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dPCR方法动态监测T790M突变在EGFR阳性非小细胞肺癌耐药治疗中的指导作用
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作者 姚铠涛 曾小芸 +3 位作者 连逸恺 林建雄 王双玲 魏丹娜 《分子诊断与治疗杂志》 2026年第1期131-134,共4页
目的本研究旨在探讨使用数字PCR(dPCR)方法动态监测血浆EGFR T790M突变的可行性,并评估基于血浆T790M突变检测的早期干预是否可作为EGFR突变非小细胞肺癌患者EGFR-TKI转换治疗的最佳时机。方法初筛2021年7月至2023年12月在汕头大学医学... 目的本研究旨在探讨使用数字PCR(dPCR)方法动态监测血浆EGFR T790M突变的可行性,并评估基于血浆T790M突变检测的早期干预是否可作为EGFR突变非小细胞肺癌患者EGFR-TKI转换治疗的最佳时机。方法初筛2021年7月至2023年12月在汕头大学医学院第二附属医院75例接受埃克替尼治疗的EGFR阳性Ⅳ期NSCLC患者,T790M突变率为53.3%,最终纳入40例患者。试验组(n=18)在血浆检测到T790M突变后更换第三代EGFR-TKI治疗,对照组(n=22)在影像学进展及T790M突变后更换EGFR-TKI治疗。比较两组的临床疗效、无进展生存期(PFS)及不良反应。结果试验组的客观缓解率(ORR)为72.2%,对照组为68.2%,两组差异无统计学意义(P>0.05)。试验组的疾病控制率(DCR)为94.4%,对照组为81.9%,差异无统计学意义(P>0.05)。试验组的中位PFS显著长于对照组,差异有统计学意义(14.8个月vs 10.3个月,P=0.024)。两组的不良反应均为1~2级,皮疹、腹泻及肝功能异常的发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用dPCR动态监测血浆EGFR T790M突变,可较影像学更早识别一代EGFR-TKI耐药,从而及时转换三代EGFR-TKI治疗,延缓疾病进展,是一种经济且临床可行的策略。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 EGFR T790M 数字pcr 三代酪氨酸激酶抑制剂
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猴痘病毒荧光定量PCR检测方法的建立
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作者 孙健 赵柏林 《山东畜牧兽医》 2026年第1期8-12,共5页
猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)作为一种重要的人畜共患病毒,其在全球范围内传播和蔓延引起了广泛关注,尤其是在近年来的疫情中,及时有效的检测方法显得尤为重要。为建立一种快速诊断MPXV的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F... 猴痘病毒(Monkeypox virus,MPXV)作为一种重要的人畜共患病毒,其在全球范围内传播和蔓延引起了广泛关注,尤其是在近年来的疫情中,及时有效的检测方法显得尤为重要。为建立一种快速诊断MPXV的检测方法,根据2022年公布的MPXV的靶基因片段F3L(462 bp,GenBank登录号AF380138.1)保守区域,设计了1对特异性的引物和1条探针,建立了猴痘病毒荧光定量PCR检测方法。结果显示,本方法仅能有效检测MPXV,与牛结节皮肤病病毒、非洲猪瘟病毒VP72片段质粒、圆环病毒Ⅱ型标准品均无交叉反应;对重组质粒标准品的最低检测限为5.1 copies/μL;批内与批间的重复试验变异系数均小于6%。结果表明,本试验方法具有较强的敏感性、特异性和稳定性,可以用于猴痘病毒的快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 猴痘病毒 荧光定量 pcr 检测方法
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机场道面承载能力ACR-PCR评价方法及其改进方向
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作者 袁捷 李杰 +2 位作者 马鲁宽 凌建明 姜昌山 《同济大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第2期255-263,共9页
道面承载能力评价是保障飞机安全运行的重要工作之一。在回顾飞机分类号-道面分类号(aircraft classification number-pavement classification number,ACN-PCN)评价方法基本原理并总结其局限性的基础上,阐述了飞机分类等级-道面分类等... 道面承载能力评价是保障飞机安全运行的重要工作之一。在回顾飞机分类号-道面分类号(aircraft classification number-pavement classification number,ACN-PCN)评价方法基本原理并总结其局限性的基础上,阐述了飞机分类等级-道面分类等级(aircraft classification rating-pavement classification rating,ACR-PCR)评价方法的优化内容;明确了ACR和PCR的计算方法,并通过算例对比分析了2种方法,同时提出了改进方向。结果表明,ACR-PCR评价方法优化了标准道面结构、当量单轮胎压等参数,更新了道面结构破坏模式的控制准则及力学响应计算方法,实现了与现行设计方法的统一;ACR值不能简单地用10倍的ACN值表示,并且ACR-PCR评价方法对刚性道面承载能力提出了更高要求;建议在优化标准结构的基础上,提出针对无机结合料稳定类基层道面的ACR计算方法以及刚性道面上加铺层复合道面承载能力ACR-PCR评价方法。 展开更多
关键词 机场工程 机场道面 承载能力 ACR-pcr评价方法
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基于边缘无浆体msp4基因的PCR检测方法的建立及应用
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作者 廖培淇 朱子奇 +4 位作者 苏中华 甘富斌 李俊强 陈远才 张龙现 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第1期77-82,共6页
为建立特异、敏感、快速的边缘无浆体PCR检测方法,以其msp4基因的保守区为靶标设计一对特异性引物。优化PCR反应条件后,进行了敏感性、特异性、重复性试验及临床样品检测。结果显示,所建立的方法能够特异性检测边缘无浆体核酸,而与其他... 为建立特异、敏感、快速的边缘无浆体PCR检测方法,以其msp4基因的保守区为靶标设计一对特异性引物。优化PCR反应条件后,进行了敏感性、特异性、重复性试验及临床样品检测。结果显示,所建立的方法能够特异性检测边缘无浆体核酸,而与其他动物常见血液原虫无交叉反应;该方法的检测下限为380 fg/μL,拷贝数为126拷贝/反应;批内、批间试验结果表明,该方法具有良好的重复性和稳定性;对120份牦牛血液临床样本检测结果表明,该方法检测边缘无浆体阳性率为54.1%(65/120),高于文献报道方法检测结果37.5%(45/120),表明该方法具有良好的敏感性和准确性。成功建立了一种敏感、特异、快速的边缘无浆体PCR检测方法,为我国牛无浆体病的流行病学调查和诊断防控提供了技术支撑。 展开更多
关键词 边缘无浆体 msp4基因 pcr 牛无浆体病
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暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及其杂交F_(1)代的荧光PCR鉴定技术的建立
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作者 赵昕 车帅 +4 位作者 王焕 孙侦龙 尤颖哲 柳淑芳 庄志猛 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期37-47,共11页
暗纹东方鲀(Takifugu obscurus♀)×红鳍东方鲀(T.rubripes♂)的杂交F_(1)代具备双亲诸多优良性状,市场前景较好。但杂交F_(1)代的形态特征与其亲本难以区分,为河鲀种质资源保护和开发利用带来了困扰,迫切需要开发有效的分子鉴定方... 暗纹东方鲀(Takifugu obscurus♀)×红鳍东方鲀(T.rubripes♂)的杂交F_(1)代具备双亲诸多优良性状,市场前景较好。但杂交F_(1)代的形态特征与其亲本难以区分,为河鲀种质资源保护和开发利用带来了困扰,迫切需要开发有效的分子鉴定方法对杂交F_(1)代及其亲本进行精准判别。为实现杂交F_(1)代及其亲本的快速准确鉴定,本研究根据核基因SH3PX3多态性SNP位点,设计荧光PCR扩增引物及探针,优化了荧光PCR参数,建立了暗纹东方鲀、红鳍东方鲀及其杂交F_(1)代的荧光PCR鉴定方法,并对该方法进行了验证。结果显示:杂交F_(1)代的COI序列与母本暗纹东方鲀的序列相似度为100%,在NJ进化树中聚为一支,无法实现杂交F_(1)代和母本的区分;SH3PX3基因荧光PCR体系最佳退火温度为48℃;荧光PCR扩增后,暗纹东方鲀仅FAM通道有Ct值,ΔCt值大于20,红鳍东方鲀FAM信号通道比HEX通道的Ct值高2~5,杂交F_(1)代的FAM通道与HEX通道的Ct值接近,二者之差小于2;基于上述方法对17份暗纹东方鲀、21份红鳍东方鲀和53份杂交F_(1)代样品进行验证,鉴定准确率为100%。本研究建立的荧光PCR鉴定方法不仅具有结果准确、易判读等优点,还避免了测序等繁琐流程,可实现高通量检测,显著提高了检测效率,为河鲀种质资源鉴定与保护、杂交育种和遗传多样性研究提供了技术支持。 展开更多
关键词 暗纹东方鲀 红鳍东方鲀 杂交F_(1)代 SH3PX3基因 荧光pcr 物种鉴定
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猪圆环病毒2型微滴数字PCR检测方法的建立及临床应用
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作者 刘武函 唐小明 +8 位作者 彭志 张坤 谢怡灵 范仲鑫 王卫国 尚玲 张梦凡 杨青 胡巧云 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期120-125,共6页
为建立一种特异性强、敏感性高、重复性好的猪圆环病毒2型(PCV-2)微滴数字PCR检测方法,试验基于PCV-2 ORF1保守区域设计引物和探针,通过优化引物浓度、探针浓度和退火温度及特异性、敏感性和重复性试验建立微滴数字PCR方法,并采用该方法... 为建立一种特异性强、敏感性高、重复性好的猪圆环病毒2型(PCV-2)微滴数字PCR检测方法,试验基于PCV-2 ORF1保守区域设计引物和探针,通过优化引物浓度、探针浓度和退火温度及特异性、敏感性和重复性试验建立微滴数字PCR方法,并采用该方法对90份临床样本进行检测。结果表明:建立的PCV-2微滴数字PCR检测方法的最佳引物和探针浓度分别为18μmol/L和9μmol/L,退火温度为61℃;能特异性检出PCV-2,与多种常见猪病原[猪圆环病毒3型(PCV-3)、伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)]无交叉反应;最低检测限为3.48 copies/μL;重复性试验中扩增后的拷贝数组内与组间变异系数范围分别在0.91%~6.13%和1.44%~8.53%之间,均小于10%。90份临床样本中,建立的微滴数字PCR方法检出PCV-2阳性样本43份,检出率为47.78%,经统计微滴数字PCR方法检出的阳性样本包含了实时荧光定量PCR方法检出的所有阳性样本,与实时荧光定量PCR方法的符合率为88.89%。说明本研究建立的PCV-2微滴数字PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,适用于临床样本(特别是低病毒载量样本)的检测。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 微滴数字pcr 病毒检测 检测方法 特异性试验 敏感性试验 重复性试验
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猫疱疹病毒Ⅰ型SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法的建立及应用
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作者 刘雅雯 赵广荣 +9 位作者 许丽文 孙亚杰 李双双 刘佳佳 李智杰 张成琪 符建海 张子闯 胡博 白雪 《畜牧与兽医》 北大核心 2026年第1期79-84,共6页
猫疱疹病毒I型(FHV-1)是威胁猫科动物健康的重要传染性疾病,本研究旨在研发一种灵敏、高效的FHV-1检测技术。依据GenBank上FHV-1 US6保守区域的基因序列,设计合成1对针对FHV-1 gD基因的引物,建立了一种SYBR Green I荧光定量PCR的检测方... 猫疱疹病毒I型(FHV-1)是威胁猫科动物健康的重要传染性疾病,本研究旨在研发一种灵敏、高效的FHV-1检测技术。依据GenBank上FHV-1 US6保守区域的基因序列,设计合成1对针对FHV-1 gD基因的引物,建立了一种SYBR Green I荧光定量PCR的检测方法,构建标准曲线后分别验证该方法的特异性、敏感性、重复性,并将其进一步应用于人工感染猫产生的临床样本检测。结果:该特异性引物与猫杯状病毒(FCV)、猫细小病毒(FPV)和猫冠状病毒(FCoV)均未出现交叉反应,检测下限为14.78 copies/μL,组内和组间重复试验的变异系数均低于2%;该方法对临床样本的检出率比常规PCR高出25.46%;通过该方法检测人工感染FHV-1强毒后猫的每日排毒量,结果呈现上升趋势,与临床发病程度相符,猫的脏器病毒载量存在个体差异,但集中在心脏、肺脏、肠道和膀胱中检出。综上,该研究建立的SYBR Green I荧光定量PCR方法对FHV-1具有较好的特异性、灵敏度和重复性,为FHV-1感染的快速诊断以及疾病的防控提供方法支持。 展开更多
关键词 猫疱疹病毒Ⅰ型 荧光定量pcr SYBR GreenⅠ US6基因 猫病毒性鼻气管炎
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实时荧光定量PCR与传统方法诊断HIV感染者合并耶氏肺孢子菌肺炎的效能比较
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作者 许少莉 王梦琦 +1 位作者 马丹丹 侯淑芬 《临床研究》 2026年第1期121-123,128,共4页
目的探讨实时荧光定量PCR(qPCR)与传统染色技术在艾滋病(HIV)感染者合并耶氏肺孢子菌肺炎中的诊断效能。方法选取2023年12月至2025年4月郑州市第六人民医院接收的130例疑似耶氏肺孢子菌肺炎的HIV感染者,共收集130份呼吸道标本(BALF或痰... 目的探讨实时荧光定量PCR(qPCR)与传统染色技术在艾滋病(HIV)感染者合并耶氏肺孢子菌肺炎中的诊断效能。方法选取2023年12月至2025年4月郑州市第六人民医院接收的130例疑似耶氏肺孢子菌肺炎的HIV感染者,共收集130份呼吸道标本(BALF或痰液)。所有患者于入院48 h内采集支气管肺泡灌洗液(BALF)或痰液,同期开展qPCR与传统染色[六胺银(GMS)染色]检测,比较两种方法的耶氏肺孢子菌肺炎诊断效能。结果所有130例均完成GMS染色检测,以临床最终裁决诊断为参照。GMS染色检出耶氏肺孢子菌肺炎19例(真阳19例,假阳0例),非耶氏肺孢子菌肺炎111例(真阴48例,假阴63例),其敏感度为23.17%(19/82),特异度为100.00%(48/48)。qPCR检出耶氏肺孢子菌肺炎84例(真阳78例,假阳6例),非耶氏肺孢子菌肺炎46例(真阴42例,假阴4例),其敏感度为95.12%(78/82),特异度为87.50%(42/48)。与GMS染色相比,qPCR法表现出明显更高的敏感度与总体准确度。两种方法均具有较高的特异度,GMS染色法特异度高于qPCR法。配对McNemar检验提示两法敏感度、特异度、准确率均存在统计学差异(P<0.05)。结论在HIV感染者疑似耶氏肺孢子菌肺炎的诊断中,qPCR相较于传统GMS染色,其敏感度与准确度较高。建议以qPCR作为首选检测手段,结合GMS染色及临床综合证据进行分层判定,以减少漏诊、提升诊断效率并优化治疗决策。 展开更多
关键词 艾滋病感染者 耶氏肺孢子菌肺炎 实时荧光定量pcr 六胺银染色 诊断效能 支气管肺泡灌洗液
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荧光定量PCR检测珍珠鸡Tva与ALV-A gp85基因方法的建立及应用
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作者 宁宇航 李喜月 +7 位作者 王扬扬 马晨曦 李鑫鹏 荣晴 何雷 余祖华 丁轲 陈建 《中国家禽》 北大核心 2026年第1期70-78,共9页
研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组... 研究旨在探讨体内水平下珍珠鸡各组织器官中A亚群禽白血病病毒(ALV-A)组织载量与维生素_(B12)(V_(B12))的含量、Tva基因转录水平之间的关系。试验通过建立检测珍珠鸡ALV-A gp85和Tva基因的荧光定量PCR方法,定量感染ALV-A的珍珠鸡不同组织中ALV-A gp85基因和Tva基因表达水平,并通过ELISA测定珍珠鸡组织中V_(B12)浓度,分析ALV-A gp85表达水平与V_(B12)组织含量和Tva基因表达水平之间的关系。结果显示:研究建立的珍珠鸡Tva基因荧光定量PCR方法灵敏度较常规PCR提升1个数量级(10倍),ALV-A gp85基因检测灵敏度提高2个数量级(100倍),仅靶基因出现特异性扩增且批内及批间变异系数均小于2%,血浆样本ALV-A阳性检出率明显高于PCR和ELISA方法,具有良好的灵敏度、特异性和稳定性。皮尔逊相关性分析显示,珍珠鸡组织器官中V_(B12)浓度与ALV-A gp85转录水平均呈负相关,而ALV-A gp85与Tva基因转录水平整体上符合正相关关系,推测V_(B12)可能通过占据Tva受体干扰ALV-A感染宿主细胞。研究表明,试验成功建立一种定量检测珍珠鸡ALV-A gp85基因和Tva基因的方法,并确定珍珠鸡中V_(B12)组织含量与ALV-A组织载量以及Tva基因表达水平之间的关系,为禽白血病的防控奠定基础。 展开更多
关键词 A亚群禽白血病病毒 TVA gp85 QRT-pcr 珍珠鸡 维生素B_(12)
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荧光定量PCR技术在母体细胞污染鉴定和快速产前诊断中的应用
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作者 赵燕玲 戴立华 +1 位作者 朱峰 王红坤 《中国妇幼健康研究》 2026年第1期31-38,共8页
目的评价荧光定量PCR(QF-PCR)技术在母体细胞污染(MCC)鉴定和常见染色体非整倍体快速产前诊断中的临床应用价值。方法建立MCC浓度梯度QF-PCR检测模型,分析不同比例MCC下的短串联重复序列(STR)图谱特点。回顾性分析577例产前羊水样本中MC... 目的评价荧光定量PCR(QF-PCR)技术在母体细胞污染(MCC)鉴定和常见染色体非整倍体快速产前诊断中的临床应用价值。方法建立MCC浓度梯度QF-PCR检测模型,分析不同比例MCC下的短串联重复序列(STR)图谱特点。回顾性分析577例产前羊水样本中MCC发生率,通过与羊水核型分析结果比对,评估QF-PCR对13、18、21、X及Y染色体非整倍体的检测效能。结果在10%及以上的MCC模型中,STR图谱出现明显可辨别“污染峰”特征。577例羊水样本中,4例存在MCC(0.69%,4/577);QF-PCR检出常见染色体异常倍性60例,包括21-三体24例、18-三体11例、XO单体3例、XXX综合征4例、XXY综合征6例和XYY综合征6例,提示倍性异常6例。羊水核型分析检出异常69例,两种检测结果比较显示,QF-PCR对52例染色体非整倍体的检出与核型分析完全一致;2例核型分析结果为Y染色体结构异常的样本,QF-PCR判定为XYY;6例性染色体嵌合的样本,QF-PCR仅能提示倍性异常而无法确定具体构成;另有9例染色体平衡重组和片段异常由于QF-PCR试剂盒的局限性未检出。结论荧光定量PCR技术可有效识别≥10%的母体细胞污染,对常见染色体非整倍体的诊断具有快速和高敏感性的优势,但对染色体嵌合组成、平衡易位和拷贝数变异等检出存在局限性,建议将其作为产前常见染色体非整倍体诊断的辅助技术手段。 展开更多
关键词 母体细胞污染 荧光定量pcr 产前诊断 染色体非整倍体
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基于超星学习通的生物技术制药课程PCR专题BOPPPS教学实践
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作者 刘广娜 王晓岩 杨松 《安徽农学通报》 2026年第1期118-121,共4页
为解决生物技术制药课程中PCR技术原理复杂、操作精细导致的教学难题,本文将BOPPPS教学法与超星学习通平台深度融合,构建PCR专题教学模式。该模式遵循引入、目标、前测、参与式学习、后测、总结6个环节逻辑,通过案例驱动、问题导向激发... 为解决生物技术制药课程中PCR技术原理复杂、操作精细导致的教学难题,本文将BOPPPS教学法与超星学习通平台深度融合,构建PCR专题教学模式。该模式遵循引入、目标、前测、参与式学习、后测、总结6个环节逻辑,通过案例驱动、问题导向激发学习兴趣,以精准前测优化教学靶向,依托小组汇报、实验实操、互动讨论强化参与式学习,结合多元化评价保障教学效果。教学实践显示,该模式有效提升了214名学生的PCR理论知识掌握度(基本原理单选题正确率达94.4%)、实验操作规范性及综合素养(团队协作、创新思维);同时促进教师从经验型备课转向精准化设计,教研融合能力明显提升,获得学校督导A级(教学效果优秀)及学生评教97.79分的高度认可。研究表明,BOPPPS教学法与学习通平台的融合应用对生物技术制药课程PCR教学具有显著成效,后续需通过优化时间管理、增设案例研讨、强化个性化支持进一步完善。本文可为多学科交叉的综合性课程教学改革提供参考。 展开更多
关键词 BOPPPS教学法 生物技术制药 pcr 教学设计
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PCR反向点杂交法在产前地中海贫血基因诊断中的应用分析
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作者 李晓红 唐丽萍 《首都食品与医药》 2026年第2期78-80,共3页
目的分析PCR反向点杂交法在地中海贫血基因诊断中的应用效果。方法选取2024年1月-2024年12月到遂宁市中心医院门诊及住院进行地中海贫血基因检验的1851例孕妇作为研究对象,通过PCR反向点杂交法进行检测,分析地中海贫血基因诊断结果。结... 目的分析PCR反向点杂交法在地中海贫血基因诊断中的应用效果。方法选取2024年1月-2024年12月到遂宁市中心医院门诊及住院进行地中海贫血基因检验的1851例孕妇作为研究对象,通过PCR反向点杂交法进行检测,分析地中海贫血基因诊断结果。结果本次筛查共检出106例地贫基因突变体,地贫基因携带率为5.73%,其中α-地贫79例(74.53%),β-地贫27例(25.47%);α-地贫基因突变类型以-α3.7/αα(49.37%)与--SEA/αα(35.44%)为主要异常基因型;β-地贫基因突变类型以β41-42/βN(40.74%)、β17/βN(29.63%)和β654/βN(18.52%)为主要类型。结论遂宁地区α-地贫基因突变携带率高于β-地贫基因突变。α-地贫基因突变类型以-α3.7/αα与--SEA/αα最常见,β-地贫基因突变类型以β41-42/βN、β17/βN和β654/βN最常见。运用PCR反向点杂交法在产前地中海贫血基因诊断中有一定的诊断价值,对临床开展遗传咨询、基因分析以及产前诊断具有重要的参考意义。 展开更多
关键词 pcr反向点杂交法 产前 地中海贫血 基因诊断
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3种食源性致病菌SDS-PMA-mRT-qPCR检测方法建立及其在乳品中的应用
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作者 刘霈霖 匙辰鹏 +1 位作者 王雁伟 艾鹏飞 《食品工业科技》 北大核心 2026年第1期311-317,共7页
本研究利用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)联合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理样品后,采用多重实时荧光定量PCR(multiple real-time quantitative polymerase chain reaction,m RTqPCR)方法快速、准确检测... 本研究利用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)联合叠氮溴化丙锭(propidium monoazide,PMA)预处理样品后,采用多重实时荧光定量PCR(multiple real-time quantitative polymerase chain reaction,m RTqPCR)方法快速、准确检测乳制品中沙门氏菌、单增李斯特菌和产志贺毒素大肠埃希氏菌3种食源性致病菌。通过对沙门氏菌中的invA基因、单增李斯特菌中的hly基因和产志贺毒素大肠埃希氏菌中的stx基因的保守序列分别设计特异性引物和探针,建立mRT-qPCR反应体系,探讨PMA预处理消除由死菌造成的检测的假阳性结果,并对检测的特异性、检出限、稳定性以及模拟样品中的检测效果进行了研究。结果表明,PMA结合SDS的预处理能有效排除死菌对mRT-qPCR检测结果的干扰,最佳PMA浓度为20μmol/L;建立的mRT-qPCR方法特异性强,在18株非目标菌的干扰下仅对3种目标菌进行特异性扩增;灵敏度高,3种目标菌的检出限均为10^(2) CFU/mL;稳定性好,不同批次内和批次间的重复性检测的变异系数均小于1%;对不同污染乳品的检测结果与国家标准中的培养法一致,检测周期约7 h。本研究建立的SDS-PMA-mRT-qPCR方法可以实现对沙门氏菌、单增李斯特菌和产志贺毒素大肠埃希氏菌的快速检测,为乳品安全提供技术支持。 展开更多
关键词 多重实时荧光定量pcr(mRT-qpcr) 叠氮溴化丙锭 沙门氏菌 单增李斯特菌 产志贺毒素大肠埃希氏菌
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禽流感病毒流行现状及qRT-PCR检测技术研究进展
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作者 刘雨晴 李安琪 +1 位作者 陈雯轩 吴华伟 《黑龙江畜牧兽医》 北大核心 2026年第1期37-43,共7页
禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)因高变异性和跨物种传播能力,对全球公共卫生和家禽养殖业构成严重威胁。从病毒学特征来看,AIV主要通过血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因分型,其快速演化加剧了防控... 禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)因高变异性和跨物种传播能力,对全球公共卫生和家禽养殖业构成严重威胁。从病毒学特征来看,AIV主要通过血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因分型,其快速演化加剧了防控难度。流行病学研究表明,野生鸟类迁徙和活禽贸易活动是AIV传播的主要途径,不同亚型分布呈现显著的区域和时间差异。在检测技术方面,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,qRT-PCR)因灵敏度高和特异性强成为AIV检测的核心方法,但AIV亚型混合感染及变异株的出现对检测技术提出了更高的要求。本文系统总结了AIV的分型依据、分子特征、流行病学特性及检测技术的最新进展,以期为AIV的精准监测和防控提供理论参考。 展开更多
关键词 禽流感病毒 QRT-pcr 流行病学 高通量检测 防控策略
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A Reconfigurable Omnidirectional Triboelectric Whisker Sensor Array for Versatile Human–Machine–Environment Interaction
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作者 Weichen Wang Jiaqi Zhu +9 位作者 Hongfa Zhao Fei Yao Yuzhu Zhang Xiankuan Qian Mingrui Shu Zhigang Wu Minyi Xu Hongya Geng Wenbo Ding Juntian Qu 《Nano-Micro Letters》 2026年第3期121-140,共20页
Developing effective,versatile,and high-precision sensing interfaces remains a crucial challenge in human-machine-environment interaction applications.Despite progress in interaction-oriented sensing skins,limitations... Developing effective,versatile,and high-precision sensing interfaces remains a crucial challenge in human-machine-environment interaction applications.Despite progress in interaction-oriented sensing skins,limitations remain in unit-level reconfiguration,multiaxial force and motion sensing,and robust operation across dynamically changing or irregular surfaces.Herein,we develop a reconfigurable omnidirectional triboelectric whisker sensor array(RO-TWSA)comprising multiple sensing units that integrate a triboelectric whisker structure(TWS)with an untethered hydro-sealing vacuum sucker(UHSVS),enabling reversibly portable deployment and omnidirectional perception across diverse surfaces.Using a simple dual-triangular electrode layout paired with MXene/silicone nanocomposite dielectric layer,the sensor unit achieves precise omnidirectional force and motion sensing with a detection threshold as low as 0.024 N and an angular resolution of 5°,while the UHSVS provides reliable and reversible multi-surface anchoring for the sensor units by involving a newly designed hydrogel combining high mechanical robustness and superior water absorption.Extensive experiments demonstrate the effectiveness of RO-TWSA across various interactive scenarios,including teleoperation,tactile diagnostics,and robotic autonomous exploration.Overall,RO-TWSA presents a versatile and high-resolution tactile interface,offering new avenues for intelligent perception and interaction in complex real-world environments. 展开更多
关键词 Reconfigurable sensor array Interaction interface Tactile perception Omnidirectional sensor Reversible anchoring
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锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌耐药性及耐药突变基因的应用研究
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作者 朱秀兰 邓玉玲 +5 位作者 莫丽英 蒲荣 陈凤钻 韦学武 卢雪茹 张帅 《现代检验医学杂志》 2026年第1期111-115,131,共6页
目的分析锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性及耐药突变基因的临床应用价值。方法收集2021年1月~2024年5月广东医科大学附属东莞松山湖中心医院165例涂阳肺结核患者痰液标本,均行痰涂片镜检、MTB培养/鉴定、比例法药... 目的分析锁环探针荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性及耐药突变基因的临床应用价值。方法收集2021年1月~2024年5月广东医科大学附属东莞松山湖中心医院165例涂阳肺结核患者痰液标本,均行痰涂片镜检、MTB培养/鉴定、比例法药敏试验及基于锁环探针的荧光定量PCR技术检测利福平(RFP)、异烟肼(INH)耐药性及耐药基因突变位点。以比例法药敏试验结果为参考标准,评价锁环探针荧光定量PCR技术检测耐药MTB的效能。结果经分离培养证实151株为MTB,比例法药敏试验检出RFP耐药36株,INH耐药42株。锁环探针荧光定量PCR技术检出RFP、INH耐药,与比例法药敏试验检测结果差异无统计学意义(χ^(2)=0.018、0.067,均P>0.05)。以药敏试验为参考,锁环探针荧光定量PCR技术检测RFP耐药的敏感度、特异度、准确度分别为91.67%(33/36)、98.26%(113/115)、96.69%(146/151),检测一致性Kappa值为0.895;检测INH耐药的敏感度、特异度、准确度分别为83.33%(35/42)、95.41%(104/109)、92.05%(139/151),检测一致性Kappa值为0.867。锁环探针荧光定量PCR技术检出RFP耐药菌株rpoB基因突变中96.97%为单一位点突变,以531位点突变为主约占57.58%,其次为526位点突变约占27.27%;检出INH耐药菌株katG/INH A基因突变,以katG 315位点突变为主,其中80.56%为katG单一位点突变,16.67%为INH A单一位点突变。结论涂阳肺结核患者应用锁环探针荧光定量PCR技术行痰标本RFP、INH耐药筛查具有较高的诊断效能,可作为临床快速诊断耐药基因位点突变及筛查耐药结核病的补充手段,为临床诊疗提供依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 锁环探针 荧光定量pcr技术 利福平 异烟肼 耐药性 耐药基因突变
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3D printed high-temperature ceramic conformal array antenna:Design,analysis,manufacturing,and testing
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作者 Peng Li Ruibo Li +5 位作者 Zijiao Fan Jiujiu Han Guangda Ding Qunbiao Wang Wanye Xu Paolo Rocca 《Defence Technology(防务技术)》 2026年第1期340-353,共14页
In this study,the design,analysis,manufacturing,and testing of a 3D-printed conformal microstrip array antenna for high-temperature environments is presented.3D printing technology is used to fabricate a curved cerami... In this study,the design,analysis,manufacturing,and testing of a 3D-printed conformal microstrip array antenna for high-temperature environments is presented.3D printing technology is used to fabricate a curved ceramic substrate,and laser sintering and microdroplet spraying processes are used to add the conductive metal on the curved substrate.The problems of gain loss,bandwidth reduction,and frequency shift caused by high temperatures are addressed by using a proper antenna design,with parasitic patches,slots,and metal resonant cavities.The antenna prototype is characterized by the curved substrates and the conductive metals for the power dividers,the patch,and the ground plane;its performance is examined up to a temperature of 600℃in a muffle furnace and compared with the results from the numerical analysis.The results show that the antenna can effectively function at 600℃and even higher temperatures. 展开更多
关键词 Ceramic antenna Conformal array High-temperature environment 3D printing High gain and wide band
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沙生蜡菊qRT-PCR内参基因筛选与验证
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作者 刘欣欣 赖成霞 +1 位作者 谷玉风 葛风伟 《新疆师范大学学报(自然科学版)》 2026年第1期74-82,共9页
从沙生蜡菊转录组数据中选择5个管家基因(ACT1、ACT7、CYP、HIS、TUB)作为候选内参基因,使用qRT-PCR检测候选内参基因在沙生蜡菊不同组织和冻害胁迫下的表达水平,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder对其稳定性进行评估,筛... 从沙生蜡菊转录组数据中选择5个管家基因(ACT1、ACT7、CYP、HIS、TUB)作为候选内参基因,使用qRT-PCR检测候选内参基因在沙生蜡菊不同组织和冻害胁迫下的表达水平,使用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder对其稳定性进行评估,筛选合适内参基因。以沙生蜡菊HaWRKY基因作为靶标基因,验证内参基因稳定性。结果表明,HaCYP和HaHIS在沙生蜡菊组织中稳定表达;HaHIS在冻害胁迫后稳定表达;综上所述,HaHIS可作为沙生蜡菊内参基因。本研究获得沙生蜡菊合适内参基因,为沙生蜡菊基因表达分析提供了可靠的技术支持,同时为深入研究其响应冻害分子机制和次生代谢调控奠定了基础。 展开更多
关键词 沙生蜡菊 内参基因 QRT-pcr 基因表达分析
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高考评价体系和命题视角下PCR技术的教学框架构建
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作者 黄林 《求知导刊》 2026年第1期32-34,共3页
阐述了高考评价体系下PCR相关内容的命题特征与教学指向,针对高中生物学PCR技术教学中原理抽象、实验逻辑混乱等问题,立足高考评价体系“四层四翼”要求,在进行命题研究的基础上构建了“具象化理解—方法化训练—情境化迁移”三层递进... 阐述了高考评价体系下PCR相关内容的命题特征与教学指向,针对高中生物学PCR技术教学中原理抽象、实验逻辑混乱等问题,立足高考评价体系“四层四翼”要求,在进行命题研究的基础上构建了“具象化理解—方法化训练—情境化迁移”三层递进式教学框架,旨在为落实学科核心素养培养要求提供创新方法,助力教考衔接。 展开更多
关键词 pcr技术 高考评价体系 递进式教学 教考衔接 命题研究
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基于PCRarray技术探讨丹参酮Ⅱa对高脂血症大鼠肝脏脂蛋白及胆固醇信号通路相关基因mRNA表达的影响 被引量:19
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作者 张妮 贾连群 +2 位作者 宋囡 曹媛 杨关林 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期570-574,共5页
目的:采用PCR array技术初步探讨丹参酮Ⅱa对高脂血症大鼠肝脏脂蛋白及胆固醇信号通路相关基因mRNA表达的影响。方法:24只SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、丹参酮组。高脂血症组、丹参酮组予高脂饲料喂饲12周后,丹参酮组予丹参酮... 目的:采用PCR array技术初步探讨丹参酮Ⅱa对高脂血症大鼠肝脏脂蛋白及胆固醇信号通路相关基因mRNA表达的影响。方法:24只SD大鼠随机分为空白对照组、高脂血症组、丹参酮组。高脂血症组、丹参酮组予高脂饲料喂饲12周后,丹参酮组予丹参酮Ⅱa磺酸钠腹腔注射12周。检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量,观察肝脏形态变化及肝脏脂质沉积,PCR array检测大鼠肝脏脂蛋白及胆固醇信号通路相关基因mRNA表达。结果:高脂血症组TC、TG、LDL-C升高(P<0.01),HDL-C降低(P<0.01),肝细胞脂质沉积,胞浆内见脂肪空泡;丹参酮组肝脏脂滴减少。PCR array显示丹参酮组Abca1、Apoa1、Cyp7a1、Cyp11a1、Hmgcr、Insig2、Lcat、Ldlr、Lep、Pcsk9 mRNA发生差异性变化。结论:丹参酮Ⅱa可能通过调控脂蛋白及胆固醇信号通路改善高脂血症大鼠肝脏的变化,其可能机制为Abca1、Cyp7a1、Hmgcr、Insig2、Lcat、Ldlr、Lep、Pcsk9基因与SREBP之间的相互调控作用。 展开更多
关键词 丹参酮Ⅱa 高脂血症 脂质代谢 pcr array技术 肝脏
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