PDIA3在子宫内膜癌中的表达水平及对Ishikawa细胞的影响

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作者 李梦璇 侯倩玉 +1 位作者 辛聪 经莉 《医学研究杂志》 2025年第9期147-153,共7页

目的探究蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3,PDIA3)在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)组织中的表达水平、临床意义及其对Ishikawa细胞的影响。方法利用TCGA数据库分析不同内膜组织中PDIA3的表达水平差异,探究其... 目的探究蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3,PDIA3)在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)组织中的表达水平、临床意义及其对Ishikawa细胞的影响。方法利用TCGA数据库分析不同内膜组织中PDIA3的表达水平差异,探究其与EC患者临床病理参数及预后间的联系;利用免疫组化法(immunohistochemical,IHC)检测临床内膜组织中PDIA3的表达水平,分析不同表达水平EC患者的临床病理参数、预后及影响其预后的危险因素;利用Transwell实验、划痕实验、CCK-8实验检测敲低PDIA3表达的Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力。结果TCGA数据库及临床标本中EC组织PDIA3表达水平高于正常内膜组织(P<0.05),TCGA数据库中EC组织PDIA3表达水平G3级组高于G1及G2级组(P<0.05),临床标本中EC组织PDIA3表达水平国际妇产科联盟(Federation International of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期Ⅱ~Ⅳ期组高于Ⅰ期组、有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组、高分化组高于低分化组(P<0.05);COX回归分析结果显示,FIGO分期、PDIA3表达水平是影响EC患者预后的独立危险因素;TCGA数据库中EC患者PDIA3高表达组生存时间短于低表达组(P<0.05),临床患者PDIA3阳性组生存率低于阴性组(P<0.05);Transwell实验、划痕实验及CCK-8实验显示PDIA3抑制组细胞的侵袭和迁移能力较正常组及阴性对照组显著降低(P<0.05)。结论PDIA3在EC组织中呈高表达,与肿瘤恶性程度和患者不良预后相关;靶向抑制PDIA3的表达可降低Ishikawa细胞的增殖、侵袭和迁移能力。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 pdia3 ISHIKAWA细胞 TCGA数据库

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蛋白质二硫键异构酶PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

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作者 王梅 甄珍 +5 位作者 胡德宝 张林林 李新 郭益文 郭宏 丁向彬 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期158-164,共7页

牛骨骼肌卫星细胞是一种多功能干细胞,能修复受损的骨骼肌。蛋白质二硫键异构酶PDIA3在肌肉再生过程中起关键作用。本试验旨在研究PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的影响。利用牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,设计合成PDIA3... 牛骨骼肌卫星细胞是一种多功能干细胞,能修复受损的骨骼肌。蛋白质二硫键异构酶PDIA3在肌肉再生过程中起关键作用。本试验旨在研究PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的影响。利用牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,设计合成PDIA3的干扰模型,并构建PDIA3的过表达载体pcDNA3.1-PDIA3,检测其干扰和过表达效果。采用EdU染色法检测PDIA3表达量的改变对细胞增殖的影响,通过肌管形成状态检测对分化进程的影响,并采用RT-qPCR和Western Blot方法检测牛骨骼肌卫星细胞在RNA水平和蛋白水平上增殖标志因子和分化标志因子的变化,综合分析干扰和过表达PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。结果显示:与对照组相比,干扰或过表达PDIA3后Pax7在mRNA和蛋白表达水平均无明显变化,EdU阳性细胞率无明显变化,表明PDIA3表达水平的改变对其增殖无明显影响。干扰PDIA3后,可发现肌管数量明显少于对照组,肌管直径明显变小,分化标志因子MyHC的RNA表达水平极显著降低,MyHC的蛋白表达水平显著降低;而过表达PDIA3后,可发现肌管数量明显多于对照组,肌管直径明显变大,且分化标志因子MyHC的RNA表达水平和蛋白水平均显著升高。以上结果表明PDIA3能正向调节牛骨骼肌卫星细胞的分化过程。本研究结果为PDIA3在肌肉发育的研究提供了一定的参考。 展开更多

关键词 pdia3 牛骨骼肌卫星细胞 细胞增殖 细胞分化

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ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

3

作者 李秀芳 黄利英 +3 位作者 韩毅 刘婷婷 高君琳 田甜 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1008-1016,共9页

目的:探究免疫原性细胞死亡相关基因——自噬相关基因5(ATG5)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在宫颈癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性、相关信号通路及药物敏感性。方法:收集自2016年1月至2023年12月间青岛大学附属医... 目的:探究免疫原性细胞死亡相关基因——自噬相关基因5(ATG5)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)在宫颈癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和预后的相关性、相关信号通路及药物敏感性。方法:收集自2016年1月至2023年12月间青岛大学附属医院60例宫颈癌癌组织标本作为实验组,26例因子宫肌瘤、子宫腺肌症切除的正常宫颈组织标本作为对照组,并收集相应的临床资料。采用免疫组化法检测宫颈癌组织和正常宫颈组织中ATG5、PDIA3蛋白的表达差异,分析其表达与各项临床病理参数之间的关系。基于基因表达水平值的交互式分析平台(GEPIA)在线分析宫颈癌组织中ATG5、PDIA3的表达水平对患者预后的影响,使用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因集富集分析(GSEA)探究ATG5和PDIA3基因可能涉及的生物学功能及信号通路,用p RRophetic包分析宫颈癌患者癌组织中ATG5、PDIA3高低表达与患者对化疗药物的敏感性。结果:ATG5、PDIA3在宫颈癌组织中的表达率均显著高于正常宫颈组织(83.3%vs 11.5%,χ^(2)=39.538,P=0.001;75.0%vs 46.2%,χ^(2)=6.753,P=0.009),ATG5的表达水平在肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移方面的差异显著(均P<0.01);PDIA3的表达水平在肿瘤直径、分化程度、FIGO分期和淋巴结转移方面的差异显著(P<0.05或P<0.01)。ATG5和PDIA3的表达水平呈正相关(r=0.679,P<0.001)。GEPIA在线分析网站预后分析显示,ATG5和PDIA3高表达宫颈癌患者的预后差(均P<0.05)。ATG5和PDIA3主要富集的功能及信号通路包括细胞增殖与分化、抗原加工与提呈、P53结合、Wnt信号通路、MAPK信号通路及mTOR信号通路。结论:ATG5和PDIA3在宫颈癌组织中呈高表达,两者高表达与患者不良预后有关,ATG5和PDIA3参与细胞增殖与分化、抗原加工提呈及多种信号通路,有望成为宫颈癌治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 宫颈癌 免疫原性细胞死亡 自噬相关基因5 蛋白质二硫键异构酶A3 预后

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胎膜早破患者胎膜、胎盘组织TRPC3和PDIA3的表达及意义 被引量：3

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作者 张小林 赵琦 +2 位作者 邹娜 陈洁 涂澜涛 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 2021年第5期486-488,共3页

目的探讨胎膜早破(PROM)患者胎膜、胎盘组织(TRPC3)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)的表达及意义。方法 120例胎膜早破患者(疾病组)和同期接受剖宫产者35例(正常组)为对象。收集两组胎膜、胎盘组织,免疫组化法检测其TRPC3、PDIA3表达情... 目的探讨胎膜早破(PROM)患者胎膜、胎盘组织(TRPC3)和蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)的表达及意义。方法 120例胎膜早破患者(疾病组)和同期接受剖宫产者35例(正常组)为对象。收集两组胎膜、胎盘组织,免疫组化法检测其TRPC3、PDIA3表达情况。分析不同临床特征PROM患者胎膜、胎盘组织TRPC3阳性表达率。分析胎膜、胎盘组织TRPC3、PDIA3阳性表达率与PROM患者HCA发生率和新生儿预后关系。结果疾病组胎膜、胎盘组织中TRPC3、PDIA3阳性表达率明显高于正常组(P <0.05)。胎膜、胎盘组织TRPC3、PDIA3阳性表达率在PROM患者HCA发生率和新生儿死亡率分布上有差异(P <0.05)。胎膜、胎盘组织TRPC3、PDIA3阳性表达率与PROM患者HCA发生和新生儿死亡率呈正相关(P <0.05)。结论 PROM患者胎膜、胎盘组织TRPC3、PDIA3阳性表达与PROM患者HCA、新生儿预后密切相关。 展开更多

关键词 胎膜早破 胎膜组织 胎盘组织 TRPC3 pdia3

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PDIA3在大鼠同种异体移植肾组织中的表达及意义 被引量：1

5

作者 陈刚 唐伟 +4 位作者 唐亚雄 何云峰 李家兵 李杰 吴小侯 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期365-367,共3页

目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3,PDIA3)在大鼠同种异体移植肾组织中的表达及意义。方法实验分2组。实验组(异基因移植组):近交系雄性F344和Lewis大鼠分别作为供体和受体,共8对。对照组(同基因移植组):近... 目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(protein disulfide isomerase A3,PDIA3)在大鼠同种异体移植肾组织中的表达及意义。方法实验分2组。实验组(异基因移植组):近交系雄性F344和Lewis大鼠分别作为供体和受体,共8对。对照组(同基因移植组):近交系雄性F344大鼠作为供体和受体,共8对。分别建立原位大鼠肾移植模型。术后7 d获取移植肾组织,分别应用免疫组化、RT-PCR和Western blot等方法检测实验组和对照组移植肾组织中的PDIA3的表达情况。结果 PDIA3主要表达在细胞质,在实验组移植肾组织中的表达呈阳性或强阳性,而在对照组表达呈弱阳性。实验组移植肾PDIA3的mRNA表达量为(0.821±0.046),对照组移植肾PDIA3的mRNA表达量为(0.187±0.154),2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。实验组移植肾PDIA3的蛋白表达量为(0.812±0.045),对照组移植肾PDIA3的蛋白表达量为(0.237±0.134),2组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论大鼠同种异基因肾移植急性排斥反应组移植肾组织中的PDIA3的表达明显高于同基因移植对照组。PDIA3可能参与肾移植急性排斥反应的发生、发展过程。 展开更多

关键词 pdia3 肾移植 移植物排斥

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大肠癌组织中PDIA3的表达及意义 被引量：2

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作者 孙景春 师庆红 +1 位作者 石宇 宋丽娜 《中国实验诊断学》 2018年第3期462-463,共2页

蛋白质二硫键异构酶A3（PDIA3）,也被称为ERp57,是一种58kD的葡萄糖调节蛋白,是属于PDI家族的硫醇氧化还原酶伴侣蛋白。该分子涉及多种细胞功能,包括新合成的蛋白质的折叠和主要组织相容性复合物I（MHC-I）的装配.

关键词 大肠癌 蛋白质 pdia3

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PDIA3在口腔鳞癌中的表达及意义

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作者 王晓丽 袁润林 +2 位作者 周童辉 张腾岳 杨云峰 《成都医学院学报》 CAS 2012年第02Z期299-300,共2页

目的：探讨蛋白质二硫键异构酶A3（protein disulfide isomeraseA3，PDIA3）在口腔鳞癌组织中的表达及意义。方法：实验分实验组（鳞癌组）和对照组（正常组），各20例。采用半定量RT—PCR和Western blot等实验方法分别检测两组PDIA3的m... 目的：探讨蛋白质二硫键异构酶A3（protein disulfide isomeraseA3，PDIA3）在口腔鳞癌组织中的表达及意义。方法：实验分实验组（鳞癌组）和对照组（正常组），各20例。采用半定量RT—PCR和Western blot等实验方法分别检测两组PDIA3的mRNA和蛋白水平表达。结果：与对照组比较，实验组PDIA3在mRNA水平高表达，两组比较差异有显著性（O．617±0．152vs0．226±0．106，P〈0．05）。同样，与对照组比较，实验组PDIA3在蛋白水平也呈高表达．两组比较差异有显著性（O．561±0．131vs0．154±0．087，P〈0．05）。结论：本实验研究发现口腔鳞癌组织中，PDIA3在mRNA和蛋白水平明显高表达。PDIA3是具有多种生物学功能的蛋白质二硫键异构酶之一，可能参与了口腔鳞癌的发生发展。 展开更多

关键词 pdia3 口腔鳞癌 基因表达

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PDIA3的结构与功能及其在精卵融合过程中的作用 被引量：4

8

作者 吕利霞 汤睿智 邢万金 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期31-34,49,共5页

二硫键异构酶家族的一员PDIA3(protein disulfide-isomerase A3)最初确定其位于内质网腔内,作为钙联接蛋白和钙网质蛋白的分子伴侣复合物的组成成分之一,促进新合成的糖蛋白在内质网中的正确折叠。PDIA3在内质网中的功能依赖其蛋白二硫... 二硫键异构酶家族的一员PDIA3(protein disulfide-isomerase A3)最初确定其位于内质网腔内,作为钙联接蛋白和钙网质蛋白的分子伴侣复合物的组成成分之一,促进新合成的糖蛋白在内质网中的正确折叠。PDIA3在内质网中的功能依赖其蛋白二硫键氧化还原异构酶活性。目前研究发现位于精子表面的PDIA3的蛋白二硫键氧化还原酶活性在精卵融合中也发挥着重要的作用。就目前关于PDIA3的结构和功能及在精卵质膜融合中的作用研究进展做一概述。 展开更多

关键词 pdia3 二硫键异构酶 内质网 精卵融合

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Wistar大鼠Pdia3 cDNA的克隆及原核表达

9

作者 乌吉斯古冷 汤睿智 邢万金 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期102-107,共6页

哺乳动物的精卵融合是一个多分子参与的复杂过程,目前只鉴定出几种影响精卵融合的蛋白因子,对其分子机制还知之甚少。其中位于精子上的Pdia3具有二硫键异构酶活性,可能催化其他精卵融合相关蛋白的二硫键变化而参与精卵膜融合。克隆了Wis... 哺乳动物的精卵融合是一个多分子参与的复杂过程,目前只鉴定出几种影响精卵融合的蛋白因子,对其分子机制还知之甚少。其中位于精子上的Pdia3具有二硫键异构酶活性,可能催化其他精卵融合相关蛋白的二硫键变化而参与精卵膜融合。克隆了Wistar大鼠的Pdia3 cDNA片段,长度为1 620 bp,其中编码区为1 518 bp。测序结果显示,编码区内有两个碱基与GenBank公布的大鼠Pdia3 cDNA不同,分别为第147个密码子GAG(Glu)的第1位碱基和第410个密码子AAG(Lys)的第3位碱基,前者造成氨基酸替换,后者仅为多态性。此外,还在大肠杆菌中成功地表达并纯化了GST-Pdia3融合蛋白,为下一步研究大鼠Pdia3在体外影响精卵融合和与其它蛋白的相互作用奠定了基础。 展开更多

关键词 WISTAR大鼠 pdia3 CDNA克隆 原核表达

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PDIA3对人Jurkat T细胞TCR信号通路的调控 被引量：1

10

作者 周云 刘海龙 靳照宇 《河北大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第3期301-306,共6页

为了研究蛋白质二硫键异构酶A3前体(protein disulfide isomerase A3 precursor,PDIA3)在T细胞受体(T cell receptor,TCR)信号通路中的具体功能,利用电穿孔法将T细胞内的PDIA3蛋白水平敲低,通过Western blotting检测ζ-链相关蛋白70(zet... 为了研究蛋白质二硫键异构酶A3前体(protein disulfide isomerase A3 precursor,PDIA3)在T细胞受体(T cell receptor,TCR)信号通路中的具体功能,利用电穿孔法将T细胞内的PDIA3蛋白水平敲低,通过Western blotting检测ζ-链相关蛋白70(zeta-chain associated protein 70,ZAP70)的磷酸化修饰水平,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)实验检测细胞因子IL-2的分泌情况,流式细胞术分析分化抗原簇69(cluster of differentiation 69,CD69)表达水平及荧光素酶报告基因检测NF-κB信号通路.结果显示:T细胞中PDIA3蛋白下调后导致ZAP70蛋白的磷酸化水平、CD69表达和IL-2的分泌都明显降低,并且影响了NF-κB信号通路,表明PDIA3蛋白对T细胞的活化有促进作用,参与T细胞TCR信号通路的调控,为进一步深入研究PDIA3与TCR下游一些功能蛋白的相互作用打下了基础. 展开更多

关键词 蛋白质二硫键异构酶A3前体(pdia3) T细胞受体(TCR) T细胞

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干扰或过表达PDIA3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响 被引量：4

11

作者 雷雨广 徐继鹏 +1 位作者 陈超 张伟丽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2020年第3期585-589,共5页

目的探讨干扰或过表达蛋白质二硫键异构酶(PDI)A3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养星形胶质细胞,构建PDIA3干扰及过表达载体稳定株系,采用过氧化氢(H 2O 2)诱导建立星形胶质细胞损伤模型。实验将星形... 目的探讨干扰或过表达蛋白质二硫键异构酶(PDI)A3对过氧化氢诱导的星形胶质细胞损伤的影响及其作用机制。方法体外培养星形胶质细胞,构建PDIA3干扰及过表达载体稳定株系,采用过氧化氢(H 2O 2)诱导建立星形胶质细胞损伤模型。实验将星形胶质细胞分为对照组(NC组)、H 2O 2组、H 2O 2+si-con组、H 2O 2+si-PDIA3组、H 2O 2+pcDNA组、H 2O 2+pcDNA-PDIA3组。实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PDIA3 mRNA表达;Western印迹检测PDIA3及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路蛋白表达;噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡。收集各组星形胶质培养基上清液检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平。结果与NC组相比,H 2O 2组星形胶质细胞中PDIA3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);H 2O 2组细胞LDH释放量、TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率及p-p38蛋白表达均显著升高(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显升高(P<0.05),PDIA3过表达后明显降低(P<0.05);H 2O 2组细胞存活率显著降低(P<0.05),干扰PDIA3表达后明显降低(P<0.05),PDIA3过表达后明显升高(P<0.05)。结论PDIA3过表达可改善H 2O 2诱导的星形胶质细胞氧化应激及炎症损伤,其可能通过抑制p38MAPK信号通路激活而发挥作用。 展开更多

关键词 蛋白质二硫键异构酶A3 星形胶质细胞 p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路 氧化损伤

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慢病毒介导PDIA3过表达对溃疡性结肠炎小鼠肠黏膜屏障的影响及其机制 被引量：1

12

作者 黄靖 闫圣玉 +2 位作者 许志杰 刘婉莹 刘丽兵 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第11期1768-1773,共6页

目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组(Control组)、模型组(Model组)、空载慢病毒组(Lv-NC组)和PDIA3过表达慢病毒组(Lv-PDIA3组),每组15只。... 目的探讨蛋白质二硫键异构酶A3(PDIA3)对溃疡性结肠炎(UC)小鼠的保护作用及其可能机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分成正常对照组(Control组)、模型组(Model组)、空载慢病毒组(Lv-NC组)和PDIA3过表达慢病毒组(Lv-PDIA3组),每组15只。采用连续7 d自由饮用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液建立UC小鼠模型,造模成功后开始注射慢病毒干预。慢病毒干预7 d后结束实验,对各组小鼠进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察结肠组织病理学变化,ELISA法检测血清中炎症因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及肠黏膜屏障通透性标志物D-乳酸(D-Lac)、二胺氧化酶(DAO)含量,qRT-PCR检测结肠组织中PDIA3 mRNA水平,Western blot检测结肠组织中PDIA3、ZO-1、Occludin、Claudin-1、IκBα、p-NF-κB p65(Ser536)、NF-κB p65蛋白表达水平。结果与Control组比较,Model组小鼠结肠组织受损严重,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平均升高,而ZO-1、Occludin和Claudin-1等蛋白表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.01);与Model组比较,Lv-PDIA3组小鼠结肠组织受损程度减轻,DAI评分、血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、D-Lac、DAO含量以及结肠组织中IκBα和p-NF-κB p65(Ser536)蛋白表达水平降低,同时ZO-1、Occludin和Claudin-1蛋白表达水平增加,差异有统计学意义(P<0.01),而Lv-NC组差异无统计学意义。结论过表达PDIA3能明显改善UC小鼠肠黏膜屏障功能,其机制可能与抑制NF-κB信号通路的激活有关。 展开更多

关键词 蛋白质二硫键异构酶A3 溃疡性结肠炎 肠黏膜屏障 NF-ΚB信号通路

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miR-196a高表达在肾脏损伤中作用的分子生物学机制 被引量：4

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作者 李慧聪 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2018年第10期2472-2475,共4页

目的探讨高表达的miR-196a在肾脏损伤中作用的分子生物学机制。方法通过抑制miR-196a表达,观察其表达水平对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响,验证miR-196a与其预测靶基因蛋白二硫化物异构酶(PDI)A3的配对关系。建立小鼠单侧输尿管梗... 目的探讨高表达的miR-196a在肾脏损伤中作用的分子生物学机制。方法通过抑制miR-196a表达,观察其表达水平对人肾小管上皮细胞(HKC)转分化的影响,验证miR-196a与其预测靶基因蛋白二硫化物异构酶(PDI)A3的配对关系。建立小鼠单侧输尿管梗阻模型,经尾静脉注射LNA修饰的anti-miR-196a寡核苷酸,观察抑制miR-196a表达后对肾小管间质病变和硫氧还原蛋白(Trx)的影响。结果体外细胞实验显示,转化生长因子(TGF)-β1能够上调miR-196a表达,诱导肾小管上皮细胞发生上皮间充质转分化,阻断miR-196a可部分逆转上皮间充质转分化,而PDIA3为miR-196a对应的直接靶基因。体内动物实验显示,模型组出现明显肾小管间质纤维化病变,5、10 mg/kg anti-miR-196a干预组肾小管间质损伤评分明显低于模型组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中以5 mg/kg干预组逆转肾小管间质纤维化作用更明显。模型组小鼠梗阻侧肾组织miR-196a相对表达量明显高于假手术组,5、10 mg/kg干预组小鼠miR-196a相对表达量明显低于模型组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5、10 mg/kg干预组α-血管平滑肌肌动蛋白(SMA)、波形蛋白(Vimentin)相对表达量明显低于模型组、阴性对照组;PDIA3蛋白表达明显高于模型组、阴性对照组;差异均有统计学意义(均P<0.05)。以Trx为抗氧化应激标志物,模型组小鼠肾组Trx表达量明显低于假手术组和空白对照组;5、10 mg/kg干预组Trx表达量明显高于模型组和阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-196a在小鼠肾小管间质纤维化过程中发挥重要作用,PDIA3是其直接靶基因;PDIA3表达下调减弱相应的抗氧化应激能力是miR-196a参与肾脏损伤的机制之一。 展开更多

关键词 肾脏损伤 肾间质纤维化 miR-196a pdia3 氧化应激

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蛋白质二硫键异构酶a3的表达纯化、活性测定与小分子抑制剂的筛选

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作者 宋煜 李海涛 +1 位作者 邵敏 周鹤峰 《合肥医科大学学报》 2022年第6期775-781,共7页

目的 通过大肠杆菌表达并纯化蛋白质二硫键异构酶a3(PDIA3)为筛选其小分子抑制剂奠定基础。方法 通过RT-PCR获得PDIA3基因,构建重组质粒pET28a-PDIA3,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析获得PDIA3,SDS-PAGE鉴定纯度... 目的 通过大肠杆菌表达并纯化蛋白质二硫键异构酶a3(PDIA3)为筛选其小分子抑制剂奠定基础。方法 通过RT-PCR获得PDIA3基因,构建重组质粒pET28a-PDIA3,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,Ni-NTA树脂亲和层析获得PDIA3,SDS-PAGE鉴定纯度,酶标仪测定活性,Specs商业化合物库虚拟筛选PDIA3的抑制物,胰岛素比浊法对抑制物进行抑酶活性测定。结果 克隆序列与基因库序列一致。获得的纯化PDIA3比活力为4.17 U/mg,PDIA3具有催化二硫键断裂的能力,筛选到的化合物去甲氧基姜黄素和41974954对PDIA3有抑制作用。结论 成功表达并纯化出PDIA3,筛选到的去甲氧基姜黄素和化合物41974954对PDIA3有抑制作用,为PDI蛋白抑制剂和抗血栓药物的研发奠定了基础。 展开更多

关键词 pdia3 原核表达 蛋白纯化 抑制剂 虚拟筛选

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蛋白质二硫键异构酶A3在消化系统肿瘤中的研究进展 被引量：1

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作者 樊建春 荀敬 +2 位作者 朱梓嫣 王紫婷 武雪亮 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第4期141-146,共6页

目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致死率、致残率在逐年上升。蛋白质二硫异构酶A3(PDIA3)是PDI家族中重要的一员,是一种功能广泛的硫醇氧化还原酶,其在多种肿瘤中的表达含量升高,与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。... 目前恶性肿瘤已经成为威胁人类身体健康的主要疾病之一,致死率、致残率在逐年上升。蛋白质二硫异构酶A3(PDIA3)是PDI家族中重要的一员,是一种功能广泛的硫醇氧化还原酶,其在多种肿瘤中的表达含量升高,与肿瘤细胞的侵袭和转移密切相关。尽管大量研究表明,PDIA3在许多肿瘤的发生和发展中起着至关重要的作用,但目前尚无系统的报道PIDA3在消化系统肿瘤中的作用。因此,该文综述了PDIA3在4种消化系统肿瘤中的不同表达情况及临床意义,探讨其在不同癌症发展阶段或临床预后中的作用,进一步寻找有效的早期诊断和基因治疗的潜在靶点。这对提高肿瘤患者的生存率具有十分重要的意义。 展开更多

关键词 蛋白质二硫键异构酶A3 消化道肿瘤 机制 临床研究

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基因静默对肠易激综合征内脏高敏感大鼠肠道树突状细胞免疫功能的影响 被引量：1

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作者 庄肇朦 张璐 +2 位作者 陶丽媛 李蒙 吕宾 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期96-100,共5页

目的了解PDIA3基因在IBS内脏高敏感大鼠结肠黏膜异常免疫应答中的作用及机制。方法将48只成年SD大鼠分为空白对照组、空病毒组（IBS-1）、PDIA3基因静默组（IBS-2）和模型对照组（IBS-3），每组各12只。免疫组织化学法检测回盲部结肠组... 目的了解PDIA3基因在IBS内脏高敏感大鼠结肠黏膜异常免疫应答中的作用及机制。方法将48只成年SD大鼠分为空白对照组、空病毒组（IBS-1）、PDIA3基因静默组（IBS-2）和模型对照组（IBS-3），每组各12只。免疫组织化学法检测回盲部结肠组织表面分子CD103的表达，流式分选技术分离肠系膜淋巴结树突状细胞（DC），磁珠分选技术分离脾脏CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞，DC和CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞共培养，MTT法检测DC促淋巴细胞增殖能力，ELISA法检测DC促CD4^＋/CD8^＋T淋巴细胞分泌IL-4、IL-9水平。统计学处理采用独立样本t检验。结果大鼠肠道CD103标记的DC计数在空白对照组为（6.25±1.14）个/高倍镜视野（HPF），低于IBS-3组的（10.83±1.03）个/HPF（t＝10.07，P〈0.05）；IBS-2组为（7.42±0.90）个/HPF，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－9.25，P〈0.05）。空白对照组和IBS-3组大鼠DC促进CD4^＋T淋巴细胞增殖的MTT值分别为0.54±0.01和0.60±0.01（t＝3.373，P〈0.05）；IBS-2组为0.53±0.01，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－3.139，P〈0.05）；DC促进CD8^＋T淋巴细胞增殖的MTT值分别为0.52±0.01和0.59±0.00（t＝3.539，P〈0.01）；IBS-2组为0.54±0.01，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－3.183，P〈0.01）。空白对照组和IBS-3组大鼠DC促CD4^＋T淋巴细胞分泌IL-4水平分别为10.24±0.09和16.61±1.00（t＝3.222，P〈0.05）；IBS-2组为11.75±0.54，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－3.539，P〈0.01）。空白对照组和IBS-3组大鼠DC促CD4^＋T淋巴细胞分泌IL-9水平分别为15.86±10.19和43.51±11.32（t＝4.529，P〈0.05）；IBS-2组为29.05±2.09，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－6.841，P〈0.01）。空白对照组和IBS-3组大鼠DC促CD8^＋T淋巴细胞分泌IL-4水平分别为7.35±0.12和13.91±0.57（t＝19.557，P〈0.01）；IBS-2组为8.63±0.24，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－14.782，P〈0.01）。空白对照组和IBS-3组大鼠DC促CD8^＋T淋巴细胞分泌IL-9水平分别为29.12±5.14和60.70±11.02（t＝4.122，P〈0.05）；IBS-2组为37.17±2.65，低于IBS-3组，差异有统计学意义（t＝－3.255，P〈0.05）。结论PDIA3可能介导DC激活T淋巴细胞，上调相关细胞因子水平，导致肠黏膜异常免疫应答，促进IBS内脏高敏感形成。 展开更多

关键词 pdia3 树突细胞 白细胞介素4 白细胞介素9 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞 内脏高敏感

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免疫性肝纤维化大鼠肝非实质细胞蛋白质组分析 被引量：3

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作者 赵倩倩 冯艳玲 +5 位作者 贾小芳 尹林 郑燕 欧阳冬生 周宏灏 张丽军 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2013年第11期928-938,1-11,共11页

研究肝纤维化发生机制对治疗肝纤维化有重要意义.通过注射猪血清2,4,6和8周后构建纤维化程度S0-1,S2,S3-4及S4期的大鼠肝纤维化模型,采用Masson染色法检测大鼠肝脏的病理学变化.Percoll梯度密度离心富集肝非实质细胞.提取处理4和8周的... 研究肝纤维化发生机制对治疗肝纤维化有重要意义.通过注射猪血清2,4,6和8周后构建纤维化程度S0-1,S2,S3-4及S4期的大鼠肝纤维化模型,采用Masson染色法检测大鼠肝脏的病理学变化.Percoll梯度密度离心富集肝非实质细胞.提取处理4和8周的大鼠肝非实质细胞蛋白,二维凝胶电泳分离,考马斯亮蓝(G250)染色.在第4周样本中鉴定到18个非冗余差异蛋白,通过进一步验证,PDIA3和NDUV蛋白质在蛋白表达水平及mRNA水平具有一致性.大鼠模型Western blot检测及人肝脏免疫组化检测验证PDIA3表达下调.本研究阐明不同时期大鼠肝纤维化模型和正常对照肝非实质细胞蛋白表达变化,揭示了有关肝纤维化进程的重要信息. 展开更多

关键词 肝纤维化 蛋白质组 非实质细胞 pdia3

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