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软脉胶囊含药血清对PCl2细胞谷氨酸损伤的保护作用
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作者 王四平 徐华洲 +3 位作者 王鑫国 郝宪恩 王菊素 李士懋 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1215-1217,共3页
关键词 软脉胶囊 pcl2细胞 血管性痴呆 血清药理学 谷氨酸损伤
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过表达PCL2基因促进人胶质瘤U87细胞增殖的作用研究
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作者 王菲 武艳玮 +2 位作者 丁慧 高永英 曹相玫 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期195-200,共6页
目的:构建过表达多梳状蛋白2(PCL2)基因的重组腺病毒,观察其促进人胶质瘤细胞系U87增殖的作用。方法:构建PCL2重组腺病毒载体Ad5-E1-CMV-hPCL2-E3-CMV-eGFP,利用HEK293细胞包装制备腺病毒,感染U87细胞,应用倒置荧光显微镜观察感染效率;... 目的:构建过表达多梳状蛋白2(PCL2)基因的重组腺病毒,观察其促进人胶质瘤细胞系U87增殖的作用。方法:构建PCL2重组腺病毒载体Ad5-E1-CMV-hPCL2-E3-CMV-eGFP,利用HEK293细胞包装制备腺病毒,感染U87细胞,应用倒置荧光显微镜观察感染效率;用Western Blot检测U87细胞内PCL2基因的蛋白表达水平; CCK8和集落形成实验检测细胞的增殖能力。结果:成功构建过表达PCL2基因的重组腺病毒,当MOI50∶1时,感染效率最高。Western Blot结果显示过表达PCL2基因后,PCL2蛋白表达水平较空白对照组和空载体组明显升高。CCK8和集落形成实验提示PCL2基因过表达促进U87细胞增殖。结论:PCL2基因过表达能够促进人胶质瘤U87细胞增殖。 展开更多
关键词 pcl2 U87细胞 胶质瘤 增殖
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PCL2 regulates p53 stability and functions as a tumor suppressor in breast cancer 被引量:4
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作者 Yiran Liang Yang Yang +6 位作者 Renbo Guo Shuang Gao Xinghong Guo Danyang Li Meng Wang Haruhiko Koseki Xiangzhi Li 《Science Bulletin》 SCIE EI CSCD 2018年第10期629-639,共11页
Polycomblike2(PCL2) is a well-known component of polycomb repressive complex 2(PRC2) and plays important roles in H3 K27 methylation and homeotic gene silencing.However,the involvement of PCL2 in breast cancer develop... Polycomblike2(PCL2) is a well-known component of polycomb repressive complex 2(PRC2) and plays important roles in H3 K27 methylation and homeotic gene silencing.However,the involvement of PCL2 in breast cancer development remains unclear.Here,we established PCL2 as a tumor suppressor gene in breast cancer.Expression level of PCL2 was significantly downregulated in breast cancer tissue samples observed at different TNM stages.Ectopic expression of PCL2 could significantly inhibit cell proliferation and promoted apoptosis.PCL2 also remarkably elevated levels of p53 and its targets by increasing p53 stability.Mechanistically,PCL2 protected p53 proteins from MDM2-mediated ubiquitination and degradation by sequestering MDM2 into the nucleolus.Overexpression of PCL2 also suppressed migration and invasion by inhibiting epithelial-mesenchymal transition.PCL2 expression was correlated with Ecadherin expression and was inversely correlated with vimentin expression.Furthermore,PCL2 knockdown could attenuate anti-tumor effect of MLN4924.Taken together,our findings indicated that PCL2 played a tumor suppressor role in development and progression of breast cancer and may be a prognostic and predictive marker for breast cancer. 展开更多
关键词 Polycomb repressive complexes pcl2 p53 MDM2 Breast cancer
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面向浸没沉淀3D打印的聚己内酯/二甲基亚砜/水体系三元相图构建
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作者 高昂 尹存宏 +3 位作者 张俊飞 周欢 郭蕊 刘西霞 《高分子通报》 北大核心 2025年第5期790-800,共11页
浸没沉淀3D打印技术能够实现复杂多孔结构的成形,广泛应用于生物医学领域,特别是在组织工程支架的制造中。该技术尤其适用于人体植入性聚己内酯(PCL)支架的制备。制备多孔PCL结构的关键在于构建三元相图,通过分析浸没沉淀3D打印过程中... 浸没沉淀3D打印技术能够实现复杂多孔结构的成形,广泛应用于生物医学领域,特别是在组织工程支架的制造中。该技术尤其适用于人体植入性聚己内酯(PCL)支架的制备。制备多孔PCL结构的关键在于构建三元相图,通过分析浸没沉淀3D打印过程中的相分离成形机理,指导多孔结构形态的调控。但是,对于聚己内酯/二甲基亚砜/水(PCL/DMSO/H2O)三元体系的相分离成形机理的研究较少。因此,本研究旨在通过理论计算及实验测定,构建该体系的三元相图。基于Flory-Huggins理论,结合二元相互作用参数计算并绘制了双节线和旋节线。通过采用浊点滴定法获得浊点数据后绘制双节线,并与上述理论计算结果进行对比,验证了三元相图的正确性。基于构建的三元相图研究了浸没沉淀3D打印过程中的相分离成形机理,分析了不同PCL浓度对打印细丝微观形态的影响。结果表明,理论计算的双节线与实验测定的双节线吻合较好,随着PCL浓度的升高,细丝横截面微观形态变得愈加致密,孔隙率越来越小。 展开更多
关键词 相分离 三元相图 PCL/DMSO/H_(2)O体系 多孔结构
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根皮苷对过氧化氢诱导损伤PC12细胞的保护作用 被引量:5
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作者 高健美 雷鸣 +1 位作者 刘双 龚其海 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期886-889,共4页
目的探讨根皮苷对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法以H_2O_2损伤PC12细胞建立氧化损伤模型,随机分为空白对照组、模型组(400μmol·L^(-1) H_2O_2)、阳性对照(20μmol·L^(-1)N-乙酰半胱氨酸)组和不同浓... 目的探讨根皮苷对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法以H_2O_2损伤PC12细胞建立氧化损伤模型,随机分为空白对照组、模型组(400μmol·L^(-1) H_2O_2)、阳性对照(20μmol·L^(-1)N-乙酰半胱氨酸)组和不同浓度根皮苷(16、32、64μmol·L^(-1))预处理组。采用MTT法检测细胞活力,显微镜观察细胞形态,ELISA检测细胞活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,Western blot检测NF-E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白表达。结果模型组细胞活力较空白对照组显著降低,ROS和MDA含量增加,SOD活力下降,Nrf2和HO-1蛋白表达下降(均P<0.05)。根皮苷低、中、高浓度(16、32、64μmol·L^(-1))组较模型组细胞存活率均显著提高,ROS和MDA含量降低,SOD活力升高,Nrf2和HO-1蛋白表达上调(均P<0.05)。结论根皮苷能够抑制H_2O_2对PC12细胞的氧化损伤,其保护作用可能与抑制氧化应激引起的细胞死亡并调控Nrf2信号通路有关。 展开更多
关键词 根皮苷 pcl2细胞 过氧化氢 NF-E2相关因子2
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麝香酮对氰化钠加缺糖致PC12细胞缺血损伤的保护作用 被引量:7
6
作者 孙蓉 张作平 +2 位作者 任海勇 尹建伟 陈云 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期8-10,共3页
目的:研究麝香酮对PCl2细胞缺血损伤的影响。方法:在离体培养的PCl2细胞,用NaCN加缺糖造成拟缺血损伤.模型,通过细胞形态学观察、MTT微量比色、培养介质LDH活力测定,研究了麝香酮对该模型的保护作用。结果:10^-7~5 10^-5mol/L... 目的:研究麝香酮对PCl2细胞缺血损伤的影响。方法:在离体培养的PCl2细胞,用NaCN加缺糖造成拟缺血损伤.模型,通过细胞形态学观察、MTT微量比色、培养介质LDH活力测定,研究了麝香酮对该模型的保护作用。结果:10^-7~5 10^-5mol/L范围内,麝香酮呈浓度依赖性地降低NaCN加缺糖造成拟缺血损伤模型培养介质内LDH的释放,其IC50为:43.33μmol/L。在10^-7~5 10^-5mol/L范围内,麝香酮呈浓度依赖性地增加NaCN加缺糖造成拟缺血损伤模型培养介质的MTT比色值,其IC50为30.62μmol/L。结论:麝香酮对PCl2细胞缺血损伤具有保护作用。 展开更多
关键词 麝香酮 pcl2细胞 NaCN加缺糖拟缺血模型
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氯胺酮对谷氨酸所致神经性PC12细胞株损伤的保护作用 被引量:2
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作者 王莉 江伟 杭燕南 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第11期894-896,900,共4页
目的研究氯胺酮对谷氨酸 (Glu)所致神经性PC12细胞株损伤的保护作用。方法PC12细胞株 (2× 10 3 /mL)在含10nmol/L 7S NGF的培养基中孵育 6d后 ,分化为神经性PC12细胞株。分别加入Glu、氯胺酮、Glu +氯胺酮、D AP5 +Glu +氯胺酮、CN... 目的研究氯胺酮对谷氨酸 (Glu)所致神经性PC12细胞株损伤的保护作用。方法PC12细胞株 (2× 10 3 /mL)在含10nmol/L 7S NGF的培养基中孵育 6d后 ,分化为神经性PC12细胞株。分别加入Glu、氯胺酮、Glu +氯胺酮、D AP5 +Glu +氯胺酮、CNQX +Glu并共同孵育 18h ,以MTT法测细胞活力。结果 30mmol/LGlu与神经性PC12细胞株共同孵育 18h ,细胞活力降至5 %以下。氯胺酮与Glu同时加入 ,对细胞活力有明显保护作用 ,且呈剂量依赖性。 0 .1mmol/L氯胺酮使细胞活力升至 (30 .94±11.75 ) % ;1.0mmol/L氯胺酮组细胞活力为 (95 .74± 2 1.4 9) % ;非NMDA受体拮抗剂 2 0 μmol/LCNQX细胞活力为 (19.31± 5 .83) % ,与Glu对照组比较均有显著差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1)。结论氯胺酮对Glu损伤的神经性PC12细胞具有保护作用 。 展开更多
关键词 氯胺酮 神经性pcl2细胞株 NMDA 谷氨酸 神经保护
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刺五加皂甙诱导PC12细胞对缺血的耐受与缺氧诱导因子-1α的表达 被引量:1
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作者 陈建 朱俐 潘永进 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第24期1727-1729,共3页
目的研究刺五加皂甙(ASS)预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。方法采用氧葡萄糖剥夺(OGD)方法在PC12细胞上建立缺血模型。用MTT比色分析法观察ASS预处理是否对缺血的PC12细胞有保护作用及其保护作用能否... 目的研究刺五加皂甙(ASS)预处理诱导PC12细胞对缺血的耐受及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达。方法采用氧葡萄糖剥夺(OGD)方法在PC12细胞上建立缺血模型。用MTT比色分析法观察ASS预处理是否对缺血的PC12细胞有保护作用及其保护作用能否被PI3K抑制剂LY294002所阻断。用Western-blot法检测PC12细胞予ASS预处理后磷酸化糖原合成激酶-3β(p-GSK-3β)和HIF-1α的表达及其表达诱导作用是否被LY294002所抑制。结果MTT结果显示,缺血9 h处理后,PC12细胞活力明显降低(P<0.01);ASS预处理对细胞具有保护作用,细胞活力有明显增加(F=552.6 P<0.01);ASS保护作用可被LY294002处理部分阻断,细胞活力有部分降低(P<0.01)。与正常对照组比,ASS预处理后p-GSK-3β和HIF-1α蛋白的表达均明显增加。ASS表达诱导作用可被LY294002处理所抑制,p-GSK-3β表达明显减少,HIF-1α表达部分减少。结论ASS预处理可诱导PC12细胞对缺血的耐受;ASS预处理诱导PC12细胞表达的HIF-1α蛋白可能与PI3K/Akt/GSK-3信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 刺五加皂甙 pcl2细胞 缺血耐受 缺氧诱导
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蛋白质组学技术鉴定帕金森病模型中的3种新蛋白质 被引量:4
9
作者 张艳梅 马飞煜 +3 位作者 邬伟 王秋艳 李兰根 胡林森 《国际神经病学神经外科学杂志》 2008年第4期291-294,共4页
目的利用蛋白质组学技术对MPP+诱导的PC12细胞帕金森病(PD)模型进行研究,以期发现PD发病机制中的新蛋白。方法建立MPP+诱导的PC12细胞PD模型并提取细胞总蛋白,荧光差异凝胶电泳(DIGE)进行蛋白样品标记与分离,应用DeCyder软件分析蛋白质... 目的利用蛋白质组学技术对MPP+诱导的PC12细胞帕金森病(PD)模型进行研究,以期发现PD发病机制中的新蛋白。方法建立MPP+诱导的PC12细胞PD模型并提取细胞总蛋白,荧光差异凝胶电泳(DIGE)进行蛋白样品标记与分离,应用DeCyder软件分析蛋白质差异表达信息,运用MALDI-TOF质谱鉴定差异蛋白质。结果质谱分析和数据库检索鉴定了3种可能同PD发病相关但在有关PD研究文献中尚未见报道的新蛋白质,他们分别是与线粒体功能相关的蛋白MPPs,具有分子伴侣活性的蛋白NAC和与免疫炎症相关的蛋白gC1qBP。结论这些新发现蛋白可能与PD的发病机制密切相关。 展开更多
关键词 pcl2细胞 MPP^+ 蛋白质组学 荧光差异凝胶电泳
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类毒素-A激活PC12细胞时胞内即刻早期基因的表达 被引量:1
10
作者 张志红 屈卫东 朱惠刚 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-43,共4页
目的探讨即刻早期基因在类毒素A激活PC12细胞烟碱受体过程中的调控作用。方法运用逆转录聚合酶链反应方法测定类毒素A激活PC12细胞烟碱受体时胞内cfos,cjun,NGFIA和NGFIB四个即刻早期基因的mRNA基因表达情况。结果当10-9、10-8、10-7mol... 目的探讨即刻早期基因在类毒素A激活PC12细胞烟碱受体过程中的调控作用。方法运用逆转录聚合酶链反应方法测定类毒素A激活PC12细胞烟碱受体时胞内cfos,cjun,NGFIA和NGFIB四个即刻早期基因的mRNA基因表达情况。结果当10-9、10-8、10-7molL类毒素A激活PC12细胞烟碱受体1小时,或10-7molL类毒素A激活PC12细胞30、60、120分钟时,细胞内cfos和NGFIAmRNA基因表达均显著高于对照组(P<005),是对照组的2~6倍,且cfos基因表达呈剂量反应和时间效应关系。而此间cjun和NGFIB基因表达与对照比较没有明显变化。结论cfos和NGFIA可能参与调控类毒素A激活PC12细胞烟碱受体的作用。 展开更多
关键词 类毒素-A pcl2细胞 即刻早期基因 烟碱乙酰胆碱受体
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氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca^(2+)浓度波动方式的影响
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作者 金小高 罗爱林 +2 位作者 张广雄 王金韬 李亚文 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 2007年第10期839-841,共3页
目的研究氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度波动方式的影响。方法使用含25ng/LNGF的DMED培养基在多聚赖氨酸包被的培养皿中培养PC12细胞;与终浓度10μmol/L的Ca2+指示剂Fluo-3AMester共孵育30min洗涤后,加入终浓度50μmol/L荷... 目的研究氯胺酮对荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度波动方式的影响。方法使用含25ng/LNGF的DMED培养基在多聚赖氨酸包被的培养皿中培养PC12细胞;与终浓度10μmol/L的Ca2+指示剂Fluo-3AMester共孵育30min洗涤后,加入终浓度50μmol/L荷包牡丹碱;在激光共聚焦显微镜选定多个细胞分别测定荧光强度的变化;随后加入氯胺酮,记录细胞荧光强度的改变。在试验结束前依次加入TritonX-100和EGTA分别记录单个细胞最大荧光强度(Fmax)和最小荧光强度(Fmin),以计算细胞内Ca2+的相对强度。结果氯胺酮不改变荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度波动的基线,但抑制细胞内Ca2+浓度升高的幅度(P<0.05),缩短相邻波峰间的时间间隙(P<0.05)。结论氯胺酮不仅改变荷包牡丹碱诱导PC12细胞内Ca2+浓度升高的幅度,而且改变Ca2+浓度波动的周期。 展开更多
关键词 氯胺酮 pcl2细胞 钙离子浓度
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右美托咪定对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制 被引量:2
12
作者 张卫东 张浩 +4 位作者 汪海 张娜 杜春彦 余军 冯泽国 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期150-156,共7页
目的研究右美托咪定(Dex)对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法应用高浓度谷氨酸处理PC12细胞以建立细胞缺氧损伤模型。应用MTT法测定细胞存活率,采用试剂盒分别测定细胞培养液中乳酸脱氢酶释放量,细胞丙二醛含量和超氧化物... 目的研究右美托咪定(Dex)对谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用及机制。方法应用高浓度谷氨酸处理PC12细胞以建立细胞缺氧损伤模型。应用MTT法测定细胞存活率,采用试剂盒分别测定细胞培养液中乳酸脱氢酶释放量,细胞丙二醛含量和超氧化物歧化酶活力,DCFH-DA染色流式细胞仪检测细胞内活性氧水平,Fluo-8染色流式细胞仪检测细胞内钙离子含量,JC-1染色流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位。结果在0.01~100μmol/L浓度范围内,Dex浓度依赖性地拮抗谷氨酸所致PC12细胞损伤,至100μmol/L时,细胞存活率达到正常组的(86.6±2.2)%,显著高于模型组(P<0.01),乳酸脱氢酶释放量为正常组的1.4±0.1倍,显著低于模型组(P<0.01)。1μmol/L Dex预处理谷氨酸损伤的PC12细胞,与模型组相比,能够显著降低丙二醛含量(P<0.01),提高超氧化物歧化酶活力(P<0.01),抑制胞内活性氧过度生成(P<0.01),降低细胞内Ca2+浓度(P<0.01),稳定细胞线粒体膜电位(P<0.01)。结论 Dex对谷氨酸所致PC12细胞损伤具有保护作用,其机制可能与Dex抗氧化和抑制细胞内钙超载,保护线粒体功能相关。 展开更多
关键词 右美托咪定 PC12细胞 谷氨酸
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清心开窍方含药脑脊液对连二亚硫酸钠所致PC12细胞损伤的保护机制研究 被引量:2
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作者 胡海燕 崔志慧 +2 位作者 陈翔 王文花 张晓艳 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1314-1317,共4页
目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对连二亚硫酸钠(sodium dithionite,Na2S2O4)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g.kg-1),每12 h ig 1次,共7次,制备清心开窍方... 目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对连二亚硫酸钠(sodium dithionite,Na2S2O4)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g.kg-1),每12 h ig 1次,共7次,制备清心开窍方含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度8 mmol.L-1的Na2S2O4共培养,造成神经细胞损伤模型。以尼莫地平(1×107mol.L-1)为阳性对照组,MTT法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响,RT-PCR方法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3 mRNA表达水平。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax,Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方对Na2S2O4损伤的PC12细胞有明显的保护作用。 展开更多
关键词 清心开窍方 PC12细胞 连二亚硫酸钠 保护作用
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BmNPV-ZJ iap1基因的克隆、序列分析及其对哺乳动物细胞NF-κB的调节作用研究(英文)
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作者 吴金美 Robert WLim +2 位作者 吴祥甫 Grace Y Sun 吕鸿声 《蚕业科学》 CAS CSCD 2003年第4期359-364,共6页
利用PCR法克隆得到家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPV ZJ)的iap 1基因。序列同源分析表明 :BmNPV ZJ的iap 1全长为 85 8bp ,与BmNPV T3株的碱基同源性为 96 % ,与BmNPV T3株相比少了一段编码 7个氨基酸的区域 ,该缺失区域的两侧有着独特... 利用PCR法克隆得到家蚕核型多角体病毒镇江株 (BmNPV ZJ)的iap 1基因。序列同源分析表明 :BmNPV ZJ的iap 1全长为 85 8bp ,与BmNPV T3株的碱基同源性为 96 % ,与BmNPV T3株相比少了一段编码 7个氨基酸的区域 ,该缺失区域的两侧有着独特的结构 :缺失区的 5′侧为连续编码 7个天冬氨酸的序列 ;缺失区的 3′侧为连续编码3个天冬氨酸的序列。NCBI的DART(DomainArchitectureRetrievalTool)功能域搜索表明 ;BmNPV ZJ的iap1含有 2个杆状病毒BIR功能域 ,但不含RING区域。BmNPV的iap是否具有抗凋亡作用迄今尚未见报道。利用以NF κB为探针的凝胶阻滞分析表明 ,BmNPV ZJ的iap1转染鼠的pc12细胞 ,可逆转肿瘤坏死因子TNFα处理pc12细胞引起的核因子 κB(NF κB)的激活。BmNPV ZJ的iap1对NF κB的作用途径及作用方式 。 展开更多
关键词 BmNPV—ZJiap基因 克隆 序列分析 哺乳动物细胞 NF-ΚB 调节作用 PCR 家蚕 核型多角体病毒镇江株 碱基同源性 凝胶阻滞分析 pcl2细胞 凋亡
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不同浓度的氯化钴对PC12分化细胞增殖与凋亡的影响 被引量:2
15
作者 范蒙蒙 王晓莉 +3 位作者 李强 王芳 刘长云 杨培培 《潍坊医学院学报》 2014年第3期186-188,228,共4页
目的观察不同浓度的氧化钴(CoCl_2)对肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)分化细胞增殖与凋亡的影响,探讨合理的体外化学模拟缺氧模式。方法应用不同浓度CoCl_2作用于PC12分化细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导细胞凋亡的实验模型;将PC12细胞分为空... 目的观察不同浓度的氧化钴(CoCl_2)对肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)分化细胞增殖与凋亡的影响,探讨合理的体外化学模拟缺氧模式。方法应用不同浓度CoCl_2作用于PC12分化细胞不同时间,建立化学性缺氧诱导细胞凋亡的实验模型;将PC12细胞分为空白对照组、不同浓度不同时间的CoCl_2处理组;应用细胞计数、MTT、Hoechst33342/PI双染色法检测不同浓度CoCl_2对PC12分化细胞的增殖与凋亡的影响。结果①CoCl_2(≤200μmol/L)在6h内使PC12细胞存活率轻度增加,12h后开始出现细胞存活率降低,并呈现比较明显的剂量和时间依赖关系;CoCl2(≥300μmol/L)诱导PC12分化细胞6h即开始出现存活率降低(P<0.01);②150μmol/L CoCl_2诱导PC12分化细胞24h后细胞数量明显减少(P<0.01);③通过荧光显微镜可见150μmol/L CoCl_2诱导PC12分化细胞24h内受损细胞多为早期凋亡,48h后开始出现晚期凋亡和坏死细胞增多。结论 CoCl_2对PC12分化细胞增殖与凋亡的影响呈时间和浓度依赖性,进行化学模拟缺氧要考虑CoCl_2的作用浓度和作用时间。 展开更多
关键词 氯化钴 PC12分化细胞 细胞凋亡
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PSI诱导PC12细胞胞浆内胞核旁嗜酸性包涵体的形成及其演变过程
16
作者 胡轶虹 常明 +4 位作者 张瑜 王秋艳 张颖 韩威 胡林森 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期20-22,I0002,共4页
目的研究蛋白酶体抑制剂PSI诱导PC12细胞胞浆内嗜酸性包涵体的形成及演变过程。方法取进入对数生长期的PC12细胞。孵育24h后,加入PSI(终浓度10μmol/L),分别于给药后3、6、9、12、24、48、72、96、120h取出细胞并甩片固定,行HE染色及α-... 目的研究蛋白酶体抑制剂PSI诱导PC12细胞胞浆内嗜酸性包涵体的形成及演变过程。方法取进入对数生长期的PC12细胞。孵育24h后,加入PSI(终浓度10μmol/L),分别于给药后3、6、9、12、24、48、72、96、120h取出细胞并甩片固定,行HE染色及α-synuclein免疫组织化学染色,光镜下观察形态变化。结果HE染色:PSI作用6h后,PC12细胞胞浆呈现嗜伊红染色,胞体变大;至12h可见明显的嗜伊红聚集的核心;24h后,几乎所有的细胞都形成了核旁嗜伊红球状包涵体;其后,胞核及胞浆逐渐缺失,于120h仅余聚集的嗜伊红球状包涵体。免疫组化染色:PSI作用3h后,可见到散在于整个胞浆的α-synuclein免疫反应阳性颗粒;6h后,细胞明显增大,胞浆中颗粒增多;12h后,颗粒聚集更加明显,形成明显的聚集中心;24h后,几乎所有的细胞都形成了α-synuclein免疫反应阳性的球状包涵体;随时间延长,胞核及胞浆逐渐缺失,至120h仅见固缩的α-synuclein免疫反应阳性球状包涵体。结论PSI作用于PC12细胞,早期出现散在于胞浆中的嗜酸性和α-synuclein免疫反应阳性的点状颗粒,然后这些颗粒进一步在核旁聚集,形成聚集中心,最后形成固缩的包涵体,细胞外包涵体可独立存在。这种包涵体形成和演变过程与以人类PD为代表的神经变性疾病中的包涵体非常相似,可以作为研究包涵体相关问题的有力工具。 展开更多
关键词 蛋白酶体 包涵体 嗜伊红 α—synuclein PC12细胞 帕金森病 神经变性
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苯甲酰化褐藻多糖对PC12细胞存活率的影响
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作者 王维维 贾凤菊 +2 位作者 宋宁 谢俊霞 姜宏 《青岛大学医学院学报》 CAS 2013年第4期307-308,共2页
目的通过观察苯甲酰化褐藻多糖(PHF)对PC12细胞存活率的影响,探讨PHF对神经细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法,检测不同浓度PHF作用下PC12细胞的存活率。结果低剂量的PHF(0.001、0.010g/L)对PC12细胞的存活率没有影响;较高... 目的通过观察苯甲酰化褐藻多糖(PHF)对PC12细胞存活率的影响,探讨PHF对神经细胞的作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)方法,检测不同浓度PHF作用下PC12细胞的存活率。结果低剂量的PHF(0.001、0.010g/L)对PC12细胞的存活率没有影响;较高剂量的PHF(0.100、1.000、10.000g/L)可以显著降低PC12细胞的存活率,10.000g/L PHF处理组细胞的存活率下降最明显。结论低剂量的PHF不影响PC12细胞的存活率,而较高浓度的PHF能显著降低PC12细胞的存活率,产生剂量依赖性的毒性作用。 展开更多
关键词 岩藻糖 PC12细胞 存活率
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二苯乙烯苷通过激活Nrf2减轻MPP^+诱导的PC12细胞凋亡 被引量:4
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作者 王松海 陈建宗 陈捷 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期948-953,共6页
目的研究2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside,TSG)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methy-4-phenylpyridinium;MPP+)诱导PC12细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 4-甲基偶... 目的研究2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4'-tetrahydroxystibene-2-O-β-D-glucoside,TSG)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(1-methy-4-phenylpyridinium;MPP+)诱导PC12细胞凋亡的影响及其可能机制。方法 4-甲基偶氮唑蓝(MTT)检测PC12细胞活性;Hochest 33258染色观察细胞凋亡的变化;DCFH-DA/DAF-FM DA检测ROS/NO表达情况;Westernblotting检测Nrf2、Keap1、SOD1、SOD2、CAT蛋白的表达情况。结果 MPP+(500μmol·L^(-1))作用于PC12细胞24 h后,与正常组比较,细胞存活率降低至(51.3±2.2)%(P<0.01);TSG(10,50μmol·L^(-1))预处理24 h后,细胞存活率增加至(60.1±1.5)%,(74.2±2.1)%,(82.1±1.5)%(P<0.05);细胞核固缩明显减少,且具有剂量依赖性关系。此外,MPP+处理后使PC12细胞中ROS/NO升高,Nrf2、SOD1、SOD2、CAT蛋白表达减少,使keap1表达增多,而TSG预处理可以明显改善这些变化。结论 TSG对MPP+诱导的PC12细胞凋亡具有浓度依赖性的抑制作用,其作用机制可能通过激活Nrf2/Keap1通路减轻细胞内活性氧的聚集有关。 展开更多
关键词 二苯乙烯苷 凋亡 NRF2 PC12细胞
原文传递
小干扰RNA干扰PC12细胞内源性Kir6.2基因后对鱼藤酮诱导的细胞损伤及信号通路研究 被引量:1
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作者 刘小坤 王刚 陈旭 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2017年第10期1085-1089,共5页
目的通过小干扰RNA(siRNA)干扰内源性Kir6.2基因表达来研究Kir6.2亚基缺失对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的作用及可能的信号通路。方法以PC12细胞为研究对象,采用RT-PCR检测5组细胞(正常对照组,阴性对照组,siRNA干扰1组,siRNA干扰2组... 目的通过小干扰RNA(siRNA)干扰内源性Kir6.2基因表达来研究Kir6.2亚基缺失对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型的作用及可能的信号通路。方法以PC12细胞为研究对象,采用RT-PCR检测5组细胞(正常对照组,阴性对照组,siRNA干扰1组,siRNA干扰2组和siRNA干扰3组)Kir6.2干扰情况,Western blot方法检测2组细胞(阴性对照组,siRNA干扰1组)Kir6.2干扰情况,水溶性四氮唑检测4组细胞(阴性无药组、干扰组无药组、阴性加药组、干扰加药组)在鱼藤酮处理24h后的细胞活力;Western blot方法检测4组细胞(阴性对照组、干扰组无药组、鱼藤酮组、PKC抑制剂组)鱼藤酮处理前后细胞内PKC及磷酸化PKC表达变化。结果 RT-PCR结果显示,siRNA干扰1组,siRNA干扰2组干扰成功。Western blot结果显示,siRNA干扰1组内源性Kir6.2表达较阴性对照组明显降低(0.55±0.07 vs 0.89±0.09,P<0.05)。四氮唑结果显示,Kir6.2干扰组较阴性对照组PC12细胞活力显著减低(P<0.05)。Western blot结果提示PKC抑制剂组PKC和磷酸化PKC水平较阴性对照组、siRNA干扰组、鱼藤酮组明显降低(P<0.05)。结论内源性Kir6.2能保护PC12细胞抵抗鱼藤酮的毒性作用,Kir6.2可能通过激活磷酸化PKC在调节鱼藤酮诱导的PC12细胞活力中发挥重要作用。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 PC12细胞 帕金森病 鱼藤酮 基因表达
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Theoretical Study on the Reaction of PCl_3/H_2 on Silicon Substrate Surface 被引量:1
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作者 许长志 王艳丽 +1 位作者 马琳 孙仁安 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2009年第3期315-320,共6页
The reaction mechanism of PCl3/H2 on silicon substrate surface (simulated by Si4 cluster) was investigated with Density Functional Theory (DFT) at the B3LYP/6-311G^** level. On silicon substrate, PCl3 firstly un... The reaction mechanism of PCl3/H2 on silicon substrate surface (simulated by Si4 cluster) was investigated with Density Functional Theory (DFT) at the B3LYP/6-311G^** level. On silicon substrate, PCl3 firstly undergoes dissociative adsorption, and then the adsorption product reacts with H2 via a four-step multi-channel mode to give the final product PSi4 cluster. The geometries at each stationary point were fully optimized. The possible transition states were determined by vibrational mode analysis and IRC verification. And finally, the main reaction channel was given. 展开更多
关键词 DFT PCl3/H2 silicon substrate reaction mechanism theoretical study
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