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PD-L2基因敲除小鼠的脾脏免疫表型分析
1
作者 杨艳红 宋赛哲 刘翠平 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第5期1048-1054,共7页
目的:研究PD-L2基因敲除对C57BL/6小鼠脾脏免疫表型的影响。方法:连续称量雌性和雄性野生型(WT)和PD-L2基因敲除(KO)小鼠3~12周的体质量。HE染色观察4组小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、卵巢、子宫和睾丸组织结构差异;脲酶紫外速率法测... 目的:研究PD-L2基因敲除对C57BL/6小鼠脾脏免疫表型的影响。方法:连续称量雌性和雄性野生型(WT)和PD-L2基因敲除(KO)小鼠3~12周的体质量。HE染色观察4组小鼠心、肝、脾、肺、肾、胸腺、卵巢、子宫和睾丸组织结构差异;脲酶紫外速率法测量小鼠血清中尿素水平;肌氨酸氧化酶法检测小鼠血清肌酐浓度;流式细胞术检测小鼠脾脏各免疫细胞比例及细胞因子差异。结果:PD-L2基因敲除对小鼠体质量及各器官结构无明显影响。雌性KO小鼠血清尿素和肌酐浓度均高于WT小鼠,但雄性之间差异无统计学意义。雌性KO小鼠脾脏CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、Treg、NK细胞和树突状细胞(DC)较WT小鼠比例降低,而Tfh、B细胞、浆细胞、na?ve B细胞和B2细胞比例升高,IL-17、IL-6和IL-22等促炎细胞因子增加,而IL-10、IL-4等抑炎细胞因子减少,雄性小鼠之间差异不明显或无差异。结论:PD-L2基因敲除主要影响雌性小鼠外周免疫表型,敲除后小鼠炎症反应激活,免疫抑制减弱。 展开更多
关键词 pd-l2 基因敲除 组织结构 免疫表型 炎症反应
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香草扶正合剂对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织能量代谢及PD-L2、RGMb表达的影响
2
作者 程权 傅华洲 《中国中医药科技》 2025年第1期20-25,共6页
目的:探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效应及机制。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,顺铂(DDP)组,XCFZ低、中、高剂量组,联合组,每组10只;造模第2天开始... 目的:探讨香草扶正合剂(Xiangcao Fuzheng Mixture,XCFZ)对Lewis肺癌小鼠的抑瘤效应及机制。方法:采用Lewis肺癌细胞株培养移植法建立肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组,顺铂(DDP)组,XCFZ低、中、高剂量组,联合组,每组10只;造模第2天开始XCFZ低、中、高剂量组分别予9.3、18.6、37.2 g/kg XCFZ灌胃;顺铂组以5 mg/kg顺铂溶液隔天腹腔注射,同时以等量双蒸水灌胃,联合组以XCFZ中剂量灌胃和顺铂腹腔注射联合给药,模型组按照等量双蒸水灌胃,每天1次,连续给药14 d;称取小鼠瘤质量及去瘤后体质量并计算抑瘤率,Real-time PCR法检测肺癌组织三磷酸腺苷合酶β亚基(ATP 5B)mRNA表达及细胞色素C氧化酶亚单IV(COX IV)mRNA表达水平;高效液相色谱法(HPLC)检测一磷酸腺苷(AMP)、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)含量。TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡。Western blot检测肿瘤组织细胞程序性死亡配体-2(PD-L2)和反义导向分子(RGMb)表达水平。结果:与模型组比较,联合组抑瘤率最高,其次为顺铂组,XCFZ中剂量组。与模型组比较,XCFZ中剂量组去瘤后体质量升高(P<0.05),顺铂组降低(P<0.05)。与模型组比较,顺铂组及XCFZ高、中剂量组ATP 5B mRNA,COX IV mRNA表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组ATP含量均降低(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,联合组ATP含量显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,联合组及XCFZ各剂量组ADP/ATP及AMP/ATP显著升高(P<0.05或P<0.01);与顺铂组比较,XCFZ中剂量组ADP/ATP及AMP/ATP显著升高(P<0.05或P<0.01)。TUNEL染色可见模型组肿瘤细胞凋亡稀少,而各给药组肿瘤细胞凋亡明显增多;各给药组肿瘤细胞稀疏,细胞间空洞较多;DDP组和联合组可见大量坏死细胞,肿瘤细胞抑制萎缩,伴大量碎裂和固缩细胞核及多见胞间空洞。与模型组比较,各用药组PD-L2和RGMb蛋白表达水平显著降低(P<0.05);与顺铂组比较,联合组及XCFZ中、高剂量组PD-L2/RGMb蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:XCFZ对Lewis肺癌小鼠具有抑瘤作用,且可提高小鼠的体质量,其机制可能与抑制肿瘤组织能量代谢和下调PD-L2和RGMb蛋白表达相关。 展开更多
关键词 香草扶正合剂 肺癌 ATP 5B COX IV pd-l2/RGMb 小鼠
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PD-L2的生物学功能及其在相关疾病中的研究进展
3
作者 宋赛哲 丁思思 刘翠平 《现代免疫学》 2025年第1期65-69,共5页
PD-L2与PD-1结合抑制T细胞增殖和细胞因子产生,与排斥引导分子b(repulsive guidance molecule b,RGMb)结合作用与之相反。研究发现PD-L2在肿瘤或自身免疫病患者的外周血和相应组织中表达异常,并通过糖基化修饰、与免疫细胞相互作用等方... PD-L2与PD-1结合抑制T细胞增殖和细胞因子产生,与排斥引导分子b(repulsive guidance molecule b,RGMb)结合作用与之相反。研究发现PD-L2在肿瘤或自身免疫病患者的外周血和相应组织中表达异常,并通过糖基化修饰、与免疫细胞相互作用等方式参与疾病进展。为充分了解PD-L2的调节、表达及与受体结合后对肿瘤和自身免疫病的影响,该文首先对PD-L2的生物学特性进行阐明,论述了其参与疾病进展的方式,随后对PD-L2参与肿瘤和自身免疫病的研究进展进行总结,最后展望了其研究价值,希望能为肿瘤等多种疾病的研究及治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 pd-l2 生物学特性 生物学靶点
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PD-L2调控EMT影响头颈部鳞状细胞癌转移的机制研究
4
作者 余小雪 孙孟宇 +4 位作者 刘超 郑建伟 梅玫 周旋 任玉 《中国肿瘤临床》 北大核心 2025年第11期550-556,共7页
目的:探讨程序性死亡受体配体2(programmed death-ligand 2,PD-L2)和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的特征性表达及其影响HNSCC转... 目的:探讨程序性死亡受体配体2(programmed death-ligand 2,PD-L2)和上皮间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关指标在头颈部鳞状细胞癌(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)中的特征性表达及其影响HNSCC转移的机制。方法:收集2018年1月至2023年7月天津医科大学肿瘤医院94例HNSCC患者肿瘤组织样本,免疫组织化学染色评估PD-L2蛋白的表达水平,统计评估其与淋巴结转移等临床病理参数的相关性。Western blot实验检测HNSCC中PD-L2的表达水平。慢病毒载体构建过表达和敲除PD-L2的稳转单克隆细胞系,Transwell实验探究PD-L2对HNSCC细胞系的侵袭迁移的影响。RNA测序技术确定受PD-L2调控的下游靶基因。通过Western blot分析检测E-cadherin、N-cadherin和Vimentin等关键EMT标志物的表达水平,以阐明PD-L2通过激活EMT通路促进肿瘤细胞转移的分子机制。结果:HNSCC中PD-L2高表达与N分期呈正相关(P<0.05),并且PD-L2高表达预示HNSCC患者预后不良。结论:PD-L2调控EMT促进HNSCC转移,靶向PD-L2有望成为治疗转移性HNSCC新策略。 展开更多
关键词 头颈部鳞状细胞癌 程序性死亡受体配体2 上皮间充质转化 转移
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共刺激分子PD-L1、PD-L2和B7-H4在人子宫颈癌的表达及意义 被引量：9
5
作者 耿卫朴 徐曼 +5 位作者 王渝琦 徐光旭 陈瑜 王婷婷 黄文炼 赵涌 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1186-1190,共5页
目的：研究共刺激分子程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmeddeath ligand 2,PD-L2）和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV-6000法检测PD-L1、PD... 目的：研究共刺激分子程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）、程序性死亡配体2（Programmeddeath ligand 2,PD-L2）和B7-H4在人子宫颈癌的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学PV-6000法检测PD-L1、PD-L2和B7-H4在10例正常人宫颈组织、10例高级别CIN（CINⅡ~Ⅲ级）和67例子宫颈癌中的表达,并分析3种共刺激分子的表达与子宫颈患者临床病理特征的相关性。结果：正常人宫颈组织上皮不表达PD-L1和B7-H4,而基底层细胞微弱表达PD-L2;CINⅡ~Ⅲ的瘤变宫颈上皮微弱表达PD-L1、PD-L2和B7-H4;子宫颈癌细胞表达PD-L1、PD-L2和B7-H4的阳性率分别为70%（47/67）、51%（34/67）和46%（31/67）。统计学分析显示宫颈癌细胞PD-L1的表达与癌细胞浸润深度明显相关（P〈0.01）,与年龄、组织学类型无关;PD-L2的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）有关;B7-H4的表达与肿瘤的淋巴结转移（P〈0.05）和局部血管内瘤栓形成（P〈0.05）相关。结论：人子宫颈癌细胞异常表达PD-L1、PD-L2和B7-H4,且与肿瘤浸润和转移密切相关。PD-L1、PD-L2和B7-H4可能成为子宫颈癌免疫治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 pd-l1、pd-l2、B7-H4 子宫颈癌 免疫组织化学
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表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用 被引量：5
6
作者 王国艳 王斐斐 +2 位作者 李恒 张丽霞 栾希英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期132-136,共5页
目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)... 目的探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响。方法应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siR-NA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响。结果除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用。结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用。 展开更多
关键词 人胎盘源性间充质干细胞 pd-l1 pd-l2 T细胞 IL-17
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系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其临床意义 被引量：6
7
作者 吴萍萍 沈冬 +4 位作者 郭云娣 张雅琴 傅丰庆 刘翠平 孙静 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期414-417,共4页
目的:分析系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其与疾病活动程度的相关性。方法:收集26例系统性红斑狼疮患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后,TRIZOL抽提总RNA,定量PCR分析PD-L2基因的表达,流式细胞仪检... 目的:分析系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2分子的表达及其与疾病活动程度的相关性。方法:收集26例系统性红斑狼疮患者及38例健康对照组外周血,Ficoll分离单个核细胞后,TRIZOL抽提总RNA,定量PCR分析PD-L2基因的表达,流式细胞仪检测CD14、PD-L2分子的表达。统计学分析其相关性及与疾病活动程度之间的关联。结果:定量PCR结果提示系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞PD-L2基因表达高于健康对照组(P<0.05),流式发现单核细胞上PD-L2高表达(P<0.05),且活动期患者表达高于稳定期,并且与疾病的评分(SLEDAI)呈正相关(P<0.05)。结论:免疫分子PD-L2可能参与系统性红斑狼疮疾病的进程并可能成为疾病预防及治疗的潜在分子。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 pd-l2 SLEDAI
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PD-L1/PD-L2对食管鳞癌细胞恶性表型的影响及耐药研究
8
作者 梁艳 郑树涛 +3 位作者 和硕 谭依依 彭天元 卢晓梅 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第2期160-168,共9页
目的探讨程序性死亡配体1/2(PD-L1/PD-L2)对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对化疗药物的敏感性。方法在体外食管鳞癌KYSE150细胞系水平上,分别构建PD-L1杂合子敲除细胞系,慢病毒转染PD-L2过表达,将细胞分为WT组(PD-L1野生型)和PD... 目的探讨程序性死亡配体1/2(PD-L1/PD-L2)对食管鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及对化疗药物的敏感性。方法在体外食管鳞癌KYSE150细胞系水平上,分别构建PD-L1杂合子敲除细胞系,慢病毒转染PD-L2过表达,将细胞分为WT组(PD-L1野生型)和PD-L1^(+/-)组(PD-L1杂合子敲除)、Ctrl组(对照)和OE-PD-L2组(PD-L2过表达),用RT-qPCR和Western blot验证PD-L1杂合子敲除和慢病毒转染PD-L2过表达效果以用于后续实验。采用EdU、细胞克隆形成实验、Transwell实验检测各组细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过CCK8法检测细胞增殖能力并计算抑制率来评估细胞对化疗药物的敏感性。结果与野生型WT组相比,PD-L1^(+/-)组细胞增殖(P<0.001)、迁移(P<0.01)和侵袭能力(P<0.05)明显降低,差异有统计学意义。与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖和迁移能力增加(P<0.05),而侵袭能力无明显差异(P>0.05)。在顺铂药物梯度浓度干预下,与WT组相比较,PD-L1^(+/-)组细胞增殖活力明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。当顺铂药物浓度为20μmol/L时,与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力无明显变化(P>0.05),而在40μmol/L药物浓度作用下,与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力显著上升,差异有统计学意义(P<0.001)。加入不同浓度的五氟尿嘧啶后发现,与WT组相比,PD-L1^(+/-)组细胞增殖活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Ctrl组相比,OE-PD-L2组细胞增殖活力显著下降(P<0.01)。比较WT组与PD-L1^(+/-)组特异性表达差异的蛋白,共获得25个差异表达蛋白质,其中差异倍数最为显著的上调蛋白为EGFR(Ser1070),下调蛋白为Smad4。结论PD-L1能够促进食管鳞癌细胞的恶性表型;PD-L2可以促进食管鳞癌细胞(ESCC)的增殖和迁移;PD-L1/PD-L2可以影响肿瘤细胞对顺铂和五氟尿嘧啶化疗药物的敏感性。 展开更多
关键词 程序性死亡配体1 程序性死亡配体2 食管鳞癌细胞 恶性表型 耐药
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系膜增生性肾小球肾炎患者外周血单个核细胞及肾组织PD-L1/PD-L2的表达变化 被引量：4
9
作者 程悦 张静波 +2 位作者 王代红 李芙蓉 袁发焕 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期303-306,共4页
目的观察系膜增生性肾小球肾炎患者外周血单个核细胞(PBMC)及肾组织活检标本中抑制性协同刺激分子PD-L1/PD-L2表达的变化。方法收集2007年11月-2008年5月在第三军医大学新桥医院住院的25例原发性系膜增生性肾小球肾炎患者作为病例组,另... 目的观察系膜增生性肾小球肾炎患者外周血单个核细胞(PBMC)及肾组织活检标本中抑制性协同刺激分子PD-L1/PD-L2表达的变化。方法收集2007年11月-2008年5月在第三军医大学新桥医院住院的25例原发性系膜增生性肾小球肾炎患者作为病例组,另外选择10例正常人作为正常对照组。全血法多色流式细胞染色技术检测两组的PBMC CD4+和CD8+ T细胞上PD-L1和PD-L2的表达水平;免疫组化方法检测肾组织活检标本中PD-L1和PD-L2的表达情况。结果病例组患者PBMC CD4+ T细胞比例(31.78%±8.48%)明显高于正常对照组(22.17%±8.00%,P<0.05),而CD8+T细胞比例(23.06%±10.32%)与正常对照组(21.56%±5.32%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。病例组患者PBMC CD4+和CD8+ T细胞上PD-L1表达阳性率(分别为14.21%±11.87%、12.92%±12.86%)均较正常对照组(分别为5.39%±4.92%、5.06%±4.61%)显著升高(P<0.05);而两组PBMC CD4+及CD8+ T细胞上PD-L2的表达很少甚至无表达,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。正常对照组中肾组织PD-L1表达很少甚至无表达,病例组肾小管上皮细胞可见PD-L1阳性表达;两组肾活检组织中均未检测到PD-L2表达。结论系膜增生性肾小球肾炎患者中抑制性协同刺激分子PD-L1表达上调,可能参与了疾病的免疫发病机制。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 膜增生性 外周血单个核细胞 pd-l1 pd-l2
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猪PD-1及其配体PD-L1和PD-L2 SYBR Green Ⅰ Real-time PCR检测方法的建立及应用 被引量：3
10
作者 岳锋 周娟娟 +3 位作者 朱艳平 李鹏 孙国鹏 王选年 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期2892-2899,共8页
本试验旨在研究猪PD-1及其配体在疾病状态下的转录水平,建立检测猪PD-1及其配体的Real-time PCR方法。根据GenBank中猪PD-1、PD-L1和PD-L2基因序列,分别设计3对特异性引物,PCR扩增目的基因片段,回收目的基因片段与pMD18-T连接后转化至... 本试验旨在研究猪PD-1及其配体在疾病状态下的转录水平,建立检测猪PD-1及其配体的Real-time PCR方法。根据GenBank中猪PD-1、PD-L1和PD-L2基因序列,分别设计3对特异性引物,PCR扩增目的基因片段,回收目的基因片段与pMD18-T连接后转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞中,提取重组质粒,经PCR及测序鉴定正确,作为标准品绘制标准曲线,并进行特异性和重复性检测。结果显示,Real-time PCR的Ct值与模板浓度对数呈良好的线性反比关系,相关系数R2>0.99,熔解曲线出现狭窄单一峰;Real-time PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,呈单一目的条带,无引物二聚体,特异性强;组内和组间重复性检测结果显示,组内和组间的变异系数均小于3%,重复性好;用建立的Real-time PCR方法检测猪自然感染PCV2后PD-1及其配体转录水平,PD-L1和PD-L2转录水平极显著或显著升高(P<0.01;P<0.05),PD-1转录水平无显著变化(P>0.05)。本试验建立了检测猪PD-1、PDL1和PD-L2mRNA的Real-time PCR方法并进行了初步应用,为猪PD-1、PD-L1和PD-L2基因表达模式研究奠定基础。 展开更多
关键词 REAL-TIME PCR PD-1 pd-l1 pd-l2
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PD-L2在宫颈鳞状细胞癌的表达及对外周血T细胞凋亡的影响 被引量：4
11
作者 耿卫朴 徐曼 +3 位作者 张燕 陈瑜 黄文炼 王婷婷 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1052-1054,1057,共4页
目的检测负性共刺激分子PD-L2在人宫颈鳞状细胞癌的表达情况,分析其与患者临床病理特征的相关性,并观察重组人PD-L2蛋白对患者外周血T细胞凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色检测PD-L2蛋白在60例宫颈鳞状细胞癌患者癌组织中的表达,... 目的检测负性共刺激分子PD-L2在人宫颈鳞状细胞癌的表达情况,分析其与患者临床病理特征的相关性,并观察重组人PD-L2蛋白对患者外周血T细胞凋亡的影响。方法采用免疫组织化学染色检测PD-L2蛋白在60例宫颈鳞状细胞癌患者癌组织中的表达,并统计分析PD-L2蛋白表达与宫颈鳞状细胞癌患者临床病理特征的相关性。将患者外周血T淋巴细胞分为空白对照组、PD-L2组和PD-L2+抗PD-1组单克隆抗体组,流式细胞术分析各组T细胞的凋亡率。结果宫颈鳞状细胞癌表达PD-L2的阳性率为53.3%(32/60)。PD-L2的表达与宫颈鳞状细胞癌的淋巴结转移相关(P<0.05)。PD-L2组宫颈鳞状细胞癌患者外周血活化CD4+T和CD8+T的凋亡率分别为17.0%和22.4%,明显高于空白对照组9.0%和16.2%;加入抗PD-1阻断PD-L2与T淋巴细胞、PD-1结合后,PD-L2+抗PD-1组CD4+T和CD8+T淋巴细胞凋亡率下降到11.1%和17.5%。结论宫颈鳞状细胞癌细胞异常表达PD-L2,且与肿瘤的淋巴结转移有关。PD-L2通过促进T细胞凋亡而削弱宫颈微环境的抗肿瘤免疫,并促进肿瘤的淋巴结转移。PD-L2/PD-1途径有可能成为宫颈鳞状细胞癌免疫治疗的靶点之一。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 T淋巴细胞 淋巴转移 pd-l2
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人PD-L2基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1
12
作者 何贤辉 徐丽慧 +2 位作者 刘毅 蔡小嫦 曾耀英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期346-349,共4页
目的　克隆人PD L2基因并构建PD L2胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法　以RT PCR方法从活化的人外周血单个核细胞总RNA中克隆PD L2基因的cDNA ,构建PD L2胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定... 目的　克隆人PD L2基因并构建PD L2胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法　以RT PCR方法从活化的人外周血单个核细胞总RNA中克隆PD L2基因的cDNA ,构建PD L2胞外区的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定。结果　克隆到PD L2基因cDNA编码区全长序列 ,经DNA测序证明其与已报道的序列一致。进而构建了PD L2胞外区的原核表达载体 ,并在大肠杆菌表达 ,免疫印迹分析表明在IPTG诱导后表达PD L2胞外区蛋白 ,相对分子质量Mr 为 2 2 0 0 0 ,与理论值大小相符。结论　成功克隆PD L2基因 ,其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达 ,为进一步研究PD L2功能提供了条件。 展开更多
关键词 pd-l2 基因克隆 大肠杆菌 重组蛋白
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B7家族新成员PD-L1、PD-L2的研究进展 被引量：7
13
作者 徐宽枫 张学光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期522-524,F003,共4页
关键词 B7-1 B7-2 pd-l1 pd-l2 PD-1 Whn 协同刺激信号 T细胞活化双信号模型 抗原特异性 免疫应答
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共刺激分子PD-L2在类风湿关节炎组织内的表达 被引量：1
14
作者 郭国宁 朱国宴 +2 位作者 尚永军 文亮 尹昌林 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期977-981,共5页
目的探讨共刺激分子PD-L2在牛二型胶原(CII)诱导的类风湿关节炎模型小鼠免疫器官、关节及RA患者滑膜组织内的表达。方法使用牛二型胶原免疫DBA-1/j小鼠,建立小鼠类风湿关节炎模型;免疫组化检测类风湿关节炎标本PD-L2的表达变化;双色免... 目的探讨共刺激分子PD-L2在牛二型胶原(CII)诱导的类风湿关节炎模型小鼠免疫器官、关节及RA患者滑膜组织内的表达。方法使用牛二型胶原免疫DBA-1/j小鼠,建立小鼠类风湿关节炎模型;免疫组化检测类风湿关节炎标本PD-L2的表达变化;双色免疫荧光分析PD-L2的细胞学定位。结果免疫组化的结果证实,小鼠的骨髓、胸腺、脾脏及淋巴结有中有大量的PD-L2阳性细胞,免疫荧光分析结果表明这些PD-L2+细胞主要为CD68+巨噬细胞及CD31+内皮细胞。但PD-L2表达及分布在CIA小鼠内并没有显著提高。此外RA患者及CIA小鼠的滑膜组织内发现大量PD-L2阳性的细胞。结论 PD-L2高表达于CIA模型小鼠关节滑膜组织内的抗原递呈细胞(包括巨噬细胞及内皮细胞)表面,提示其有可能通过调节浸润于滑膜组织内的T细胞的功能状态并最终调节了关节炎的病理进程。 展开更多
关键词 pd-l2 类风湿关节炎 滑膜组织 免疫器官 免疫组化
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子宫颈鳞状细胞癌中PD-L2的表达及临床意义 被引量：1
15
作者 缪小兵 张邢松 +2 位作者 沈蓉 朱兴华 贾美群 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期559-563,共5页
目的探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)组织中程序性死亡配体-2(programmed death-ligand 2,PD-L2)的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测CSCC及子宫颈腺癌(cervical adenocarcinoma,CAC)组织中... 目的探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)组织中程序性死亡配体-2(programmed death-ligand 2,PD-L2)的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测CSCC及子宫颈腺癌(cervical adenocarcinoma,CAC)组织中PD-L2的表达;分析PD-L2表达与CSCC临床病理特征、无瘤生存期(disease free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)的关系。结果肿瘤细胞PD-L2的总阳性率为16.8%(24/143),肿瘤浸润性免疫细胞(tumor-infiltrating immune cell,TIIC)PD-L2的总阳性率为66.4%(95/143)。肿瘤细胞PD-L2在CSCC中的阳性率为16.3%(21/129),TIIC PD-L2在CSCC中的阳性率为65.1%(84/129);肿瘤细胞PD-L2在CAC中的阳性率为21.4%(3/14),TIIC PD-L2在CAC中的阳性率为78.6%(11/14)。肿瘤细胞中PD-L2表达与CSCC肿瘤浸润深度有关,其在浸润深度<1/3纤维肌层患者中的表达低于浸润深度>1/3纤维肌层患者(P=0.040);肿瘤细胞中PD-L2表达与CSCC患者年龄、脉管侵犯、肿瘤分化、肿瘤直径、淋巴结转移以及FIGO分期均无关(P均>0.05)。TIIC PD-L2表达与肿瘤分化相关,其在高+中分化肿瘤(75.0%,42/56)中的表达高于低分化肿瘤(57.5%,42/73)(P=0.039);TIIC PD-L2表达与CSCC患者年龄、脉管侵犯、浸润深度、肿瘤直径、淋巴结转移以及FIGO分期均无关(P均>0.05)。肿瘤细胞PD-L2表达与CSCC患者的DFS和OS均无关(P均>0.05)。CSCC中TIIC PD-L2阳性患者比PD-L2阴性患者的DFS(P=0.0072)和OS(P=0.0119)长。Cox单因素和多因素回归分析显示:TIIC PD-L2表达是影响CSCC患者DFS和OS的相关因素,但不是独立的预后因素。结论CSCC肿瘤细胞及TIIC均可表达PD-L2,TIIC PD-L2阳性者比阴性者的DFS和OS长;检测PD-L2的表达状态可为子宫颈癌的免疫治疗提供参考。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 肿瘤细胞 肿瘤浸润性免疫细胞 pd-l2 免疫组织化学
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人乳腺癌中共刺激分子PD-L1、PD-L2的表达及其临床意义 被引量：11
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作者 耿卫朴 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期59-62,共4页
目的探讨共刺激分子PD-L1、PD-L2在人乳腺癌的表达及其与临床病理特征、预后的相关性。方法采用免疫组化SP两步法检测PD-L1、PD-L2在10例正常乳腺组织、18例乳腺导管内癌和40例乳腺浸润性导管癌中的表达,并分析两种共刺激分子的表达与... 目的探讨共刺激分子PD-L1、PD-L2在人乳腺癌的表达及其与临床病理特征、预后的相关性。方法采用免疫组化SP两步法检测PD-L1、PD-L2在10例正常乳腺组织、18例乳腺导管内癌和40例乳腺浸润性导管癌中的表达,并分析两种共刺激分子的表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果正常人乳腺腺上皮不表达PD-L1和PD-L2,乳腺导管内癌弱表达PDL1和PD-L2,乳腺浸润性导管癌中PD-L1和PD-L2的阳性率分别为45%(18/40)、35%(14/40),显著高于PD-L1和PD-L2在乳腺导管内癌的表达。统计学分析结果显示PD-L1和PD-L2表达与乳腺癌淋巴结转移(P<0.05)密切相关。PD-L1和PD-L2表达与ER、PR表达(P<0.05)有相关性,但PD-L1、PD-L2表达与乳腺癌其他临床病理特征无相关性。PD-L1和PD-L2表达在ER、PR、HER-2均阴性的乳腺癌患者中高表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论人乳腺癌癌细胞异常表达PD-L1和PD-L2,且与淋巴结转移密切相关;PD-L1和PD-L2有望成为乳腺癌免疫治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 pd-l1 pd-l2 免疫组织化学
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抗原修复液pH值和抗体浓度对免疫组织化学技术检测PD-L2染色结果的影响 被引量：3
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作者 张丽娜 李水仙 +1 位作者 闫惠卿 武文帅 《长治医学院学报》 2017年第1期26-28,共3页
目的:探讨不同浓度抗体和不同pH值的抗原修复液对免疫组织化学反应结果的影响,以提高免疫组织化学染色阳性率。方法:采用3种不同抗体浓度作预处理后,分别在pH值6.0和pH值9.0条件下,进行免疫组织化学SP法检测PD-L2分子在食管磷状细胞癌... 目的:探讨不同浓度抗体和不同pH值的抗原修复液对免疫组织化学反应结果的影响,以提高免疫组织化学染色阳性率。方法:采用3种不同抗体浓度作预处理后,分别在pH值6.0和pH值9.0条件下,进行免疫组织化学SP法检测PD-L2分子在食管磷状细胞癌组织中的免疫组织化学染色效果。结果:PD-L2抗体稀释浓度1∶400的免疫组化染色效果优于抗体浓度1∶800;pH值9.0的抗原修复液处理后的免疫组化染色效果优于pH值6.0的抗原修复。结论:PD-L2抗体稀释浓度1∶400,pH值9.0抗原修复液处理后的免疫组化染色效果最佳,既可提高免疫组织化学反应阳性表达率,又能提高制片质量,是理想的检测PD-L2分子免疫组织化学反应的优化方案。 展开更多
关键词 pd-l2 抗原修复 免疫组织化学技术
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PD-L2表达的研究及其在肝细胞癌中的意义 被引量：1
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作者 杜玉 黄旭晖 +1 位作者 王昌俊 郭苇 《现代医院》 2019年第12期1808-1810,共3页
近十年最引人注目的抗肿瘤免疫疗法就是PD-1/PD-L1免疫疗法,即阻断PD-1/PD-L1信号通路增强抗肿瘤免疫。PD-1和PD-L1的过表达已被证明与多种肿瘤的预后不良相关。PD-L2作为PD-1的另一个配体,近年的研究发现PD-L2在所有的肿瘤类型中均有表... 近十年最引人注目的抗肿瘤免疫疗法就是PD-1/PD-L1免疫疗法,即阻断PD-1/PD-L1信号通路增强抗肿瘤免疫。PD-1和PD-L1的过表达已被证明与多种肿瘤的预后不良相关。PD-L2作为PD-1的另一个配体,近年的研究发现PD-L2在所有的肿瘤类型中均有表达,在不同类型的肿瘤中差异非常显著,在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)中阳性率较高,与PD-1的结合强度是PD-L1的3倍。PD-L2是实体癌患者预后的负预测因子,其高表达可能促进实体癌患者术后肿瘤转移,并预测预后不良,尤其是HCC患者。PD-L2阳性表达对HCC中OS、DFS和PFS的预测不利,PD-L2高表达预测HCC患者DFS/PFS较差,PD-L2能在HCC中作为预后标志物。进一步总结和研究PD-L2的表达及作用,对HCC的抗肿瘤免疫治疗有重要意义。 展开更多
关键词 pd-l2 HCC 肿瘤免疫治疗
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原发性肝癌PD-L1和PD-L2表达 被引量：3
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作者 王征帆 王豪勋 +7 位作者 李楠 赵晓静 张中冕 陈香宇 周士霞 张玲 段芳龄 马军 《医药论坛杂志》 2017年第2期14-15,共2页
目的研究原发性肝癌和癌旁组织中PD-L1和PD-L2的表达。方法采用组织芯片和免疫组化方法,检测40例HCC、36例癌旁组织PD-L1和PD-L2表达,其中36例HCC和27例癌旁组织有病理临床资料。结果 PD-L1在HCC和癌旁组织中的表达率分别为50%和77.8%(P... 目的研究原发性肝癌和癌旁组织中PD-L1和PD-L2的表达。方法采用组织芯片和免疫组化方法,检测40例HCC、36例癌旁组织PD-L1和PD-L2表达,其中36例HCC和27例癌旁组织有病理临床资料。结果 PD-L1在HCC和癌旁组织中的表达率分别为50%和77.8%(P<0.05),PD-L2的表达率分别为70%和80.6%(P>0.05),未发现PD-L1或PD-L2的表达和年龄、性别、HBV的感染状态、转移等有相关性。配对分析显示PD-L1和PD-L2在癌旁组织的表达有同样的趋势,而HCC中PD-L2表达高于PD-L1。结论HCC中有较高的PD-L1和PD-L2表达率,PD-L1可能在肝癌发病早期起重要作用。 展开更多
关键词 原发性肝癌 pd-l1 pd-l2
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PD-L1mRNA与PD-L2mRNA在口腔扁平苔藓中的表达特点及可能作用
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作者 杜观环 秦孝鹏 +3 位作者 李琴 周永梅 沈雪敏 唐国瑶 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2011年第6期619-622,共4页
目的:研究PD-L1mRNA、PD-L2mRNA在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者外周血与损害组织,以及在不同临床类型与病理分型中的表达特点。方法:采用实时定量PCR方法检测60例OLP患者(斑纹型35例,充血糜烂型25例;不伴异常增生38例,伴... 目的:研究PD-L1mRNA、PD-L2mRNA在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)患者外周血与损害组织,以及在不同临床类型与病理分型中的表达特点。方法:采用实时定量PCR方法检测60例OLP患者(斑纹型35例,充血糜烂型25例;不伴异常增生38例,伴轻度异常增生22例)PD-L1mRNA、PD-L2mRNA表达水平,并以10名正常人外周血与黏膜组织作为对照,比较不同临床类型和病理类型OLP患者间PD-L1mRNA、PD-L2mRNA表达水平差异,并分析PD-L1mRNA、PD-L2mRNA在OLP患者外周血与损害组织中表达的相关性。利用SAS6.12软件包中的非配对两样本均数比较的Wilcoxon秩和检验,比较不同组别间的差异。结果:PD-L2mRNA在OLP患者外周血中表达降低,损害组织中表达升高,且在不同临床类型OLP患者之间存在显著差异(P<0.05)。PD-L1mRNA在OLP组与正常对照组之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PD-L2分子可能在OLP患者全身与损害局部对OLP的发生、发展产生不同的影响。 展开更多
关键词 口腔扁平苔藓 pd-l2 pd-l1 定时定点PCR
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