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基于PI3K p85/AKT/GSK-3β通路探讨隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的调控机制
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作者 崔云华 朱璐 +8 位作者 陈珂旭 陈子怡 吴璐一 马金丹 刘雅楠 黄艳 赵继梦 李昆珊 吴焕淦 《吉林中医药》 2025年第2期201-206,共6页
目的观察隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠甲状腺PI3K p85/AKT/GSK-3β通路的影响,探讨隔药饼灸干预实验性自身免疫性甲状腺炎的免疫调节机制。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药饼灸组和西药组。采用抗原免疫联合碘... 目的观察隔药饼灸对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠甲状腺PI3K p85/AKT/GSK-3β通路的影响,探讨隔药饼灸干预实验性自身免疫性甲状腺炎的免疫调节机制。方法SD大鼠随机分为正常组、模型组、隔药饼灸组和西药组。采用抗原免疫联合碘剂诱导法制备实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠模型,在隔药饼灸组中,采用“大椎与命门”或“天突与关元”穴位交替干预的方式,西药组采用优甲乐溶液灌胃,均干预30 d。治疗结束后,通过HE染色对大鼠甲状腺组织的形态学特征进行观察;采用ELISA法检测大鼠血清甲状腺自身抗体TPOAb、TGAb的浓度,RT-qPCR法检测大鼠甲状腺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18、PI3K p85、pAKT、GSK-3β、β-catenin的mRNA表达,免疫组化法检测甲状腺组织PI3K p85、pAKT、GSK-3β、β-catenin蛋白表达。结果隔药饼灸和西药均能改善EAT大鼠甲状腺组织炎症损伤;隔药饼灸降低血清TPOAb、TGAb浓度;降低甲状腺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18 mRNA及PI3K p85、pAKT、GSK-3βmRNA和蛋白表达,升高β-catenin mRNA和蛋白表达。西药组降低IL-1βmRNA表达。结论隔药饼灸可能通过抑制PI3K p85/AKT/GSK-3β通路的异常激活,减少促炎症因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-18的表达,减轻甲状腺炎症反应。 展开更多
关键词 实验性自身免疫性甲状腺炎 隔药饼灸 PI3Kp85/AKT/GSK-3β通路
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灵芝多糖对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85和GLUT4蛋白表达的影响 被引量:10
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作者 刘聪 冉春枭 +3 位作者 钟民涛 刘颖丽 刘磊 黄敏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2012年第8期715-717,732,共4页
目的研究灵芝多糖对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85和GLUT4蛋白表达的影响,探讨灵芝多糖改善胰岛素抵抗的分子机制。方法 3T3-L1前脂肪细胞经1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、地塞米松、胰岛素诱导分化成3T3-L1脂肪细胞,以葡萄糖氧化酶法... 目的研究灵芝多糖对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85和GLUT4蛋白表达的影响,探讨灵芝多糖改善胰岛素抵抗的分子机制。方法 3T3-L1前脂肪细胞经1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、地塞米松、胰岛素诱导分化成3T3-L1脂肪细胞,以葡萄糖氧化酶法测定培养液中残余的葡萄糖含量。比较二甲双胍组,检测培养液中葡萄糖含量及PI-3K p85和GLUT4蛋白表达变化。结果地塞米松联合胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,细胞对葡萄糖的摄取量减少。灵芝多糖可改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗。胰岛素抵抗细胞的PI-3K p85和GLUT4蛋白表达明显减少;应用灵芝多糖后,相关蛋白表达增加。结论灵芝多糖通过提高PI-3K p85和GLUT4蛋白的表达,参与胰岛素抵抗状态下3T3-L1细胞的葡萄糖代谢。 展开更多
关键词 灵芝多糖 胰岛素抵抗 PI-3K p85 GLUT4
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小檗碱对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85蛋白表达的影响 被引量:10
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作者 易屏 陆付耳 +3 位作者 陈广 徐丽君 董慧 王开富 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第19期2102-2106,共5页
目的:研究小檗碱对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85蛋白表达的影响,探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制.方法:分别以0.5mmol/L软脂酸与25mmol/L葡萄糖加0.6nmmol/L胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,予以小檗碱进行干预,同时... 目的:研究小檗碱对3T3-L1胰岛素抵抗细胞模型PI-3K p85蛋白表达的影响,探讨小檗碱改善胰岛素抵抗的分子机制.方法:分别以0.5mmol/L软脂酸与25mmol/L葡萄糖加0.6nmmol/L胰岛素诱导3T3-L1脂肪细胞产生胰岛素抵抗,予以小檗碱进行干预,同时以阿司匹林作为阳性对照,以2-脱氧-[3H]-D-葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率,用Western blot检测PI-3K p85蛋白的表达.结果:0.5mmol/L软脂酸作用24h或25mmol/L葡萄糖加0.6nmmol/L胰岛素作用18h分别使3T3-L1脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖转运抑制67%和60%,Western blot显示PI-3K p85蛋白表达减少,与正常对照组比较有统计学意义(P<0.01);同时加入小檗碱则可逆转上述效应使PI-3K p85蛋白表达增加,与模型组比较有明显差异(P<0.01),并且PI-3K p85蛋白的表达与小檗碱的剂量和作用时间呈依赖关系.结论:小檗碱可明显改善游离脂肪酸和高糖诱导的胰岛素抵抗,其分子机制可能与小檗碱提高PI-3K p85蛋白的表达有关. 展开更多
关键词 小檗碱 胰岛素抵抗 PI-3K p85 游离脂肪酸 高糖
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PI3K p85α在大肠癌癌变过程中的表达及意义 被引量:14
4
作者 孙嫣 田华 +2 位作者 肖法嫚 谢晓云 宋于刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期416-418,共3页
目的研究磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位(PI3K p85α)在大肠癌癌变过程中,即大肠正常组织、大肠腺瘤、大肠癌中的表达及意义。方法用免疫组织化学二步法检测试剂盒检测116例大肠病变组织标本中PI3K p85α的表达情况,用等级相关的秩和检验... 目的研究磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位(PI3K p85α)在大肠癌癌变过程中,即大肠正常组织、大肠腺瘤、大肠癌中的表达及意义。方法用免疫组织化学二步法检测试剂盒检测116例大肠病变组织标本中PI3K p85α的表达情况,用等级相关的秩和检验分析PI3K p85α在大肠病变组织中表达的意义及其与临床病理特征间的关系。结果PI3K p85α蛋白在大肠癌癌变过程中表达阳性率呈递增趋势,差异有明显统计学意义(P<0.05)。统计分析显示在大肠癌中PI3K p85α蛋白与患者的肿瘤分化程度无关,但是与临床分期相关(P<0.05)。结论在大肠癌的发生发展过程中存在PI3K p85α蛋白的异常表达并与临床分期密切相关,PI3K/AKT信号传导通路在大肠癌癌变过程中有重要作用。 展开更多
关键词 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 免疫组织化学
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普朗尼克P85与维拉帕米对苯妥英钠脑靶向分布的比较 被引量:3
5
作者 陈树达 陈子怡 +4 位作者 方子妍 周珏倩 李泽 潘小平 周列民 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期161-168,共8页
【目的】比较表面活性剂普朗尼克P85和维拉帕米对传统抗癫痫药物苯妥英钠的脑靶向分布作用。【方法】健康雌性Sprague-Dawley大鼠,25只,周龄9~10周,体质量190~240 g,随机分为5组,每组5只。具体为PHT组、+VPM组、+0.1%P85组、+1%P85组、+... 【目的】比较表面活性剂普朗尼克P85和维拉帕米对传统抗癫痫药物苯妥英钠的脑靶向分布作用。【方法】健康雌性Sprague-Dawley大鼠,25只,周龄9~10周,体质量190~240 g,随机分为5组,每组5只。具体为PHT组、+VPM组、+0.1%P85组、+1%P85组、+10%P85组。PHT组静脉注射苯妥英钠;+VPM组静脉注射苯妥英钠前30 min腹腔注射维拉帕米;+0.1%P85组、+1%P85组和+10%P85组静脉注射的苯妥英钠用相应浓度的普朗尼克P85溶液配制。给予苯妥英钠后分别在不同时间点取大脑微透析液和血液,最后处死大鼠分离肝脏和肾脏组织。高效液相色谱法检测各样本中苯妥英钠的浓度,评估苯妥英钠的脑靶向分布情况。【结果】+10%P85组、+1%P85组、+0.1%P85组和+VPM组与PHT组比较,脑组织间液和血浆苯妥英钠的曲线下面积比值分别提高113.5%、50.4%、21.9%和7.2%,各组之间两两比较差异均有统计学意义。+VPM组苯妥英钠药物浓度肝血比明显升高,与其余各组之间差异有统计学意义。各组苯妥英钠药物浓度肾血比之间比较,差异无统计学意义。【结论】相对于维拉帕米,普朗尼克P85可明显的提高苯妥英钠进入大脑的剂量,而且不会提高苯妥英钠在肝脏和肾脏的累积分布,具有脑靶向输送作用。 展开更多
关键词 普朗尼克p85 维拉帕米 微透析 脑靶向分布
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RNAi调下AKT1、PI3K P85表达抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖 被引量:5
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作者 梅玫 任玉 +6 位作者 周旋 赵津辉 王凡 高伟 祁艳斌 姚智 蒋伶活 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期51-56,共6页
目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染... 目的:探讨RNAi(RNA interference)技术抑制乳腺癌MCF-7细胞中AKT1和PI3KP85亚基的表达对MCF-7细胞增殖和侵袭等的影响。方法:将包含AKT1、PI3KP85两种siRNA开放阅读框的短发夹RNA(shRNA)重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K转染至乳腺癌MCF-7细胞。应用real-timePCR和Western blotting检测转染后目的基因mRNA和蛋白的表达水平,并用Western blotting检测目的基因被沉默后PCNA、cyclinD1和P53的表达情况。应用MTT法、流式细胞术、2-D和3-DMatrigel实验检测MCF-7细胞转染前后的细胞增殖周期和侵袭能力。结果:重组腺病毒质粒表达载体rAd5-siAKT1-siPI3K介导的靶向AKT1,PI3KP85shRNA可以有效抑制目的基因AKT1和PI3Kp85的mRNA和蛋白表达;下游相关因子PCNA、cyclinD1的表达亦下调,P53表达则上调。MTT法结果显示rAd5-siAKT1-siPI3K组细胞生长抑制率>50%,与未转染组和rAd5-siCtrl转染组比较,出现明显的G1/G0细胞周期阻滞;2-D和3-DMatrigel实验显示,未转染组和rAd5-siCtrl转染组细胞呈正常形态,而rAd5-siAKT1-siPI3K转染组细胞贴壁生长能力明显减低,细胞团块明显缩小。结论:靶向AKT1、PI3KP85亚基的shRNA技术可以抑制MCF-7细胞中AKT1、PI3KP85亚基的表达,抑制MCF-7细胞的体外增殖。 展开更多
关键词 RNA干扰 乳腺肿瘤 AKT1 PI3Kp85 增殖
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针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌PI3K p85的影响 被引量:10
7
作者 张梁 李梅 +2 位作者 易玮 许能贵 孙健 《新中医》 CAS 北大核心 2010年第10期112-114,共3页
目的:观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)之亚基p85的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为空白组、模型组和针刺组各8只,以高糖高脂高盐饮食复制胰岛素抵抗动物模型,采用葡萄糖氧化酶法、ELISA、实时荧光定量PCR、we... 目的:观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)之亚基p85的影响。方法:将24只SD大鼠随机分为空白组、模型组和针刺组各8只,以高糖高脂高盐饮食复制胰岛素抵抗动物模型,采用葡萄糖氧化酶法、ELISA、实时荧光定量PCR、western-blotting等方法,检测比较各组大鼠空腹血糖(FBG)、血浆胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性指数(ISI)、血清C-肽(C-P)和骨骼肌PI3K p85α mRNA及蛋白的表达。结果:模型组大鼠的FBG、FINS、C-P、PI3K p85α mRNA、PI3Kp85蛋白表达均较空白组显著升高(P<0.01),ISI显著降低(P<0.01);针刺组的FBG、FINS、C-P、PI3K p85α mRNA、PI3K p85蛋白表达均较模型组有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01),ISI显著升高(P<0.01)。结论:针刺干预可以纠正胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌PI3K p85蛋白的过度表达,使PI3K的活性升高,这可能是针刺改善胰岛素抵抗的作用机理之一。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 针灸疗法 针刺 骨骼肌PI3K p85 动物实验 大鼠
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肉桂醛对糖尿病大鼠腓肠肌IRS-1和P85α表达的影响 被引量:10
8
作者 李鸣一 徐焱成 张维 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2009年第6期723-726,731,共5页
目的:研究肉桂醛(Cin)降糖调脂作用及其对胰岛素受体底物1(IRS-1)和磷脂酰肌醇3激酶调节亚基P85α的影响。方法:Wistar大鼠,雄性,随机分为3组:正常对照组、糖尿病组(T2DM,高脂饮食诱导8周后,腹腔注射35mg/kg链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠... 目的:研究肉桂醛(Cin)降糖调脂作用及其对胰岛素受体底物1(IRS-1)和磷脂酰肌醇3激酶调节亚基P85α的影响。方法:Wistar大鼠,雄性,随机分为3组:正常对照组、糖尿病组(T2DM,高脂饮食诱导8周后,腹腔注射35mg/kg链脲佐菌素建立的糖尿病大鼠模型)和Cin+糖尿病组[T2DM+Cin,肉桂醛40mg/(kg·d),灌胃]。药物干预4周后,观察一般情况,检测体重、血糖血脂、胰岛素,采用免疫组化检测大鼠腓肠肌IRS-1和P85α蛋白水平。结果:实验末,T2DM+Cin组体重、血糖、胰岛素、甘油三酯、低密度脂蛋白均显著低于T2DM组(P<0.01),高密度脂蛋白高于T2DM组(P<0.05);T2DM+Cin组腓肠肌的IRS-1高于T2DM组,P85α低于T2DM组,差别有统计学意义(P<0.05)。结果:肉桂醛的降糖调脂作用可能与升高糖尿病大鼠腓肠肌中IRS-1和降低P85α水平有关。 展开更多
关键词 肉桂醛 2型糖尿病 胰岛素抵抗 胰岛素受体底物1 磷脂酰肌醇3激酶调节亚基p85α
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白藜芦醇通过PI3K p85/Akt信号轴抗HepG2肝癌细胞增殖 被引量:3
9
作者 周柯均 王城 +4 位作者 谢梦忆 侯永川 熊云麟 刘瑜 邓琳 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2020年第7期808-813,共6页
目的研究白藜芦醇对肝细胞癌细胞增殖的影响,并进一步研究其影响机制。方法以不同浓度(0、12.5、25.0和50.0μmol/L)的白藜芦醇分别处理对数生长期的HepG2细胞,采用CCK8法和实时细胞分析仪(RTCA)系统检测细胞的增殖情况。4组细胞处理48 ... 目的研究白藜芦醇对肝细胞癌细胞增殖的影响,并进一步研究其影响机制。方法以不同浓度(0、12.5、25.0和50.0μmol/L)的白藜芦醇分别处理对数生长期的HepG2细胞,采用CCK8法和实时细胞分析仪(RTCA)系统检测细胞的增殖情况。4组细胞处理48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用Western blot法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)p85、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、总蛋白激酶B(t-Akt)和细胞周期素A2(CyclinA2)蛋白的表达。结果白藜芦醇对HepG2细胞的生长具有明显的抑制作用,并且随着时间的延长和白藜芦醇浓度的增高,HepG2细胞的活力越来越低。白藜芦醇作用48 h后,各个浓度白藜芦醇对细胞的抑制效应逐渐增大,且50.0μmol/L浓度下细胞的抑制效应最大。进一步的RTCA系统研究也发现,白藜芦醇对HepG2细胞的NCI值降低作用具有时间浓度依赖关系。流式细胞仪检测结果显示,12.5、25.0和50.0μmol/L白藜芦醇可以诱导HepG2肝癌细胞发生细胞凋亡。Western-blot结果表明,与0μmol/L比较,12.5、25.0和50.0μmol/L白藜芦醇可以降低HepG2细胞内PI3K p85、p-AKT和CyclinA2蛋白的表达水平(P<0.05),但4组细胞内的t-Akt的表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论白藜芦醇可能通过PI3K p85/Akt信号轴来达到抗肝癌细胞增殖的作用,这为HCC的药物治疗提供了新的思路。 展开更多
关键词 白藜芦醇 HepG2细胞 磷脂酰肌醇3-激酶p85调节亚基 蛋白激酶B 增殖
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RNA干扰靶向抑制PI3K p85α表达对5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的影响 被引量:2
10
作者 杨慧 倪丽 +1 位作者 马豫茜 宋于刚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期1085-1088,共4页
目的探讨应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达对5-FU诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法培养已成功沉默PI3Kp85α表达的大肠癌LoVo细胞(PI3Kp85α/RNAi-LoVo)及LoVo对照组细胞,MTT法计算两组细胞5-FU的半数抑制率(IC50),JC-1染色检测线... 目的探讨应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达对5-FU诱导大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法培养已成功沉默PI3Kp85α表达的大肠癌LoVo细胞(PI3Kp85α/RNAi-LoVo)及LoVo对照组细胞,MTT法计算两组细胞5-FU的半数抑制率(IC50),JC-1染色检测线粒体膜电位(Δψm)的变化,Western blotting检测凋亡蛋白Bcl-6和Bim的表达。结果 PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞组5-FU的IC50值(1.056±0.03562μmol/L)显著低于LoVo对照组(2.796±0.10947μmol/L)(P=0.000),JC-1染色显示5-FU刺激48h后,PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞线粒体膜电位较LoVo对照组细胞显著降低,表明PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞对5-FU更敏感。5-FU刺激48h后,PI3Kp85α/RNAi-LoVo细胞组凋亡蛋白Bcl-6和Bim的表达较LoVo对照组细胞显著增加(P=0.000)。结论应用RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α表达可促进5-FU诱导大肠癌细胞LoVo的凋亡。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 磷脂酰3-激酶p85α亚基 RNA干扰 细胞凋亡 线粒体膜电位 5-氟脲嘧啶
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PI3Kp85α在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量:3
11
作者 龚小花 周琦 +2 位作者 吴文俊 王芳 陈肖俊 《温州医科大学学报》 CAS 2018年第5期371-374,共4页
目的:探讨PI3Kp85α在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法、Western blot和ELISA法检测116例甲状腺乳头状癌组织、90例甲状腺乳头状增生组织中PI3Kp85α蛋白的表达情况,并分析蛋白表达与患者性别、年龄... 目的:探讨PI3Kp85α在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学法、Western blot和ELISA法检测116例甲状腺乳头状癌组织、90例甲状腺乳头状增生组织中PI3Kp85α蛋白的表达情况,并分析蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移等临床病理特征的相关性。利用ROC曲线评价PI3Kp85α在甲状腺乳头状癌诊断中的价值。结果:PI3Kp85α蛋白的阳性表达率在甲状腺乳头状癌组织中显著高于甲状腺乳头状增生组织(69.8%vs.31.1%),2组间差异有统计学意义(P<0.05)。甲状腺乳头状癌中,PI3Kp85α蛋白表达与淋巴结转移、TNM分期相关(P<0.05);PI3Kp85α诊断甲状腺乳头状癌的ROC曲线下面积为0.966,当cut-off值取2.100时,诊断灵敏度(为92.2%)和特异度(为91.1%)较高。结论:甲状腺乳头状癌组织中PI3Kp85α蛋白的阳性表达率明显升高,且其表达水平与淋巴结转移和肿瘤分期相关,可能作为评估甲状腺乳头状癌侵袭性及预后的指标。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 磷脂酰肌醇-3激酶p85α亚单位 病理学 临床 诊断
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p85a基因对小鼠大脑皮层投射神经元迁移的影响 被引量:3
12
作者 陈林华 曹华腾 +2 位作者 涂晓萌 王教 李雪 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1054-1059,共6页
Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路,Pi3k激活可介导多种细胞功能,Pi3k由p85a和p110构成。该研究通过干扰p85a基因的表达,探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用。首先,构建p85a基因的对照质粒(scramble... Pi3k/Akt信号通路是近年来发现的参与细胞增殖、调控的重要通路,Pi3k激活可介导多种细胞功能,Pi3k由p85a和p110构成。该研究通过干扰p85a基因的表达,探讨其在小鼠大脑皮层投射神经元迁移中的作用。首先,构建p85a基因的对照质粒(scramble)、siRNA质粒(sip85a-1、sip85a-2)和过表达质粒(OEp85a);接着转染N2a细胞,48 h后,用定量PCR方法检测p85a基因mRNA的表达情况。随后,将sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒分别转入小鼠大脑,4 d后,借助免疫荧光方法检测皮层神经元的迁移情况。定量PCR结果显示:与对照相比,转染sip85a-1、sip85a-2均能显著降低N2a细胞中p85a基因的mRNA表达,抑制效率约为40%(P<0.05);而转染OEp85a质粒后,能显著增加p85a基因mRNA的表达,约为对照组的12倍(P<0.01)。胚胎电转结果中,各区EGFP阳性神经元数目定量分析显示,sip85a-1、sip85a-2、OEp85a质粒均能显著抑制神经元的迁移(P<0.05)。大脑发育阶段中,p85a基因在适当范围内,对平衡神经元迁移过程中起着重要作用。 展开更多
关键词 皮层投射神经元 迁移 Pi3k p85a 定量PCR
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包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸纳米粒子制备及体外释放行为考察 被引量:1
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作者 李资玲 熊向源 +1 位作者 龚妍春 李玉萍 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期1-4,共4页
目的:制备包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸(PLA-P85-PLA)纳米粒子并考察其形态及体外释放行为。方法:采用本体聚合法合成PLA-P85-PLA嵌段共聚物,透析法制备PLA-P85-PLA纳米粒子,UV测定包封率及载药量,HPLC测定紫杉醇的体外释放行为,MT... 目的:制备包埋紫杉醇的Pluronic P85/聚乳酸(PLA-P85-PLA)纳米粒子并考察其形态及体外释放行为。方法:采用本体聚合法合成PLA-P85-PLA嵌段共聚物,透析法制备PLA-P85-PLA纳米粒子,UV测定包封率及载药量,HPLC测定紫杉醇的体外释放行为,MTT测定纳米粒子的生物相容性。HPLC条件为流动相乙腈-PBS(50∶50),检测波长227 nm。结果:包埋紫杉醇的PLA-P85-PLA纳米粒子粒径140 nm,包封率56%,载药量9.4%,体外释放在前20 h呈快速释放形式,接着在长达近4 d的时间内呈现缓慢释放,且仅约12%被包埋的紫杉醇释放出来,包埋紫杉醇的PLA-P85-PLA纳米粒子处理的OVCAR-3细胞存活率(41%)明显低于空白紫杉醇(70%)。结论:PLA-P85-PLA嵌段共聚物是良好的药物载体,可用于包埋疏水性强的抗癌药物。 展开更多
关键词 紫杉醇 PLURONIC p85 纳米粒子 体外释放行为 高效液相色谱 细胞存活率 细胞毒性试验
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2型糖尿病大鼠不同组织中p85mRNA及蛋白表达变化与中药干预作用 被引量:1
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作者 宋菊敏 舒适 +1 位作者 刘小美 宋丽娜 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期520-522,共3页
目的:观察2型糖尿病大鼠不同组织中p85基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠给予复方黄连降糖片治疗8周。测定血糖、血清胰岛素,大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织p85mRNA... 目的:观察2型糖尿病大鼠不同组织中p85基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠给予复方黄连降糖片治疗8周。测定血糖、血清胰岛素,大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织p85mRNA的表达及其蛋白的表达。结果:复方黄连降糖片治疗组大鼠的血糖和血清胰岛素均有所下降,各组织p85的基因表达均显著提高。结论:不同组织p85的基因表达的提高可能是复方黄连降糖片治疗2型糖尿病的分子机理之一。 展开更多
关键词 2型糖尿病 复方黄连降糖片 p85 实验研究
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RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白对大肠癌细胞侵袭与转移的影响 被引量:1
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作者 孙嫣 田华 +2 位作者 谢晓云 肖法嫚 宋于刚 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期496-499,共4页
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白表达对大肠癌细胞侵袭与转移的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌LoVo细胞。用蛋白质印迹法筛选出一组抑制效率最高的细胞进行细胞划痕实验和Transwell实验... 目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白表达对大肠癌细胞侵袭与转移的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌LoVo细胞。用蛋白质印迹法筛选出一组抑制效率最高的细胞进行细胞划痕实验和Transwell实验。结果:转染shRNA/324干扰载体的LoVo细胞PI3Kp85α蛋白表达降低最明显,抑制率达77%,选择该组细胞作为有效干扰组进行后续实验。细胞划痕实验显示,干扰组细胞的划痕愈合能力明显低于对照组细胞(P<0.05)。Transwell实验显示,干扰组细胞的穿膜细胞数明显少于对照组细胞(P<0.05)。结论:PI3Kp85α蛋白表达缺失可明显降低大肠癌LoVo细胞的迁移运动能力,PI3Kp85α可能成为治疗大肠癌转移的新靶点。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 肿瘤转移
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小檗碱对2型糖尿病大鼠IRS-1/-2、p85基因表达的影响 被引量:10
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作者 舒适 刘小美 +2 位作者 宋丽娜 周金芳 宋菊敏 《浙江中医杂志》 2009年第4期254-257,共4页
目的:探讨小檗碱降血糖和治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予小檗碱治疗8周。氧化酶法测定血糖,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1/-2、p85mRNA的表达及Western blo... 目的:探讨小檗碱降血糖和治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予小檗碱治疗8周。氧化酶法测定血糖,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1/-2、p85mRNA的表达及Western blot法测定上述3个组织中IRS-1/-2、p85蛋白的表达。结果:治疗8周时,小檗碱治疗组大鼠的空腹血糖显著下降,各组织IRS-1/-2、p85基因表达均有不同程度的提高。结论:小檗碱治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-1/-2、p85基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。 展开更多
关键词 小檗碱 2型糖尿病 IRS-1 IRS-2 p85 实验研究
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PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌细胞的促凋亡作用 被引量:1
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作者 孙嫣 王林 曾晖 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2011年第3期212-215,共4页
探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达联合5-FU对大肠癌LoVo细胞的促凋亡作用。方法复苏培养PI3K p85α干扰组LoVo细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-LoVo)和LoVo对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,MTT法检测5-FU对两组细胞的半数抑制浓度(IC50)... 探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达联合5-FU对大肠癌LoVo细胞的促凋亡作用。方法复苏培养PI3K p85α干扰组LoVo细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-LoVo)和LoVo对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,MTT法检测5-FU对两组细胞的半数抑制浓度(IC50),Annexin-FITC标记法检测细胞凋亡。结果 Western blot结果显示LoVo干扰组细胞PI3K p85α蛋白抑制率为59%,MTT结果显示干扰组细胞5-FU的IC50值(4.57±0.16)μmol/L明显低于对照组细胞5-FU的IC50值(8.07±0.30)μmol/L(P=0.000),细胞凋亡实验显示,干扰组细胞对5-FU诱导凋亡的敏感性增加(P=0.000)。结论 PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU可促进大肠癌LoVo细胞凋亡,为基因治疗和化学药物联合治疗大肠癌提供新的策略。 展开更多
关键词 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 细胞凋亡 5-氟脲嘧啶
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PI3K p85α蛋白表达缺失对SW480细胞侵袭及转移的影响 被引量:1
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作者 孙嫣 郭升超 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第16期2640-2643,共4页
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α的表达对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移的影响。方法:构建慢病毒PI3K p85α干扰载体并转染SW480细胞,通过划痕实验、Transwell实验及黏附实验,明确PI3K p85α表达变化对大肠癌细胞侵袭及转移的影响。... 目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α的表达对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移的影响。方法:构建慢病毒PI3K p85α干扰载体并转染SW480细胞,通过划痕实验、Transwell实验及黏附实验,明确PI3K p85α表达变化对大肠癌细胞侵袭及转移的影响。结果:划痕实验结果显示低表达PI3K p85α的大肠癌细胞愈合能力下降;Transwell实验显示低表达PI3K p85α的大肠癌细胞迁移及侵袭能力下降;黏附实验显示低表达PI3K p85α的大肠癌细胞黏附能力降低。结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可明显抑制大肠癌细胞株SW480侵袭及转移能力,PI3K p85α可能成为大肠癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 P13K p85α RNA干扰 大肠癌 转移
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RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白对大肠癌细胞侵袭、转移的影响研究 被引量:1
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作者 宋洋 徐正磊 张茹 《中外医疗》 2012年第23期28-28,30,共2页
目的分析RNA干扰靶向抑制PI3K p85α表达对大鼠大肠癌细胞的侵袭及转移的影响。方法设计1条阴性载体及4条shRNA干扰载体转染大肠癌细胞,检测shRNA干扰载体对减少PI3K p85α蛋白表达的作用。结果 shRNA/324转染组PI3K p85α蛋白表达量降... 目的分析RNA干扰靶向抑制PI3K p85α表达对大鼠大肠癌细胞的侵袭及转移的影响。方法设计1条阴性载体及4条shRNA干扰载体转染大肠癌细胞,检测shRNA干扰载体对减少PI3K p85α蛋白表达的作用。结果 shRNA/324转染组PI3K p85α蛋白表达量降低幅度最大;转染shRNA/324载体的干扰组LoVo细胞迁移能力显著减弱(P<0.05)。结论 RNA干扰靶向可有效抑制PI3K p85α表达并降低肿瘤细胞运动迁移能力。 展开更多
关键词 RNA干扰 PI3K p85α蛋白 大肠癌
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RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白对大肠癌细胞增值的影响 被引量:1
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作者 孙嫣 田华 +2 位作者 谢晓云 肖法嫚 宋于刚 《数理医药学杂志》 2009年第3期274-277,共4页
目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞。用Western Blot筛选出一组抑制效率最高的细胞进行CCK-8细胞增值实验。结果:转染shRNA... 目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞。用Western Blot筛选出一组抑制效率最高的细胞进行CCK-8细胞增值实验。结果:转染shRNA/324干扰载体的SW480细胞PI3K p85蛋白表达显著降低,抑制率约90%,选择该组细胞作为有效干扰组。CCK-8细胞增值实验显示,接种48h、72h及96h后,干扰组细胞生长速度明显低于对照组细胞(P<0.05)。结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可降低大肠癌SW480细胞的增值速度,PI3K p85可能是大肠癌靶向治疗的新靶点。 展开更多
关键词 大肠癌 磷脂酰肌醇3-激酶p85α亚单位 RNA干扰 细胞增值
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