巢式PCR-RFLP法对湖南省乙型肝炎病毒Bj和Ba基因亚型的初步鉴定 被引量：5

1

作者 温志立 谭德明 +1 位作者 杨铁一 徐铿 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第14期1770-1773,共4页

目的:检测湖南省乙型肝炎病毒(HBV)基因亚型(Bj或Ba)的分布情况,了解基因亚型与HBV致病性的关系,希望以此诠释相同基因型HBV导致不同病情的机制. 方法:随机选取经多对型特异性引物巢式PCR法鉴定为B 基因型HBV的血清标本50例,包括慢性HB... 目的:检测湖南省乙型肝炎病毒(HBV)基因亚型(Bj或Ba)的分布情况,了解基因亚型与HBV致病性的关系,希望以此诠释相同基因型HBV导致不同病情的机制. 方法:随机选取经多对型特异性引物巢式PCR法鉴定为B 基因型HBV的血清标本50例,包括慢性HBV携带者和慢性重型乙型肝炎患者各25例,采用巢式PCR-RFLP法鉴定其基因亚型(Bj或Ba). 结果:50例B基因型HBV均为Ba亚型,没有发现Bj亚型结论:湖南省B基因型HBV可能主要为Ba亚型.相同基因型HBV导致不同病情的机制可能还与其他因素(如HBV准种)有关. 展开更多

关键词 巢式pcr-rflp法 湖南 乙型肝炎病毒 Bj基因亚型 Ba基因亚型 鉴定

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PCR-RFLP法检测葡萄糖激酶基因启动子-30位点变异的实验条件研究 被引量：1

2

作者 赵滢 詹淑芬 +2 位作者 韩林 段勇 王玉明 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第3期44-46,共3页

目的确定用Alw21I限制性内切酶切割PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区-30位点的最适实验条件。方法按一定梯度设定酶切所用扩增产物量、内切酶的浓度、酶切时间,用2g/dl低熔点琼脂糖凝胶(含0.5μg/ml的溴乙锭)电泳,透射式紫... 目的确定用Alw21I限制性内切酶切割PCR(聚合酶链反应)扩增葡萄糖激酶基因启动子区-30位点的最适实验条件。方法按一定梯度设定酶切所用扩增产物量、内切酶的浓度、酶切时间,用2g/dl低熔点琼脂糖凝胶(含0.5μg/ml的溴乙锭)电泳,透射式紫外灯下观察酶切结果。结果20μl的酶切体系中,最适酶切产物为5μl,最适内切酶量为5U,酶切时间应超过9h。结论参数偏离最适条件将会导致实验失败。 展开更多

关键词 葡萄糖激酶基因启动子 实验条件 pcr-rflp法 30位点 基因变异 聚合酶链反应

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PCR-RFLP法检验混合斑中精斑ABO血型及基因型

3

作者 吕桂平 姚桂法 +2 位作者 黄磊 王功祥 郭风琴 《刑事技术》 北大核心 2000年第4期24-25,共2页

运用PCR-RFLP检验方法,对21份精斑样品、5份混合斑检材进行了检验,结果表明该方法能够很好地检测混合斑中精斑的ABO血型及基因型,有效地解决了非分泌型精斑的ABO血型及基因型,拓宽了混合斑中精斑的检验范围.

关键词 pcr-rflp法 混合斑 精斑 ABO血型 基因型 检验

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PCR-RFLP法检测肿瘤坏死因子受体基因多态性

4

作者 王小飞 钱绩虎 王惠民 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期206-207,共2页

目的　建立聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ (TNFR2 )第 6外显子基因多态性的方法。方法　用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA ,PCR扩增其TNFR2包括编码 196位氨基酸残基在内的第 6外... 目的　建立聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性分析 (PCR -RFLP)检测肿瘤坏死因子受体Ⅱ (TNFR2 )第 6外显子基因多态性的方法。方法　用碘化钾法从外周血白细胞中提取基因组DNA ,PCR扩增其TNFR2包括编码 196位氨基酸残基在内的第 6外显子基因 ,扩增产物用限制性内切酶NIaⅢ酶切后干含溴化乙锭的 35 g/L琼脂糖凝胶中电泳 ,紫外灯下直接观察TNFR2的基因型。结果　通过观察电泳条带可确定TNFR2的三种基因型 ,196R/R纯合子、196M/M纯合子、196M/R杂合子分别出现一、二、三条条带 ;江苏地区健康汉族人TNFR2第 6外显子各基因型的频率为 :196M /M 6 1 6 %,196R/R 5 6 %,196M /R 32 8%;等位基因的频率为 196M 77 9%,196R 2 2 1%。结论　RCR -RFLP是一种高效敏感、简单快速、准确可靠的分析TNFR2基因多态性的方法 ,适于普通实验室开展。 展开更多

关键词 pcr-rflp法 检测 肿瘤坏死因子受体 基因多态性

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巢式PCR-RFLP法对江西省乙型肝炎病毒Bj和Ba基因亚型的初步鉴定

5

作者 张华 温志立 +3 位作者 易冬英 黄神安 向天新 吴平 《肝脏》 2009年第3期215-218,共4页

关键词 pcr-rflp法 基因亚型 巢式PCR 乙型肝炎病毒 江西省 Ba HBV基因型 鉴定

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PCR-RFLP法检测骨钙素等位基因

6

作者 刘建伟 张红红 +1 位作者 叶玲 陶国枢 《军医进修学院学报》 CAS 2001年第3期221-222,共2页

目的 :为骨质疏松症的多基因综合研究提供一种简便、实用、准确的骨钙素 (osteocalcin ,OC)等位基因检测方法。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)特异性扩增OC基因序列 ,扩增产物用限制性内切酶HindⅢ酶切 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)酸... 目的 :为骨质疏松症的多基因综合研究提供一种简便、实用、准确的骨钙素 (osteocalcin ,OC)等位基因检测方法。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)特异性扩增OC基因序列 ,扩增产物用限制性内切酶HindⅢ酶切 ,经聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)酸性银染后 ,观察酶切位点的限制酶片段长度多态性 (RFLP)图谱。结果 :应用PCR RFLP法检测了 77名健康汉族人OC基因型 ,hh、Hh、HH基因型分布频率分别为 6 4% (49例 )、32 % (2 5例 )、4% (3例 )。结论 :该方法简便、准确、重复性好 。 展开更多

关键词 骨钙素 聚合酶链反应 等位基因 pcr-rflp法 骨质疏松

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用PCR-RFLP法对三带喙库蚊钠通道基因L1014F突变快速检测与分型 被引量：1

7

作者 张燕 朱长强 +3 位作者 艾乐乐 韩招久 谭伟龙 姜志宽 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2015年第4期372-374,共3页

目的建立PCR-RFLP方法对三带喙库蚊钠通道基因L1014F(TTA-TTT)突变进行快速检测与分型。方法根据三带喙库蚊钠通道基因DNA序列,合成PCR引物,在上游引物3'端第二个碱基引入突变位点"C",构建酶切位点,扩增后对PCR产物酶切,... 目的建立PCR-RFLP方法对三带喙库蚊钠通道基因L1014F(TTA-TTT)突变进行快速检测与分型。方法根据三带喙库蚊钠通道基因DNA序列,合成PCR引物,在上游引物3'端第二个碱基引入突变位点"C",构建酶切位点,扩增后对PCR产物酶切,在电泳结果读取分型结果并统计基因频率与基因型频率。结果建立的PCR-RFLP方法能够对三带喙库蚊钠通道基因L1014F突变进行快速检测与分型,灵敏度和特异度均达到98%以上。结论本研究建立的PCR-RFLP方法灵敏度和特异度较高,实现了对三带喙库蚊钠通道L1014F(TTA-TTT)突变的快速分型,可以推广使用。 展开更多

关键词 三带喙库蚊 钠通道基因 L1014F突变 pcr-rflp法

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PCR-RFLP法对单纯疱疹病毒感染诊断和分型的研究 被引量：1

8

作者 程健 陈兴平 《华中医学杂志》 CAS 2006年第2期150-151,共2页

目的建立单纯疱疹病毒的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法,为生殖器疱疹的诊断及分型提供可靠而特异的方法。方法以特异性引物法为对照,用一对单纯疱疹病毒外层通用引物扩增出长度为438bp的片断,并进行酶切以分型。结... 目的建立单纯疱疹病毒的聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测法,为生殖器疱疹的诊断及分型提供可靠而特异的方法。方法以特异性引物法为对照,用一对单纯疱疹病毒外层通用引物扩增出长度为438bp的片断,并进行酶切以分型。结果PCR-RFLP法可特异性检测出单纯疱疹病毒并进行分型,同特异性引物法比较,两种方法无显著性差异。结论PCR-RFLP法是一种准确、特异的对单纯疱疹病毒感染进行诊断和分型的方法。 展开更多

关键词 疱疹 单纯 单纯病毒属 分型 pcr-rflp法

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PCR-RFLP法检测葡萄糖激酶基因启动子-30位点变异的实验条件研究

9

作者 马春宇 刘华 +1 位作者 王玉明 段勇 《昆明医学院学报》 2004年第2期48-52,共5页

目的 :确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw2 1I内切酶切割 -3 0位点的最佳实验条件 .方法 :对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究 .结果 :最佳引物浓度为 0 3 μmol/L ;以 1U酶量效果最满意 ;最适dNTP浓度为 1 67μmo... 目的 :确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw2 1I内切酶切割 -3 0位点的最佳实验条件 .方法 :对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究 .结果 :最佳引物浓度为 0 3 μmol/L ;以 1U酶量效果最满意 ;最适dNTP浓度为 1 67μmol/L ;最适镁离子浓度为 1 5mmol/L . 2 0 μL的酶切体系中 ,最佳酶切产物为 5 μL,最佳内切酶量为 5U ,酶切时间应超过 9h .以上参数偏离最适条件将会导致实验失败 . 展开更多

关键词 pcr-rflp法 检测 葡萄糖激酶基因 启动子-30位点变异 实验条件

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PCR-RFLP法对蛇胆川贝散中川贝母的鉴别研究 被引量：7

10

作者 朱林 蒲婧哲 +2 位作者 张亚中 程旺兴 金斌 《淮海医药》 CAS 2017年第6期719-722,共4页

目的:研究聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性方法(PCR-RFLP法)对蛇胆川贝散(胶囊)中川贝母鉴定的可行性。方法:本实验选取8个厂家的蛇胆川贝散(胶囊)作为研究对象,对模板DNA的预处理方法进行考察,通过PCR-RFLP法对提取的DNA进行扩... 目的:研究聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性方法(PCR-RFLP法)对蛇胆川贝散(胶囊)中川贝母鉴定的可行性。方法:本实验选取8个厂家的蛇胆川贝散(胶囊)作为研究对象,对模板DNA的预处理方法进行考察,通过PCR-RFLP法对提取的DNA进行扩增和酶切。结果:自提样本中只有川贝母自提样本的PCR产物可被酶切,8个厂家成药样本的PCR产物均不能被Sma I酶切。结论:PCR-RFLP法对蛇胆川贝散(胶囊)中川贝母的鉴别具有很高的灵敏度和准确度,对市场上成药中川贝母的真伪鉴别提供了较好的依据。 展开更多

关键词 蛇胆川贝散 川贝母 pcr-rflp法 鉴别 可行性

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PCR-RFLP法快速测定种猪氟烷基因型及其使用优点 被引量：3

11

作者 祁永旺 王昕陟 +2 位作者 侯华 张翠 王金旭 《饲料博览》 2011年第2期27-30,共4页

从猪毛中提取DNA,用特异性引物进行PCR-RFLP扩增法对沈阳市畜牧兽医研究所种猪场种猪进行氟烷基因检测。结果表明,在测定的长白、大约克、杜洛克种猪中,发现长白猪HaLn基因的基因频率较高,为7.5%、大约克为2.1%、杜洛克为2.0%。所有种... 从猪毛中提取DNA,用特异性引物进行PCR-RFLP扩增法对沈阳市畜牧兽医研究所种猪场种猪进行氟烷基因检测。结果表明,在测定的长白、大约克、杜洛克种猪中,发现长白猪HaLn基因的基因频率较高,为7.5%、大约克为2.1%、杜洛克为2.0%。所有种猪不含易引起猪应激综合征的氟烷基因隐形纯合子(nn)。用猪毛进行PCR扩增不仅成本低、速度快,且准确性高、取样方便,可大批量地处理样品。从仔猪开始至成年种猪,均可用毛样进行基因诊断,从而有效防止氟烷基因隐形纯合子(nn)的出现,加快种猪的改良步伐。 展开更多

关键词 氟烷基因 pcr-rflp扩增法 猪应激综合征

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PCR-RFLP法研究分析市售川贝母药材质量现状 被引量：2

12

作者 张烨 陈羽涵 +3 位作者 丁华 李珍 杨洋 孟美英 《海峡药学》 2019年第12期93-95,共3页

目的对市售的10批次川贝母药材质量现状进行研究分析。方法对川贝母样品进行性状鉴定,并通过PCR-RFLP鉴别法进一步进行真伪判定。结果10批次川贝母药材全部符合为药典正品。结论PCR-RFLP鉴别法与传统检测方法相比具有专属性强、高效快... 目的对市售的10批次川贝母药材质量现状进行研究分析。方法对川贝母样品进行性状鉴定,并通过PCR-RFLP鉴别法进一步进行真伪判定。结果10批次川贝母药材全部符合为药典正品。结论PCR-RFLP鉴别法与传统检测方法相比具有专属性强、高效快速、可操作性强、结果准确可靠易判定等优点。 展开更多

关键词 川贝母 pcr-rflp法 模板DNA 基源鉴定

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PCR-RFLP方法鉴定HLA-DP抗原

13

作者 高方 聂晓波 +1 位作者 刘新 陈仁馨 《中国输血杂志》 CAS CSCD 1996年第2期73-76,共4页

HLA-DP抗原是HLA-Ⅱ类3个主要抗原之一,主要表达在B淋巴细胞和部分活化的T淋巴细胞表面,具有复杂的遗传多态性,并在移植排斥反应,特别是在骨髓移植后的移植物抗宿主病(GVHD)中起着极为重要的作用。与HLA-DP抗原相关的基因位点共有4个,D... HLA-DP抗原是HLA-Ⅱ类3个主要抗原之一,主要表达在B淋巴细胞和部分活化的T淋巴细胞表面,具有复杂的遗传多态性,并在移植排斥反应,特别是在骨髓移植后的移植物抗宿主病(GVHD)中起着极为重要的作用。与HLA-DP抗原相关的基因位点共有4个,DPA1、DPB1和DPA2、DPB2,皆位于人第6号染色体短臂上的MHC-D区近着丝粒端的DP亚区基因群内,其中DPA2和DPB2为假基因,HLA-DP抗原分别由DPA1和DPB1基因所编码的α链和β链通过非共价结合构成,其多态性主要决定于DPB1位点等位基因的第2外显子DNA序列的不同。HLA-DR和DQ 展开更多

关键词 pcr-rflp法 HLA-DP抗原 鉴定

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铁皮石斛的PCR-RFLP鉴别方法 被引量：6

14

作者 王孟颖 万林春 +2 位作者 赵雯 饶毅 曾黎明 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期509-515,共7页

目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试... 目的:建立铁皮石斛专有的分子鉴别方法。方法:通过对铁皮石斛及其近缘种石斛的叶绿体matk基因序列进行对比分析,根据鉴别位点设计特异的铁皮石斛鉴别引物,通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP)技术进行鉴别。结果:本试验中鉴别引物可成功扩增铁皮石斛及其近缘种石斛,PCR产物为331 bp,铁皮石斛的PCR产物可被Tru9 Ⅰ限制性内切酶切开,而近缘种石斛不能被切开,可通过琼脂糖凝胶电泳成功鉴别。结论:本试验建立的PCR-RFLP鉴别方法可以鉴别铁皮石斛及其近缘种石斛。 展开更多

关键词 铁皮石斛 pcr-rflp法 分子鉴别 MATK基因 近缘物种

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基于ITS序列PCR-RFLP鉴别大蓟药材及饮片中掺伪飞廉、魁蓟的方法研究 被引量：3

15

作者 张诗华 赖晶 +3 位作者 倪琳 宋平顺 李辰荃 郭朝晖 《天津中医药大学学报》 CAS 2023年第6期780-785,共6页

[目的]利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP),建立快速鉴别大蓟混伪品飞廉和魁蓟的方法。[方法]通过比对ITS基因序列,分别筛选飞廉、魁蓟的限制性内切酶位点并设计鉴别引物。考察PCR反应的退火温度、循环数及不同酶的适用... [目的]利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP),建立快速鉴别大蓟混伪品飞廉和魁蓟的方法。[方法]通过比对ITS基因序列,分别筛选飞廉、魁蓟的限制性内切酶位点并设计鉴别引物。考察PCR反应的退火温度、循环数及不同酶的适用性,对酶切反应时间和酶切底物量进行优化。同时对该方法适应性及掺伪比例的专属性、稳定性进行考察。[结果]当退火温度为58~60℃、循环数为30个时,样品均能扩增出一条379 bp的DNA条带。底物为8μL、酶切温度为37℃、酶切反应120 min时,ZraI酶将飞廉切割成120 bp和259 bp两条DNA条带;DNA底物为8μL、酶切温度为37℃、酶切反应60 min时,ApaLI酶将魁蓟切割成126 bp和253 bp两条DNA条带。[结论]试验建立的PCR-RFLP方法能够准确地鉴别大蓟混伪品飞廉、魁蓟,避免此类药材的混用,以保证临床用药安全。 展开更多

关键词 大蓟 飞廉 魁蓟 pcr-rflp法 ITS序列

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Apo E基因multi-ARMS与PCR-RFLP分型法的比较研究

16

作者 唐慧 董虹 +3 位作者 高建梅 华映昆 张丽平 严新民 《大理学院学报（综合版）》 CAS 2002年第3期1-4,共4页

目的 :以聚合酶链反应—限制性酶切片段长度多态性(PCR -RFLP)方法作为参照 ,建立一种ApoE基因分型方法。方法 :以基因组DNA为模板 ,用PCR -RFLP法和等位基因特异性复合PCR方法(MultiplexAmplificationRefractoryMutationSystem,multi-A... 目的 :以聚合酶链反应—限制性酶切片段长度多态性(PCR -RFLP)方法作为参照 ,建立一种ApoE基因分型方法。方法 :以基因组DNA为模板 ,用PCR -RFLP法和等位基因特异性复合PCR方法(MultiplexAmplificationRefractoryMutationSystem,multi-ARMS)检测了75例个体的ApoE基因型。结果 :共检测出5种常见的ApoE基因型 :ε2/2 ,ε3/3 ,ε2/3,ε3/4 ,ε2/4。两种方法所得的结果完全一致。结论 :说明multi-ARMS方法快速简便、准确可靠 。 展开更多

关键词 APOE基因 multi-ARMS pcr-rflp分型法 比较研究 基因分型

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基因芯片和聚合酶链反应限制性片段长度多态性法检测拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎患者YMDD变异 被引量：2

17

作者 左维泽 田群 +3 位作者 张跃新 刘佩芝 买力坎木 詹爱琴 《实用肝脏病杂志》 CAS 2005年第1期19-21,共3页

目的　对基因芯片和聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)两种方法检测YMDD变异进行比较。方法　取 40例临床考虑拉米夫定耐药的患者血清 ,分别用基因芯片和PCR RFLP法检测YMDD基序变异情况。随机抽取 8份血清标本进行测序验... 目的　对基因芯片和聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)两种方法检测YMDD变异进行比较。方法　取 40例临床考虑拉米夫定耐药的患者血清 ,分别用基因芯片和PCR RFLP法检测YMDD基序变异情况。随机抽取 8份血清标本进行测序验证两种方法的准确性。结果　 40例患者血清标本中 ,用基因芯片法检测出YMDD变异阳性标本 2 7例 ,其中 ,YIDD变异 4例 ,YVDD变异 16例 ,YVDD/YMDD共存 12例 ;YIDD与YVDD混合变异 7例。用PCR RFLP法检测出变异阳性标本 2 1例。在变异株中 ,YIDD变异和YVDD变异各 9例 ,YIDD/YVDD混合变异 3例 ,明显低于基因芯片的检出率。结论　 1、用基因芯片能快速灵敏地检测YMDD变异情况 ,并能检测到患者体内变异株与野生株混合存在形式 ;2、基因芯片能同时检测两种YMDD变异株和YMDD野生株 ,优于PCR RFLP法 ,适用于临床检测乙型肝炎病毒YMDD变异。 展开更多

关键词 YMDD变异 基因芯片 pcr-rflp法 患者 耐药 拉米夫定 血清标本 野生株 变异株 测序

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两种方法在二斑叶螨电压门控钠离子通道基因突变检测中的应用 被引量：1

18

作者 杨顺义 岳秀利 +4 位作者 王进军 沈慧敏 郭金梅 沈一凡 周兴隆 《草业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期153-160,共8页

靶标突变是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生高抗性的重要原因,而用于靶标突变检测的方法较多,有必要寻找一种经济、灵敏且有效的方法进行突变检测。本研究根据二斑叶螨电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)基因上... 靶标突变是二斑叶螨对拟除虫菊酯类药剂产生高抗性的重要原因,而用于靶标突变检测的方法较多,有必要寻找一种经济、灵敏且有效的方法进行突变检测。本研究根据二斑叶螨电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)基因上已报道的3个点突变(L1022V、A1215D和F1538I),采用PCR产物直接测序和限制性片段长度多态性聚合酶链反应(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)两种不同的方法对二斑叶螨田间种群(WW-R和LZ-R)进行靶标VGSCs基因突变检测。PCR产物直接测序结果显示,与SS种群相比,WW-R和LZ-R种群VGSCs基因均存在两种氨基酸突变A1215D和F1538I,但没有发现存在F1022V突变,其中A1215D突变发生在结构域ⅡS6-ⅢS1连接处,F1538I突变发生在结构域ⅢS6螺旋处,而采用PCR-RFLP方法只检测出A1215D突变。两种不同的方法对田间采集的二斑叶螨种群VGSCs基因突变位点检测的比较,为抗菊酯类药剂二斑叶螨种群抗性分子监测技术的建立和抗性治理奠定了基础。 展开更多

关键词 二斑叶螨 甲氰菊酯 靶标突变 直接测序法 pcr-rflp法

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基于ITS序列PCR-RFLP鉴别木香、川木香和藏木香 被引量：8

19

作者 燕梦遥 宋平顺 +3 位作者 赖晶 郭晔红 倪琳 朱喜春 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期339-346,共8页

目的利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,建立快速鉴别木香、川木香和藏木香的方法。方法通过比对木香、川木香和藏木香3个物种ITS基因序列,筛选限制性内切酶并设计鉴别引物。优化PCR扩增和酶切反应条件,并进行方... 目的利用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,建立快速鉴别木香、川木香和藏木香的方法。方法通过比对木香、川木香和藏木香3个物种ITS基因序列,筛选限制性内切酶并设计鉴别引物。优化PCR扩增和酶切反应条件,并进行方法学考察和统计学分析。结果退火温度为60℃、循环数为30时,能检出500~750 bp单一DNA条带;底物为10μL、酶切时间为15 min时,BsaHⅠ酶可将木香、川木香及藏木香在一定范围内切割成大小不一的DNA条带,方法学和统计学结果较好。结论建立的PCR-RFLP方法能够准确地鉴别木香、川木香及藏木香3种药材,避免此3类药材的混用,保证临床用药安全。 展开更多

关键词 木香 川木香 藏木香 pcr-rflp法 ITS序列

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用FLDAS-PCR和PCR-RFLP检测汉族人群GPT的多态性 被引量：1

20

作者 赵彩霞 陈慧 +2 位作者 宋海燕 黄代新 杨庆恩 《中国法医学杂志》 CSCD 2003年第2期90-92,共3页

目的 建立片段长度差异等位基因特异性PCR(FLDAS-PCR)检测GPT基因型的新方法,并调查武汉地区汉族人群GPT多态性分布。方法 应用FLDAS-PCR、PCR-RFLP分别对武汉地区248例汉族个体进行GPT基因型分型。结果 FLDAS-PCR与PCR-RFLP分型结果完... 目的 建立片段长度差异等位基因特异性PCR(FLDAS-PCR)检测GPT基因型的新方法,并调查武汉地区汉族人群GPT多态性分布。方法 应用FLDAS-PCR、PCR-RFLP分别对武汉地区248例汉族个体进行GPT基因型分型。结果 FLDAS-PCR与PCR-RFLP分型结果完全一致,GPT的3种基因型分型明确,基因频率GPT*1=0.5423,GPT*2=0.4577,基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡。结论 FLDAS-PCR和PCR-RFSP分型GPT在法医学鉴定中有实用价值。 展开更多

关键词 汉族人群 谷丙转氨酶 基因型 片段长度差异等位基因特异性PCR法 pcr-rflp法 法医学 亲权鉴定

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