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lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的调控影响 被引量:2
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作者 胡志高 欧阳艳红 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第21期33-38,62,共7页
目的观察lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的调控影响。方法通过左冠状动脉前降支结扎构建AMI模型小鼠。取AMI模型构建成功的雄性小鼠64只,随机选择48只小鼠,于术后0、1、2、3、4、5 d各处死8只小鼠,作为AMI组。... 目的观察lncRNA PAX8-AS1对小鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌细胞凋亡的调控影响。方法通过左冠状动脉前降支结扎构建AMI模型小鼠。取AMI模型构建成功的雄性小鼠64只,随机选择48只小鼠,于术后0、1、2、3、4、5 d各处死8只小鼠,作为AMI组。小鼠选择方式同AMI组,并采取与AMI小鼠相同的手术方式,但不进行左冠状动脉前降支结扎,于术后0、1、2、3、4、5 d各处死8只小鼠,作为Sham组。Sham组中剩余小鼠随机分为Sham+Ad-shCon组(8只)、Sham+Ad-shPAX8-AS1组(8只);AMI组中小鼠随机分为AMI+Ad-shCon组(8只)、AMI+Ad-shPAX8-AS1组(8只)。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测AMI组和Sham组小鼠术后心肌组织中PAX8-AS1水平变化。采用红四氮唑(TTC)染色法检测Sham+Ad-shCon组、Sham+Ad-shPAX8-AS1组、AMI+Ad-shCon组、AMI+Ad-shPAX8-AS1组小鼠梗死面积(IS)/危险区域(ARR);采用TUNEL染色法检测小鼠心肌细胞凋亡水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、免疫组化及蛋白质印迹法检测小鼠心肌组织PAX8-AS1(RT-PCR)、B淋巴细胞瘤-2相关x蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)及裂解的半胱天冬酶-3(cleaved-caspase3)表达水平。结果AMI组小鼠PAX8-AS1表达水平随着AMI术后时间的延长而增加,在术后第3天其PAX8-AS1表达水平达到最高值,并高于Sham组,差异有统计学意义(P<0.05)。与Sham+Ad-shCon组比较,Sham+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1表达下调,差异有统计学意义(P<0.05),AMI+Ad-shCon组及AMI+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3均上调,Bcl-2下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与AMI+Ad-shCon组比较,AMI+Ad-shPAX8-AS1组PAX8-AS1、IS/ARR、心肌细胞的凋亡指数、Bax及cleaved-caspase3下调,Bcl-2上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PAX8-AS1在AMI心肌组织中呈高表达,PAX8-AS1低表达可减少梗死面积,抑制心肌细胞凋亡,其作用可能与调节凋亡蛋白有关。 展开更多
关键词 lncRNA pax8-as1 急性心肌梗死小鼠 TUNEL染色 心肌细胞凋亡
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抑制长非编码RNA配对盒8反义RNA 1对心肌缺血再灌注细胞氧化应激和细胞凋亡水平的影响
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作者 朱新华 侯静雯 +3 位作者 刘蓓蓓 许慧娟 李秋影 张晓阳 《岭南心血管病杂志》 CAS 2021年第6期727-730,756,共5页
目的探讨抑制长非编码RNA配对盒8反义RNA 1(long non-coding RNA PAX8-AS1,lncRNA PAX8-AS1)对心肌缺血再灌注(myocardial ischemia-reperfusion,MI/R)细胞氧化应激和细胞凋亡水平的影响。方法以H9c2心肌细胞为研究对象,将细胞分为4组:... 目的探讨抑制长非编码RNA配对盒8反义RNA 1(long non-coding RNA PAX8-AS1,lncRNA PAX8-AS1)对心肌缺血再灌注(myocardial ischemia-reperfusion,MI/R)细胞氧化应激和细胞凋亡水平的影响。方法以H9c2心肌细胞为研究对象,将细胞分为4组:空白对照组、MI/R组、si-con组、si-PAX8-AS1组。实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组心肌细胞PAX8-AS1的表达水平;化学比色法检测各组细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)浓度;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;Western blot检测各组细胞B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bcl-2 associated X protein,Bax)蛋白表达。结果与空白对照组(1.00±0.06)相比,MI/R组(2.63±0.08)、si-con组(2.59±0.04)、si-PAX8-AS1组PAX8-AS1 mRNA表达水平(1.41±0.03)均显著升高,差异有统计学意义(F=687.811,P<0.05);与si-con组相比,si-PAX8-AS1组PAX8-AS1 mRNA表达水平显著降低,差异有统计学意义(LSD-t=27.281,P<0.05)。与空白对照组相比,MI/R组、si-con组、si-PAX8-AS1组MDA浓度、心肌细胞凋亡率及Bax蛋白表达均显著升高,SOD、GSH-Px浓度及Bcl-2蛋白表达均显著降低,差异有统计学意义(均P<0.05);与si-con组相比,si-PAX8-AS1组MDA浓度、心肌细胞凋亡率及Bax蛋白表达降低,SOD和GSH-Px浓度及Bcl-2蛋白表达均升高,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论抑制PAX8-AS1表达后可抑制心肌MI/R损伤细胞氧化应激水平并降低细胞凋亡水平。 展开更多
关键词 长非编码RNA配对盒8反义RNA 1 心肌缺血再灌注 氧化应激 细胞凋亡
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金丝桃苷抑制鼻咽癌细胞生物学行为的分子机制研究 被引量:1
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作者 葛塬 马佐鹏 王延华 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第4期344-350,共7页
目的 探讨金丝桃苷对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响和机制。方法 采用10、20及40 mg/L金丝桃苷的培养液孵育SUNE1细胞,依次记为低、中、高剂量组;将长链非编码RNA(lncRNA)配对盒基因8反义RNA 1(PAX8-AS1)过表达或敲低... 目的 探讨金丝桃苷对鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响和机制。方法 采用10、20及40 mg/L金丝桃苷的培养液孵育SUNE1细胞,依次记为低、中、高剂量组;将长链非编码RNA(lncRNA)配对盒基因8反义RNA 1(PAX8-AS1)过表达或敲低质粒、miR-494-3p模拟物及其阴性对照分别转染至40 mg/L金丝桃苷处理的SUNE1细胞,采用CCK-8实验、平板克隆实验、Transwell实验检测SUNE1细胞活力、克隆形成以及迁移和侵袭。蛋白质印记法分析基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达。实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测lncRNA PAX8-AS1和miR-494-3p表达。双荧光素酶报告实验分析lncRNA PAX8-AS1和miR-494-3p靶向关系。结果低、中、高剂量金丝桃苷降低SUNE1细胞活力、迁移数和侵袭数,下调MMP-2蛋白、MMP-9蛋白以及miR-494-3p表达水平,上调lncRNA PAX8-AS1表达水平(P<0.05)。lncRNA PAX8-AS1靶向负调控miR-494-3p表达。过表达lncRNA PAX8-AS1增强40 mg/L金丝桃苷对SUNE1细胞活力、迁移、侵袭以及MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用(P<0.05)。敲低lncRNA PAX8-AS1和过表达miR-494-3p均减弱40 mg/L金丝桃苷对SUNE1细胞活力、迁移、侵袭以及MMP-2、MMP-9蛋白表达的抑制作用(P<0.05)。结论 金丝桃苷可能通过上调lncRNA PAX8-AS1/miR-494-3p轴来抑制鼻咽癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 鼻咽肿瘤 药理作用分子作用机制 基因 肿瘤抑制 细胞增殖 肿瘤侵润 金丝桃苷 lncRNA pax8-as1 miR-494-3p
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