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HLA—DR.DQ基因与骨,关节结核的易感性研究
1
作者 刘忠泉 宋长兴 《结核病与胸部肿瘤》 2000年第3期182-187,共6页
目的 探讨HLA-DR.DQ基因多态性与骨、关节结核的遗传关联性,比较骨、关节结核与肺结核之间易感基因的差异。方法 采用聚合酶链反应一列特异引物(PCR-SSP)方法,对86例骨、关节结核,88例正常人及34例肺结核... 目的 探讨HLA-DR.DQ基因多态性与骨、关节结核的遗传关联性,比较骨、关节结核与肺结核之间易感基因的差异。方法 采用聚合酶链反应一列特异引物(PCR-SSP)方法,对86例骨、关节结核,88例正常人及34例肺结核的HLA-DR.DQ闰基因进行分析。结果 骨、关节结核组与正常人比较,骨、关节结核组DRB1^*09 DQB1^*0301基因频率增高(38.99%比8.24% PC〈0.001 展开更多
关键词 骨关节结核 HLA-DR.DQ pcr-sp
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肺癌患者外周血中表面活性蛋白D mRNA的表达及临床意义 被引量:5
2
作者 齐之丽 肖琅 +2 位作者 高英堂 杜建民 景丽 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第7期772-775,共4页
背景与目的:循环癌细胞的灵敏检测对于肺癌患者的预后及选择合适的治疗方法很重要。为此,我们建立了利用表面活性蛋白D(surfactantproteinD,SP-D)作为基因标志的RT-PCR方法,检测肺癌患者外周血中的癌细胞,并初步探讨其临床意义。方法:... 背景与目的:循环癌细胞的灵敏检测对于肺癌患者的预后及选择合适的治疗方法很重要。为此,我们建立了利用表面活性蛋白D(surfactantproteinD,SP-D)作为基因标志的RT-PCR方法,检测肺癌患者外周血中的癌细胞,并初步探讨其临床意义。方法:采用优化的套式RT-PCR方法,对26例伴肺外转移肺癌患者,37例无转移肺癌患者,15例良性肺疾病患者及15例健康志愿者外周血中SP-DmRNA的表达进行分析。结果:1)该方法灵敏度可达1×10-6,特异性强;2)采用此方法,伴肺外转移和无转移肺癌患者外周血中SP-DmRNA的检出率分别为92.3%(24/26)和24.3%(9/37),所有良性肺疾病患者和健康对照外周血中均未见SP-DmRNA的表达。结论:SP-DmRNA可能是检测肺癌患者外周血中是否存在癌细胞的一个有价值的指标,对肺癌的转移倾向有一定的提示作用,并有可能为制定治疗方案和评估预后提供重要的参考依据。 展开更多
关键词 表面活性蛋白D 肺肿瘤 循环癌细胞 RT-PCR SP-D MRNA
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盐单胞菌属BYS-1四氢嘧啶合成基因ectABC克隆及其盐激表达 被引量:10
3
作者 何健 黄星 +2 位作者 顾立锋 蒋建东 李顺鹏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期28-32,共5页
利用SEFA-PCR技术从中度嗜盐菌Halomonassp.BYS-1总DNA中克隆了四氢嘧啶合成基因ectABC及其上游序列(GenBank accession number DQ017757);OMIGA软件分析结果显示ectA、ectB、ectC位于同一个操纵子上,大小分别为573bp1、251bp和387bp,... 利用SEFA-PCR技术从中度嗜盐菌Halomonassp.BYS-1总DNA中克隆了四氢嘧啶合成基因ectABC及其上游序列(GenBank accession number DQ017757);OMIGA软件分析结果显示ectA、ectB、ectC位于同一个操纵子上,大小分别为573bp1、251bp和387bp,预测编码的DAT(L-二氨基丁酸转氨酶)、DAA(L-二氨基丁酸乙酰转移酶)和ES(四氢嘧啶合酶)大小分别为21.1kDa(191 amino acid)、45.7kDa(417 amino acid)和14.5kDa(129 amino acid);将包含ectABC基因及其上游1000bp序列的片段克隆到pUC19中并转化E.coliDH5α,转化子E.coli(pUC19ECT)能够在盐激条件下合成四氢嘧啶,但其耐盐能力没有得到显著改善。 展开更多
关键词 四氢嘧啶 ectABC基因 SEFA-PCR HALOMONAS sp.BYS-1 盐激表达
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促凋亡蛋白Bid在子宫内膜癌中的表达及意义 被引量:8
4
作者 毕芳芳 杨清 +1 位作者 王玉 郭振华 《现代肿瘤医学》 CAS 2012年第3期589-592,共4页
目的:检测促凋亡蛋白Bid在不同子宫内膜组织中的表达,探讨其与子宫内膜病变发生、发展的关系。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测30例正常子宫内膜组织和42例子宫... 目的:检测促凋亡蛋白Bid在不同子宫内膜组织中的表达,探讨其与子宫内膜病变发生、发展的关系。方法:应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP法)检测30例正常子宫内膜组织和42例子宫内膜癌组织中Bid mRNA及蛋白的表达,并分析表达量与子宫内膜癌临床病理学参数的关系。结果:Bid蛋白在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为11.253±2.984和21.361±3.056,差异有统计学意义(P<0.05);Bid蛋白mRNA在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的相对表达量分别为0.309±0.195和0.642±0.207,差异有统计学意义(P<0.05);在不同临床分期、不同组织学分级和肌层浸润的子宫内膜癌组织中Bid蛋白的表达量有统计学差异(P<0.05)。结论:Bid蛋白可能参与子宫内膜病变的发生发展过程。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 促凋亡蛋白Bid RT-PCR 免疫组化
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用rep-PCR技术研究中国花生根瘤菌的多样性 被引量:8
5
作者 李俊 徐玲玫 +3 位作者 樊蕙 李力 葛诚 杨苏声 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期296-304,共9页
采用细菌基因组重复序列PCR技术(简称repPCR)中常用的REPPCR和ERICPCR,对从中国11个省、市的23个点、24个花生品种采集的根瘤中分离的59株花生根瘤菌Bradyrhizobiumsp.(Ar... 采用细菌基因组重复序列PCR技术(简称repPCR)中常用的REPPCR和ERICPCR,对从中国11个省、市的23个点、24个花生品种采集的根瘤中分离的59株花生根瘤菌Bradyrhizobiumsp.(Arachis)进行多样性研究,同时对来自国外的6株花生根瘤菌及14株参比慢生根瘤菌也进行了比较。得到的低相似性结果表明中国花生根瘤菌基因组存在显著的多样性。REPPCR揭示,在相似性50%上分为11个群,而ERICPCR却得到24个分群。这两种结果对菌株的分群有差异,暗示这两种短重复序列在慢生根瘤菌基因组中的分布的不同。没有发现菌株间基因组的多样性分布与花生品种、地理来源之间的必然联系。将两者电泳图谱结合并分析,得到介于上述两者间的结果。此结果进一步反映了菌株基因组间存在的多样性。同时还表明repPCR不仅是研究生物多样性的快速简便方法,还可应用于菌株的鉴别和生态学研究。 展开更多
关键词 PCR 花生根瘤菌 多样性
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免疫捕捉-通用引物PCR检测食品中沙门氏菌 被引量:5
6
作者 张体银 黄晓蓉 +5 位作者 郑晶 邵碧英 黄嫦娇 陈彬 林杰 汤敏英 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第12期233-236,共4页
利用免疫吸附富集结合经典PCR技术建立免疫捕捉通用引物PCR(IC-UPPCR)检测食品中沙门氏菌。采用细菌16SrRNA基因保守区设计特异性引物,建立通用引物PCR技术是可行的,该IC-UPPCR检测沙门氏菌的灵敏度最低,能检测到2×102CFU/ml,检测... 利用免疫吸附富集结合经典PCR技术建立免疫捕捉通用引物PCR(IC-UPPCR)检测食品中沙门氏菌。采用细菌16SrRNA基因保守区设计特异性引物,建立通用引物PCR技术是可行的,该IC-UPPCR检测沙门氏菌的灵敏度最低,能检测到2×102CFU/ml,检测沙门氏菌属和非沙门氏菌属标准株的特异性为100%,无假阳性和假阴性出现。结果表明该方法具有简单、快速、特异性好和敏感性高等特点,并可满足大批样品沙门氏菌筛选检测的要求,适用于食品卫生监管、商品检验检疫以及临床诊断等领域。 展开更多
关键词 免疫捕捉 通用引物 PCR 沙门氏菌 食品
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贝类单孢子虫PCR检测方法的建立 被引量:7
7
作者 谢丽基 谢芝勋 +3 位作者 庞耀珊 刘加波 邓显文 谢志勤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期54-56,共3页
根据基因库中单孢子虫的基因保守序列,设计了1对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测贝类单孢子虫的PCR方法。用该方法对单孢子虫模板进行扩增,得到与试验设计相符的244 bp的特异性条带,而对派琴虫、折光马尔太虫、嗜水气单... 根据基因库中单孢子虫的基因保守序列,设计了1对特异性引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立了检测贝类单孢子虫的PCR方法。用该方法对单孢子虫模板进行扩增,得到与试验设计相符的244 bp的特异性条带,而对派琴虫、折光马尔太虫、嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、河弧菌和拟态弧菌等病原体的扩增结果全为阴性。敏感性试验结果表明,该方法最低能检测到100 fg的单孢子虫DNA。 展开更多
关键词 贝类 单孢子虫 PCR检测方法
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基于小麦白粉病菌rDNA ITS序列的PCR分子检测 被引量:17
8
作者 曾晓葳 骆勇 +1 位作者 周益林 段霞瑜 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期211-214,共4页
Wheat powdery mildew(Blumeria graminis f.sp.tritici) is the one of main wheat diseases in China.Based on the internal transcribed spacer(ITS) sequences of ribosome of B.graminis f.sp.tritici,three molecular primer pai... Wheat powdery mildew(Blumeria graminis f.sp.tritici) is the one of main wheat diseases in China.Based on the internal transcribed spacer(ITS) sequences of ribosome of B.graminis f.sp.tritici,three molecular primer pairs(F1/R,F2/R and F3/R) were designed to detect the fungal pathogen of wheat powdery mildew.The species specificity of these primers was confirmed.F1/R was demonstrated a higher sensitivity than the other two primer pairs,and could detect as low as 1 pg DNA of B.graminis f.sp.tritici.Furthermore,F1/R primer pair was used to detect the pathogen DNA extracted from wheat leaves showing chlorosis and typical symptoms of powdery mildew caused by artificial inoculation with B.graminis f.sp.tritici.The preliminary results demonstrated the usefulness of this primer pair and its potential applications in efficient detection of wheat powdery mildew pathogen from leaves with latent infections at early growth stages of wheat. 展开更多
关键词 小麦白粉病菌 PCR分子检测 ITS序列 RDNA 小麦病害 小麦产量 预测预报 白粉菌
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应用PCR方法检测患“黄水病”锯缘青蟹中的血卵涡鞭虫 被引量:11
9
作者 施慧 许文军 +2 位作者 李鹏飞 徐汉祥 史海东 《海洋渔业》 CSCD 2008年第1期74-79,共6页
"黄水病"是目前锯缘青蟹养殖过程中的主要疾病之一,病蟹主要症状表现为肌肉白浊,体液呈土黄色或浊白色牛奶状。因该病流行范围广、发病率和死亡率高,给青蟹养殖业主造成巨大经济损失,严重地影响了青蟹养殖的健康发展。本研究... "黄水病"是目前锯缘青蟹养殖过程中的主要疾病之一,病蟹主要症状表现为肌肉白浊,体液呈土黄色或浊白色牛奶状。因该病流行范围广、发病率和死亡率高,给青蟹养殖业主造成巨大经济损失,严重地影响了青蟹养殖的健康发展。本研究从病蟹体液中发现大量疑似血卵涡鞭虫的寄生原虫,应用已建立的梭子蟹血卵涡鞭虫病的PCR检测方法对患"黄水病"青蟹进行检测。结果从患病青蟹组织的DNA中扩增出产物大小为585bp的特异性目的片段,经序列分析比较,与三疣梭子蟹上发现的血卵涡鞭虫的序列同源,同源性达99.7%。综合病原流行病学调查、组织病理学、电镜观察等分析结果,初步确定血卵涡鞭虫是引起养殖青蟹"黄水病"的重要病原。 展开更多
关键词 锯缘青蟹 血卵涡鞭虫 ITS1 PCR 序列分析
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贝类单孢子虫荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:7
10
作者 谢丽基 谢芝勋 +3 位作者 庞耀珊 刘加波 邓显文 谢志勤 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期239-242,共4页
根据基因库中单孢子虫的基因保守序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了检测单孢子虫的荧光定量PCR方法。该方法对单孢子虫的检测敏感性达到40拷贝数,比常规PCR敏感性高100倍;对派琴虫、折光马... 根据基因库中单孢子虫的基因保守序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,对反应条件和试剂浓度进行优化,建立了检测单孢子虫的荧光定量PCR方法。该方法对单孢子虫的检测敏感性达到40拷贝数,比常规PCR敏感性高100倍;对派琴虫、折光马尔太虫、荧光假单胞菌、副溶血弧菌、溶藻弧菌、河弧菌和拟态弧菌等病原体的检测结果全为阴性。表明该研究建立的单孢子虫荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量和重复性好等优点,可用于临床单孢子虫感染的快速检测。 展开更多
关键词 贝类 单孢子虫 荧光定量PCR 检测
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三疣梭子蟹感染血卵涡鞭虫PCR检测方法的建立 被引量:11
11
作者 施慧 许文军 +2 位作者 徐汉祥 李鹏飞 史海东 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2008年第1期28-33,共6页
血卵涡鞭虫病是近年来三疣梭子蟹养殖过程中发生的一种危害较大的流行性疾病,患病蟹的体液和肌肉组织中有大量的血卵涡鞭虫寄生。该病多发生于每年9~11月份的夏秋季节,会在短时间内出现死亡高峰。因该病流行范围广、死亡率高、危害... 血卵涡鞭虫病是近年来三疣梭子蟹养殖过程中发生的一种危害较大的流行性疾病,患病蟹的体液和肌肉组织中有大量的血卵涡鞭虫寄生。该病多发生于每年9~11月份的夏秋季节,会在短时间内出现死亡高峰。因该病流行范围广、死亡率高、危害严重,对三疣梭子蟹养殖业发展影响很大。本文根据GenBank中登陆的血卵涡鞭虫18S rDNA和ITS1基因序列设计了1对特异性引物,建立了血卵涡鞭虫病的PCR检测方法,从感染血卵涡鞭虫的三疣梭子蟹组织DNA中扩增出产物大小为585bp的DNA片段。本方法可快速、特异地检测出三疣梭子蟹感染和携带血卵涡鞭虫的状况,为三疣梭子蟹的健康养殖和血卵涡鞭虫病的流行病学调查提供了快速、简便的手段。 展开更多
关键词 三疣梭子蟹 血卵涡鞭虫 ITS1 PCR检测方法
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γ-干扰素受体在雌性山羊星状神经节的表达 被引量:2
12
作者 李强 王志豪 +4 位作者 金秀芳 徐永平 郭晓 陈文东 董伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期604-608,共5页
目的:为了解雌性山羊星状神经节是否具备接受γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用的条件,即是否有IFN-γ受体(Interferon-γreceptor,IFNGR)存在。方法:取雌性山羊星状神经节,用免疫组化SP法和PCR方法检测IFNGR在星状神经节的表达情况... 目的:为了解雌性山羊星状神经节是否具备接受γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)作用的条件,即是否有IFN-γ受体(Interferon-γreceptor,IFNGR)存在。方法:取雌性山羊星状神经节,用免疫组化SP法和PCR方法检测IFNGR在星状神经节的表达情况。结果:结果显示,在雌性山羊星状的神经元、支持细胞和神经纤维均有IFNGR免疫阳性产物分布,但主要分布于神经元细胞膜与细胞核,IFNGR在神经元胞体的相对表达量极显著高于非神经细胞结构(P<0.01)。在山羊星状神经节扩增到IFNGR1基因的cDNA片段全长376 bp,山羊IFNGR1基因与绵羊基因同源性最高(98%),其次为牛(97%)。结论:在雌性山羊星状神经节中IFNGR主要在交感节后神经元表达与分布,具备对IFN-γ刺激做出反应的条件,提示雌性山羊星状神经节可能作为IFN-γ对心血管免疫调节途径和自主神经对心血管调节的神经途径之间相互协调的关键点。 展开更多
关键词 γ-干扰素受体 星状神经节 免疫组织化学SP法 山羊
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贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用 被引量:14
13
作者 吴绍强 李海艳 +6 位作者 林祥梅 郑腾 李西峰 刘建 梅琳 韩雪清 贾广乐 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期58-63,共6页
选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101~2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质... 选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×101~2.6×107拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰。利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份。研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。 展开更多
关键词 派琴虫 贝类 实时荧光PCR 检测
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羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法的建立 被引量:5
14
作者 田万年 李国江 +2 位作者 薛书江 贾立军 张守发 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期398-401,共4页
为建立一种敏感、快速的羊泰勒虫检测方法,本研究根据GenBank中登录的羊泰勒虫18S rRNA保守区设计1对特异引物,经各反应条件的优化,建立了羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法。结果显示该方法可以特异地检测羊泰勒虫,而对卵形巴贝斯虫、双芽... 为建立一种敏感、快速的羊泰勒虫检测方法,本研究根据GenBank中登录的羊泰勒虫18S rRNA保守区设计1对特异引物,经各反应条件的优化,建立了羊泰勒虫荧光定量PCR检测方法。结果显示该方法可以特异地检测羊泰勒虫,而对卵形巴贝斯虫、双芽巴贝斯虫、羊巴贝斯虫和瑟氏泰勒虫检测均为阴性;该方法的灵敏度可达2.08×10~1拷贝/μL,比普通PCR灵敏度高100倍。组内及组间重复试验变异系数均小于5%。对50份临床样品进行检测,荧光定量PCR和常规PCR的阳性检出率分别为48%和38%。本实验建立的荧光定量PCR检测方法适用于羊泰勒虫定量分析和分子流行病学调查。 展开更多
关键词 羊泰勒虫 荧光定量PCR 临床检测
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枯萎病菌的PCR-RFLP分子检测和早期诊断 被引量:10
15
作者 张宝俊 李志岗 +2 位作者 郭明霞 徐玉梅 王建明 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第B08期88-90,共3页
采用自行设计的、能对镰刀菌18srDNA进行特异性扩增的1对引物,利用PCR-RFLP对尖孢镰刀菌以不同方式侵染的植株进行跟踪检测。结果表明,应用PCR-RFLP检测程序可检测出处于侵染初期和潜育期的枯萎病菌,说明PCR-RFLP能够快速、灵敏、准确... 采用自行设计的、能对镰刀菌18srDNA进行特异性扩增的1对引物,利用PCR-RFLP对尖孢镰刀菌以不同方式侵染的植株进行跟踪检测。结果表明,应用PCR-RFLP检测程序可检测出处于侵染初期和潜育期的枯萎病菌,说明PCR-RFLP能够快速、灵敏、准确地对枯萎病进行早期诊断。 展开更多
关键词 PCR—RFLP 尖孢镰刀菌黄瓜专化型 尖孢镰刀菌萎蔫专化型
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真空包装肘花胀袋微生物的鉴定及验证 被引量:8
16
作者 高鹏 伏毅 +5 位作者 陈谦 王艳 伍玲 谢艳 刘绵学 黄敏 《湖北农业科学》 2016年第13期3434-3438,共5页
以正常和腐败的产品为材料研究引起真空包装肘花胀袋的微生物,将传统培养与分子生物学方法(16S r DNA序列分析和PCR-DGGE技术)相结合对分离纯化的微生物进行鉴定,并将分离到的细菌进行回接验证试验。结果表明,比较从正常和胀袋产品中分... 以正常和腐败的产品为材料研究引起真空包装肘花胀袋的微生物,将传统培养与分子生物学方法(16S r DNA序列分析和PCR-DGGE技术)相结合对分离纯化的微生物进行鉴定,并将分离到的细菌进行回接验证试验。结果表明,比较从正常和胀袋产品中分离纯化到的14株和18株菌发现,胀袋组中含有对照组没有的细菌。16S r DNA的分析结果显示这些菌株主要是芽孢杆菌[枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)]以及寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia和Stenotrophomonas pavanii);而PCR-DGGE分析结果表明这些菌株主要是包括产气荚膜梭茵(Clostridium perfringens)在内的梭状芽孢杆菌(Clostridium sp.)和假单胞菌(Pseudomonas sp.),将分离到的细菌回接到样品中,产品即发生胀袋,可见,引起肘花胀袋的微生物是芽孢杆菌和寡养单胞菌。 展开更多
关键词 肘花 胀袋 微生物 枯草芽孢杆菌 寡养单胞菌 PCR-DGGE
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我国近海贝类体内帕金虫的亲缘关系 被引量:1
17
作者 周广麒 刘雁 +3 位作者 李冬梅 李秋菊 刘沙 梁玉波 《大连工业大学学报》 CAS 北大核心 2014年第3期161-165,共5页
研究了我国近海贝类体内帕金虫的分布和分类。从辽宁、河北到广西、海南沿海九省区58个地点共30种主要的经济贝类采样分析,利用聚合酶链式反应(PCR)法,对样品进行rDNA-ITS序列的扩增,初步确定我国海产贝类体内帕金虫的种类及其分布。结... 研究了我国近海贝类体内帕金虫的分布和分类。从辽宁、河北到广西、海南沿海九省区58个地点共30种主要的经济贝类采样分析,利用聚合酶链式反应(PCR)法,对样品进行rDNA-ITS序列的扩增,初步确定我国海产贝类体内帕金虫的种类及其分布。结果表明,我国具有两种rDNA-ITS序列差异较大的帕金虫,在菲律宾蛤仔、紫贻贝、毛蚶、皱纹盘鲍、牡蛎中检测出帕金虫Perkinsus olseni;在南方近江牡蛎中检测出帕金虫Perkinsus beihaiensis。 展开更多
关键词 贝类 帕金虫 PCR RDNA-ITS
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猴源环孢子虫巢式PCR检测方法的建立 被引量:3
18
作者 高振永 李国清 +3 位作者 岳彩玲 程家林 朱海波 李结 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第5期32-36,共5页
环孢子虫是一类可引起人和动物腹泻的重要寄生性原虫。为建立猴源环孢子虫的巢式PCR检测方法,根据该环孢子虫18S rDNA基因序列,设计一对保守引物N18SA/N18SS和一对特异性引物CYJS/CYJA,通过阳性质粒摸索该检测方法的最佳反应条件,进行... 环孢子虫是一类可引起人和动物腹泻的重要寄生性原虫。为建立猴源环孢子虫的巢式PCR检测方法,根据该环孢子虫18S rDNA基因序列,设计一对保守引物N18SA/N18SS和一对特异性引物CYJS/CYJA,通过阳性质粒摸索该检测方法的最佳反应条件,进行特异性和敏感性试验,并应用该方法对87份猴粪样本进行了临床检测。结果显示该巢式PCR能特异性地扩增出猴源环孢子虫目的片段,与微小隐孢子虫、阿米巴原虫等8种DNA无交叉反应,最低能检测0.2 fg的阳性质粒DNA,对临床样本的检出率比传统方法(饱和蔗糖漂浮法和改良抗酸染色法)提高2.3%~3.4%。可见,该巢式PCR方法具有较高的特异性和敏感性,对于环孢子虫病的诊断和分子流行病学调查具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 环孢子虫 巢式PCR 临床检测
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阿拉尔地区枣园不同时期枣花、枣果黑斑病菌带菌量检测 被引量:4
19
作者 许瑛 姚兆群 +2 位作者 王兰 谢建明 赵思峰 《新疆农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1911-1919,共9页
【目的】检测新疆南疆阿拉尔市枣园不同时期枣花、枣果上黑斑病菌的带菌量,确定枣果黑斑病的侵入时期和侵入部位,明确防治该病害的关键时期。【方法】在阿拉尔市周边3个枣园分别采集不同时期的枣花、枣果,采用常规组织分离法对其进行分... 【目的】检测新疆南疆阿拉尔市枣园不同时期枣花、枣果上黑斑病菌的带菌量,确定枣果黑斑病的侵入时期和侵入部位,明确防治该病害的关键时期。【方法】在阿拉尔市周边3个枣园分别采集不同时期的枣花、枣果,采用常规组织分离法对其进行分离,并对分离物进行鉴定,用交链格孢菌特异性引物采用实时荧光定量PCR方法,检测不同时期枣花及枣果各部位带菌量。【结果】在不同时期采集的枣花及枣果各部位均分离到了链格孢菌,累计获得276个分离物,经鉴定均为A.alternata;实时荧光定量PCR检测表明,在枣花上就能检测到枣果黑斑病菌,其平均含量为2.11μg/100 mg,在栆果上果肉中链格孢菌含量最高,其中胴部果肉含量最高为20.12μg/100 mg,果柄处果肉为9.34μg/100 mg,胴部果皮11.48μg/100 mg,果柄处果皮为3.84μg/100 mg。【结论】枣果黑斑病菌在红枣开花期就可以感染枣花,病菌可在枣果果肉中大量潜伏侵染,待黑斑病显症时,果肉中已有大量病菌存在,对枣果黑斑病的药剂防治应提前至红枣开花前期。 展开更多
关键词 枣果黑斑病 链格孢菌 RT-PCR 枣花和枣果
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炭疽病病原菌侵染对茶树叶片生理特性的影响 被引量:12
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作者 赖建东 魏日凤 +5 位作者 连玲丽 刘伟 叶乃兴 杨江帆 陈丹 杨国一 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2016年第2期162-168,共7页
本试验筛选出一株强致病力茶树刺盘孢菌株ZRG,并测定其侵染后对茶树叶片相对电导率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性及其基因表达量的影响,探究茶树刺盘孢对茶树叶片生理特性的影... 本试验筛选出一株强致病力茶树刺盘孢菌株ZRG,并测定其侵染后对茶树叶片相对电导率,丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)等抗氧化酶活性及其基因表达量的影响,探究茶树刺盘孢对茶树叶片生理特性的影响.结果表明:ZRG侵染48 h内,茶树叶片相对电导率明显增高;MDA先是快速积累,含量上升,随后下降;POD、SOD和CAT活性都出现不同程度的上升,随后下降.qRT-PCR验证结果显示,POD、SOD和CAT相关基因的表达先上调后下降,三者相互协调配合,起到清除过剩自由基的作用. 展开更多
关键词 茶树 炭疽病病原菌 生理特性 QRT-PCR
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