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PCDH10基因促进多发性骨髓瘤细胞凋亡及机制研究 被引量:5
1
作者 李珍 陈建斌 +3 位作者 彭曦 谭栩 杨泽松 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期437-441,共5页
目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因诱导多发性骨髓瘤KM3细胞凋亡的作用及相关机制。方法采用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1(+)PCDH10以及pcDNA3.1(+)空质粒稳定转染入人骨髓瘤KM3细胞,以未转染组和转染pcDNA3.1(+)空质粒组作为对照,通... 目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因诱导多发性骨髓瘤KM3细胞凋亡的作用及相关机制。方法采用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1(+)PCDH10以及pcDNA3.1(+)空质粒稳定转染入人骨髓瘤KM3细胞,以未转染组和转染pcDNA3.1(+)空质粒组作为对照,通过RT-PCR和Western blot检测PCDH10基因和蛋白的表达,应用MTT法检测PCDH10转染后细胞增殖能力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;应用透射电镜观察细胞凋亡超微结构;应用Western blot检测凋亡相关蛋白表达水平。结果 PCDH10转染KM3细胞后,PCDH10基因和蛋白表达水平均明显升高。MTT结果显示PCDH10转染后细胞增殖明显受到抑制(P<0.05);流式细胞仪结果显示转染PCDH10基因的KM3细胞凋亡率明显增高(P<0.05);透射电镜下观察,PCDH10转染组细胞可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,对照组未见明显异常;Western blot结果显示PCDH10能降低Bcl-2的表达,促进P53、Fas的表达(P<0.05)。结论 PCDH10基因有促进多发性骨髓瘤细胞KM3凋亡作用。 展开更多
关键词 pcdh10 多发性骨髓瘤 细胞凋亡
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PCDH10基因在多发性骨髓瘤细胞中的作用 被引量:5
2
作者 彭曦 陈建斌 +3 位作者 李珍 袁海汀 谭栩 杨泽松 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第20期2093-2097,共5页
目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因对多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法采用脂质体将pcDNA3.1(+)PCDH10及pcDNA3.1(+)质粒稳定转染入骨髓瘤RPMI-8226细胞,分别为PCDH10转染组、空质粒转染组... 目的探讨PCDH10(protocadherin 10)基因对多发性骨髓瘤细胞系RPMI-8226增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法采用脂质体将pcDNA3.1(+)PCDH10及pcDNA3.1(+)质粒稳定转染入骨髓瘤RPMI-8226细胞,分别为PCDH10转染组、空质粒转染组,未转染组作为对照。采用RT-PCR及Western blot检测转染前后PCDH10基因和蛋白的表达,应用MTT法检测转染前后细胞的增殖能力;应用Transwell小室实验检测转染前后细胞的迁移及侵袭能力;应用Western blot检测增殖、迁移和侵袭相关蛋白表达水平。结果 PCDH10基因转染RPMI-8226细胞后,PCDH10在基因和蛋白水平均呈现高表达。MTT结果显示,PCDH10转染组增殖能力较对照组减弱;Transwell实验结果显示PCDH10能抑制瘤细胞的迁移、侵袭能力,PCDH10转染组迁移、侵袭的细胞数分别为(51.00±2.65)、(51.00±8.00)个,与对照组比较显著减少(P<0.05);Western blot检测结果显示PCDH10基因可下调AKT、p-AKT、cyclinD1和MMP-9的表达(P<0.05)。结论 PCDH10基因可能通过下调PI3K/AKT通路活性而抑制多发性骨髓瘤细胞RPMI-8226的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 pcdh10 多发性骨髓瘤 增殖 迁移 侵袭
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甲基化修饰致PCDH10基因在多发性骨髓瘤中沉默 被引量:5
3
作者 李颖 陈建斌 +3 位作者 宋君君 杨泽松 向廷秀 黄宗干 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期817-820,共4页
目的研究PCDH10基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者及细胞系KM3、RPMI-8226中的甲基化状态,分析甲基化对其沉默的影响。方法常规骨髓穿刺术获取MM患者骨髓样本,培养骨髓瘤细胞系KM3、RPMI-8226,以增生性骨髓象骨髓样本作为对... 目的研究PCDH10基因在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者及细胞系KM3、RPMI-8226中的甲基化状态,分析甲基化对其沉默的影响。方法常规骨髓穿刺术获取MM患者骨髓样本,培养骨髓瘤细胞系KM3、RPMI-8226,以增生性骨髓象骨髓样本作为对照。RT-PCR检测其中PCDH10基因表达水平,甲基化特异性PCR(methylation-sensitive PCR,MSP)法检测PCDH10基因甲基化状态,通过5-氮杂-2'-脱氧胞苷和组蛋白去乙酰化酶抑制剂[5-aza-2'-deoxycytidine(Aza)and trichostatin A(TSA),A+T]处理MM细胞系,检测药物处理前后PCDH10甲基化状态及表达水平。结果 PCDH10基因在正常人群中表达,但在MM患者骨髓及细胞系中广泛低表达,且77.27%(34/44)的MM患者PCDH10呈甲基化状态。PCDH10基因可经A+T试验逆转甲基化状态并恢复表达。结论 DNA甲基化可能在多发性骨髓瘤的PCDH10基因沉默中发挥作用,从而参与骨髓瘤的发生。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 pcdh10 DNA甲基化
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白山毛桃根提取物通过调控miR-182-5p/PCDH10表达抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移、侵袭 被引量:3
4
作者 胡玉海 王晨 +2 位作者 谢宇端 余婷 汪浩 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2021年第23期5383-5387,共5页
目的探讨白山毛桃根提取物是否调控miR-182-5p/PCDH10表达影响非小细胞肺癌细胞生物学行为。方法设置对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/ml)、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组、白山毛桃根提取物+miR-NC组、anti... 目的探讨白山毛桃根提取物是否调控miR-182-5p/PCDH10表达影响非小细胞肺癌细胞生物学行为。方法设置对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/ml)、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组、白山毛桃根提取物+miR-NC组、anti-miR-182-5p组、anti-miR-NC组。四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)法检测各组细胞增殖。Transwell检测各组细胞的侵袭和迁移;qRT-PCR检测非小细胞肺癌H1299细胞中miR-182-5p和PCDH10 mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测PCDH10蛋白表达。双荧光素酶报告实验检测荧光活性。结果相较于对照组,白山毛桃根提取物组非小细胞肺癌H1299细胞迁移和侵袭数量显著减少(P<0.05),PCDH10 mRNA和蛋白表达升高,miR-182-5p表达显著降低(P<0.05);miR-182-5p可靶向调控PCDH10的表达。抑制miR-182-5p表达后,迁移和侵袭的H1299细胞数量显著降低(P<0.05)。miR-182-5p过表达可逆转白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌的影响。结论白山毛桃根提取物可能通过下调miR-182-5p/PCDH10轴对非小细胞肺癌H1299细胞发挥抗增殖、抗迁移和抗侵袭作用。 展开更多
关键词 白山毛桃根提取物 miR-182-5p pcdh10 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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PCDH10基因甲基化与宫颈癌的研究进展 被引量:2
5
作者 国宏莉 李江华 +2 位作者 李斌 度长海 张丽 《中国热带医学》 CAS 2012年第9期1151-1153,共3页
PCDH10基因是原钙粘蛋白细胞粘附分子家族的成员之一,是一种重要的抑癌基因。DNA甲基化是抑癌基因失活的机制,PCDH10基因甲基化及其在子宫颈癌癌变中的作用机制还不清楚。现对宫颈癌中PCDH10基因甲基化的相关研究内容进行综述。
关键词 pcdh10基因 DNA甲基化 宫颈癌
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过表达PCDH10基因对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响 被引量:1
6
作者 王飞 杨继鑫 +1 位作者 陈智年 张永喜 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2020年第5期653-657,共5页
目的:探讨过表达原钙黏蛋白10(PCDH10)基因对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法:采用qRT-PCR检测不同结直肠癌细胞(SW620、HT29、LoVo、HCT116)及正常结肠上皮细胞NCM460中PCDH10 mRNA的表达水平。以含pcDNA-PCDH10过表达载体... 目的:探讨过表达原钙黏蛋白10(PCDH10)基因对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法:采用qRT-PCR检测不同结直肠癌细胞(SW620、HT29、LoVo、HCT116)及正常结肠上皮细胞NCM460中PCDH10 mRNA的表达水平。以含pcDNA-PCDH10过表达载体质粒的慢病毒感染结直肠癌SW620细胞(PCDH10组),以感染含空载质粒的慢病毒为阴性对照,未感染细胞为空白对照。采用qRT-PCR和Western blot法检测上述3组细胞的转染效率,MTT法和克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,采用Western blot法检测细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平。结果:PCDH10在结直肠癌细胞中的表达水平均低于正常结肠上皮细胞NCM460(P<0.05)。与二对照组相比,感染组SW620细胞中PCDH10 mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.05),细胞增殖和迁移受抑,同时细胞中PCNA和MMP-2蛋白的表达水平降低(P<0.05)。结论:PCDH10基因在结直肠癌细胞中呈低表达,过表达PCDH10能够抑制结直肠癌SW620细胞增殖和迁移能力,该过程可能与抑制PCNA和MMP-2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 pcdh10基因 结直肠癌 SW620细胞 增殖 迁移
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前列腺癌患者血清PCDH10甲基化检测及临床意义 被引量:3
7
作者 吴旭鹏 郭玉刚 牛文斌 《黑龙江医药科学》 2016年第4期120-121,123,共3页
目的:通过测定前列腺癌患者及前列腺增生患者血清中PCDH10基因启动子甲基化水平,探讨其作为一种肿瘤标志物对前列腺癌诊断的临床价值。方法:收集20例前列腺癌患者和20例前列腺增生患者的血清样本作为研究对象,应用甲基化特异性聚合酶链... 目的:通过测定前列腺癌患者及前列腺增生患者血清中PCDH10基因启动子甲基化水平,探讨其作为一种肿瘤标志物对前列腺癌诊断的临床价值。方法:收集20例前列腺癌患者和20例前列腺增生患者的血清样本作为研究对象,应用甲基化特异性聚合酶链式反映(MSP)方法,测定血清样本中PCDH10基因甲基化状态,同时分析20例前列腺癌患者的临床资料。结果:20例前列腺癌患者中8例检出PCDH10基因甲基化,20例前列腺增生患者中无一例检出PCDH10基因甲基化。将检测结果阳性和阴性两类前列腺癌患者的拎出啊资料进行统计学分析。发现2类患者在年龄、前列腺特异性抗原(PSA值)、以及临床Jewett分期的差别无统计学意义(P>0.05),但是在Gleason评分的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PCDH10基因启动子甲基化仅出现在前列腺癌患者血清中,而在前列腺增生(BPH)患者中未出现,并且PCDH10基因出现甲基化的比率与前列腺癌患者的Gleason评分呈正相关性。 展开更多
关键词 前列腺癌 pcdh10基因 甲基化 聚合酶链式反应
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PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及作用研究
8
作者 李明 徐光辉 +2 位作者 杨利萍 李汀 宋巍 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2021年第6期628-631,共4页
目的研究PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及作用。方法选取2017年1月至2019年11月西安市第四医院手术后胃癌组织标本和癌旁组织标本各80例,使用免疫组化染色检测PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素阳性表达,并对胃癌患... 目的研究PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素在胃癌患者组织中的表达及作用。方法选取2017年1月至2019年11月西安市第四医院手术后胃癌组织标本和癌旁组织标本各80例,使用免疫组化染色检测PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素阳性表达,并对胃癌患者按照TNM分期进行划分,分析PCDH10、Neuritin、E-钙黏附素表达和胃癌患者分期程度的关系。结果癌旁组织PCDH10表达高于胃癌组织,Neuritin、E-钙黏附素表达低于胃癌组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期患者胃癌组织PCDH10表达低于Ⅰ~Ⅱ期,Neuritin、E-钙黏附素表达高于Ⅰ~Ⅱ期,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移者中PCDH10表达低于无淋巴结转移者,而Neuritin、E-钙黏附素表达高于无淋巴结转移者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Neuritin、E-钙黏附素在胃癌组织中处于高表达,而PCDH10处于低表达,其能够作为判断胃癌生物学行为的重要指标;将三者联合起来检测,可为临床上提高胃癌患者筛查及评估肿瘤的进展程度、判断预后提供一个新的手段。 展开更多
关键词 pcdh10 NEURITIN E-钙黏附素 胃癌
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PCDH10在肾癌组织中表达的临床意义
9
作者 林英立 李艳丽 +1 位作者 梁杰 赵炎 《吉林医学》 CAS 2019年第10期2192-2194,共3页
目的:探讨PCDH10在肾癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法检测PCDH10在78例肾癌组织和38例癌旁组织中的表达情况,并结合患者的临床病理资料及随访结果进行统计学分析。结果:PCDH10在肾癌组织中的表达明显低于... 目的:探讨PCDH10在肾癌组织中的表达情况及其临床意义。方法:应用免疫组织化学染色法检测PCDH10在78例肾癌组织和38例癌旁组织中的表达情况,并结合患者的临床病理资料及随访结果进行统计学分析。结果:PCDH10在肾癌组织中的表达明显低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);PCDH10表达减少与较高的肿瘤分期、分级和淋巴结转移密切相关;Kaplan-Meier生存分析和log-rank检验结果表明,PCDH10表达减少与患者总生存率降低密切相关(P=0.014)。结论:PCDH10表达减少与肾癌的发生、发展和患者的预后不良密切相关。 展开更多
关键词 肾癌 pcdh10 分子标志物
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PCDH10基因对子宫内膜腺样癌细胞抑制作用的研究 被引量:6
10
作者 江曼 叶元 +1 位作者 杨一华 江艳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期526-528,共3页
目的:研究PCDH10基因诱导子宫内膜腺样癌细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将pc DNA3.1(+)PCDH10及pc DNA3.1(+)空质粒分别瞬时转染入子宫内膜腺样癌细胞系,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测PCDH10的表达;以MTT和细胞计数测定转染后细胞... 目的:研究PCDH10基因诱导子宫内膜腺样癌细胞凋亡的作用及相关机制。方法:将pc DNA3.1(+)PCDH10及pc DNA3.1(+)空质粒分别瞬时转染入子宫内膜腺样癌细胞系,通过RT-PCR和实时荧光定量PCR检测PCDH10的表达;以MTT和细胞计数测定转染后细胞的增殖能力和生长数量;应用流式细胞术检测细胞的凋亡率和细胞周期。结果:子宫内膜癌细胞转染PCDH10后,细胞的PCDH10表达升高;细胞计数和MTT试验显示转染PCDH10后的子宫内膜癌细胞的生长数量明显减少,细胞增殖受抑制(P<0.05);流式细胞凋亡率实验结果显示转染PCDH10后的子宫内膜癌细胞早期凋亡率增加;流式周期分析显示转染后的细胞G1期阻滞。结论:PCDH10基因在子宫内膜腺样癌的发生发展中起抑制作用;PCDH10基因促进对子宫内膜腺样癌细胞早期凋亡,使细胞在G1期受阻滞。 展开更多
关键词 子宫内膜腺样癌 pcdh10 细胞凋亡 细胞周期
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原钙黏蛋白10(PCDH10)抑制BXPC-3胰腺癌细胞的增殖以及侵袭和迁移 被引量:10
11
作者 邱禅 卜小娜 +1 位作者 胡丹 姜政 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期163-167,172,共6页
目的探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)在胰腺癌细胞株中的表达情况以及生物学功能。方法利用反转录PCR检测PCDH10在CAPAN-1、PANC-1、ASPC-1、BXPC-3胰腺癌细胞以及HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞的表达情况。将质粒pc DNA3.1-PCDH10与质粒pc ... 目的探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)在胰腺癌细胞株中的表达情况以及生物学功能。方法利用反转录PCR检测PCDH10在CAPAN-1、PANC-1、ASPC-1、BXPC-3胰腺癌细胞以及HPDE6-C7人正常胰腺导管上皮细胞的表达情况。将质粒pc DNA3.1-PCDH10与质粒pc DNA3.1-vector通过脂质体转染至BXPC-3人胰腺癌细胞,转染后通过反转录PCR检测BXPC-3细胞中PCDH10 mRNA的水平、Western blot法检测其蛋白水平;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖情况,膜联蛋白Ⅴ-碘化丙啶双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell^(TM)侵袭和迁移实验、划痕实验检测BXPC-3细胞的侵袭和迁移。结果与正常胰腺导管上皮细胞相比较,PCDH10在CAPAN-1、PANC-1、BXPC-3胰腺癌细胞中表达明显下调。反转录PCR及Western blot法检测结果表明,转染pc DNA3.1-PCDH10的BXPC-3实验组细胞PCDH10表达明显高于转染pc DNA3.1-vector的对照组细胞。与对照组相比,过表达PCDH10后,BXPC-3细胞的增殖速度明显降低、克隆形成数明显减少;细胞凋亡率明显增加,细胞的侵袭、迁移能力明显降低。结论 PCDH10在胰腺癌细胞中表达下调,过表达PCDH10能够明显抑制BXPC-3胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,并且诱导BXPC-3细胞凋亡。 展开更多
关键词 pcdh10 胰腺癌 转染 增殖 凋亡 侵袭 迁移
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PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化测定及临床意义 被引量:3
12
作者 刘绍祖 佟明 +5 位作者 张骞 张莲 徐奔 李自智 黄伟超 金艳阳 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第4期379-382,共4页
目的检测PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测PCDH10基因在3株前列腺癌细胞系、1株前列腺上皮细胞、13例前列腺增生组织和40例前列腺癌组织样本... 目的检测PCDH10基因在前列腺癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)技术检测PCDH10基因在3株前列腺癌细胞系、1株前列腺上皮细胞、13例前列腺增生组织和40例前列腺癌组织样本中的甲基化情况,同时分析40例前列腺癌患者的临床资料。结果 3株前列腺癌细胞系中有2株检出PCDH10基因甲基化;40例前列腺癌样本中24例(60%)检出PCDH10基因甲基化,13例前列腺增生组织中未检出PCDH10基因甲基化。PCDH10基因出现甲基化患者与未出现甲基化患者相比,在年龄、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)和临床分期等指标的差异无统计学意义(P>0.05),但在Gleason评分的差异存在统计学意义(P<0.05)。结论 PCDH10基因在前列腺癌组织中甲基化程度较高,高Gleason评分的前列腺癌可能具有更高的PCDH10基因甲基化率,提示PCDH10基因甲基化可能与前列腺癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 甲基化 pcdh10基因 前列腺癌 甲基化特异性 聚合酶链式反应
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PCDH10减少多发性骨髓瘤细胞逃避表阿霉素杀伤 被引量:1
13
作者 袁海汀 陈建斌 +1 位作者 许永会 杨泽松 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期388-392,共5页
目的:探讨原钙黏蛋白10(protocadherin-10,PCDH10)对表阿霉素杀伤多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞的影响及机制。方法:采用脂质体法将PCDH10基因转染入人MM细胞株RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blot法检测PCDH10基因和蛋白的表达... 目的:探讨原钙黏蛋白10(protocadherin-10,PCDH10)对表阿霉素杀伤多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)细胞的影响及机制。方法:采用脂质体法将PCDH10基因转染入人MM细胞株RPMI8226细胞,RT-PCR和Western blot法检测PCDH10基因和蛋白的表达;CCK-8法检测表阿霉素对RPMI8226细胞的增殖抑制作用,求得半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50);Transwell法检测表阿霉素和PCDH10对RPMI8226细胞迁移的影响;流式细胞术检测CXC族趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)蛋白表达;Western blot方法检测Ras同源家族成员A(ras homolog gene family member A,Rho A)和基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白表达情况。结果:PCDH10基因成功转染入RPMI8226细胞,并成功表达;PCDH10转染组表阿霉素IC50为(0.87±0.07)μg/ml,明显低于空质粒转染组(1.27±0.02)μg/ml(F=77.93,P=0.000);PCDH10减少表阿霉素所致的细胞迁移(F=34.943,P=0.000)并抑制CXCR4(F=117.269,P=0.000)、Rho A(F=1 818.250,P=0.000)和MMP-9(F=523.764,P=0.000)蛋白表达。结论:PCDH10一方面可增强MM细胞对表阿霉素的敏感性,另一方面可通过抑制CXCR4、Rho A、MMP-9蛋白的表达来减少MM细胞逃避表阿霉素的杀伤,从而增强了表阿霉素的抗骨髓瘤效应。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 pcdh10基因 表阿霉素 CXC族趋化因子受体4 Ras同源家族成员A 基质金属蛋白酶9
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PCDH10基因在结直肠癌组织中的表达 被引量:3
14
作者 姜文强 陈玉强 +2 位作者 王彤旭 吕鑫 王亚洲 《黑龙江医药科学》 2017年第3期104-105,107,共3页
目的:检测结直肠癌组织及对应的癌旁正常组织中PCDH10基因表达mRNA水平及其启动子区域甲基化状态,探究该基因在结直肠癌发生发展中的作用。方法:选取2016-01~2017-02于佳木斯大学附属第一医院普外科直接行手术切除治疗的60例结直肠癌患... 目的:检测结直肠癌组织及对应的癌旁正常组织中PCDH10基因表达mRNA水平及其启动子区域甲基化状态,探究该基因在结直肠癌发生发展中的作用。方法:选取2016-01~2017-02于佳木斯大学附属第一医院普外科直接行手术切除治疗的60例结直肠癌患者的肿瘤组织及对应的癌旁正常组织,采用甲基化PCR(MSP)和RT-PCR实验技术,检测两者组织中PCDH 10基因启动子甲基化状态和mRNA水平情况,并根据临床资料进行分析。结果:PCDH10基因在结直肠癌组织中见启动子明显异常甲基化,比例为53.3%(32/60),远高于癌旁组织8.3%(5/60),二者差异具有显著统计学意义(P<0.01);在结直肠癌组织中其mRNA表达只有8.3%(5/60),大多数表达沉默,而在癌旁组织中高表达90%(54/60),二者差异具有统计学意义(P<0.05);PCDH10基因异常甲基化与结直肠癌患者性别、年龄、肿瘤大小未见相关(P>0.05),与Dukes分期、分化程度、淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论:PCDH10基因在结直肠癌组织中表达大多数沉默,但其启动子异常甲基化显著,说明该基因可能在结直肠癌的发生、发展中具有抑制作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 pcdh10 甲基化 MRNA表达
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miR-412-5p靶向PCDH10对肺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响 被引量:2
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作者 刘江帆 魏丹丹 李朝红 《中国实验诊断学》 2021年第11期1658-1663,共6页
目的研究微小RNA-412-5p(miR-412-5p)对原钙黏蛋白10(PCDH10)的靶向关系及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组化检测miR-412-5p、PCDH10在肺癌和癌旁组织中的表达。... 目的研究微小RNA-412-5p(miR-412-5p)对原钙黏蛋白10(PCDH10)的靶向关系及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。方法实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)和免疫组化检测miR-412-5p、PCDH10在肺癌和癌旁组织中的表达。建立抑制miR-412-5p的A549细胞,Western blot检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭。生物信息学预测和双荧光素酶活性检测分析miR-412-5p和PCDH10的靶向关系。共转染antimiR-412-5p和si-PCDH10,观察抑制PCDH10对抑制miR-412-5p诱导的细胞A549增殖、迁移、侵袭的影响。结果与癌旁组织组比较,肺癌组织中miR-412-5p表达明显上调,PCDH10表达显著下调(P<0.05)。抑制miR-412-5p明显降低Cyclin D1、MMP-2蛋白表达量、迁移细胞数和侵袭细胞数(P<0.05),而显著提高E-cadherin蛋白水平、24h、48h、72h的细胞增殖抑制率(P<0.05)。miR-412-5p靶向调控PCDH10表达。抑制PCDH10能逆转抑制miR-412-5p对细胞A549增殖、迁移、侵袭的抑制作用。结论miR-412-5p通过靶向PCDH10影响肺癌细胞增殖、迁移、侵袭。 展开更多
关键词 miR-412-5p pcdh10 肺癌 增殖 迁移 侵袭
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PCDH10基因慢病毒载体构建及其在MDA-MB-231细胞中的表达
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作者 张微 岳丽玲 +4 位作者 张延勇 韩翠翠 徐天娇 朱文斌 刘立琨 《系统医学》 2019年第16期27-29,38,共4页
目的构建原钙黏蛋白10(PCDH10)基因慢病毒表达载体并建立稳定过表达PCDH10的MDA-MB-231细胞系。方法 2018年6—11月,根据PCDH10基因序列设计引物,应用PCR法扩增PCDH10全长片段,连接线性化的pLV-EF1α-GFP-Puro载体,获得pLV-PCDH10慢病... 目的构建原钙黏蛋白10(PCDH10)基因慢病毒表达载体并建立稳定过表达PCDH10的MDA-MB-231细胞系。方法 2018年6—11月,根据PCDH10基因序列设计引物,应用PCR法扩增PCDH10全长片段,连接线性化的pLV-EF1α-GFP-Puro载体,获得pLV-PCDH10慢病毒重组质粒,测序正确后进行PCDH10基因慢病毒载体的包装及滴度测定。将重组质粒pLV-PCDH10转染MDA-MB-231细胞,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测MDA-MB-231细胞中PCDH10的表达情况。结果测序结果证实成功构建慢病毒表达载体pLV-PCDH10,病毒滴度为5×10^8TU/mL;转染MDA-MB-231细胞后,RT-PCR和Western blot结果显示PCDH10的m RNA和蛋白表达较对照组高表达。结论成功构建pLV-PCDH10慢病毒载体并建立稳定过表达PCDH10的MDA-MB-231细胞系,为深入研究PCDH10基因在乳腺癌发生发展中的功能提供实验基础。 展开更多
关键词 pcdh10基因 慢病毒载体 载体构建 MDA-MB-231细胞
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结直肠癌组织中PCDH10、RASSF1A基因启动子甲基化状态 被引量:9
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作者 李沫 颜登国 刘杰麟 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期456-459,共4页
目的 检测结直肠癌(CRC)组织中原钙黏素蛋白10 (PCDH10)基因和Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子区的甲基化状态,探讨其与CRC发生发展的关系.方法 选取2007至2010年在贵州医科大学附属医院行手术治疗的75例CRC患者的肿瘤组织... 目的 检测结直肠癌(CRC)组织中原钙黏素蛋白10 (PCDH10)基因和Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子区的甲基化状态,探讨其与CRC发生发展的关系.方法 选取2007至2010年在贵州医科大学附属医院行手术治疗的75例CRC患者的肿瘤组织,应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测CRC组织及相应癌旁正常组织中PCDH10和RASSF1A基因启动子区的甲基化情况.采用x2检验分析PCDH10和RASSF1A甲基化的表达率及其与临床病理特征的关系.结果 PCDH10基因在CRC组织中的甲基化率为58.7% (44/75),明显高于癌旁组织的22.7%(17/75)(P<0.01);PCDH10甲基化与CRC患者的年龄、性别、病灶部位、Dukes分期、有无淋巴结转移等均无相关性(均P>0.05).RASSF1A基因在CRC组织中的甲基化率为64.6% (42/65),明显高于癌旁组织的15.4% (10/65) (P <0.01),RASSF1A甲基化与CRC患者的年龄、性别、病灶部位均无相关性(均P >0.05),CRC Dukes高分期和淋巴结转移患者RASSF1A甲基化率高[92.9% (26/28)比43.2%(16/37),92.9% (26/28)比43.2% (16/37),均P<0.05].结论 CRC组织中PCDH10、RASSF1A基因呈高甲基化状态,可能是CRC发生机制之一.高分期的CRC具有更高的RASSF1A基因甲基化率,提示RASSF1A基因甲基化还可能与CRC的发展有关. 展开更多
关键词 直肠肿瘤 DNA甲基化 基因 pcdh10 基因 RASSF1A
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肾癌组织中PCDH10基因甲基化状态的检测及临床意义的研究 被引量:4
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作者 岳根全 徐奔 +4 位作者 张莲 刘倩伶 王璐 张骞 陈光富 《中华临床医师杂志(电子版)》 CAS 2013年第18期80-83,共4页
目的:检测PCDH10基因在肾癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测PCDH10基因在5株肾癌细胞系和47例肾癌组织样本中的甲基化情况,同时分析47例患者的临床资料及病理信息,进行统计研究。结果... 目的:检测PCDH10基因在肾癌组织中的甲基化状态,并分析其临床意义。方法应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测PCDH10基因在5株肾癌细胞系和47例肾癌组织样本中的甲基化情况,同时分析47例患者的临床资料及病理信息,进行统计研究。结果5株肾癌细胞系中有2株检出PCDH10基因甲基化,比率为40%;47例肾癌样本中有31例检出PCDH10基因甲基化,比率为66.0%,6例癌旁组织中有1例检出PCDH10基因甲基化,比率为16.7%。PCDH10基因出现甲基化的患者与未出现甲基化的患者相比,二者在性别、年龄、肿瘤部位、大小、病理核分级等指标的差异无统计学意义(P>0.05),但在Ⅰ期肾癌与Ⅱ~Ⅲ期肾癌之间PCDH10基因甲基化率的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PCDH10基因在肾癌组织中甲基化程度较高,高分期的肾癌可能具有更高的PCDH10基因甲基化率,提示PCDH10基因甲基化可能与肾癌的发生发展有关。 展开更多
关键词 肾细胞 甲基化 pcdh10基因 甲基化特异性PCR
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白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌细胞的抑制效果及机制研究 被引量:5
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作者 赵泽义 陈军堂 王明明 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第12期2166-2172,共7页
目的:探讨白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探究其潜在分子调控机制。方法:设置白山毛桃根提取物各浓度(0 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL、40 mg/mL、60 mg/mL)实验组进行MTT实验,观察白山毛桃根提取物对肺癌H... 目的:探讨白山毛桃根提取物对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响,并探究其潜在分子调控机制。方法:设置白山毛桃根提取物各浓度(0 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL、40 mg/mL、60 mg/mL)实验组进行MTT实验,观察白山毛桃根提取物对肺癌H1299细胞增殖的影响。根据MTT实验结果,再设置分组为对照组(无白山毛桃根提取物)、白山毛桃根提取物组(浓度40 mg/mL)、白山毛桃根提取物+miR-NC组、白山毛桃根提取物+miR-182-5p组进行实验。采用脂质体法,分别将miRNC、miR-182-5pmimics、anti-miR-NC、anti-miR-182-5p转染至H1299细胞。Transwell检测各组细胞的侵袭和迁移;实时荧光定量PCR(qPCR)检测H1299细胞中miR-182-5pmRNA和PCDH10 mRNA表达水平;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测PCDH10蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果:各浓度白山毛桃根提取物组细胞抑制率均高于0 mg/mL组,并呈剂量依赖性(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-182-5p组WT-PCDH10非小细胞肺癌细胞的荧光素酶活性低于miR-NC组(P<0.05);而miR-182-5p组与miR-NC组的MUT-PCDH10荧光素酶活性比较,差异无统计学意义(P>0.05),白山毛桃根提取物组细胞迁移和侵袭数量低于对照组(P<0.05);白山毛桃根提取物组H1299细胞中miR-182-5p mRNA表达低于对照组;PCDH10 mRNA及蛋白表达高于对照组(P<0.05),白山毛桃根提取物组H1299细胞中miR-182-5p表达水平、细胞迁移和侵袭数量低于对照组;白山毛桃根提取物+miR-24-3p组H1299细胞中miR-182-5p表达水平、细胞迁移和侵袭数量高于白山毛桃根提取物+miR-NC组(P<0.05);白山毛桃根提取物组H1299细胞中PCDH10蛋白表达水平、细胞抑制率高于对照组;白山毛桃根提取物+miR-182-5p组H1299细胞中PCDH10蛋白表达水平、细胞抑制率低于白山毛桃根提取物+miR-NC组(P<0.05)。结论:白山毛桃根提取物可抑制非小细胞肺癌H1299细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与miR-182-5p调控PCDH10基因表达有关。 展开更多
关键词 白山毛桃根提取物 miR-182-5p pcdh10 非小细胞肺癌 增殖 迁移 侵袭
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肾癌组织中原钙黏蛋白-10甲基化状态及临床意义 被引量:3
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作者 林英立 李艳丽 +1 位作者 梁杰 赵炎 《浙江医学》 CAS 2019年第18期1964-1966,1970,共4页
目的探讨肾癌组织中原钙黏蛋白-10(PCDH10)甲基化状态及临床意义。方法收集78例肾癌患者的癌组织标本及其中38例癌旁正常肾组织标本;采用甲基化特异性PCR法检测组织PCDH10甲基化情况,分析肾癌组织PCDH10甲基化状态与患者临床特征及预后... 目的探讨肾癌组织中原钙黏蛋白-10(PCDH10)甲基化状态及临床意义。方法收集78例肾癌患者的癌组织标本及其中38例癌旁正常肾组织标本;采用甲基化特异性PCR法检测组织PCDH10甲基化情况,分析肾癌组织PCDH10甲基化状态与患者临床特征及预后的关系。结果肾癌组织PCDH10甲基化阳性率(73.1%)明显高于癌旁正常组织(21.1%),差异有统计学意义(P<0.05)。肾癌组织PCDH10甲基化阳性与患者性别、年龄无关,差异均无统计学意义(均P>0.05);与肿瘤T分期、Fuhrman分级、淋巴结转移有关,差异均有统计学意义(均P<0.05)。肾癌患者PCDH10甲基化阳性组5年总生存率(73.7%)明显低于甲基化阴性组(95.2%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论肾癌组织PCDH10甲基化阳性率较高,与肾癌的发生、发展及患者预后不良相关。 展开更多
关键词 肾癌 甲基化 原钙黏蛋白-10
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