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LncRNA PCAT1通过上调乳酸脱氢酶A促进胰腺癌细胞增殖和迁移的研究
1
作者 陈靖 朱子璇 +1 位作者 周扬 沈维干 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第3期44-52,共9页
为揭示lncRNA PCAT1促进胰腺癌细胞增殖和迁移的分子机制,采用RT-qPCR和Western blotting方法检测相关基因的表达水平,利用RNA pull-down结合Western blotting验证、RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)-qPCR、蛋白质稳定性试验... 为揭示lncRNA PCAT1促进胰腺癌细胞增殖和迁移的分子机制,采用RT-qPCR和Western blotting方法检测相关基因的表达水平,利用RNA pull-down结合Western blotting验证、RNA免疫沉淀(RNA immunoprecipitation,RIP)-qPCR、蛋白质稳定性试验、葡萄糖摄取和乳酸分泌检测等研究PCAT1对胰腺癌细胞增殖和迁移的影响。结果表明:PCAT1可上调胰腺癌细胞中乳酸脱氢酶A (LDHA)的表达;PCAT1可与细胞中LDHA结合,但不影响LDHA蛋白的稳定性和降解;PCAT1可通过上调LDHA的表达促进胰腺癌细胞中的葡萄糖的摄取和乳酸的分泌,促进细胞增殖和迁移。综上,PCAT1通过上调LDHA表达并与LDHA蛋白结合促进胰腺癌细胞的有氧糖酵解,进一步增强胰腺癌细胞的增殖和迁移能力。 展开更多
关键词 lncRNA pcat1 乳酸脱氢酶A 胰腺癌细胞 增殖和迁移
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沉默lncRNA PCAT1调控miR-128表达增强肺癌H1299细胞放射敏感性 被引量：1
2
作者 缪继东 尤玮 +3 位作者 官文强 李家伟 高扬 谢炉峰 《生物技术》 CAS 2022年第6期766-771,786,共7页
[目的]探讨LncRNA PCAT1调控miR-128对肺癌H1299细胞放射敏感性的影响。[方法]用LncRNA PCAT1阻断剂处理或不处理肺癌H1299细胞,根据放射剂量的不同将细胞分为空白对照组(0Gy)、低剂量组(2Gy)、中剂量组(4Gy)和高剂量组(8Gy)。采用RT-q... [目的]探讨LncRNA PCAT1调控miR-128对肺癌H1299细胞放射敏感性的影响。[方法]用LncRNA PCAT1阻断剂处理或不处理肺癌H1299细胞,根据放射剂量的不同将细胞分为空白对照组(0Gy)、低剂量组(2Gy)、中剂量组(4Gy)和高剂量组(8Gy)。采用RT-qPCR检测各组细胞LncRNA PCAT1、miR-128表达水平,CCK-8法检测细胞存活率,transwell实验检测细胞侵袭力,划痕实验检测细胞迁移力,流式细胞术检测细胞凋亡率。[结果]空白对照组及各放射剂量组肺癌H1299细胞使用阻断剂后LncRNA PCAT1表达显著降低,miR-128显著升高(P<0.05)。与空白对照组比较,低、中、高剂量组肺癌H1299细胞存活率、迁移率和侵袭力显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。使用阻断剂后各剂量组细胞存活率、迁移率和侵袭力均显著降低,凋亡率显著升高(P<0.05)。[结论]沉默lncRNA PCAT1可上调miR-128表达来增强肺癌H1299细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 LncRNA pcat1 miR-128 肺癌 放射敏感性
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lncRNA PCAT1表达下调抑制口腔鳞状细胞癌细胞的增殖、生长、侵袭、迁移及上皮-间充质转化 被引量：8
3
作者 李艳莉 邓金勇 +1 位作者 王金龄 何升腾 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2004-2010,共7页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) PCAT1对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的增殖、生长、侵袭及迁移的影响,并探讨其可能机制。方法:采用Lipofectamine 200将PCAT1 siRNA转染入OSCC细胞分... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) PCAT1对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞的增殖、生长、侵袭及迁移的影响,并探讨其可能机制。方法:采用Lipofectamine 200将PCAT1 siRNA转染入OSCC细胞分别利用RT-qPCR和Western blot检测相关基因的mRNA及蛋白表达;分别利用CCK-8实验和集落形成实验检测OSCC细胞的增殖及生长能力;利用细胞侵袭实验和细胞迁移实验检测OSCC细胞的侵袭及迁移能力。结果:PCAT1在OSCC组织和细胞中的表达与癌旁正常组织和正常口腔细胞黏膜角质细胞相比显著上调(P <0. 05)。转染PCAT1 siRNA可以显著降低PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的表达(P <0. 05)。PCAT1的低表达可以显著抑制Tca8133和TSCCa细胞的增殖、生长、侵袭及迁移(P <0. 05)。PCAT1在Tca8113和TSCCa细胞中的低表达可以抑制ZEB1、N-cadherin和vimentin的mRNA及蛋白表达,同时增加E-cadherin的mRNA及蛋白表达(P <0. 05)。结论:沉默PCAT1能够抑制OSCC细胞的增殖、生长及转移,该作用可能与调控上皮-间充质转化有关。 展开更多
关键词 长链非编码RNA pcat1 口腔鳞状细胞癌 细胞增殖 细胞迁移 上皮-间充质转化
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LncRNA PCAT1通过调控miR-329-3p影响乳腺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性 被引量：2
4
作者 李东原 王艳梅 +2 位作者 吴博 闫美宏 毕华 《广州医科大学学报》 2022年第1期1-9,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)前列腺癌相关ncRNA转录本1(PCAT1)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响,并分析其分子机制。方法:实时定量PCR分析lncRNA PCAT1和miR-329-3p在乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D、Bcap-37)以及正常乳腺上皮... 目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)前列腺癌相关ncRNA转录本1(PCAT1)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和放射敏感性的影响,并分析其分子机制。方法:实时定量PCR分析lncRNA PCAT1和miR-329-3p在乳腺癌细胞系(MCF-7、T47D、Bcap-37)以及正常乳腺上皮细胞(MCF-10A)中表达水平。转染lncRNA PCAT1小干扰RNA、miR-329-3p模拟物至T47D细胞,采用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术、细胞克隆实验分析干扰lncRNA PCAT1表达或过表达miR-329-3p对T47D细胞增殖活力、凋亡和放射敏感性的影响。双荧光素酶实验验证lncRNA PCAT1与miR-329-3p之间的关系。免疫印迹法检测细胞周期素D1(CyclinD1)、磷酸化组蛋白(γ-H2AX)、切割的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved-caspase-3)以及β-连环蛋白(β-Catenin)表达。结果:与MCF-10A细胞比较,MCF-7、T47D、Bcap-37细胞中lncRNA PCAT1表达量显著升高(P<0.05),miR-329-3p表达量显著降低(P<0.05)。干扰lncRNA PCAT1表达或过表达miR-329-3p显著下调CyclinD1表达(P<0.05),上调Cleaved-caspase-3表达(P<0.05),降低T47D细胞活力(P<0.05),促进细胞凋亡(P<0.05),并增加细胞的放射敏感性(P<0.05)。miR-329-3p与lncRNA PCAT1序列直接结合,干扰lncRNA PCAT1后miR-329-3p的表达显著升高(P<0.05),过表达lncRNA PCAT1后miR-329-3p的表达显著降低(P<0.05)。干扰lncRNA PCAT1表达显著抑制β-Catenin蛋白表达(P<0.05)。抑制miR-329-3p表达可减弱干扰lncRNA PCAT1对T47D细胞增殖活力、凋亡、放射敏感性以及β-Catenin蛋白表达的影响(P<0.05)。结论:干扰lncRNA PCAT1可抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡,增加细胞放射敏感性,其机制可能与靶向miR-329-3p调控Wnt/β-Catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 lncRNA pcat1 乳腺癌 细胞增殖 凋亡 放射敏感性
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LncRNA PCAT1靶向miR-329-3p调控舌鳞状细胞癌细胞增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解的机制研究
5
作者 刘玮 宗佩君 许婷婷 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期102-107,共6页
目的探讨长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1(PCAT1)调控舌鳞状细胞癌(TSCC)增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解的调控机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TSCC癌组织、癌旁组织、TSCC细胞和常口腔角质细胞中PCAT1、miR-329-3p... 目的探讨长链非编码RNA前列腺癌相关转录物1(PCAT1)调控舌鳞状细胞癌(TSCC)增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解的调控机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测TSCC癌组织、癌旁组织、TSCC细胞和常口腔角质细胞中PCAT1、miR-329-3p的表达情况。脂质体转染法将pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-PCAT1组(转染pcDNA-PCAT1)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-329-3p组(转染miR-329-3p mimics)、pcDNA-PCAT1+miR-NC组(共转染pcDNA-PCAT1和miR-NC)、pcDNA-PCAT1+miR-329-3p组(共转染pcDNA-PCAT1和miR-329-3p mimics)转染至UM1细胞;细胞计数试剂盒(CCK-8)、迁移实验(Transwell)、酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解产物谷氨酸盐、α-酮戊二酸(α-KG)水平。双荧光素酶试验检测细胞中PCAT1与miR-329-3p之间的结合力。结果与癌旁组织组相比,癌组织组PCAT1表达明显上调,miR-329-3p表达明显下调;与NHOK组相比,UM1、CAL-27、SCC25细胞中PCAT1表达均上调,miR-329-3p表达均下调(P<0.05);与pcDNA组相比,pcDNA-PCAT1组PCAT1表达明显上升,细胞增殖率、细胞侵袭数和细胞侵袭数均发生上调,谷氨酸盐水平和α-KG水平也发生明显升高(P<0.05);PCAT1可靶向调控miR-329-3p;与miR-NC组相比,miR-329-3p组TSCC细胞miR-329-3p表达显著升高,细胞增殖率、细胞迁移数和细胞侵袭数均显著降低,谷氨酸盐水平和α-KG水平均明显降低(P<0.05);与pcDNA-PCAT1+miR-NC组相比,pcDNA-PCAT1+miR-329-3p组PCAT1表达显著降低,细胞增殖率、迁移细胞数和侵袭细胞数均明显降低,谷氨酸盐水平和α-KG水平也显著下调(P<0.05)。结论 PCAT1促进TSCC细胞增殖、迁移侵袭和谷氨酰胺分解,其机制与靶向miR-329-3p有关。 展开更多
关键词 pcat1 miR-329-3p 舌鳞状细胞癌 谷氨酰胺分解
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血清外泌体LncRNA PCAT1在早期非小细胞肺癌诊断中的潜在价值研究
6
作者 柳秋霞 蔡云祥 +3 位作者 李勇 万诚诚 嵇龙飞 胡燕勤 《现代实用医学》 2023年第11期1416-1421,共6页
目的 探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)早期诊断中的价值。方法回顾性选取湖州市第一人民医院2017年1月至2020年3月检测的206份NSCLC和200份健康对照人群的血清样本,随机分为训练集(50例NSCLC和50例健康对照)... 目的 探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)在非小细胞肺癌(NSCLC)早期诊断中的价值。方法回顾性选取湖州市第一人民医院2017年1月至2020年3月检测的206份NSCLC和200份健康对照人群的血清样本,随机分为训练集(50例NSCLC和50例健康对照)和验证集(156例NSCLC和150例健康对照)。从NSCLC和健康对照的血清样本中分离外泌体,进行外泌体RNA深度测序以检测差异表达的外泌体LncRNA,然后利用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析在训练集和验证集队列中表达失调最显著的外泌体LncRNA PCAT1(exoPCAT1),采用受试者工作特征(ROC)曲线分析检测外泌体生物标志物的诊断能力。结果 共发现781个外泌体LncRNA在NSCLC和健康对照组血清样本之间差异表达(变化倍数> 1.5,P<0.05)。在训练集中,利用qRT-PCR证实exoPCAT1在NSCLC血清样本中较健康对照组过表达[2.24 (1.45,3.44) vs 0.92(0.57,1.30),Z=5.667,P<0.05]。在验证集中,NSCLC组exoPCAT1相对表达量亦高于健康对照组[2.09(1.32,3.18)vs0.84(0.56,1.41),Z=10.112,P<0.05]。exoPCAT1诊断NSCLC的曲线下面积(AUC)为0.838(95%CI0.795~0.880)。对于早期(Ⅰ~Ⅱ期)或者血清癌胚抗原正常(<5 ng/ml)的NSCLC患者,exoPCAT1也有较高的诊断价值,AUC分别为0.789(95%CI0.737~0.841)和0.728(95%CI0.661~0.795)。另外,血清exoPCAT1表达与疾病进展有关高表达(> 2.09)者TNMⅢ~Ⅳ期、T1~T2分期及淋巴结转移阳性的比例更高(均P <0.05)。结论 血清外泌体LncRNA PCAT1可作为一种新的液体活检”生物标志物并可用于早期NSCLC的诊断。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 早期诊断 血清外泌体 长链非编码RNA pcat1
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