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猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
1
作者
马红艳
蒋智勇
+2 位作者
孙丽华
郝永清
宋长绪
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期666-669,共4页
根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的...
根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。
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关键词
pcv1orf1
克隆
表达
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职称材料
题名
猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
1
作者
马红艳
蒋智勇
孙丽华
郝永清
宋长绪
机构
内蒙古农业大学动物科学与医学学院
广东省农业科学院兽医研究所
出处
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第8期666-669,共4页
基金
国家食品安全重大专项(2001BA804A31)
广东省农业科技攻关项目(2003B21404
+3 种基金
20052490100)
广东省自然基金项目(04002083
031990)
广东省自然基金重点项目(06105311)
文摘
根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(PCV1)ORF1基因序列,设计合成了1对引物,对PCV1 ORF1基因进行PCR扩增,将扩增出的ORF1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-ORF1。测序分析表明,克隆的ORF1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将ORF1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-ORF1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,PCV1ORF1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。
关键词
pcv1orf1
克隆
表达
Keywords
PCV1 ORF1
cloning
expression
分类号
S852.659 [农业科学—基础兽医学]
Q786 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪圆环病毒Ⅰ型ORF1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
马红艳
蒋智勇
孙丽华
郝永清
宋长绪
《中国兽医科学》
CAS
CSCD
北大核心
2007
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