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PADI4在VPA诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡中的表达变化与作用机制研究
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作者 张丹凤 王杰伟 +2 位作者 吴沄桦 姜国胜 王希娣 《医学检验与临床》 2025年第7期46-51,共6页
目的:探讨PADI4表达变化在HDAC抑制因子丙戊酸钠(Valproate sodium,VPA)诱导胃癌细胞凋亡中的变化与作用机制。方法:CCK8细胞计数法检测胃癌细胞增殖水平的变化;RT-PCR检测胃癌细胞株中PADI4基因表达的水平;流式细胞术测定胃癌细胞的凋... 目的:探讨PADI4表达变化在HDAC抑制因子丙戊酸钠(Valproate sodium,VPA)诱导胃癌细胞凋亡中的变化与作用机制。方法:CCK8细胞计数法检测胃癌细胞增殖水平的变化;RT-PCR检测胃癌细胞株中PADI4基因表达的水平;流式细胞术测定胃癌细胞的凋亡水平;Western blot检测PADI4,Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果:VPA对胃癌SGC-7901、MGC-803和BGC-823细胞增殖株均具有明显的抑制作用,对SGC-7901的抑制作用最为明显。进一步证实VPA可以诱导SGC-7901胃癌细胞发生细胞凋亡,并伴有PADI4蛋白表达水平降低,凋亡相关蛋白Bcl-2蛋白表达水平降低,以及Bax蛋白表达水平的升高。PADI4表达干扰后,可以引起Bcl-2蛋白表达水平的降低和Bax蛋白表达水平的升高。结论:VPA通过降低PADI4表达水平抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,并通过降低Bcl-2/Bax比值促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃癌细胞 增殖 凋亡 VPA padi4
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中国河北地区汉族人群padi4-94单核苷酸多态性的研究 被引量:1
2
作者 冯忠军 梁芸 +1 位作者 闻海丰 牛艳丽 《河北医药》 CAS 2009年第19期2527-2529,共3页
目的研究中国河北地区健康汉族人群PADI4基因padi4-94位点多态性及其分布特征,比较种族间的基因型及等位基因频率分布差异。方法随机选取106例河北地区汉族个体,对padi4-94位点PCR产物进行直接测序。结果中国汉族人群padi4-94位点存在... 目的研究中国河北地区健康汉族人群PADI4基因padi4-94位点多态性及其分布特征,比较种族间的基因型及等位基因频率分布差异。方法随机选取106例河北地区汉族个体,对padi4-94位点PCR产物进行直接测序。结果中国汉族人群padi4-94位点存在三种基因型,AA、AG和GG,频率分别为22.6%、40.6%和39.8%,等位基因频率A为42.9%,G为57.1%。将日本、英国、西班牙、瑞士、北美等人群相关资料与本研究比较发现,此位点的基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论中国河北汉族人群padi4-94位点存在多态性,这种多态型在种族间可能不存在差异,这将为在汉族人群中研究padi4-94相关疾病提供可靠依据。 展开更多
关键词 padi4-94基因 单核苷酸多态性 直接测序 汉族人群
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padi4-104单核苷酸多态性与河北省汉族人群类风湿关节炎的相关性研究 被引量:2
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作者 冯忠军 牛会忠 +2 位作者 梁芸 牛艳丽 闻海丰 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第4期244-247,共4页
目的探讨中国河北汉族人群肽酰基精氨酸脱亚胺酶4-104(padi4-104)单核苷酸多态性(SNP)与RA易感性的关系。方法用PCR-DNA测序法对无血缘关系的115名RA患者和106名健康体检者的PADI4基因padi4-104位点的SNP进行检测分析。结果 padi4-104... 目的探讨中国河北汉族人群肽酰基精氨酸脱亚胺酶4-104(padi4-104)单核苷酸多态性(SNP)与RA易感性的关系。方法用PCR-DNA测序法对无血缘关系的115名RA患者和106名健康体检者的PADI4基因padi4-104位点的SNP进行检测分析。结果 padi4-104的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05),AA、AG、GG基因型和A、G等位基因分布在RA病例组与对照组间差异均无统计学意义(P值分别为0.368、0.245、0.252),比值比(OR)分别为0.709(95%可信区间:0.336~1.498)、0.636(95%可信区间:0.296~1.364)、0.800(95%可信区间:0.546~1.172)。结论河北汉族人群PADI4基因的padi4-104位点具有多态性,但此单核苷酸多态性与RA的易感性无相关性。 展开更多
关键词 肽酰基精氨酸脱亚胺酶4-104(padi4—104) 类风湿关节炎(RA) 单核苷酸多态性(SNP)
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PADI4及cAT与胃癌的相关性研究
4
作者 张国洲 邵松涛 +2 位作者 钱龙 闫永丽 刘汝冰 《安徽医学》 2014年第11期1492-1494,共3页
目的研究肽酰基精氨酸脱亚氨酶(PADI4)及其相关的产物瓜氨酸化抗凝血酶(cAT)与胃癌发病的相关性。方法收集胃癌患者和健康者血清,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中PADI4蛋白含量及cAT水平。结果和正常对照组相比,胃癌患者血清PA... 目的研究肽酰基精氨酸脱亚氨酶(PADI4)及其相关的产物瓜氨酸化抗凝血酶(cAT)与胃癌发病的相关性。方法收集胃癌患者和健康者血清,应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清中PADI4蛋白含量及cAT水平。结果和正常对照组相比,胃癌患者血清PADI4蛋白含量及cAT水平显著增高,手术及化疗后PADI4蛋白含量及cAT水平明显降低。结论PADI4及cAT与胃癌的发病密切相关,对其相关性研究可能为临床胃癌治疗提供新的靶点和策略。 展开更多
关键词 胃癌 padi4 CAT
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肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)对RA的影响 被引量:1
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作者 刘肖帅 葛鲁娜 +3 位作者 韩金祥 常晓天 朱有名 王世立 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期103-108,共6页
类风湿关节炎(RA)是一种病因和发病机制尚不清楚的自身免疫疾病,一般认为是由多种遗传因素和环境因素共同作用的结果。遗传因素中以组织相容性白细胞抗原HLA最为重要,另外作为非HLA的肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)也参与了RA的发病。PADI... 类风湿关节炎(RA)是一种病因和发病机制尚不清楚的自身免疫疾病,一般认为是由多种遗传因素和环境因素共同作用的结果。遗传因素中以组织相容性白细胞抗原HLA最为重要,另外作为非HLA的肽基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)也参与了RA的发病。PADI4是一种翻译后修饰酶,可在钙离子存在的情况下将精氨酸残基转化为瓜氨酸残基,瓜氨酸化后的蛋白质往往改变其分子构象,从而导致其生化活性亦发生改变。在不用种族的人群中,PADI4基因多态性与RA的易感性不尽相同。PADI4在RA患者血清中含量明显升高,在机体内产生自身抗PADI4抗体,并且PADI4瓜氨酸化多种蛋白质引起机体自身的免疫反应参与RA的发生与发展。近些年来的其他研究表明PAID4也参与了肿瘤、溃疡性结肠炎、多发性硬化症的发病。尽管针对PADI4的研究已经取得了很多重大进展,但是仍然存在很多悬而未决的问题等待科研工作者进一步的研究和证实。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 肽基精氨酸脱亚胺酶4 SNP 瓜氨酸化 padi4抗体
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白血病细胞的定向诱导分化及PADI4在诱导分化中的作用 被引量:3
6
作者 赵钰 林玮 《中南医学科学杂志》 CAS 2019年第1期85-88,共4页
白血病是血液系统的常见病和多发病,定向诱导白血病细胞分化是治疗白血病的重要策略之一。肽酰基精氨酸脱亚胺酶(PAD/PADI)是催化精氨酸转化为瓜氨酸的关键酶,在白血病诱导分化过程中起关键作用。国内外学者在白血病诱导分化的机制及策... 白血病是血液系统的常见病和多发病,定向诱导白血病细胞分化是治疗白血病的重要策略之一。肽酰基精氨酸脱亚胺酶(PAD/PADI)是催化精氨酸转化为瓜氨酸的关键酶,在白血病诱导分化过程中起关键作用。国内外学者在白血病诱导分化的机制及策略方面开展了众多研究。本文对诱导白血病细胞定向分化为粒细胞、树突状细胞及巨噬细胞的研究概况及PADI4在白血病细胞定向分化中的机制研究进展作一综述。 展开更多
关键词 白血病 诱导分化 肽酰基精氨酸脱亚胺酶(padi4) 全反式维甲酸
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融合蛋白GST-PADI4可溶性表达条件的优化及纯化 被引量:10
7
作者 柴政斌 张更林 +1 位作者 王学政 韩金祥 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期404-408,411,共6页
目的优化融合蛋白GST-PADI4的可溶性表达条件,并对蛋白进行纯化。方法对融合蛋白GST-PADI4工程菌的诱导温度(16、20、25、30、37℃)、诱导剂IPTG浓度(0.05、0.1、0.2、0.5、1 mmol/L)、诱导时菌液A600值(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0)、诱... 目的优化融合蛋白GST-PADI4的可溶性表达条件,并对蛋白进行纯化。方法对融合蛋白GST-PADI4工程菌的诱导温度(16、20、25、30、37℃)、诱导剂IPTG浓度(0.05、0.1、0.2、0.5、1 mmol/L)、诱导时菌液A600值(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0)、诱导时间(8、12、16、20、24 h)进行优化,分析融合蛋白GST-PADI4的可溶性表达情况;按优化的表达条件进行大量表达后,采用Sepharose 4B亲和层析柱对融合蛋白进行纯化。结果在16℃,菌液A600值约为0.4时,以0.1 mmol/L IPTG诱导12 h,融合蛋白GST-PADI4有较高的可溶性表达;纯化的融合蛋白纯度为91%。结论优化了融合蛋白GST-PADI4的可溶性表达条件,并获得了高纯度的可溶性融合蛋白,为后续研究PADI4蛋白的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 肽酰基精氨酸脱亚胺酶Ⅳ 融合蛋白 可溶性表达 纯化
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Expression of PADI4 in hepatocellular carcinoma 被引量:1
8
作者 Yang Lv Yan Xia Yaohua Wang Chongyuan Cai 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2009年第8期453-455,共3页
Objective: The aim of the research was to study peptidylarginine deiminase type 4 (PAD4/PADI4) expression and its tumodgenic mechanism in hepatocellular carcinomas. Methods: Expressions of PADI4 and p53 were inves... Objective: The aim of the research was to study peptidylarginine deiminase type 4 (PAD4/PADI4) expression and its tumodgenic mechanism in hepatocellular carcinomas. Methods: Expressions of PADI4 and p53 were investigated in tumors and non-tumor tissues by Western blot in patients with hepatocellular carcinomas. We constructed plasmid of PADI4-Flag and transfected it in Hela cells to investigate the mechanism. Results: Western blot analysis showed higher PADI4 expression in hepatocellular carcinomas than in the surrounding healthy tissues. Furthermore, by Western blot, we detected decreased p53 levels in the tumor tissues of patients with hepatocellular carcinomas compared to surrounding healthy tissues. In Hela cells transfected with PcDNA3.0-Flag-PADI4 plasmid, the expression of p53 decreased obviously. Conclusion: Our results suggest that PADI4 elevated in the tissues of hepatocellular carcinomas and induced tumorigenic by down-regulating p53 expression. 展开更多
关键词 hepatocellular carcinoma peptidylarginine deiminase type 4 (PAD4/padi4 tumorigenic mechanism
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类风湿关节炎患者血液中PADI4表达的研究
9
作者 索翠萍 万芙荣 +1 位作者 杨宜娥 孟庆松 《医学检验与临床》 2012年第4期11-13,共3页
目的探索肽基精氨酸脱亚胺基酶4(PADI4)在早期类风湿关节炎(RA)患者血液中的表达。方法收集早期RA(发病六个月)和早期骨关节炎(发病六个月)(OA)患者的血清,EusA方法检测患者血清中的PADI4,anti—CCP和RF的水平,同时检测超... 目的探索肽基精氨酸脱亚胺基酶4(PADI4)在早期类风湿关节炎(RA)患者血液中的表达。方法收集早期RA(发病六个月)和早期骨关节炎(发病六个月)(OA)患者的血清,EusA方法检测患者血清中的PADI4,anti—CCP和RF的水平,同时检测超过三年的RA患者血浆中这三种物质的水平。另外还采集了健康者以及系统性红斑狼疮(SLE)患者的血样进行分析。作为对照。结果68.7%的早期RA患者的PADI4水平明显高于早期OA患者。长时间患RA病人的PADI4表达量高于SLE病人,但与健康人水平没有多大的差剐。在RA患者血液中,PADI4的水平与RF和anti—CCP的水平密切相关。蛄论PADI4可能在RA发病起始过程中发挥作用,PADI4的表达水平可能与疾病活动争一些临床表现有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 肽基精氨酸脱亚胺酶 抗环瓜氨酸化多肽 类风湿因子
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PADI4基因与白血病细胞分化关系的实验研究 被引量:1
10
作者 李红江 潘素飞 +2 位作者 史露露 宋冠华 姜国胜 《中国医药科学》 2013年第8期28-30,共3页
目的体外探讨PADI4基因与白血病细胞分化的关系。方法检测HL60、K562、U937等9株不同白血病细胞株中PADI4在mRNA水平的表达情况,建立ATRA诱导HL60细胞分化模型,然后分别利用RT-PCR及WB技术检测PADI4基因在转录和翻译水平的表达变化。结... 目的体外探讨PADI4基因与白血病细胞分化的关系。方法检测HL60、K562、U937等9株不同白血病细胞株中PADI4在mRNA水平的表达情况,建立ATRA诱导HL60细胞分化模型,然后分别利用RT-PCR及WB技术检测PADI4基因在转录和翻译水平的表达变化。结果不同类型的白血病细胞株中PADI4表达情况不同。ATRA诱导HL60细胞后,在药物作用的96h内,随着药物作用时间的增加,在转录和翻译水平PADI4表达水平逐渐下调,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 PADI4与白血病细胞的分化有关,ATRA诱导HL60细胞分化后PADI4表达下调。 展开更多
关键词 白血病 肽酰基精氨酸脱亚胺酶-4 HL-60 细胞 细胞分化
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PADI4对NB4细胞分化过程中炎性因子表达水平的影响
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作者 郭庆伟 李府 +2 位作者 宋丽 王亚屏 杨晓梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1065-1070,共6页
目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4向粒细胞分化过程中肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)的表达变化及其是否参与炎性因子的表达。方法:建立ATRA诱导的NB4细胞分化模型,采用Wright-Giemsa染色观察细胞形态学... 目的:探讨全反式维甲酸(ATRA)诱导人急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4向粒细胞分化过程中肽酰基精氨酸脱亚胺酶4(PADI4)的表达变化及其是否参与炎性因子的表达。方法:建立ATRA诱导的NB4细胞分化模型,采用Wright-Giemsa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达;RT-PCR方法检测PADI4基因转录水平的表达;Western bolt方法检测PADI4翻译水平的表达;ELISA检测培养液中肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β的表达;siRNA技术干扰PADI4表达后ELISA检测TNF-α和IL-1β的表达。结果:ATRA诱导后NB4细胞胞浆增多,核浆比例降低,核有凹陷,杆状和分叶现象增多。流式细胞术检测结果显示细胞表面分子CD11b表达明显升高(P <0.01)。在分化模型中,RT-PCR及Western blot检测结果显示PADI4转录水平和翻译水平表达均明显升高(P <0.05)。ELISA方法检测培养液中TNF-α和IL-1β的表达水平明显升高(P<0.05),而siRNA技术干扰PADI4表达后TNF-α和IL-1β的表达水平明显下降(P <0.05)。结论:ATRA诱导NB4细胞向粒细胞分化过程中PADI4的表达升高,同时PADI4参与了NB4细胞分化过程中炎性因子的表达。 展开更多
关键词 NB4 肽酰基精氨酸脱亚胺酶4 分化 炎性因子
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云南人群中PTPN22和PADI4基因多态性与类风湿关节炎的关联研究 被引量:5
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作者 李倩 林克勤 +7 位作者 李芹 王静 俞娟 于亮 易薇 黄小琴 褚嘉祜 杨昭庆 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期111-115,共5页
目的探讨云南人群PTPN22和PADl4基因的7个SNP多态与类风湿关节炎易感性的相关性。方法选取192例类风湿关节炎患者和288名正常人进行病例对照研究。分别用PCR-RFLP法检测PTPN22基因的rs33996649和1858位点、PADl4基因的rsll203366和rs874... 目的探讨云南人群PTPN22和PADl4基因的7个SNP多态与类风湿关节炎易感性的相关性。方法选取192例类风湿关节炎患者和288名正常人进行病例对照研究。分别用PCR-RFLP法检测PTPN22基因的rs33996649和1858位点、PADl4基因的rsll203366和rs874881位点,用焦磷酸测序法检测PADl4基因的rsl635579、rs2428736和rs2240340共7个SNP位点的基因型。结果在7个SNP位点中,PADl4基因的rs2240340位点的等位基因频率和基因型频率在病例组和对照组间差异有统计学意义(P〈0.05)。结论在云南人群中PADl4基因的rs2240340多态性与类风湿关节炎的易感性存在相关性。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 基因多态性 PTPN22基因 padi4基因
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Nrf2抑制剂4f诱导白血病细胞凋亡中miRNA-4298/PADI4信号轴的作用研究 被引量:1
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作者 赵守臻 隋丽华 +8 位作者 丁慧 吴沄桦 李庆 孙晓琳 王欢 王朝喆 孙瑞婧 毕可红 姜国胜 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期683-691,共9页
目的:探讨miRNA-4298靶向PADI4调控P53在介导核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2;Nrf2)抑制剂4f诱导白血病细胞凋亡中的关键作用。方法:细胞生长密度和CCK-8计数法检测白血病细胞增殖水平;荧光定量qRT-PCR... 目的:探讨miRNA-4298靶向PADI4调控P53在介导核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2;Nrf2)抑制剂4f诱导白血病细胞凋亡中的关键作用。方法:细胞生长密度和CCK-8计数法检测白血病细胞增殖水平;荧光定量qRT-PCR法检测细胞株中PADI4和P53基因的表达水平;流式细胞术检测白血病细胞的周期百分率和凋亡率;Western blot法检测PADI4、P53、Bcl-2、Bax、caspase-3和caspase-9的蛋白质表达水平;二代测序检测miRNA和mRNA的基因表达水平;TargetScan数据库进行靶向预测PADI4上游的miRNA和下游关联基因;荧光素酶试验检测miRNA-4298靶向结合的PADI43′UTR及其活性调控作用。细胞转染试验检测siRNA、PADI4载体、miRNA mimics和miRNA inhibitor的干扰或拯救作用。结果:Nrf2抑制剂4f具有明显抑制THP-1、K562和U937细胞增殖水平以及诱导其凋亡的作用。4f主要通过miRNA-4298的靶向海绵作用降低PADI4表达水平,继而抑制白血病细胞增殖并诱导其凋亡。进一步研究发现,上述作用与PADI4表达水平降低后的下游P53表达水平升高有关。miRNA-4298/PADI4靶向诱导P53的表达水平升高,导致下游Bcl-2蛋白表达降低和Bax蛋白表达升高。Bcl-2/Bax比值的倒置继而激活caspase-3和caspase-9蛋白,导致白血病细胞发生凋亡现象。结论:miRNA-4298/PADI4/P53信号轴是介导4f靶向诱导白血病细胞凋亡的重要机制途径,也是靶向干预的新型信号通路。 展开更多
关键词 白血病细胞 凋亡 padi4 miRNA-4298 P53 Nrf2抑制剂4f
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肽基精氨酸脱亚胺酶4抗体定性检测试剂盒的研制及初步应用
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作者 刘肖帅 葛鲁娜 +3 位作者 韩金祥 常晓天 朱有名 王世立 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第11期1508-1510,共3页
目的研制肽基精氨酸脱亚胺酶4(Peptidylarginine deiminase 4,PADI4)抗体定性检测ELISA试剂盒,并初步探讨其对诊断类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的临床意义及应用价值。方法采用PADI4多肽片段作为包被抗原,制备PADI4抗体定性... 目的研制肽基精氨酸脱亚胺酶4(Peptidylarginine deiminase 4,PADI4)抗体定性检测ELISA试剂盒,并初步探讨其对诊断类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的临床意义及应用价值。方法采用PADI4多肽片段作为包被抗原,制备PADI4抗体定性检测试剂盒,并检测50份RA患者和283份健康人血清,评价该试剂盒的分析性能、精密性和稳定性。使用该试剂盒对181份临床确诊RA患者和353份健康人的血清样本进行初步检测。结果所制备的PADI4抗体定性检测试剂盒总体符合率为85.3%,灵敏度为46.0%,特异性为92.2%;板内变异系数分别为2.47%和4.26%,板间变异系数分别为4.24%和6.20%;在4℃保存6个月,总体符合率、灵敏度、特异性、精密性均无明显变化,稳定性良好。181份RA患者血清中阳性检出率为45.3%,353份健康人血清中阳性检出率为7.7%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论所研制的试剂盒可用于类风湿关节炎的临床辅助诊断。 展开更多
关键词 肽基精氨酸脱亚胺酶4 试剂盒 诊断 类风湿关节炎
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肽基精氨酸脱亚胺酶在脑梗死患者中的表达及意义
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作者 童洋萍 黄超平 +4 位作者 王振 唐建生 徐伟 李芳毅 胡珏 《中国实用神经疾病杂志》 2021年第21期1880-1888,共9页
目的研究肽基精氨酸脱亚胺酶(PADI4)在脑梗死患者中的表达及意义。方法选取2020-03—10南华大学附属长沙市中心医院神经内科收治住院的40例急性脑梗死患者,对照组为40例同期收治住院的与病例组年龄相匹配的非脑梗死患者,应用RT-qPCR技... 目的研究肽基精氨酸脱亚胺酶(PADI4)在脑梗死患者中的表达及意义。方法选取2020-03—10南华大学附属长沙市中心医院神经内科收治住院的40例急性脑梗死患者,对照组为40例同期收治住院的与病例组年龄相匹配的非脑梗死患者,应用RT-qPCR技术方法检测2组患者血液中PADI4的相对表达量。结果PADI4在病例组中的相对表达量为1.06(0.91~1.21),对照组为0.86(0.80~0.95),病例组的相对表达量较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);绘制ROC曲线进行诊断试验效能的评价,AUC为0.759,PADI4用于诊断脑梗死的敏感度为70.0%,特异度为82.5%,P<0.001。结论PADI4相对表达量与脑梗死的发生具有相关性,同时对脑梗死的发病有一定的诊断效能. 展开更多
关键词 脑梗死 肽基精氨酸脱亚胺酶 RT-QPCR 生物标志物 ROC曲线
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全反式维甲酸诱导HL60细胞分化分子机制探讨 被引量:1
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作者 禹林昌 宋冠华 +5 位作者 张之勇 史美燕 袁小芬 任霞 郭强 姜国胜 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第12期924-928,共5页
目的探讨全反式维甲酸(alltrans retinoic acid,ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中PADI4的变化与作用机制。方法 ATRA诱导HL-60细胞24、48、72和96h后,采用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的... 目的探讨全反式维甲酸(alltrans retinoic acid,ATRA)诱导HL-60细胞分化过程中PADI4的变化与作用机制。方法 ATRA诱导HL-60细胞24、48、72和96h后,采用Wright-Gimesa染色观察细胞形态学变化;采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b的表达变化;采用RT-PCR分析PADI4在基因水平的表达趋势,蛋白质印迹法检测PADI4在蛋白水平的表达变化;RNAi技术干扰PADI4后流式细胞仪检测CD11b变化,蛋白质印迹法检测PADI4、p42/44、p65、p105和p55等蛋白水平变化。结果 HL-60细胞经ATRA诱导后与对照组相比,Wright-Gimesa染色显示核质比明显减小,核有凹陷及分叶,杆状核、分叶核现象明显增多。流式细胞术检测结果显示,细胞表面分子CD11b表达由2.1%升高到48.9%,升高了346.8%,t=411.51,P<0.01;RT-PCR结果显示,PADI4在mRNA水平表达随时间延长逐渐升高,F=318.046,P<0.001,r=0.595;PADI4与内参基因GAPDH灰度值的比值从0.122±0.033升高到0.464±0.077,差异有统计学意义,F=16.002,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,PADI4在蛋白水平表达随时间延长逐渐升高,F=16.002,P<0.001,r=0.873;PADI4与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.077±0.045升高到0.263±0.095,差异有统计学意义,F=221.8,P<0.000 1。蛋白质印迹法检测结果显示,P-p44/42与内参GAPDH灰度值的比值分析从0.470±0.023下降到0.320±0.012,差异有统计学意义,F=92.942,P<0.001。结论 ATRA诱导HL-60细胞定向粒系分化的过程中,PADI4促进HL-60细胞向粒系分化,而且PADI4可能是通过促进MAPK信号通路中的p42/44磷酸化而发挥作用。 展开更多
关键词 HL-60 分化 padi4 磷酸化 P42/44 白血病
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