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p66^(Shc)对心肌细胞凋亡的调控作用研究
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作者 柳昊睿 张源 +2 位作者 刘维静 冯杰 徐瑞霞 《中国分子心脏病学杂志》 2025年第3期6862-6867,共6页
目的探讨p66^(Shc)对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建p66^(Shc)过表达腺病毒和对照腺病毒,分离1 d龄小鼠原代心肌细胞,培养24 h后分别使用p66^(Shc)过表达腺病毒和相应的对照腺病毒对细胞进行处理。利用实时荧光定量PCR(rev... 目的探讨p66^(Shc)对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建p66^(Shc)过表达腺病毒和对照腺病毒,分离1 d龄小鼠原代心肌细胞,培养24 h后分别使用p66^(Shc)过表达腺病毒和相应的对照腺病毒对细胞进行处理。利用实时荧光定量PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blot)法检测p66^(Shc)在小鼠原代心肌细胞中的过表达效率;利用Hoechst 33258染色试剂盒检测过表达p66^(Shc)对小鼠原代心肌细胞凋亡的影响;利用qRT-PCR及Western blot检测p66^(Shc)过表达后小鼠原代心肌细胞DNA损伤相关基因的表达。结果使用p66^(Shc)过表达腺病毒处理原代心肌细胞48 h后,与对照组比较,p66^(Shc)过表达组的p66^(Shc)表达显著升高;Hoechst 33258染色发现,p66^(Shc)过表达组心肌细胞凋亡程度较对照组增加;qRT-PCR结果显示,p66^(Shc)过表达组DNA损伤相关基因表达较对照组上调;Western blot结果表明p66^(Shc)过表达组DNA损伤反应相关蛋白磷酸化ATM水平明显上调。结论p66^(Shc)能够诱导DNA损伤的同时引起心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 p66^(Shc) 心肌细胞 DNA损伤应答 细胞凋亡
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慢肾康宁方对慢性肾衰大鼠肾组织氧化应激状态及Caspase-3,JNK,p66Shc蛋白表达影响 被引量:9
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作者 何铃 朱诗平 +1 位作者 金鑫 聂玲辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期559-564,共6页
目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余... 目的:观察中药慢肾康宁方对腺嘌呤诱发的慢性肾衰大鼠肾脏氧化应激状态及p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的影响。方法:60只wistar大鼠随机分成正常组,模型组,氯沙坦组,中药慢肾康宁方低、中、高质量分数组,除正常组给予生理盐水灌胃外,其余各组使用腺嘌呤灌胃复制慢性肾衰大鼠模型,时间是21d。检测模型建立成功后,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,其余各组对应给予等量药物进行治疗,疗程为28d。实验结束后,检测各组大鼠血清尿肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)的含量,采用化学比色法测定肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,提取肾组织蛋白,通过Western blotting进行p66Shc,Caspase-3和JNK蛋白的检测。结果:造模成功后,模型组Scr及BUN水平明显升高,显著高于正常组(P<0.01),SOD水平降低,MDA活性升高,与正常组相比差异具有统计学意义(P<0.05),肾脏组织内Caspase-3,JNK,p66Shc及其磷酸化位点p66Shc-ser36表达量明显上升(P<0.05)。经药物治疗后,中药低中高剂量组及氯沙坦组Scr和BUN均明显降低(P<0.01),SOD活性升高,中药高剂量组和氯沙坦组升高明显(P<0.05),其余治疗组具有升高趋势,MDA含量明显降低,氯沙坦组和中药高剂量降低趋势明显(P<0.05),其余各组存在降低趋势,Caspase-3,JNK,p66Shc及磷酸化蛋白p66Shc-ser36表达量较模型组相比均呈现出下降趋势(P<0.05)。结论:中药慢肾康宁方高剂量治疗组能够降低慢性肾衰大鼠血清Scr,BUN水平,改善肾间质纤维化程度,作用的机制可能与提高SOD水平,降低MDA表达,改善肾脏氧化应激状态及降低Caspase-3,p66Shc和JNK蛋白表达水平相关。 展开更多
关键词 慢肾康宁方 慢性肾衰 氧化应激 CASPASE-3 p66SHC JNK
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细胞复制衰老与H_2O_2诱导细胞早衰过程中P66^(SHC)基因表达谱及组蛋白修饰研究 被引量:2
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作者 徐薇 庄志雄 +3 位作者 杨建平 杨琳清 许玉玲 张文娟 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期777-782,共6页
目的研究细胞复制衰老与H2O2诱导细胞早衰过程中P66SHC基因表达变化及复制衰老过程中组蛋白修饰改变。方法人胚肺成纤维细胞固定传代直至停止增殖以制备复制衰老模型,过氧化氢诱导细胞早衰模型。采用Q-PCR方法动态观察细胞复制衰老与早... 目的研究细胞复制衰老与H2O2诱导细胞早衰过程中P66SHC基因表达变化及复制衰老过程中组蛋白修饰改变。方法人胚肺成纤维细胞固定传代直至停止增殖以制备复制衰老模型,过氧化氢诱导细胞早衰模型。采用Q-PCR方法动态观察细胞复制衰老与早衰过程中P66SHC以及组蛋白乙酰化酶EP300和去乙酰化酶HDAC1的基因表达,采用染色质免疫沉淀技术观察年轻细胞与衰老细胞P66SHC基因启动子区的组蛋白修饰情况。结果 P66SHCmRNA表达与染毒剂量正相关(R=0.909,P=0.000),EP300表达与染毒剂量负相关(R=-0.922,P=0.000),HDAC1与染毒剂量不相关(R=-0.066,P=0.839)。P66SHC表达与群体倍增代数正相关(R=0.743,P=0.006),EP300表达和HDAC1表达与群体倍增代数负相关(R=-0.709,P=0.010;R=-0.599,P=0.040)。与复制衰老组相比,早衰组细胞P66SHC、EP300及HDAC1的基因表达量均有显著性差异(t=-19.733,P=0.000;t=11.103,P=0.000;t=9.728,P=0.001)。老年细胞的P66SHC基因调控区的H3组蛋白修饰丰度均降低;在转录起始点上游3.0kb处抑制基因转录的H3K9-tri-Me修饰几乎为零,选择启动子(转录起始点下游3.8kb)处的组蛋白修饰以活化转录的修饰为主。结论 P66SHC、EP300和HDAC1均可能参与细胞衰老和氧化应激诱导的细胞早衰,早衰组细胞P66SHC基因表达与复制衰老组不同;组蛋白修饰参与P66SHC的基因表达调控。 展开更多
关键词 过氧化氢 复制性衰老 氧化应激 p66SHC组蛋白修饰
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山茱萸纳米水提液对衰老小鼠脑组织p66^(shc)表达的影响 被引量:3
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作者 王明富 欧芹 +2 位作者 朱贵明 王昭 冷莉莉 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1249-1250,共2页
目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药... 目的探讨山茱萸制剂对自然衰老小鼠脑组织的磷酸化酪氨酸信号适配蛋白(66kilodalton isoform of shcgene products,p66shc)表达的影响。方法人工饲养自然衰老小鼠11~12月龄36只、青年鼠8只,分6组:青年对照组、衰老对照组和给药组,给药组又分为山茱萸纳米水提液和醇提液的大剂量、小剂量组;各组给药30d,然后断头取小鼠肝组织做超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)检测,RT-PCR法测定小鼠脑组织p66shc的表达。结果山茱萸纳米水提和醇提液给药组SOD活性与衰老对照组相比显著升高(P<0.01),而MDA含量和脑p66shc的表达显著降低(P<0.01);山茱萸纳米制剂水提液小剂量、大剂量组和醇提液比较上述作用均更显著(P<0.01)。结论山茱萸能够明显降低衰老小鼠脑p66shc活性亚基的表达,从而影响p66shc活性起到延缓衰老的作用。山茱萸纳米水提取液小剂量组的作用优于山茱萸纳米醇提液各组。 展开更多
关键词 山茱萸 p66shc活性 衰老小鼠 脑组织 纳米水提取液
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基于PKCβ/P66shc信号通路探讨针刺干预肥胖糖尿病大鼠氧化应激的作用机制 被引量:12
5
作者 尹刚 申国明 +1 位作者 江爱娟 李静雅 《针刺研究》 CSCD 北大核心 2021年第8期642-648,678,共8页
目的:观察针刺"足三里""三阴交"对肥胖糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响,探讨针刺改善肥胖糖尿病的作用机制。方法:SPF级雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、针刺干预组、非经非穴组、二甲双胍组,每组1... 目的:观察针刺"足三里""三阴交"对肥胖糖尿病大鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响,探讨针刺改善肥胖糖尿病的作用机制。方法:SPF级雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、针刺干预组、非经非穴组、二甲双胍组,每组10只。高脂饲料持续喂养8周联合链脲佐菌素腹腔注射复制肥胖糖尿病大鼠模型。针刺干预组电针"足三里""三阴交",非经非穴组电针"足三里""三阴交"旁开5 mm处,20 min/次;二甲双胍组予300 mg/kg二甲双胍灌胃。记录大鼠体质量和体长,计算Lee’s指数,监测空腹血糖(FBG)及血脂,ELISA法检测空腹血清胰岛素(FINS)水平并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(ISI),TBA比色法检测血清丙二醛(MDA)水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性,三硫代双硝基苯甲酸直接法测定血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,活性氧(ROS)试剂盒检测血清ROS水平,RT-PCR技术检测胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平,HE染色法观察肝脏、脂肪组织病理形态变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组Lee’s指数、FBG、FINS、HOMA-IR及血浆总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)及血清MDA水平、ROS活性及胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平均升高(P<0.05,P<0.01),ISI、血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL)和血清SOD、GSH-Px水平均降低(P<0.05,P<0.01);与模型对照组比较,针刺干预组、二甲双胍组Lee’s指数、FBG、FINS、HOMA-IR及血浆TC、TG、LDL及血清MDA水平、ROS活性及胰腺组织中P66shc、PKCβmRNA表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),ISI、血浆HDL和血清SOD、GSH-Px水平均升高(P<0.05,P<0.01)。模型对照组、非经非穴组可见许多白色脂肪细胞分布,正常对照组、针刺干预组、二甲双胍组白色脂肪细胞较模型对照组及非经非穴组明显减少,细胞形态变小。正常对照组、针刺干预组、二甲双胍组肝脏细胞排列呈索状,结构清晰,模型对照组、非经非穴组肝脏细胞仍呈放射状排列,但较多肝细胞胞质内有小泡状脂滴空泡。结论:针刺"足三里""三阴交"可以改善肥胖糖尿病大鼠的糖脂代谢及胰岛素抵抗,这一作用可能与PKCβ/P66shc信号通路及氧化应激有关。 展开更多
关键词 电针 肥胖糖尿病 PKCβ/p66shc信号通路 氧化应激
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p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达及其与胞质氧化还原稳态的关系 被引量:3
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作者 张通 栗瑞兰 +4 位作者 范晓梅 刘春洁 海日汗 霍敏 张家新 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期2183-2192,共10页
[目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于... [目的]研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。[方法]试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于屠宰场的绵羊卵巢。分别收集成熟前优质和劣质、常规成熟24 h及成熟30 h老化的卵母细胞,采用实时荧光定量PCR对成熟前后不同质量绵羊卵母细胞中p66Shc mRNA的表达量进行分析,利用细胞免疫荧光结合MitoTracker Red探针对p66Shc蛋白和线粒体进行共定位,同时利用荧光探针DCFH-DA和卵母细胞自发荧光分别对成熟前后不同质量卵母细胞内ROS水平和氧化还原稳态进行检测。此外,采用外源H2O2诱导的氧化应激处理成熟前优质卵母细胞,并对p66Shc蛋白的表达及定位进行了检测分析。[结果]实时荧光定量PCR结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc mRNA表达量分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。然而优质卵母细胞成熟前后p66Shc mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)。共定位结果表明,p66蛋白主要分布在线粒体分布活跃的区域。细胞免疫荧光结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc蛋白表达量也分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。与成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞相比,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞表现出线粒体分布紊乱和活性下降、ROS水平升高以及氧化还原稳态的失衡。此外,与未添加外源H2O2的对照组相比,外源H2O2处理成熟前优质卵母细胞诱导的氧化应激显著(P<0.05)上调p66Shc蛋白的表达并促使p66Shc由胞质向细胞核定位。[结论]p66Shc基因在劣质和老化的绵羊卵母细胞中呈现高水平的表达,H2O2诱导的氧化应激显著上调p66Shc蛋白的表达并影响其亚细胞定位。总之,绵羊卵母细胞中p66Shc表达上调影响了胞质的氧化还原稳态。 展开更多
关键词 绵羊卵母细胞 p66SHC 线粒体 ROS 氧化还原稳态
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结肠癌中雌激素受体和衔接蛋白p66Shc的表达和意义 被引量:3
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作者 张莉 田月 +3 位作者 李鹏 吴咏冬 张澍田 林明丰 《胃肠病学》 2012年第9期527-530,共4页
背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特... 背景:雌激素和雌激素受体(ER)在结肠癌的发生、发展中起重要作用,然而ER在其中的具体作用机制尚不完全清楚。在甾类激素敏感性肿瘤细胞中,甾类激素可显著上调衔接蛋白p66Shc表达并刺激细胞增殖。目的:探讨ER和p66Shc在结肠癌中的表达特点及其临床意义。方法:以免疫组化方法检测65例石蜡包埋结肠癌组织及其癌旁非癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达,分析p66Shc蛋白表达与结肠癌临床病理特征的相关性。结果:ER和p66Shc蛋白表达分别定位于细胞核和细胞质,结肠癌组织中的ER和p66Shc蛋白表达阳性率显著高于癌旁非癌组织(ER:47.7%对0%,P<0.01;p66Shc:49.2%对0%,P<0.01),且两者呈正相关(r=0.43,P<0.05)。p66Shc蛋白表达与结肠癌患者的性别、年龄以及原发肿瘤部位、肿瘤大小、大体类型、浸润深度、淋巴结转移、AJCC分期均无相关性,而与肿瘤组织学分级相关(高分化:22.2%,中分化:47.7%,低分化:75.0%,P=0.046)。结论:结肠癌可能是一种雌激素敏感性肿瘤。雌激素及其受体可能与p66Shc共同参与了结肠癌的发生、发展。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 受体 雌激素 p66SHC 免疫组织化学
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急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系 被引量:3
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作者 陈亮 徐标 +2 位作者 黄为 钟静 李声娜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期159-162,共4页
目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检... 目的探讨急性心肌梗死患者外周血单个核细胞P66Shc mRNA的表达及其与氧化应激的关系。方法选择经冠状动脉造影检查及治疗的患者67例,根据临床表现和冠状动脉造影结果分成健康对照组23例,稳定型心绞痛组23例,急性心肌梗死组21例。通过检测血中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平,对机体氧化应激状态进行全面分析,在此基础上运用RT-qPCR比较三组外周血单个核细胞中P66Shc mRNA的表达,并对P66Shc mRNA的表达与MDA及SOD进行相关性分析。结果急性心肌梗死组MDA明显高于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.05),而SOD明显低于稳定型心绞痛组和健康对照组(P<0.01);急性心肌梗死组P66Shc mRNA的表达明显高于稳定型心绞痛组及健康对照组(P<0.01),而在稳定型心绞痛组与健康对照组之间无明显差别(P>0.05),且P66Shc mRNA的表达量与MDA水平呈正相关(r=0.49,P=0.024),与SOD水平相关性不明显。结论急性心肌梗死时P66Shc mRNA表达增高,P66Shc可能介导了斑块由稳定到不稳定性转化的机制。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 p66SHC 氧化应激
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氧化应激下的p66^(Shc)调控作用 被引量:5
9
作者 顾闻 陈川 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期870-873,共4页
氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激... 氧化应激产生的过量活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)可通过分子毒性作用或相关信号通路影响相关病理生理学过程.p66Shc是Shc蛋白家族的重要成员之一.氧化应激下p66Shc能被蛋白激酶Cβ(protein kinase Cβ,PKCβ)、Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase,JNK)和p53等激活,促进线粒体产生ROS.本文将对氧化应激下p66Shc的作用以及调控其作用的信号转导机制做一综述. 展开更多
关键词 p66SHC 氧化应激 蛋白激酶Cβ(PKCβ) Jun氨基末端激酶
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人胚肺成纤维细胞衰老过程中P66Shc启动子区CpG岛甲基化状态 被引量:1
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作者 张文娟 纪卫东 +2 位作者 杨淋清 许玉玲 庄志雄 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期321-324,共4页
目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐... 目的探讨人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中P66Shc的表达改变及其启动子区域的甲基化水平变化。方法荧光定量PCR方法检测细胞衰老过程中的mRNA表达改变,甲基化特异性PCR(MSP)定性检测甲基化的变化情况,亚硫酸氢盐修饰基因组结合克隆测序定量检测启动子区域CpG岛甲基化水平。结果人胚肺成纤维细胞复制性衰老及过氧化氢诱导的早衰过程中,P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,中年细胞组及复制性衰老细胞组mRNA表达分别升高至1.78和1.73倍,而早衰组却显著增高,至7.16倍;年轻细胞组、复制性衰老细胞组及早衰组P66Shc启动子区域CpG岛呈高甲基化水平,分别为94%、90%和90%。结论人胚肺成纤维细胞复制性衰老过程中P66Shc的mRNA表达水平逐渐升高,其启动子区CpG岛呈高的甲基化水平,不参与该基因表达调控。 展开更多
关键词 细胞衰老 早衰 p66SHC 甲基化
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慢病毒载体靶向介导p66shc基因沉默 被引量:1
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作者 张婵 董文斌 +5 位作者 赵帅 李清平 康兰 雷小平 郭琳 翟雪松 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第1期73-75,83,共4页
目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白... 目的构建p66shc基因重组慢病毒表达载体,并将之转染至293T细胞,通过RNA干扰致使p66shc基因沉默,为进一步研究p66shc基因功能奠定基础。方法筛选3个RNA靶点,命名为p66shc-shc1、p66shc-shc2、p66shc-shc3,与双酶切后的pLenR-绿色荧光蛋白(GPH)(含有GFP表达)连接,转化入感受态的DH5α细胞,挑取阳性克隆测序正确后,与pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G一起转染293T细胞,于倒置荧光显微镜下检测GFP的表达,证实病毒包装成功。使用荧光定量PCR及Western blot技术检测p66shc在基因及蛋白水平的表达,选取有效沉默p66shc基因的p66shc-shc1靶点,为后续试验做准备。结果成功构建表达p66shc的shRNA慢病毒载体并转染至真核生物细胞内,通过荧光定量PCR及Western blot技术检测其通过RNA干扰导致细胞内p66shc基因沉默。结论靶向表达p66shc的shRNA慢病毒载体,转染入真核生物细胞内可通过RNA干扰在分子及蛋白水平导致p66shc基因沉默。 展开更多
关键词 慢病毒属 RNA干扰 p66SHC
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p66^(Shc)基因调控早期胚胎发育阻滞的研究进展 被引量:1
12
作者 胡军和 阳仲斌 +5 位作者 李伟 金晨钟 曾智 吴娟 张雪娇 王艳 《安徽农业科学》 CAS 2015年第22期92-93,102,共3页
在胚胎早期发育过程中,存在易停留在某个阶段的现象,称之为发育阻滞,如小鼠胚胎的2-细胞阻滞等。从分子结构及功能、调控活性氧水平和作用网络方面,综述了p66Shc基因调控早期胚胎发育阻滞的研究进展,以期对该领域的研究提供借鉴。
关键词 p66^Shc 发育阻滞 活性氧水平 早期胚胎
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衔接蛋白p66Shc在糖尿病及其并发症中的作用 被引量:3
13
作者 聂静 孙林 刘伏友 《国际病理科学与临床杂志》 CAS 2009年第3期250-253,共4页
p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66... p66Shc是调控氧化应激和生命周期的关键蛋白。在氧化应激信号的刺激下,p66Shc在线粒体内氧化细胞色素C产生大量活性氧,造成细胞的氧化损伤。最新的研究表明,p66Shc可能在衰老及衰老相关的疾病如糖尿病中扮演关键的角色。本文简要综述p66Shc的结构、功能、相关的信号通路及其在糖尿病领域的最新研究进展。 展开更多
关键词 p66SHC 氧化应激 活性氧 糖尿病
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SIRT1/p66Shc介导小檗碱对阿霉素诱导心肌毒性拮抗作用研究 被引量:1
14
作者 武彦昭 张兰 +5 位作者 武子笑 单菊彤 时萍 刘妍 杨菲 熊晨 《广州中医药大学学报》 CAS 2022年第6期1374-1382,共9页
【目的】基于细胞水平观察小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p66Shc通路的影响,探讨小檗碱抗阿霉素所致心肌毒性作用的机制。【方法】应用阿霉素(1μmol/L)处理人心肌细胞系AC16建立阿霉素心肌毒性模型。... 【目的】基于细胞水平观察小檗碱对阿霉素诱导心肌细胞沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)/p66Shc通路的影响,探讨小檗碱抗阿霉素所致心肌毒性作用的机制。【方法】应用阿霉素(1μmol/L)处理人心肌细胞系AC16建立阿霉素心肌毒性模型。四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率,二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色荧光显微镜照像测定细胞活性氧簇(ROS)水平,罗丹明123(Rh123)染色荧光显微镜照像测定线粒体膜电位(MMP),荧光染料Rhod2-AM(分子探针)测定线粒体Ca^(2+)浓度([Ca^(2+)]m),蛋白免疫印迹(Western Blot)法测定细胞SIRT1、p66Shc及凋亡蛋白Bax的表达水平。【结果】用1μmol/L小檗碱预处理可明显抑制1μmol/L阿霉素引起的AC16心肌细胞毒性作用,使细胞存活率升高,表现为抑制阿霉素引起的细胞内ROS生成增多、抑制阿霉素致细胞凋亡(使凋亡蛋白Bax表达下调)和减轻线粒体损伤。阿霉素处理的AC16心肌细胞中p66Shc表达增强且SIRT1蛋白表达下降;预先加用小檗碱组中,阿霉素上调p66Shc及下调SIRT1表达的效应显著减弱;而1μmol/L EX527(SIRT1抑制剂)预处理则加重阿霉素引起的AC16细胞损伤,这种细胞损伤未能被小檗碱预处理所改善。【结论】小檗碱可通过SIRT1介导的p66Shc抑制保护AC16心肌细胞对抗阿霉素诱导的心肌毒性。 展开更多
关键词 小檗碱 阿霉素 心肌毒性 SIRT1/p66Shc通路 线粒体损伤 氧化损伤 钙超载 细胞凋亡 AC16细胞
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综合血液净化对慢性肾功能衰竭患者p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1的影响 被引量:3
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作者 李文冬 张艳琴 +1 位作者 王静 辛小龙 《中国煤炭工业医学杂志》 2018年第4期386-389,共4页
目的探讨综合血液净化对慢性肾功能衰竭(CRF)患者p66Shc蛋白、可溶性fms样酪氨酸激酶受体1(sFlt-1)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的影响。方法选取2015年1月—2017年12月在该院接受维持性血液透析>3个月的108例CRF患者作为研... 目的探讨综合血液净化对慢性肾功能衰竭(CRF)患者p66Shc蛋白、可溶性fms样酪氨酸激酶受体1(sFlt-1)和组织金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的影响。方法选取2015年1月—2017年12月在该院接受维持性血液透析>3个月的108例CRF患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为血液透析组(HD组)、血液透析+血液滤过组(HD+HF组)和血液透析+血液滤过+血液灌流组(HD+HF+HP组),每组36例。比较三组入组前、入组后6个月和12个月的p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1水平。结果三组入组后6个月、12个月血清p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1水平均明显低于入组前(P<0.05),HD+HF+HP组入组后6个月、12个月血清p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1水平均明显低于HD组和HD+HF组(P<0.05),HD+HF组入组后6个月、12个月血清p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1水平均明显低于HD组(P<0.05)。结论综合血液净化可有效降低CRF患者体内血清p66Shc蛋白、sFlt-1和TIMP-1水平。 展开更多
关键词 综合血液净化 慢性肾功能衰竭 p66SHC 可溶性fms样酪氨酸激酶受体l 组织金属蛋白酶抑制因子-1
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膀胱癌中衔接蛋白p66Shc的表达及临床意义 被引量:2
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作者 王西川 樊春华 冉建华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期674-678,共5页
目的观察p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达,分析其表达与膀胱癌临床分期、病理类型、转移等的关系,以及p66Shc影响膀胱癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 应用免疫组化法和Western blot技术检测32例膀胱癌中p66Shc蛋白的表达,分析p66Shc蛋白... 目的观察p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达,分析其表达与膀胱癌临床分期、病理类型、转移等的关系,以及p66Shc影响膀胱癌细胞增殖、凋亡的分子机制。方法 应用免疫组化法和Western blot技术检测32例膀胱癌中p66Shc蛋白的表达,分析p66Shc蛋白表达和临床病理特征的关系。Western blot技术检测T24细胞中PKCβ和p66Shc蛋白及其磷酸化水平,以及p53、Bax和BCL-2蛋白水平。结果 膀胱癌组织中p66Shc阳性率为65.6%(21/32),其在T3+T4期膀胱癌中的表达显著高于T1+T2期膀胱癌( P <0.05);p66Shc表达与患者年龄、性别、分化程度无关( P >0.05)。LY333531下调T24细胞中PKCβ和p66Shc蛋白及其磷酸化水平,以及下调p53、Bax和上调BCL-2的蛋白水平。结论 p66Shc蛋白在膀胱癌中的表达与膀胱癌临床分期相关,随着pTNM分期增加而表达增多。p66Shc磷酸化促进肿瘤细胞的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 p66SHC 免疫组织化学
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p66shc基因表达与老年糖尿病患者早期肾损伤的相关性 被引量:1
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作者 石晶 曹喆 贾琳 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期603-605,共3页
目的研究p66shc基因在老年糖尿病患者外周血单核细胞中的表达及其与早期肾损伤指标的关系。方法采用实时PCR技术检测74例老年糖尿病患者和48例健康老年人(对照组)外周血单核细胞中p66shc基因表达水平,结合临床资料分析p66shc与早期肾损... 目的研究p66shc基因在老年糖尿病患者外周血单核细胞中的表达及其与早期肾损伤指标的关系。方法采用实时PCR技术检测74例老年糖尿病患者和48例健康老年人(对照组)外周血单核细胞中p66shc基因表达水平,结合临床资料分析p66shc与早期肾损伤指标尿微量白蛋白(m Alb)、转铁蛋白(TRF)、免疫球蛋白(Ig G)、α1-微球蛋白(α1-MG)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)之间的相关性。结果 p66shc基因在老年糖尿病患者中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);与对照组相比,老年糖尿病患者m Alb、TRF、Ig G、α1-MG、NAG均显著升高(均P<0.01),并均与p66shc基因的表达水平呈正相关。结论 p66shc与老年糖尿病患者早期肾损伤密切相关,可为老年糖尿病患者肾损伤的早期诊断提供新的依据。 展开更多
关键词 p66SHC 糖尿病 肾损伤
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siRNA干扰技术沉默p66SHC对结直肠癌细胞生物学特性的影响 被引量:1
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作者 杨洲 刚海菊 +3 位作者 覃先蓬 贾贵清 王波 杨春 《临床和实验医学杂志》 2018年第13期1360-1363,共4页
目的探讨干扰p66shc基因表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、迁移的影响。方法实验分为对照组(不做任何处理)、NC-siRNA组和p66SHC-siRNA组,NC-siRNA组、p66SHC-siRNA组通过Lipofectamine 2000将特异性siRNA转染入结直肠癌HCT116细胞... 目的探讨干扰p66shc基因表达对结直肠癌HCT116细胞增殖、迁移、迁移的影响。方法实验分为对照组(不做任何处理)、NC-siRNA组和p66SHC-siRNA组,NC-siRNA组、p66SHC-siRNA组通过Lipofectamine 2000将特异性siRNA转染入结直肠癌HCT116细胞中。荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中p66SHC的表达量;四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell法观察细胞迁移、侵袭的变化;Western Blot检测细胞EMT相关蛋白钙黏蛋白E(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、钙黏蛋白N(N-cadherin)的水平。结果采用siRNA干扰HCT116细胞中p66SHC蛋白的表达后,细胞的增殖能力显著下降(P<0.05),明显抑制细胞侵袭、迁移能力(P<0.05),E-cadherin蛋白的水平明显上调(P<0.05),Vimentin、N-cadherin蛋白的表达水平显著下调(P<0.05)。结论干扰p66SHC基因的表达能阻碍EMT的发生,从而降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭以及迁移能力。 展开更多
关键词 结直肠癌 p66SHC基因 HCT116细胞 上皮细胞间充质化
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p66^(Shc)基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤的保护作用 被引量:1
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作者 孔祥溢 关健 王任直 《协和医学杂志》 2017年第6期359-363,共5页
目的探讨p66Shc基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及可能的机理。方法将C57小鼠分为假手术组(野生型,sham operation,SO)、HIBI野生型组(hypoxic-ischemic wild type,HIWT)和HIBI-p66Shc... 目的探讨p66Shc基因敲除对小鼠缺血缺氧性脑损伤(hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)的保护作用及可能的机理。方法将C57小鼠分为假手术组(野生型,sham operation,SO)、HIBI野生型组(hypoxic-ischemic wild type,HIWT)和HIBI-p66Shc基因敲除组(hypoxic-ischemic knock-out,HIKO),每组20只。采用右侧颈总动脉结扎-浸入低氧环境的方法制备小鼠HIBI模型。随后对各组小鼠神经功能障碍情况、HIBI损伤灶体积、血清神经元特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)水平和脑组织匀浆中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的水平进行测量和比对。结果 HIBI造模24 h后,HIKO组小鼠的神经功能缺损程度评分(1.87±0.30)低于HIWT组小鼠(2.49±0.26),HIKO组小鼠脑梗死灶体积[(22.66±4.20)mm3]小于HIWT组小鼠[(27.31±3.23)mm3],HIKO组小鼠血清NSE含量[(8.97±0.74)ng/ml]显著低于HIWT组小鼠[(11.26±0.68)ng/ml],HIKO组小鼠脑组织IL-1β含量[(1.72±0.30)ng/ml]显著低于HIWT组小鼠[(2.07±0.28)ng/ml],P均<0.05。结论 p66Shc基因敲除可通过降低小鼠HIBI发生后脑组织IL-1β的表达,起到脑保护作用。 展开更多
关键词 p66^Shc基因 缺血缺氧性脑损伤 氧化应激 炎性反应
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p66Shc的生物学效应及其在肾脏疾病中的作用 被引量:1
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作者 景宇 何娅妮 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期55-58,共4页
关键词 SHC p66SHC 氧化应激 凋亡
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