期刊文献+
共找到189篇文章
< 1 2 10 >
每页显示 20 50 100
副流感病毒5型RT-PCR检测方法的建立及检测试剂盒的初步配制
1
作者 吴华伟 陈晓春 +4 位作者 刘丹 秦义娴 高金源 孔冬妮 姜平 《中国兽药杂志》 2025年第11期7-15,共9页
为建立检测副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,PIV5)的RT-PCR方法,针对PIV5L基因设计筛选出一对特异性引物,对退火温度、引物浓度、阳性对照灭活剂及浓度等进行了优化,并进行了敏感性、特异性、试剂盒配制及冻融后检测效果验证研究。... 为建立检测副流感病毒5型(Parainfluenza virus5,PIV5)的RT-PCR方法,针对PIV5L基因设计筛选出一对特异性引物,对退火温度、引物浓度、阳性对照灭活剂及浓度等进行了优化,并进行了敏感性、特异性、试剂盒配制及冻融后检测效果验证研究。结果显示:该方法仅能从PIV5分离毒种扩增到与预期大小相符的长度为314bp的特异性目的片段,最适退火温度为57.1℃,最适引物浓度为0.2umol/L,阳性对照适宜灭活剂为二乙烯亚胺(BEI),试剂盒冻融后不影响检测结果。建立的RT-PCR方法检测灵敏度为8~10TCID50,与BPIV_(3)等22种常见病毒均无交叉,特异性强、敏感性高,为PIV5的临床诊断和流行病学调查提供了技术方法。 展开更多
关键词 副流感病毒5型 RT-pcr 检测试剂
在线阅读 下载PDF
PCR荧光探针法猪源性成分试剂盒质量评价方法建立及应用
2
作者 马温华 张娟 +6 位作者 王延滨 刘浩田 刘静 田雪梅 陈飞秀 赵蕾 陈爱亮 《质量安全与检验检测》 2025年第2期27-32,共6页
为了评价市售猪源性PCR荧光探针法核酸检测试剂盒的质量,本研究对市售5个品牌猪源性PCR荧光探针法核酸检测试剂盒进行质量评价。按照5种品牌试剂盒内置的说明书进行样品前处理、实时荧光定量PCR扩增以及结果判定,对精密度、特异性、检... 为了评价市售猪源性PCR荧光探针法核酸检测试剂盒的质量,本研究对市售5个品牌猪源性PCR荧光探针法核酸检测试剂盒进行质量评价。按照5种品牌试剂盒内置的说明书进行样品前处理、实时荧光定量PCR扩增以及结果判定,对精密度、特异性、检测限、冻融稳定性和模拟掺假样品检测5个指标进行了评价,探讨该5种试剂盒的检测性能。结果显示,5种PCR荧光探针法猪源性成分检测试剂盒的变异系数均小于5%,DNA检测限均可达到0.1 ng/μL,冻融稳定性实验变异系数小于5%,扩增效率可达到90%~110%,Kit_1#、Kit_2#、Kit_3#、Kit_4#试剂盒除了猪源性成分有扩增产物外,鸡、鸭、牛、羊等有非特异扩增,Kit_5#试剂盒只有猪源性成分有扩增产物,其他物种无扩增产物。5种PCR荧光探针法猪源性成分检测试剂盒,其精密度、检测限、稳定性等性能指标,符合行业标准YY/T 1182—2020《核酸扩增检测用试剂(盒)》中的要求。Kit_1#、Kit_2#、Kit_3#、Kit_4#试剂盒的特异性较差,容易引起误判,不适于猪肉及其肉制品的掺假鉴定。Kit_5#试剂盒的特异性好,可用于肉类食品中猪源性成分的检验鉴定。 展开更多
关键词 猪源性成分检测 试剂盒 Q-pcr 质量评价
在线阅读 下载PDF
羊绒羊毛实时荧光PCR定量的试剂盒法验证探究
3
作者 韩超轶 李典典 《毛纺科技》 北大核心 2025年第9期116-120,共5页
天然深色和后加工染色的羊绒羊毛样品均含有大量色素,在提取时不仅不易与脱氧核糖特苷酸(DNA)分离,还会抑制聚合酶链式反应(PCR扩增),研究验证了DNA试剂盒法对解决此类问题的有效性。以纯天然原色羊绒和羊毛样品为研究对象,通过吸光度... 天然深色和后加工染色的羊绒羊毛样品均含有大量色素,在提取时不仅不易与脱氧核糖特苷酸(DNA)分离,还会抑制聚合酶链式反应(PCR扩增),研究验证了DNA试剂盒法对解决此类问题的有效性。以纯天然原色羊绒和羊毛样品为研究对象,通过吸光度比值法和扩增效率分别验证了DNA的纯度和DNA片段的完整性,选取纯天然青绒和紫绒样品以及3种常见比例的后加工深色样品,进一步验证DNA试剂盒法的有效性。结果表明:该方法实测值与理论值的偏差均小于5%,批内变异系数和批间变异系数均小于5%,验证了试剂盒法具有良好的准确性和重复性;与传统的苯酚氯仿法相比,DNA试剂盒法可有效解决水溶性色素和染料与DNA分离困难、抑制PCR扩增等问题,为天然深色和后加工染色样品的分析提供了一种有效的测试手段。 展开更多
关键词 天然深色样品 后加工染色样品 实时荧光定量pcr DNA试剂盒法 变异系数.
在线阅读 下载PDF
6种商品化PRRSV美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒性能比对
4
作者 高晓龙 栗云鹏 +5 位作者 李志军 张启龙 傅彩霞 高敏 雷琪莉 王林 《中国动物检疫》 2025年第2期80-86,共7页
为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV... 为评价不同品牌猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲经典毒株和高致病性毒株双重实时荧光定量PCR检测试剂盒的性能,选择6种市售商品化试剂盒,对其敏感性、特异性、重复性以及临床样品检测符合率等指标进行比对分析。结果显示:对于PRRSV美洲经典毒株VR2332和高致病性毒株JXA1,A品牌试剂盒最低检测限均可达到1 copy/μL,D品牌试剂盒最低检测限分别为100和1000 copies/μL,其他品牌试剂盒最低检测限为1~10 copies/μL;6种试剂盒对猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪细小病毒(PPV)的检测均为阴性,特异性良好;对不同浓度模板进行检测,除1个变异系数为6.5%以外,其余均小于5.0%,重复性较好。临床样品检测结果显示,F品牌试剂盒阴性样品检测符合率为95%,其余试剂盒为100%;D品牌试剂盒阳性样品检测符合率为50%,其余试剂盒为100%。综上所述,6种试剂盒的特异性、重复性均较好,但其敏感性及临床检测性能存在一定差异。建议在使用荧光定量PCR试剂盒检测PRRSV前,对其性能进行科学评估,选用性能良好的试剂盒以满足检测需求。本研究为检测机构和养殖场选择PRRSV检测试剂盒提供了依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 美洲经典毒株 高致病性毒株 pcr检测试剂盒 性能对比
在线阅读 下载PDF
现场PCR诊断箱POCKIT试剂联合应用技术快速检测炭疽芽孢杆菌的实验研究
5
作者 尹世辉 唐磊 +4 位作者 孙建飞 代伟萍 袁爽 邢智锋 李杉杉 《大医生》 2019年第8期71-72,共2页
目的建立一种灵敏度高、特异性强、操作简单、检测结果准确并对检测环境要求低等优点的炭疽芽孢杆菌基因检测方法。方法利用Taqman探针原理,设计炭疽杆菌质粒PXO1和PXO2基因引物,采用冷冻干燥工艺将PCR检测试剂全部组分制备成冻干粉,使... 目的建立一种灵敏度高、特异性强、操作简单、检测结果准确并对检测环境要求低等优点的炭疽芽孢杆菌基因检测方法。方法利用Taqman探针原理,设计炭疽杆菌质粒PXO1和PXO2基因引物,采用冷冻干燥工艺将PCR检测试剂全部组分制备成冻干粉,使用时加入缓冲液进行溶解,与PCR诊断箱中配置便携PCR联合使用,可实现现场快速检测的目的。结果使用Taqman探针原理的PCR诊断箱和POCKIT试剂组合应用是目前最适合的现场检测方法,在敏感性和准确性方面一致,且操作简便。结论本研究建立的现场PCR诊断箱POCKIT试剂联合应用技术,方法可特异、灵敏地检测出患者的涂抹样本、环境样本。胶体金检测及荧光定量PCR检测结果充分证明此技术在现场快速检测炭疽疫情中具有重要意义。 展开更多
关键词 炭疽 pcr诊断箱 POCkit试剂 质粒 现场检测
在线阅读 下载PDF
基于数字PCR平台的肺炎支原体耐药突变检测试剂盒与tNGS在肺炎支原体常见耐药突变检测中的效能对比
6
作者 王逍潇 张鑫强 +5 位作者 赵云虎 江小珍 陈宗威 王子霞 陈秀贤 顾兵 《中国医学装备》 2025年第11期61-64,共4页
目的:基于MicroDrop微滴式数字聚合酶链式反应(PCR)平台的肺炎支原体鉴定及常见耐药突变检测试剂盒与高通量测序的病原靶向测序(tNGS)方法在肺炎支原体常见耐药突变检测的效能对比研究。方法:收集2023至2024年广东省人民医院肺炎住院患... 目的:基于MicroDrop微滴式数字聚合酶链式反应(PCR)平台的肺炎支原体鉴定及常见耐药突变检测试剂盒与高通量测序的病原靶向测序(tNGS)方法在肺炎支原体常见耐药突变检测的效能对比研究。方法:收集2023至2024年广东省人民医院肺炎住院患者的300份临床呼吸道样本,采用肺炎支原体耐药突变检测试剂盒和tNGS方法对耐药突变基因进行检测,对结果不一致的样本用Sanger测序法进行验证。结果:300份肺炎支原体阳性样本经肺炎支原体耐药突变检测试剂盒和tNGS方法平行检测的检出率分别为87.00%和78.67%,检测结果较为一致(Kappa=0.711);在25份结果不一致的样本中,采用Sanger测序法进行验证,结果显示低频基因突变的样本中,试剂盒仍保持可靠的检出能力,然而tNGS方法存在漏检,因此试剂检测低频突变能力更优。结论:基于数字PCR的肺炎支原体耐药突变检测试剂盒在检测低频突变样本的检出率高于tNGS方法,该方法有助于提高检测结果的准确性,为临床诊治提供快速精准的耐药基因检测手段。 展开更多
关键词 MicroDrop微滴式数字 聚合酶链式反应(pcr) 肺炎支原体常见耐药突变 耐药突变检测试剂盒 Sanger测序法 病原靶向测序(tNGS)法 低频突变
暂未订购
奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)的临床应用评估 被引量:2
7
作者 胡秀花 王子华 +5 位作者 黄鹏成 刘园园 毛君杰 王桂琴 马翀 王少林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第11期61-69,共9页
为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧... 为了评估商品化的奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)(后文简称为“检测试剂盒”)在临床应用中的适用性,本试验采用传统细菌分离培养、检测试剂盒、16S rRNA基因扩增子测序和药物敏感性试验对宁夏回族自治区9个牧场155份奶牛乳房炎奶样分别进行菌株鉴定和耐药性检测,并将检测试剂盒与其他3种检测结果进行比较和分析。结果显示,检测试剂盒与传统细菌分离培养在病原菌检出情况上基本保持一致,均主要检出了大肠杆菌、芽孢杆菌属和凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)等;检测试剂盒与16S rRNA基因扩增子测序结果在菌属组成上一致性较高,均主要检出了假单胞菌属、链球菌属和葡萄球菌属等;药物敏感性试验结果显示,检出率较高的66株病原菌分离株对β-内酰胺类抗菌药物的耐药率普遍偏高;奶样中β-内酰胺酶耐药基因blaZ的检测试剂盒检出结果与同一奶样中分离菌株的药物敏感性试验结果一致率达58%(7/12)。综上所述,该检测试剂盒具有较高的准确度和病原覆盖率,可为牧场奶牛乳房炎主要病原的快速诊断和耐药基因(blaZ)监测提供有效的技术支持,从而降低抗菌药物的使用量,以减少牧场经济损失。 展开更多
关键词 奶牛乳房炎病原微生物20联核酸检测试剂盒(pcr-荧光探针法) 细菌分离培养 16S rRNA基因扩增子测序 药物敏感性试验
在线阅读 下载PDF
食用肉类中5种动物源性成分多重PCR检测方法及检测试剂盒的研制 被引量:1
8
作者 孙文 王晗 孟黎明 《现代食品》 2024年第11期152-154,共3页
目的:建立一种同步检测肉类中鹿、牛、羊、猪、马动物源性成分的多重聚合酶链式反应检测方法,并研发快速检测的多重PCR试剂盒。方法:将牛、羊、猪、马的Cyt b基因以及梅花鹿、马鹿的COX 1基因作为设计引物的靶序列,设计特异性引物,优化... 目的:建立一种同步检测肉类中鹿、牛、羊、猪、马动物源性成分的多重聚合酶链式反应检测方法,并研发快速检测的多重PCR试剂盒。方法:将牛、羊、猪、马的Cyt b基因以及梅花鹿、马鹿的COX 1基因作为设计引物的靶序列,设计特异性引物,优化PCR体系,建立5种动物源性成分的多重PCR鉴定方法。结果:在同一反应体系中,可同步扩增鹿肉(173 bp)、牛肉(148 bp)、猪肉(261 bp)、羊肉(100 bp)以及马肉(424 bp)的特异性条带。结论:本研究开发的多重PCR检测试剂盒可同步检测肉类中5种动物源性成分。 展开更多
关键词 多重pcr 线粒体DNA 动物源性成分 试剂盒
在线阅读 下载PDF
产品介绍——食品沙门氏菌PCR快速检测试剂盒简介 被引量:15
9
作者 马立农 刘华伟 +1 位作者 张春柳 梁顺兴 《深圳职业技术学院学报》 CAS 2005年第2期95-96,共2页
A self-developed PCR kit was introduced. It can detect rapidly Salmonella in food. And those actual effect pictures of the PCR kit show that it is sensitive and credible to rapid detection of Salmonella in food.
关键词 快速检测试剂盒 产品介绍 pcr 简介 沙门氏菌污染 中毒病例 食源性疾病 安全监控 食品质量 测定项目 卫生指标 检测方法 细菌性 畜产品 CMA 食物
在线阅读 下载PDF
溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研制及初步应用 被引量:11
10
作者 徐慧 韦莉 +4 位作者 佟瑞平 龚玉梅 王宏俊 孙惠玲 张培君 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第1期13-17,共5页
在溶血性曼氏杆菌PCR检测方法研究的基础上,进行溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研究及初步应用。结果表明,试剂盒特异性好,批内和批间的试剂盒无差异;试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保存12个月;应用试剂盒从1 000多份临床样品中筛选... 在溶血性曼氏杆菌PCR检测方法研究的基础上,进行溶血性曼氏杆菌PCR检测试剂盒的研究及初步应用。结果表明,试剂盒特异性好,批内和批间的试剂盒无差异;试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保存12个月;应用试剂盒从1 000多份临床样品中筛选分离到6株溶血性曼氏杆菌。 展开更多
关键词 溶血性曼氏杆菌 pcr 试剂盒
在线阅读 下载PDF
沙门氏菌内标PCR快速检测试剂盒的研制与应用 被引量:12
11
作者 李小玲 刘斌 +3 位作者 但现龙 王大鹏 周敏 史贤明 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第16期3395-3402,共8页
【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能... 【目的】研制一种能有效指示假阴性的PCR检测产品,用于沙门氏菌快速、准确、灵敏的检测。【方法】针对沙门氏菌invA基因、stn基因序列分别设计引物与扩增内标,建立添加扩增内标的沙门氏菌PCR检测方法,组装试剂盒,并对试剂盒的各项性能进行评价。【结果】试剂盒对147株沙门氏菌和28株非沙门氏菌的检测结果显示,所有沙门氏菌均能扩增出362 bp的目标条带,非沙门氏菌仅扩增出520 bp的内标条带。试剂盒检测沙门氏菌基因组DNA的检测限为8.0 fg/PCR,检测染菌量为4—5 CFU/10 mL的牛奶样品,增菌8—10 h即得到阳性结果。反复冻融60次或-20℃下贮存1年,均不影响试剂盒的使用效果。对食品样品的检测结果显示,阳性检出率为2/30,与国标法的检测结果相符,比未添加扩增内标的PCR检测结果(阳性检出率为1/30)准确。【结论】采用添加扩增内标的PCR试剂盒检测沙门氏菌,特异性强、灵敏度高、稳定性好,并能有效指示假阴性,提高检测的准确性,适用于食品中沙门氏菌的快速筛检。 展开更多
关键词 沙门氏菌 聚合酶链式反应(pcr) 扩增内标 检测试剂盒
在线阅读 下载PDF
冬虫夏草PCR快速检测试剂盒的研制与效果评价 被引量:7
12
作者 侯飞侠 曹静 +5 位作者 王沙沙 王茜 袁媛 彭成 万德光 国锦琳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1125-1129,共5页
冬虫夏草为我国传统名贵中药材。资源短缺、价格昂贵和巨大的市场需求导致市售冬虫夏草掺伪掺假现象严重,亟需建立快速有效的鉴别方法。该研究基于实验前期已建立的冬虫夏草快速鉴定SS-PCR方法,按照体外诊断试剂评价标准开发试剂盒,并... 冬虫夏草为我国传统名贵中药材。资源短缺、价格昂贵和巨大的市场需求导致市售冬虫夏草掺伪掺假现象严重,亟需建立快速有效的鉴别方法。该研究基于实验前期已建立的冬虫夏草快速鉴定SS-PCR方法,按照体外诊断试剂评价标准开发试剂盒,并对试剂盒的特异性、检测限、重复性及保存期4项性能进行了评价。结果显示冬虫夏草质量占混合物质量的1/200(质量分数0.5%以上)以上时可被成功检测。试剂盒对冬虫夏草及其伪品的检测结果显示,仅有冬虫夏草可被成功扩增,并在紫外下显示绿色荧光。该试剂盒37℃温育7 d仍有效,说明4℃保存其在1年内稳定有效。同一批次试剂盒在不同条件下,不同批次试剂盒在相同条件下,其检测结果均一致且准确,表明试剂盒具有良好的批内及批间重复性。将该试剂盒用于市售冬虫夏草及其混伪品的检测,操作简单快速,结果准确可靠,为下一步中药快检试剂盒的商品化奠定了基础。 展开更多
关键词 冬虫夏草 聚合酶链式反应(pcr) 检测试剂盒
原文传递
羊痘病毒PCR检测方法的建立和试剂盒的研制 被引量:8
13
作者 张志成 陈丽华 +3 位作者 陆静静 张大淦 戴薇 陈钟鸣 《中国动物检疫》 CAS 2011年第2期44-46,共3页
根据GenBank上已发表的羊痘病毒(CPV)的全基因序列,设计并合成了一对能特异性扩增羊痘病毒的引物,扩增产物大小约为445bp。通过对PCR方法的优化,建立了检测羊痘病毒的PCR方法,并研制出检测试剂盒。同时对试剂盒的敏感性,特异性和稳定性... 根据GenBank上已发表的羊痘病毒(CPV)的全基因序列,设计并合成了一对能特异性扩增羊痘病毒的引物,扩增产物大小约为445bp。通过对PCR方法的优化,建立了检测羊痘病毒的PCR方法,并研制出检测试剂盒。同时对试剂盒的敏感性,特异性和稳定性进行了研究。实验结果表明,该试剂盒具有良好的敏感性和特异性,稳定性在-20℃至少可以保存一年。 展开更多
关键词 羊痘病毒 pcr检测试剂盒 敏感性 特异性
在线阅读 下载PDF
弓形虫PCR检测试剂盒的组装和初步应用 被引量:9
14
作者 任科研 李琳 +3 位作者 苑淑贤 尹荣兰 杨金生 姚新华 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第9期92-94,共3页
研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能... 研制弓形虫PCR检测试剂盒,观察临床应用效果。根据GenBank公布的弓形虫MIC3基因序列,设计合成1对特异性引物,对PCR反应条件进行优化,分别对试剂盒的特异性、敏感性、重复性、稳定性和保存期进行研究,之后进行临床试验。该诊断试剂盒能扩增出弓形虫特异性基因MIC3片段,与猪球虫、贾第虫、猪旋毛虫和隐孢子虫无交叉反应;该检测方法最低能够检测到10个弓形虫速殖子的DNA,不同批次的试剂盒对同一样品检测和同一批次对不同样品检测,有较高的重复性和稳定性,且常温下可保存1年以上,临床应用效果显著。该检测试剂盒对弓形虫病早期诊断、流行病学调查和卫生检疫提供了检测手段。 展开更多
关键词 弓形虫 pcr检测试剂盒 组装 应用
在线阅读 下载PDF
布鲁氏菌病VirB8-PCR诊断试剂盒的特异性评价 被引量:7
15
作者 谷文喜 吴冬玲 +5 位作者 范伟兴 叶峰 李博 刘丽娅 钟旗 岳大安 《中国动物检疫》 CAS 2009年第7期48-49,共2页
使用VirB8-PCR诊断试剂盒对布鲁氏菌标准株、疫苗株及新疆分离株共7株布鲁氏菌的VirB8基因序列扩增、克隆并与Genbank中发表的VirB8基因序列(AF226278)进行比较和分析,发现:该基因非常保守,7株布鲁氏菌的同源性在99.2%以上,其中A菌与Rev... 使用VirB8-PCR诊断试剂盒对布鲁氏菌标准株、疫苗株及新疆分离株共7株布鲁氏菌的VirB8基因序列扩增、克隆并与Genbank中发表的VirB8基因序列(AF226278)进行比较和分析,发现:该基因非常保守,7株布鲁氏菌的同源性在99.2%以上,其中A菌与Rev1基因序列100%同源,B菌与Genbank发表的基因序列100%同源;牛种(544A、A19)和羊种(M5、Rev1)分别各自在相同部位发生了相同的碱基突变,因此VirB8基因有可能做为布鲁氏菌疫苗菌的鉴定分类基因。VirB8基因在布鲁氏菌中高度保守,可作为布鲁氏菌检测模板,VirB8-PCR诊断试剂盒特异、敏感,检测结果可靠。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 VirB8-pcr 试剂盒 序列分析
在线阅读 下载PDF
副猪嗜血杆菌PCR诊断试剂盒的研制及初步应用 被引量:4
16
作者 龚玉梅 佟瑞平 +4 位作者 韦莉 徐慧 孙惠玲 王宏俊 张培君 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第6期10-14,共5页
在特异性和敏感性试验的基础上,组装副猪嗜血杆菌PCR诊断试剂盒,进行批间和批内试剂盒的检测、试剂盒在不同温度条件下的保存期试验等。结果表明,试剂盒特异性好、敏感性高,批内和批间的试剂盒无差异,试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保... 在特异性和敏感性试验的基础上,组装副猪嗜血杆菌PCR诊断试剂盒,进行批间和批内试剂盒的检测、试剂盒在不同温度条件下的保存期试验等。结果表明,试剂盒特异性好、敏感性高,批内和批间的试剂盒无差异,试剂盒在-20℃可保存30个月,4℃可保存12个月。适用于不同地区、不同条件的实验室快速检测副猪嗜血杆菌。 展开更多
关键词 副猪嗜血杆菌 聚合酶链反应 试剂盒
在线阅读 下载PDF
一步法RT-PCR检测烟草环斑病毒试剂盒的研制与应用 被引量:5
17
作者 张永江 李明福 +1 位作者 黄冲 相宁 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第10期2072-2073,共2页
根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明... 根据烟草环斑病毒基因组序列设计特异性引物,利用RT-PCR技术研制成一步法检测该病毒的试剂盒,并建立了操作程序。对试剂盒扩增到的预期产物进行测序验证,产物序列与目的序列间的同源性为97.8%,表明该试剂盒的准确性较高。试验结果还表明,该试剂盒在常温、4℃和-20℃下可分别保存2d、7d和60d;灵敏度是DAS-ELISA的100倍;质量控制试验结果一致,具有较高的重复性。 展开更多
关键词 一步法RT—pcr 烟草环斑病毒 检测 试剂盒
在线阅读 下载PDF
猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒的研制 被引量:9
18
作者 徐景峨 蔡一鸣 +1 位作者 王璇 任荣清 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第4期209-211,共3页
根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核... 根据GenBank中猪传染性胸膜肺炎放线杆菌apxⅣA基因序列,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了检测猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的PCR试剂盒。该试剂盒扩增的阳性条带为600 bp,特异性与敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为50 CFU/mL,而对金黄色葡萄球菌、链球菌、多杀性巴氏杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、副猪嗜血杆菌、大肠杆菌的扩增结果均为阴性。-20℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对41份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与细菌学检测结果相一致。结果表明,猪传染性胸膜肺炎放线杆菌PCR检测试剂盒能够对APP临床样品进行快捷、灵敏、准确的检测。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎放线杆菌 pcr试剂盒 apxⅣA基因
在线阅读 下载PDF
牛结核病PCR检测试剂盒的研制 被引量:3
19
作者 吴位珩 徐景峨 +3 位作者 孙启跃 杨莉 文才智 杨茂生 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第8期237-240,共4页
根据GenBank中的牛结核分枝杆菌IS6110的基因片段,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了用于检测牛结核病的PCR试剂盒,该试剂盒扩增的阳性条带为317 bp;敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为1.025 pg/μL;特异... 根据GenBank中的牛结核分枝杆菌IS6110的基因片段,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了用于检测牛结核病的PCR试剂盒,该试剂盒扩增的阳性条带为317 bp;敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为1.025 pg/μL;特异性试验表明,仅结核分枝杆菌扩增结果为阳性,副结核分枝杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金葡萄球菌、链球菌的扩增结果均为阴性。-20℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对24份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与结核菌素试验检测结果相一致。结果表明,牛结核病PCR检测试剂盒能够对牛结核临床样本进行快捷、灵敏、准确的检测。 展开更多
关键词 牛结核分枝杆菌 pcr试剂盒 IS6110基因
在线阅读 下载PDF
安氏隐孢子虫PCR诊断试剂盒的初步应用 被引量:3
20
作者 周荣琼 李国清 +2 位作者 肖淑敏 李韦华 郭远忠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期397-400,共4页
运用首次研制的安氏隐孢子虫PCR诊断试剂盒对广东省4个奶牛场和河南省1个奶牛场共234份样品,进行了安氏隐孢子虫感染的实际检测,并与常规检测方法饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法进行了比较。本试剂盒的检出率比常规检测方法提高了2%~1... 运用首次研制的安氏隐孢子虫PCR诊断试剂盒对广东省4个奶牛场和河南省1个奶牛场共234份样品,进行了安氏隐孢子虫感染的实际检测,并与常规检测方法饱和蔗糖漂浮法、改良抗酸染色法进行了比较。本试剂盒的检出率比常规检测方法提高了2%~13%,显示该试剂盒具有特异、敏感等优点,对开展隐孢子虫病的鉴别诊断和分子流行病学调查具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 安氏隐孢子虫 pcr 诊断试剂盒 奶牛
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 10 下一页 到第
使用帮助 返回顶部