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PCSK6对可溶性corin的活化作用研究 被引量：1
1
作者 李枫 周田甜 +1 位作者 刘萌 董宁征 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期15-20,共6页
目的:研究前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein convertase subtilisin/kextin type 6,PCSK6)对可溶性corin的活化作用,以及PCSK6作用后的可溶性corin是否具有生物学活性。方法:以野生型corin质粒为模板,通过PCR扩增出不含跨膜区的cori... 目的:研究前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein convertase subtilisin/kextin type 6,PCSK6)对可溶性corin的活化作用,以及PCSK6作用后的可溶性corin是否具有生物学活性。方法:以野生型corin质粒为模板,通过PCR扩增出不含跨膜区的corin基因片段,并将目的基因克隆至真核表达载体p SEC得到重组质粒p SECsol Corin,测序验证。分别将可溶性corin、PCSK6及心钠肽前体(pro-atrial natriuretic peptide,pro-ANP)的表达载体转染人胚胎肾(human embryonic kidney,HEK)293细胞,收取上清液。然后将可溶性corin上清液与不同体积的PCSK6上清液共同孵育,免疫印迹(Western blot)方法检测corin蛋白的活化情况。再将PCSK6作用后的可溶性corin与pro-ANP上清液共孵育,检测可溶性corin的生物学活性。结果:构建了可溶性corin的表达质粒,并在HEK293细胞成功表达可溶性corin蛋白。可溶性corin的上清液与pcsk6上清液共同孵育后可检测到活化条带,并可使pro-ANP活化为ANP。结论:PCSK6同样可以剪切活化可溶性corin蛋白,活化后的corin具有生物学活性。为可溶性corin用于心衰的临床治疗提供了重要基础。 展开更多
关键词 可溶性corin pcsk6 pro-ANP 心力衰竭
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siRNA沉默PCSK6基因对胶原诱导性关节炎的影响 被引量：1
2
作者 姜慧钰 王林 潘继红 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第12期20-26,共7页
目的探讨siRNA沉默PCSK6基因对胶原诱导性关节炎(CIA)成纤维样滑膜细胞(FLS)生物学行为的影响。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA模型,取膝关节滑膜组织原代培养FLS;采用人工合成的siRNA oligo-433干扰剂、siRNA oligo-688干扰剂、siRNA o... 目的探讨siRNA沉默PCSK6基因对胶原诱导性关节炎(CIA)成纤维样滑膜细胞(FLS)生物学行为的影响。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA模型,取膝关节滑膜组织原代培养FLS;采用人工合成的siRNA oligo-433干扰剂、siRNA oligo-688干扰剂、siRNA oligo-2506干扰剂特异性抑制PCSK6在CIA FLS中的表达,阴性siRNA为阴性对照组,瞬时转染24、36 h后,采用RT-q PCR法检测抑制效率,同时检测PCSK6基因沉默后各相关基因的表达;采用MTT、Transwell、细胞划痕、流式细胞术、ELISA等方法检测干扰PCSK6表达后对细胞增殖、侵袭、迁移、细胞周期和相关炎性因子分泌的影响。结果转染特异性siRNA-PCSK6后,各干扰组与阴性对照组相比,siRNA oligo-2506干扰剂转染24 h时,PCSK6 mRNA水平抑制效果显著(P<0.001),CIA FLS的增殖受到抑制(P<0.001),细胞的侵袭和迁移能力下降(P<0.001),肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)分泌降低(P<0.001),G_0/G_1期的细胞数目增多(P<0.05),PCSK6下游基因CXCL9、MMP2、MMP9、NOSTRIN、HIF-1α、M PZL2、IGF2、PADI4表达均明显下降(P<0.05)。结论 PCSK6基因沉默对CIA FLS的生物学行为具有一定作用,为进一步研究CIA发病机制奠定基础。 展开更多
关键词 pcsk6 SIRNA 胶原诱导性关节炎 类风湿关节炎 成纤维样滑膜细胞
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PCSK6在心血管疾病中的作用
3
作者 朱雯钰 唐毅 彭建强 《国际心血管病杂志》 2024年第6期354-355,359,共3页
前蛋白转化酶枯草溶菌素6(PCSK6)是分泌型丝氨酸蛋白酶,可裂解多种生长因子、信号分子、肽类激素、蛋白水解酶和黏附蛋白。在心血管系统中,PCSK6在心脏形成、脂蛋白代谢、体液稳态、心脏修复和血管重构中起着关键的调节作用。PCSK6的表... 前蛋白转化酶枯草溶菌素6(PCSK6)是分泌型丝氨酸蛋白酶,可裂解多种生长因子、信号分子、肽类激素、蛋白水解酶和黏附蛋白。在心血管系统中,PCSK6在心脏形成、脂蛋白代谢、体液稳态、心脏修复和血管重构中起着关键的调节作用。PCSK6的表达或功能失调与急性心肌梗死后心室重构、动脉粥样硬化和血管重构、高血压、房间隔缺损和心脏老化等多种心血管疾病有关。 展开更多
关键词 pcsk6 心肌梗死 心室重构 高血压 动脉粥样硬化
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PCSK6联合脑钠肽在肾功能不全合并心力衰竭中的应用价值
4
作者 田文倩 刘诗语 +2 位作者 陆静谊 张家明 胡亚会 《医药论坛杂志》 2024年第12期1263-1266,1271,共5页
目的探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein converting enzyme subtilysin 6,PCSK6)在慢性肾功能不全(CRI)合并心力衰竭(HF)中的表达水平,PCSK6和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)联合诊断在CRI合并HF中的应用价值。方法选取2... 目的探讨前蛋白转化酶枯草溶菌素6(proprotein converting enzyme subtilysin 6,PCSK6)在慢性肾功能不全(CRI)合并心力衰竭(HF)中的表达水平,PCSK6和脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)联合诊断在CRI合并HF中的应用价值。方法选取2023年6月1日至2024年1月31日于河南省两家三甲医院肾内科住院的慢性肾功能不全(CRI)患者129例,其中单纯CRI患者53例,HF患者76例。收集患者一般临床资料、BNP、肌酐、尿素氮、尿酸、胱抑素C、肾小球滤过率(eGFR)等检测指标和左心室射血分数、E/A值、室间隔厚度、左心室后壁厚度等心功能参数,采用ELISA方法比较两组血清PCSK6的浓度。采用Spearman相关性分析血清PCSK6与BNP的相关性。ROC曲线分析血清PCSK6和BNP联合诊断对CRI合并HF的预测价值。结果CRI合并HF组PCSK6、BNP等均高于单纯CRI组,且差异有统计学意义(P<0.05)。根据Spearman相关分析结果,血清PCSK6与BNP成正相关(r=0.440,P<0.001)。经ROC曲线分析,血清PCSK6联合BNP诊断CRI合并HF的AUC为0.884,高于PCSK6(AUC=0.822)、BNP(AUC=0.835)。结论血清PCSK6与BNP相关。血清PCSK6联合BNP对于CRI合并HF的诊断具有很好的预测价值,血清PCSK6有望成为CRI合并HF的新型标志物。 展开更多
关键词 肾功能不全 慢性 心力衰竭 pcsk6 脑钠肽
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绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1 mRNA的表达研究 被引量：8
5
作者 许惠娟 谢丽华 +3 位作者 李生强 陈娟 赖玉链 葛继荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期476-480,共5页
目的研究绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1及PCSK6的mRNA表达水平,探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1及PCSK6基因表达的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阳虚证组25例,32例健康绝经后妇女为对照组,RT-PC... 目的研究绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因LTBP1及PCSK6的mRNA表达水平,探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1及PCSK6基因表达的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证肾阳虚证组25例,32例健康绝经后妇女为对照组,RT-PCR法检测外周血LTBP1及PCSK6 mRNA的表达。结果肾阳虚证组LTBP1 mRNA表达水平低于健康对照组(F=7.473,P=0.008),差异有统计学意义;肾阳虚证组PCSK6 mRNA表达水平较健康对照组比较,有降低趋势,但差异无统计学意义;通过GO分析参与到的生物途径有细胞外组织形成、代谢过程、磷酸化作用、蛋白磷酸化、TGF-β的细胞外基质合成、BMP信号通路、细胞分泌等;通过Pathway分析参与到弹性纤维形成、细胞外基质组织、整合胰腺癌的通路、TGF-β信号通路、发育生物学、神经生长因子信号转导等通路相关。结论骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1基因表达下调相关联。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 肾阳虚证 LTBP1 pcsk6 MRNA
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