1、Nkx6.1、Mafa蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论:左归丸能促进GDM模型子代生长发育,有效改善胰腺病理形态,其作用机制可能与调节子代胰腺发育不同时期Pdx1路径相关调控因子的表达有关。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 胰腺十二指肠同源盒1(pdx1) 胚胎发育 胰腺 左归丸
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非肌层浸润性膀胱癌PDX/PDXO配对模型的构建及鉴定
2
作者 彭世波 杨登峰 +6 位作者 龚燕飞 龚晓林 王昌辉 张郭娟 何可文 崔钰 谢良凯 《临床泌尿外科杂志》 2025年第9期806-810,共5页
目的构建非肌层浸润性膀胱癌PDX/PDXO配对模型,并鉴定其与来源患者肿瘤组织的一致性。方法利用NMIBC患者手术切除的肿瘤组织,接种到免疫缺陷小鼠体内构建PDX模型,再利用PDX模型荷瘤小鼠肿瘤组织进行酶解和基质胶包埋构建配对的PDXO模型... 目的构建非肌层浸润性膀胱癌PDX/PDXO配对模型,并鉴定其与来源患者肿瘤组织的一致性。方法利用NMIBC患者手术切除的肿瘤组织,接种到免疫缺陷小鼠体内构建PDX模型,再利用PDX模型荷瘤小鼠肿瘤组织进行酶解和基质胶包埋构建配对的PDXO模型。通过苏木精-伊红染色、免疫组织化学等技术手段对PDX和PDXO模型进行鉴定,评估其对与来源患者肿瘤组织的一致性。结果成功构建了3例PDX/PDXO配对模型,PDX/PDXO配对模型保留了来源患者肿瘤组织的异质性、微环境和蛋白表达谱。结论PDX/PDXO配对模型为NMIBC的研究治疗及新药研发提供了贴近临床的研究新工具,有助于推动精准医学和药物的研发进程。 展开更多
关键词 非肌层浸润性膀胱癌 患者来源异种移植 pdx衍生类器官 肿瘤异质性 肿瘤微环境
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PDX模型在肿瘤转移研究中的应用与展望
3
作者 祝欣萍 吕昌莲 +1 位作者 贾迪 赵炜明 《现代肿瘤医学》 2025年第1期109-114,共6页
人源性肿瘤异种移植(PDX)模型是将患者体内的肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠体内而建立的动物模型。该模型具有保留肿瘤的原始特征、保留肿瘤微环境和肿瘤异质性、与患者的临床反应高度相关等优势,是研究肿瘤转移机制和抗肿瘤转移治疗的理... 人源性肿瘤异种移植(PDX)模型是将患者体内的肿瘤组织移植到免疫缺陷小鼠体内而建立的动物模型。该模型具有保留肿瘤的原始特征、保留肿瘤微环境和肿瘤异质性、与患者的临床反应高度相关等优势,是研究肿瘤转移机制和抗肿瘤转移治疗的理想动物模型。该文探讨了PDX模型在肿瘤转移机制研究中的作用,并对PDX模型在肿瘤转移研究中的应用现状、发展前景及局限性进行综述。 展开更多
关键词 pdx模型 免疫缺陷小鼠 肿瘤转移
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基于PDX模型进行癌症诊疗的进展 被引量：1
4
作者 胡可馨 李梦玮 +1 位作者 徐寒梅 胡加亮 《药物生物技术》 CAS 2022年第5期528-532,共5页
肿瘤异质性是当前癌症研究中不可忽视的重要因素,精准医学为此提供了新的解决方法。随着多组学、基因组学、转录组学、代谢组学等信息统计及数据分析技术的发展,特别是直接进行原代肿瘤移植的人源肿瘤组织异种移植模型(Patient-derived ... 肿瘤异质性是当前癌症研究中不可忽视的重要因素,精准医学为此提供了新的解决方法。随着多组学、基因组学、转录组学、代谢组学等信息统计及数据分析技术的发展,特别是直接进行原代肿瘤移植的人源肿瘤组织异种移植模型(Patient-derived xenograft,PDX)被广泛应用,为肿瘤患者的精准治疗奠定了基础。文章综述了PDX相关的进展,以及目前主要的PDX数据库资源共享平台,希望可以为肿瘤研究提供参考。 展开更多
关键词 pdx模型 精准医学 肿瘤异质性 个性化治疗 免疫缺陷鼠 pdx数据库
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PDX模型在肿瘤医学中的应用进展 被引量：5
5
作者 马双平 马静 +1 位作者 张洁 张俊河 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期245-250,共6页
癌症威胁着全球人类的生命和健康,其发病率和死亡率仅次于心血管疾病,一直是人们关注的焦点。良好的动物模型不仅可用于研究癌症的发生发展和生物学机制,还可用于抗癌药物的筛选和基因治疗。近年来,患者来源的异种移植(patient-derived ... 癌症威胁着全球人类的生命和健康,其发病率和死亡率仅次于心血管疾病,一直是人们关注的焦点。良好的动物模型不仅可用于研究癌症的发生发展和生物学机制,还可用于抗癌药物的筛选和基因治疗。近年来,患者来源的异种移植(patient-derived xenograft, PDX)模型因其能够保留原发肿瘤的微环境和组织学特性而成为研究热点。对PDX动物模型的建模方法以及在肿瘤医学中的应用进行归纳总结,并分析其局限性,以期为PDX模型在肿瘤治疗领域中的应用提供重要参考。 展开更多
关键词 pdx模型 肿瘤医学 精准医学 药物筛选
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基于PRO/E及PDX的连续冲裁模设计方法 被引量：5
6
作者 厉成龙 葛正浩 +1 位作者 丁英杰 梁江波 《机械设计与制造》 北大核心 2007年第10期189-190,共2页
介绍了Pro/E软件中"连续模设计系统Progressive Die Extension(PDX)"在连续冲裁模设计中的应用。并结合实例说明了利用PDX设计连续冲裁模的过程。
关键词 PRO/E pdx 连续冲裁模
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PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用 被引量：4
7
作者 杨川 程桦 +3 位作者 王川 严励 黎锋 魏菁 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期409-412,共4页
【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检... 【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。 展开更多
关键词 胰岛素分泌细胞 pdx-1 成肌细胞株 分化 C2C12细胞 GLP-1 RT-PCR检测 胰腺十二指肠 胰高血糖素 流式细胞仪 免疫法检测 胰岛素含量 mol/L 胰岛素浓度 分泌胰岛素 不同浓度 细胞表达 瞬时转染 培养基 阳性率 同源框 细胞内
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启动子DNA甲基化和组蛋白乙酰化对胃癌中PDX1表达的影响 被引量：3
8
作者 马娟 余莲英 +5 位作者 廖山婴 王蓓蓓 徐丽姝 沙卫红 王启仪 刘庆华 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期175-182,共8页
【目的】已知胃癌中PDX1表达下调,本研究旨在探讨DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰对PDX1基因表达的调控。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片中PDX1、Dnmt1和HDAC的表达,分析其相关性。5’-aza-d C和TSA处理胃癌细胞,RT-PCR检测PDX1 m RN... 【目的】已知胃癌中PDX1表达下调,本研究旨在探讨DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰对PDX1基因表达的调控。【方法】免疫组化法检测胃癌组织芯片中PDX1、Dnmt1和HDAC的表达,分析其相关性。5’-aza-d C和TSA处理胃癌细胞,RT-PCR检测PDX1 m RNA水平,分析DNA去甲基化和组蛋白乙酰化对PDX1表达的影响;构建6个PDX1启动子片段至p GL3载体,检测转录活性,分析去甲基化和乙酰化对PDX1启动子转录活性的影响。MSP和BSP评估PDX1启动子DNA甲基化状态以及启动子活性受5’-aza-d C和Sss I的影响;Ch IP评估PDX1启动子组蛋白乙酰化状态以及启动子活性受TSA的影响。【结果】免疫组化结果显示与正常组织对比,胃癌组织中的PDX1表达下调,Dnmt1和HDAC表达上调,PDX1和Dnmt1及HDAC的表达负相关(P<0.05);5’-aza-d C和TSA使PDX1在胃癌细胞中重获表达;F383是PDX1启动子核心,5’-aza-d C和TSA增强F383转录活性,Sss I抑制F383转录活性;MSP结果显示F383在胃癌细胞中呈完全甲基化;BSP结果显示与对照比较,位于F383区域内17个Cp G位点中80%以上呈现甲基化。Ch IP分析结果提示F383呈组蛋白H3和H4低乙酰化。【结论】PDX1基因在胃癌中表达沉默与启动子DNA高甲基化和组蛋白低乙酰化有关。 展开更多
关键词 胃癌 pdx1 DNA甲基化 组蛋白乙酰化
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Furin抑制剂α1-PDX对宫颈癌HeLa细胞生长、转移和成瘤的影响 被引量：3
9
作者 石冲 张国彬 +3 位作者 韩宝生 杨俊红 刘恒 习瑾昆 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期432-436,共5页
目的研究α1-PDX对宫颈癌细胞株He La细胞生长、转移及成瘤的影响并探讨其机制。方法α1-PDX转染He La细胞,通过MTT细胞增殖实验,Boyden细胞迁移和侵袭实验观察He La细胞的生长,迁移和侵袭能力。采用蛋白印迹法检测细胞Furin及产物膜性... 目的研究α1-PDX对宫颈癌细胞株He La细胞生长、转移及成瘤的影响并探讨其机制。方法α1-PDX转染He La细胞,通过MTT细胞增殖实验,Boyden细胞迁移和侵袭实验观察He La细胞的生长,迁移和侵袭能力。采用蛋白印迹法检测细胞Furin及产物膜性Ⅰ型金属蛋白酶(MT1-MMP)蛋白量的变化,荧光酶底物实验检测Furin活性。制作He La细胞致瘤裸鼠模型研究肿瘤体内生长。结果细胞增殖实验结果显示,与对照组相比24 hα1-PDX组He La细胞体外生长抑制18.4%,差异有统计学意义(P<0.01);细胞迁移和侵袭实验结果显示,α1-PDX处理组穿过滤膜和基质胶的He La细胞数量均明显少于对照组(P<0.01);He La/PDX可显著降低Furin的活性和MTI-MMP的蛋白水平。He La/PDX致瘤裸鼠的成瘤机率及皮下肿瘤体积明显小于对照组。结论α1-PDX可有效抑制人宫颈癌He La细胞的生长、转移及成瘤能力,机制可能与降低Furin活性及产物MTI-MMP的表达有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 HELA FURIN 膜性Ⅰ型金属蛋白酶 α1-pdx
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妊娠期糖尿病患者胎盘PGC-1α和PDX1表达水平及甲基化状态与胎儿血糖水平的相关性 被引量：13
10
作者 陈超 施莉英 龚明霞 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期72-76,共5页
目的:探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)对胎盘中PGC-1α和PDX1表达水平及甲基化状态的影响,以及与胎儿血糖的相关性。方法:收集30例GDM孕妇的新生儿出生体重、胎盘重量等数据,同时收集30例无妊娠并发症和脐带异常... 目的:探讨妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)对胎盘中PGC-1α和PDX1表达水平及甲基化状态的影响,以及与胎儿血糖的相关性。方法:收集30例GDM孕妇的新生儿出生体重、胎盘重量等数据,同时收集30例无妊娠并发症和脐带异常的足月新生儿相应数据作为对照组。在分娩后立即从胎盘滋养层组织收集样品,使用亚硫酸氢钠测序法定量检测PGC-1α和PDX1基因的DNA甲基化水平,逆转录定量PCR测量PGC-1α和PDX1 mRNA水平。同时,测定胎盘组织的胰岛素、血糖和糖化血红蛋白(HbA1c)水平。结果:GDM组胎儿出生体重和胎盘重量均显著高于对照组(P <0.05)。GDM组胎盘组织胰岛素、HbA1c和血糖水平显著高于对照组(P <0.01)。脐带血胰岛素水平与新生儿出生体重、胎盘重量、血糖和HbA1c呈正相关(r值分别为0.648、0.795、0.862、0.927,P均<0.001)。与对照组比较,GDM组中PGC-1α和PDX1 mRNA的水平较低,PGC-1α基因甲基化水平较高(P <0.05)。胎盘组织中血糖水平与PGC-1α和PDX1 mRNA的表达呈负相关(r=-0.438,P=0.002;r=-0.373,P=0.007)。结论:GDM孕妇PGC-1α基因表观遗传修饰的变化可能是其后代糖代谢异常的原因之一。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 表观遗传学 PGC-1Α pdx1
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重构腺相关病毒转导PDX-1对C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用 被引量：3
11
作者 杨川 李莉 +4 位作者 王川 陈黎红 黎峰 严励 程桦 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期486-490,共5页
【目的】重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAVHelper-FreeSystem)表达系统中,转染HEK293细胞,培养7... 【目的】重构含有PDX-1的腺相关病毒载体,将PDX-1转导入C2C12细胞,观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用PCR方法将PDX-1从pZL1质粒中克隆出来,安装到Stratagene公司的腺相关病毒(AAVHelper-FreeSystem)表达系统中,转染HEK293细胞,培养72h,提取病毒悬液,转导PDX-1进入C2C12细胞中,检测细胞培养液中的胰岛素含量。【结果】①用X-gal染色系统检测,可见有蓝色的阳性细胞。②病毒的粗略的浓度经计算后大约为1012/mL,转导的病毒数约为1011。③PCR结果:用重构的腺相关病毒转导后C2C12有胰岛素及PDX-1的mRNA的表达。④用重构的腺相关病毒转导PDX-1进入C2C12后的培养液的胰岛素浓度为(5.5±1.1)μIU/mL,较其他方法也有较明显的增加(P<0.05)。【结论】通过应用含有PDX-1基因的重构腺相关病毒载体可以转导PDX-1在C2C12细胞中表达,且可以提高C2C12分化为胰岛素分泌细胞的分泌量。 展开更多
关键词 pdx-1 成肌细胞 胰岛素分泌细胞 腺相关病毒
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基于PDX模型的胃癌个体化治疗研究进展 被引量：2
12
作者 徐农 徐馨 +1 位作者 毛晨宇 滕理送 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2018年第18期922-925,共4页
胃癌是全球尤其是东亚地区高发恶性肿瘤之一,在中国60%的患者初诊时即为进展期且异质性强、传统治疗疗效低,故需要更精准的治疗方案。目前,缺乏快速有效的筛选与验证平台是肿瘤精准治疗的瓶颈。人源肿瘤异种移植瘤(patient derived tumo... 胃癌是全球尤其是东亚地区高发恶性肿瘤之一,在中国60%的患者初诊时即为进展期且异质性强、传统治疗疗效低,故需要更精准的治疗方案。目前,缺乏快速有效的筛选与验证平台是肿瘤精准治疗的瓶颈。人源肿瘤异种移植瘤(patient derived tumor xenograft,PDX)模型已在多种类型的肿瘤中被证实是研究肿瘤生物学及评价抗肿瘤药物疗效的有效平台。本文将从三个层面对PDX模型在胃癌个体化治疗中研究进展进行综述,包括PDX在临床前药物疗效评估中的作用,PDX对生物标志物的鉴定及耐药机制研究,以及PDX在人-鼠联合临床试验中的作用。 展开更多
关键词 胃癌 pdx模型 精准治疗
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胰腺十二指肠同源框基因PDX-1的体外扩增 被引量：3
13
作者 孙吉平 贾延劼 +1 位作者 宋建辉 杨于嘉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期2591-2593,共3页
目的提取大鼠胰岛细胞瘤细胞株的RNA,以其中的mRNA为模板,扩增胰腺十二指肠同源框-1(PancreaticDuodenalHomeobox-1)编码基因,并测定核苷酸序列,为进一步克隆及表达PDX-1cDNA奠定基础。方法采用TIZOL方法进行RNA提取;通过RT-PCR方法扩... 目的提取大鼠胰岛细胞瘤细胞株的RNA,以其中的mRNA为模板,扩增胰腺十二指肠同源框-1(PancreaticDuodenalHomeobox-1)编码基因,并测定核苷酸序列,为进一步克隆及表达PDX-1cDNA奠定基础。方法采用TIZOL方法进行RNA提取;通过RT-PCR方法扩增大鼠PDX-1cRNA;琼脂糖凝胶电泳检测后进行序列测定。结果从大鼠胰岛细胞瘤细胞中提取了RNA,以其中的mRNA为模板扩增出大鼠PDX-1基因,经琼脂糖凝胶电泳鉴定为目的片断,经序列测定与Genebank公布的序列一致。结论在国内首次成功的克隆了PDX-1基因。扩增时在5'端以限制性酶切位点进行限制,对进一步进行其克隆、表达研究以及对其生物学功能进行研究奠定了基础。 展开更多
关键词 pdx-1 CDNA 胰岛细胞瘤
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高浓度葡萄糖对PDX-1表达和胰岛素分泌功能的影响 被引量：4
14
作者 肖常青 邓宏明 黄媛 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期281-283,共3页
目的探讨高浓度葡萄糖(Glu)对PDX-1表达的影响及其与胰岛素(Ins)分泌的关系。方法分别测定SD大鼠胰岛细胞基础和Glu刺激后Ins分泌量、细胞内Ins含量、细胞内PDX-1mRNA和蛋白的表达水平。结果1·高糖刺激3天后,基础和Glu刺激后Ins分... 目的探讨高浓度葡萄糖(Glu)对PDX-1表达的影响及其与胰岛素(Ins)分泌的关系。方法分别测定SD大鼠胰岛细胞基础和Glu刺激后Ins分泌量、细胞内Ins含量、细胞内PDX-1mRNA和蛋白的表达水平。结果1·高糖刺激3天后,基础和Glu刺激后Ins分泌量、细胞内Ins含量及PDX-1蛋白表达水平均明显降低(P<0·01)。2·在高糖环境下,延长培养时间可显著加强高糖对PDX-1蛋白表达的抑制作用。3·纠正高糖环境3天后可部分逆转高糖对PDX-1蛋白表达的抑制作用。结论高浓度Glu对PDX-1蛋白表达的抑制是Glu毒性作用的机制之一,纠正高糖3天后可部分逆转高糖对PDX-1蛋白表达的抑制作用,恢复Ins分泌功能。 展开更多
关键词 pdx-1 胰岛素分泌 胰岛细胞培养
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小鼠pdx-1基因真核表达载体的构建及其在胚胎干细胞中的表达 被引量：2
15
作者 周光纪 徐海伟 +3 位作者 杨丽 唐军 李达兵 屈纪富 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1204-1207,共4页
目的:克隆小鼠pdx-1基因,构建其真核表达载体,并在小鼠胚胎干细胞中表达,为糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法:PCR扩增小鼠胰腺pdx-1基因cDNA,酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1重组,将pdx-1基因cDNA片段连接到... 目的:克隆小鼠pdx-1基因,构建其真核表达载体,并在小鼠胚胎干细胞中表达,为糖尿病的细胞移植治疗奠定基础。方法:PCR扩增小鼠胰腺pdx-1基因cDNA,酶切后和携带绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体pEGFP-N1重组,将pdx-1基因cDNA片段连接到pEGFP-N1载体的多克隆位点,形成重组载体pEGFP/pdx-1,转化大肠杆菌DH5α菌株,构建成pdx-1基因真核表达载体质粒。扩增DH5α后抽提质粒DNA,HindⅢ和BamHⅠ酶切,电泳,DNA测序鉴定。鉴定正确的质粒DNA用脂质体包裹后转染小鼠胚胎干细胞MESPU13。结果:从小鼠胰腺cDNA扩增出876bp的DNA片段并成功重组到pEGFP-N1载体中。经酶切和DNA测序验证,插入载体的DNA片段为pdx-1基因,插入方向正确。重组质粒经脂质体转染胚胎干细胞MESPU13,24h后观察到绿色荧光蛋白报告基因和目的基因的pdx-1表达。结论:小鼠pdx-1基因的克隆和真核表达载体构建获得成功,为进一步研究其功能奠定了基础。 展开更多
关键词 基因 pdx-1 胚胎干细胞 真核表达载体
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PDX-1及其对胰岛β细胞的调控作用 被引量：9
16
作者 徐彩棉 赵瑞景 朱铁年 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2006年第1期55-58,共4页
胰腺十二指肠同源盒(PDX-1)具有促进胰岛β细胞增殖以及抑制其凋亡的作用。PDX-1通过调控胰岛素及胰岛素相关基因如葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖转运蛋白(GLUT2)等的表达,促进胰岛素分泌,维持胰岛β细胞的正常功能。提高胰岛β细胞PDX-1蛋白... 胰腺十二指肠同源盒(PDX-1)具有促进胰岛β细胞增殖以及抑制其凋亡的作用。PDX-1通过调控胰岛素及胰岛素相关基因如葡萄糖激酶(GK)、葡萄糖转运蛋白(GLUT2)等的表达,促进胰岛素分泌,维持胰岛β细胞的正常功能。提高胰岛β细胞PDX-1蛋白表达量,可对抗因“糖毒性”所致的胰岛β细胞功能损伤,促进胰岛素基因表达。PDX-1还可以将非胰岛素分泌细胞如肝细胞等转化为胰岛素分泌细胞。 展开更多
关键词 胰岛素 胰岛细胞 pdx-1 转录因子 胰岛素抵抗 糖尿病
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氧化应激对2型糖尿病大鼠胰岛PDX-1表达的影响 被引量：2
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作者 甘廷庆 梁瑜祯 +3 位作者 潘海林 苏宏业 黎英荣 肖常青 《广西医科大学学报》 CAS 北大核心 2006年第2期213-215,共3页
目的:探讨氧化应激对2型糖尿病大鼠胰岛胰岛素的生物合成及分泌功能的影响。方法:检测正常Wistar大鼠及2型糖尿病大鼠血清的空腹血糖、餐后血糖及空腹胰岛素,并测定胰腺组织匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱... 目的:探讨氧化应激对2型糖尿病大鼠胰岛胰岛素的生物合成及分泌功能的影响。方法:检测正常Wistar大鼠及2型糖尿病大鼠血清的空腹血糖、餐后血糖及空腹胰岛素,并测定胰腺组织匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量;应用免疫组化法检测胰岛PDX-1、胰岛素的表达。结果:①糖尿病组大鼠胰腺匀浆MDA、NO含量升高,SOD、GSH-PX降低,胰岛PDX-1、胰岛素表达降低,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);②胰岛PDX-1的表达与MDA、NO呈负相关,与SOD、GSH-PX呈正相关(P<0.05)。结论:2型糖尿病大鼠胰腺存在氧化应激反应,可引起2型糖尿病大鼠胰岛PDX-1、胰岛素的表达下降,直接影响胰岛素的生物合成及分泌。 展开更多
关键词 2型糖尿病 氧化应激 pdx-1
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PDX通过P38 MAPK通路促进脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin表达 被引量：3
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作者 谷丽君 潘静怡 +1 位作者 MOHAMED ALI Abdullahi 金胜威 《温州医科大学学报》 CAS 2019年第7期469-474,共6页
目的:探究PDX对脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin(CAMP)的影响及其具体机制。方法:C57BL/6小鼠行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型,分为:假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、治疗组(CLP+PDX组)、抑制剂组(CLP+PDX+SB203580组)、溶剂对照组(... 目的:探究PDX对脓毒症性ARDS抗菌肽cathelicidin(CAMP)的影响及其具体机制。方法:C57BL/6小鼠行盲肠结扎穿孔术建立脓毒症模型,分为:假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、治疗组(CLP+PDX组)、抑制剂组(CLP+PDX+SB203580组)、溶剂对照组(CLP+PDX+DMSO组)、PDX组。采用HE染色观察肺组织损伤情况,进行肺损伤评分,菌落形成单位(CFU)检测细菌清除情况,qPCR检测肺组织CAMP基因表达情况,Westernblot检测肺组织CAMP蛋白表达以及P38MAPK、ERKMAPK通路激活情况。结果:与Sham组比,CLP组ERKMAPK通路无显著变化,P38MAPK通路受到抑制,CAMP表达显著升高(P<0.05);与CLP组相比,CLP+PDX组小鼠肺组织出血、炎性细胞浸润减轻,CFU显著降低,P38MAPK通路明显活化,且CLP+PDX组中CAMP表达进一步升高(P<0.05)。结论:PDX通过调控P38MAPK通路促进脓毒症性ARDSCAMP的表达。 展开更多
关键词 脓毒症 pdx MAPK 抗菌肽 CATHELICIDIN
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MAFA-PDX1过表达慢病毒感染人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞的分化 被引量：2
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作者 邱晓燕 李碧欣 +3 位作者 黎敬弟 范垂钦 马廉 王鸿武 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第7期1000-1006,共7页
背景:干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源,但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的:研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:构建MAFA-P... 背景:干细胞来源胰岛β细胞移植被认为是治疗1型糖尿病的有效手段。人脐带间充质干细胞是理想的细胞来源,但其向胰岛β细胞分化的效率不高。目的:研究MAFA、PDX1修饰促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化的潜能。方法:构建MAFA-PDX1过表达慢病毒载体,用细胞形态学、RT-qPCR法、双硫腙染色比较3种方案[方案A:单纯慢病毒组;方案B:先药物(尼克酰胺、β-巯基乙醇)诱导再加慢病毒组;方案C:慢病毒和药物诱导同时进行组]诱导人脐带间充质干细胞分化为胰岛素分泌细胞的效率和潜能。结果与结论:(1)细胞形态学改变:经3种方案诱导后细胞形态均发生了改变,方案B在诱导第11天细胞聚集生长最为明显,出现聚集生长的胰岛样细胞团;(2)RT-qPCR检测胰岛相关基因的表达差异:同一诱导时间点3种方案横向比较,在诱导第5天,方案C的MAFA和PDX1基因表达量最高,方案B的GCG基因表达量最高;在诱导第11天,方案B的MAFA、PDX1基因表达量以及INS和GLUT2基因表达量最高;(3)双硫腙染色鉴定锌离子:3种方案诱导第11天部分细胞被双硫腙染成棕红色,其中方案B中部分小岛状细胞被染成棕红色,颜色较深(阳性表达);(4)结果表明,MAFA和PDX1共过表达可促进人脐带间充质干细胞向胰岛素分泌细胞分化;MAFA-PDX1基因修饰联合药物诱导方案优于单纯基因修饰方案。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 MAFA pdx1 过表达慢病毒载体 胰岛素分泌细胞 糖尿病 诱导分化
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腺病毒载体介导PDX-1在骨髓间充质干细胞中的表达 被引量：1
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作者 李艳华 张锐 +4 位作者 王韫芳 赵连旭 陈琳 岳文 裴雪涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第6期538-542,共5页
为研究PDX 1基因在骨髓间充质干细胞中的表达情况及生物学功能的发挥 ,构建了含PDX 1基因的重组腺病毒载体 .酶切PDX 1基因并连入穿梭质粒 pAdTrack CMV .用电穿孔法使穿梭质粒pAdTrack CMV PDX 1与病毒骨架质粒 pAdEasy 1在大肠杆菌BJ5... 为研究PDX 1基因在骨髓间充质干细胞中的表达情况及生物学功能的发挥 ,构建了含PDX 1基因的重组腺病毒载体 .酶切PDX 1基因并连入穿梭质粒 pAdTrack CMV .用电穿孔法使穿梭质粒pAdTrack CMV PDX 1与病毒骨架质粒 pAdEasy 1在大肠杆菌BJ5 183中同源重组 .利用脂质体介导重组腺病毒载体转染 2 93细胞 ,包装出完整的腺病毒 .分离、培养、扩增骨髓间充质干细胞 .用重组腺病毒感染间充质干细胞 .用荧光显微镜、RT PCR、免疫荧光染色等方法检测PDX 1、胰岛素基因及蛋白质的表达 ,用放射免疫分析法检测转基因细胞分泌胰岛素情况 .结果表明 :通过测序、PCR、酶切等鉴定PDX 1基因已正确插入穿梭质粒中 ,并与病毒骨架质粒重组 .重组腺病毒滴度为 6 3× 10 7PFU/ml.通过荧光显微镜观察证实重组腺病毒可高效感染骨髓间充质干细胞 ,经RT PCR、免疫荧光染色证实转染 pAd PDX 1后培养 7天的细胞中有PDX 1及胰岛素基因的表达 .这些转基因的细胞向胞外分泌的胰岛素量为 (15 2 1± 3 5 0 )mIU/L . 展开更多
关键词 pdx-1 腺病毒载体 间充质干细胞
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