基于重组HepG_2-P4503A4与HepG_2-P4503A46全细胞体外药物代谢比较研究

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作者 薛正楷 罗祎 魏泓 《四川动物》 CSCD 北大核心 2014年第2期210-215,共6页

本研究以探针药物硝苯地平（NF）、睾酮（TST）及其抑制剂酮康唑（KCZ）与重组HepG2-P4503A4、HepG2-P4503A46细胞全细胞在优化的重组细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育，通过高效液相色谱仪检测其药物代谢（抑制）动... 本研究以探针药物硝苯地平（NF）、睾酮（TST）及其抑制剂酮康唑（KCZ）与重组HepG2-P4503A4、HepG2-P4503A46细胞全细胞在优化的重组细胞浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育，通过高效液相色谱仪检测其药物代谢（抑制）动力学参数，并将二者进行比较分析。重组HepG2-P4503A46与HepG2-P4503A4细胞的硝苯地平、睾酮的代谢活性无显著差异（P＞0.05）；在0～10 μM的浓度范围内，酮康唑对硝苯地平和睾酮的抑制活性均随酮康唑浓度的增加而增加，且其IC50值均低于1 μM，为nM级，表明酮康唑对二者的硝苯地平代谢具有较强的抑制活性，抑制剂酮康唑对重组HepG2-P4503A46与HepG2-P4503A4细胞的抑制活性差异不显著（P＞0.05）。本研究表明无论是底物代谢或底物抑制活性，重组HepG2-P4503A46细胞均与重组HepG2-P4503A4细胞差异不显著，P4503A46可能为巴马小型猪体内人P4503A4的同源酶。 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 细胞色素p4503a46 全细胞 药物代谢

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液-质联用法测定中年妇科病人咪达唑仑及其代谢物的血药浓度并研究其细胞色素P4503A4酶活性分布特征 被引量：2

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作者 李治松 张卫 +4 位作者 阚全程 王中玉 路辉 常琰子 张书胜 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期213-216,共4页

目的研究中年妇科手术病人应用咪哒唑仑(抗焦虑药)及其CYP3A4酶活性分布特征。方法以咪哒唑仑作为探针药物,用液-质联用法测定血桨中咪达唑仑、1′-羟基咪达唑仑的单点药物浓度,以1′-羟基咪达唑仑/咪达唑仑的比值评估CYP3A4酶活性。结... 目的研究中年妇科手术病人应用咪哒唑仑(抗焦虑药)及其CYP3A4酶活性分布特征。方法以咪哒唑仑作为探针药物,用液-质联用法测定血桨中咪达唑仑、1′-羟基咪达唑仑的单点药物浓度,以1′-羟基咪达唑仑/咪达唑仑的比值评估CYP3A4酶活性。结果 260例妇科手术病人CYP3A4酶的活性为0.46±0.14,推测中年妇科手术病人CYP3A4酶活性的正常值范围为0.18～0.73。结论 CYP3A4酶活性在中年妇科手术病人中呈正态分布,酶活性的个体差异较小,对术后的个体化药物治疗影响不大。 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 咪达唑仑 液相色谱-串联质谱

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非洛地平降压疗效与细胞色素P4503A4*1G基因的关系

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作者 张玉莲 孙倩 +4 位作者 董艳彩 王蒙 王明 石磊 贺青军 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期672-675,共4页

目的探索轻中度原发性高血压患者细胞色素P4503A4*1G基因(CYP3A4*1G)不同表型对非洛地平疗效的影响。方法对2014年1月至2020年1月就诊的原发性高血压患者462例应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)进行CYP3A4*1G基因多态性检... 目的探索轻中度原发性高血压患者细胞色素P4503A4*1G基因(CYP3A4*1G)不同表型对非洛地平疗效的影响。方法对2014年1月至2020年1月就诊的原发性高血压患者462例应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)进行CYP3A4*1G基因多态性检测,根据结果分为AA组(n=211)、GA组(n=171)、GG组(n=270),给予患者口服非洛地平治疗。在用药1个和6个月进行血压监测。对比各组患者血压水平,采用二元有序logistic回归分析CYP3A4*1G基因型、体质量指数(BMI)、高盐膳食、高脂血症及性别对非洛地平降压效果的影响。结果共有462例患者完成试验,不同基因型患者在药物治疗前的一般情况差异无统计学意义(P>0.05)。服药前AA、GA及GG基因型患者收缩压及舒张压差异无统计学意义(P>0.05),服药1个月后,AA型与GG型患者收缩压及舒张压差异有统计学意义(P<0.05);服药6个月后,AA、GA及GG型患者之间收缩压及舒张压差异有统计学意义(P<0.05)。二元有序logistic回归分析结果提示,患者CYP3A4*1G基因型与BMI独立影响非洛地平的降压疗效(均P<0.05)。结论CYP3A4*1G基因多态性与非洛地平降压疗效密切相关,结合基因多态性指导用药值得参考。 展开更多

关键词 非洛地平 高血压 细胞色素p4503a4*1G基因 基因多态性

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重组细胞色素P4503A4和P4503A22细胞微粒体药物代谢动力学比较研究

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作者 薛正楷 魏泓 《西南师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期102-109,共8页

目的:利用已建立的巴马小型猪细胞色素P4503A22和P4503A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体,分析比较二者的药物代谢动力学特征.方法:以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将探针药物与重组P4503A4,P4... 目的:利用已建立的巴马小型猪细胞色素P4503A22和P4503A4稳定表达重组肝癌细胞株微粒体,分析比较二者的药物代谢动力学特征.方法:以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将探针药物与重组P4503A4,P4503A22细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,通过高效液相色谱仪检测其药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析.结果:P4503A22的硝苯地平、睾酮的代谢活性均低于P4503A4(p<0.05);酮康唑对P4503A4和P4503A22的硝苯地平代谢具有较强的抑制活性,但酮康唑对P4503A4的抑制活性强于P4503A22(p<0.05).结论:无论是代谢底物或抑制底物活性,重组P4503A22细胞微粒体活性均低于重组P4503A4细胞微粒体活性. 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 细胞色素p4503a4 细胞色素P4503A22 药物代谢

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重组细胞色素P4503A4与P4503A39微粒体药物代谢活性比较研究

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作者 薛正楷 魏弘 《亚太传统医药》 2014年第5期9-13,共5页

目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制... 目的:通过考察已建立的P4503A39和P4503A4稳定表达重组细胞株微粒体药物代谢动力学特征,旨在分子水平为巴马小型猪作为临床药物代谢试验动物提供科学依据。方法:制备重组细胞微粒体,以P4503A特异性代谢底物硝苯地平(NF)、睾酮及其抑制剂酮康唑(KCZ)为探针药物,将其与重组P4503A4、P4503A39细胞微粒体在优化的微粒体浓度、药物浓度、孵育时间等条件下进行体外孵育,获得药物代谢(抑制)动力学参数,并将二者进行比较分析。结果:P4503A39和P4503A4体外微粒体药物代谢动力学参数Vmax、Km(S50)、Clint及IC50均表明:P4503A39的硝苯地平、睾酮的代谢活性及酮康唑的抑制活性均显著低于P4503A4(P<0.05)。结论:重组P4503A39细胞微粒体活性显著低于重组P4503A4细胞微粒体活性。 展开更多

关键词 重组细胞 微粒体 细胞色素p4503a4 细胞色素P4503A39 药物代谢

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雷公藤甲素通过抑制细胞色素P4503A4酶增强肝损伤研究 被引量：10

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作者 杨新华 夏宏光 金涌 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2020年第4期496-502,共7页

目的研究雷公藤甲素诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)表达下调在其引发肝损伤中的作用。方法将L-02细胞和C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,分别为正常组(C)、雷公藤甲素(TP)组、雷公藤甲素(TP)+卡马西平(CBZ)组、雷公藤甲素(TP)+氨氯地平(AML)... 目的研究雷公藤甲素诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)表达下调在其引发肝损伤中的作用。方法将L-02细胞和C57BL/6雄性小鼠随机分为4组,分别为正常组(C)、雷公藤甲素(TP)组、雷公藤甲素(TP)+卡马西平(CBZ)组、雷公藤甲素(TP)+氨氯地平(AML)组, 24 h后收集培养基,C57BL/6雄性小鼠2周后安乐死,取血和肝脏。流式细胞仪观察用药后各组细胞的凋亡率,小鼠肝脏进行组织染色观察肝细胞损伤情况。试剂盒检测细胞上清液和小鼠血清的丙氨酸氨基转移酸(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase,AST)。通过Western blot法和RT-PCR法检测细胞和小鼠肝脏CYP3A4的mRNA和蛋白表达水平,应用高效液相色谱法检测细胞培养基中和小鼠血清中雷公藤甲素的含量。结果流式细胞仪检测的细胞凋亡结果和小鼠肝脏病例照片结果显示,TP组明显比C组严重,加入P450 3A4诱导剂的TP+CBZ组则明显减轻,而加入P450 3A4抑制剂的TP+AML组的细胞进一步加剧。体内外ALT和AST检测结果显示,TP组明显高于C组,TP+CBZ组则明显降低,TP+AML组进一步增加。Western blot法和RT-PCR结果显示,TP组CYP3A4表达量明显低于C组,TP+CBZ组的CYP3A4表达量则明显升高,TP+AML组的CYP3A4表达量更低。高效液相检测结果显示,TP+CBZ组中TP的含量低于TP组,而TP+AML组中TP的含量则相反。结论 TP通过抑制其主要代谢酶CYP3A4来减慢自身代谢,可能是其产生肝损伤的机制之一。 展开更多

关键词 L-02细胞 雷公藤甲素 细胞色素p4503a4 卡马西平 氨氯地平 肝脏

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pazopanib血药浓度个体差异与细胞色素P4503A4基因多态性的关系初探 被引量：2

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作者 吴茂锋 刘畅 +5 位作者 戴慧晖 麦长凤 黄丹丽 缪经纬 刘丽忠 方翼 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2020年第12期1376-1380,共5页

目的:分析健康受试者口服pazopanib片后体内药代动力学(PK)规律,初步探讨pazopanib片PK个体差异的遗传学机制。方法:14例健康男性受试者分别在给药当天单次口服pazopanib片(200 mg)后,采集基线至96 h血液样本,用LC-MS/MS法测定服药后各... 目的:分析健康受试者口服pazopanib片后体内药代动力学(PK)规律,初步探讨pazopanib片PK个体差异的遗传学机制。方法:14例健康男性受试者分别在给药当天单次口服pazopanib片(200 mg)后,采集基线至96 h血液样本,用LC-MS/MS法测定服药后各时间点血药浓度,用WinNonlin 6.3软件计算药代动力学相关参数,采用SNapShot法测定细胞色素P4503A4(CYP3A4)基因多态性。结果:Cmax变化范围(7361.65-26081.00)ng/mL,平均值±标准差(15410.72±6366.21)ng/mL;tmax变化范围(1.50-4.00)h、平均值±标准差(2.50±0.83)h;AUC0-t变化范围(228013.55-775231.63)ng·mL-1·h,平均值±标准差(516279.90±175688.41)ng·mL-1·h。个体间Cmax、AUC相差达3倍以上,tmax可相差2倍以上;14例受试者CYP3A4(RS35599367)位点皆为野生型。结论:pazopanib片在中国健康男性志愿者中个体差异较大,未观察到CYP3A4(rs35599367)位点单核苷酸多态性,pazopanib个体间PK差异可能与其他药物代谢相关基因多态性有关。 展开更多

关键词 PAZOPANIB 细胞色素p4503a4 基因多态性

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细胞色素P4503A4与肿瘤化疗耐药的关系研究进展 被引量：2

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作者 张浩杰 李晓强 +5 位作者 于跃 张湘生 王松 尹方旭 王晓红 杨振林 《医学综述》 CAS 2022年第11期2122-2127,共6页

恶性肿瘤仍是目前威胁人类健康的重大疾病之一,化疗过程中肿瘤细胞对化学药物产生耐药性是抗肿瘤化疗失败的重要因素,严重影响患者预后及生存,明确影响肿瘤化疗耐药性的因素十分重要。细胞色素P450(CYP450)氧化代谢酶系是参与化疗药物... 恶性肿瘤仍是目前威胁人类健康的重大疾病之一,化疗过程中肿瘤细胞对化学药物产生耐药性是抗肿瘤化疗失败的重要因素,严重影响患者预后及生存,明确影响肿瘤化疗耐药性的因素十分重要。细胞色素P450(CYP450)氧化代谢酶系是参与化疗药物代谢过程的关键酶之一,与多数抗肿瘤药物的生物转化、代谢消除密切相关,其中CYP4503A4(CYP3A4)是CYP450家族最重要的药物代谢酶。其可以降低和清除具有细胞毒性的化疗药物的毒性,部分抗癌前药经CYP3A4代谢后具有更强的抗肿瘤活性。其在肿瘤化疗耐药中占据重要位置,深入研究CYP3A4在肿瘤病理机制、疾病进展、预后生存中的作用,对肿瘤的防治具有重要价值。 展开更多

关键词 恶性肿瘤 化疗 化疗耐药 细胞色素p4503a4

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细胞色素P4503A4与药物代谢的研究进展 被引量：1

9

作者 张广健 王德才 《泰山医学院学报》 CAS 2012年第10期757-760,共4页

细胞色素P450（cytochrome P450,CYP）是一组含血红素的蛋白质,由结构和功能相关的基因超家族（superfamily）编码的同工酶组成的超家族酶系。CYP主要存在于肝脏,能代谢绝大多数药物和外源性化合物,故又称肝药酶。在肠壁、肾、肾上腺、... 细胞色素P450（cytochrome P450,CYP）是一组含血红素的蛋白质,由结构和功能相关的基因超家族（superfamily）编码的同工酶组成的超家族酶系。CYP主要存在于肝脏,能代谢绝大多数药物和外源性化合物,故又称肝药酶。在肠壁、肾、肾上腺、肺及皮肤等组织中也有CYP存在。 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 药物代谢 药物相互作用

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细胞色素P4503A4基因多态性与癫痫耐药的关系 被引量：1

10

作者 高玫梅 邓维意 +1 位作者 陈盛强 廖卫平 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2010年第3期183-186,共4页

目的研究细胞色素P4503A4（CYP3A4）基因中3个下调CYP3A4酶活力的多态性位点的分布特点，探讨CYP3A4基因多态性与中国南方汉族人群的癫痫耐药之间的关系。方法应用聚合酶链-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法检测CYP3A4^＊4、CYP3A4^... 目的研究细胞色素P4503A4（CYP3A4）基因中3个下调CYP3A4酶活力的多态性位点的分布特点，探讨CYP3A4基因多态性与中国南方汉族人群的癫痫耐药之间的关系。方法应用聚合酶链-限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法检测CYP3A4^＊4、CYP3A4^＊5和CYP3A4^＊63个多态性位点在112例耐药性癫痫患者（耐药组）和136例健康人（健康组）中的分布，分析两组之间CYP3A4基因型的差异。结果所有受检者的CYP3A4^＊4和CYP3A4^＊6基因型均为野生型。而健康组中CYP3A4^＊5的基因型均为野生型，耐药组中则有4例为杂合子基因型，108例为野生型。两组的差异有统计学意义[136：0比108：4，0R（95％C1）=1．037（1．001～1．075），P=0．040]。结论CYP3A4^＊5的多态性位点可能和癫痫耐药性有关。 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 基因多态性 癫痫 耐药 多态性 限制性片段长度

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冻存对大量分离的人肝细胞色素氧化酶P4503A4活性的影响

11

作者 邢同海 王兆文 +1 位作者 钟林 彭志海 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期813-814,共2页

成功的冻存使人肝细胞有可能用于暂时替代肝脏治疗急性肝衰竭和多次、反复治疗肝代谢性疾病。P4503A4是肝细胞色素P450氧化酶系中重要成分，在内外源化合物的代谢中起重要作用，包括环孢霉素、FK506。所以，该酶可衡量肝细胞冻存后功能... 成功的冻存使人肝细胞有可能用于暂时替代肝脏治疗急性肝衰竭和多次、反复治疗肝代谢性疾病。P4503A4是肝细胞色素P450氧化酶系中重要成分，在内外源化合物的代谢中起重要作用，包括环孢霉素、FK506。所以，该酶可衡量肝细胞冻存后功能保存，对肝移植后肝功能检测有重要意义。 展开更多

关键词 细胞色素氧化酶 p4503a4 肝细胞冻存 人肝细胞 肝细胞色素P450 代谢性疾病 活性 分离

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肝细胞色素P4503A4的代谢活性对氯吡格雷耐药现象的作用（译文）

12

作者 孟莉 任方 《天坛药讯》 2005年第2期55-58,共4页

曾有描述用阿斯匹林(AS)或氯吡格雷(CL)后，血小板抑制有个体间差异。另外发现一些个体对AS与CL耐药。因CL的前药(prodmg)由肝细胞色素酶P450(CYP)3A4激活，故作者假设CL疗效的个体间差异可能与CYP3A4代谢活性相关。

关键词 肝细胞色素 p4503a4 代谢活性 氯吡格雷 耐药现象

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miRNA-122-5p对细胞色素P4503A4调控替格瑞洛代谢细胞学研究

13

作者 才艺 赵晓杰 +3 位作者 张效林 刘丹 田孝祥 闫承慧 《临床军医杂志》 CAS 2021年第10期1122-1126,共5页

目的探讨miRNA-122-5p是否通过特异性调控人正常肝细胞(LO2)中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的表达,从而影响替格瑞洛的代谢。方法采用LO2进行4组细胞转染实验:miR-122-5p模拟物组、miR-122-5p模拟物阴性对照组、miR-122-5p抑制剂组、miR-122... 目的探讨miRNA-122-5p是否通过特异性调控人正常肝细胞(LO2)中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的表达,从而影响替格瑞洛的代谢。方法采用LO2进行4组细胞转染实验:miR-122-5p模拟物组、miR-122-5p模拟物阴性对照组、miR-122-5p抑制剂组、miR-122-5p抑制剂阴性对照组。通过蛋白质印迹和实时聚合酶链反应鉴定CYP3A4蛋白和转录的表达水平。在miR-122-5p模拟物和miR-122-5p抑制剂转染后,采用5μmol/L替格瑞洛刺激LO224 h。通过高效液相质谱联用检测细胞培养基中替格瑞洛及其活性代谢物AR-C124910XX的浓度。结果在蛋白表达水平方面,与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物组CYP3A4的表达降低(P<0.05)。与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组CYP3A4的表达增加(P<0.05)。在转录水平上,与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物转染组CYP3A4的表达降低(P<0.05)。与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组CYP3A4的表达增加(P<0.05)。与miR-122-5p模拟物阴性对照组相比,miR-122-5p模拟物组细胞培养基中替格瑞洛的浓度增高,其活性代谢物AR-C124910XX的浓度降低(P<0.05)。与miR-122-5p抑制剂阴性对照组相比,miR-122-5p抑制剂组细胞培养基中替格瑞洛的浓度降低,其活性代谢物AR-C124910XX的浓度增加(P<0.05)。结论miR-122-5p参与CYP3A4表达的调控,并影响替格瑞洛的代谢。 展开更多

关键词 miR-122-5p 细胞色素p4503a4 替格瑞洛 高效液相质谱联用

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PXR-CYP3A4轴通过触发内质网应激介导利托那韦肝毒性的机制研究

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作者 王晓飞 熊在欢 +3 位作者 常琦 余怡杭 王沛 张莉蓉 《药学学报》 北大核心 2025年第12期3631-3643,共13页

利托那韦(ritonavir,RTV)作为抗病毒药物广泛应用于临床,但其肝毒性机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)激活促进RTV肝毒性的分子机制。本实验获得郑州大学生命科学伦理审查委员会批准(批准号:ZZUIRB20... 利托那韦(ritonavir,RTV)作为抗病毒药物广泛应用于临床,但其肝毒性机制尚未完全阐明。本研究旨在探讨孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)激活促进RTV肝毒性的分子机制。本实验获得郑州大学生命科学伦理审查委员会批准(批准号:ZZUIRB2022-142)。构建Pxr基因敲除小鼠,给予PXR激动剂和RTV处理,检测肝功能指标、代谢酶、内质网(endoplasmic reticulum,ER)应激和细胞凋亡相关基因的表达及RTV主要活性代谢产物,并在细胞水平进行验证。结果显示,PXR激活加剧RTV所致小鼠肝损伤,伴随相关代谢酶上调、RTV活性代谢产物积累、ER应激、细胞死亡及组织损伤相关分子表达上调;在HepG2细胞中,过表达PXR联合利福平使RTV肝细胞毒性增加,而敲低细胞色素P450酶(cytochrome P450,CYP) 3A4后毒性得以逆转。机制上,PXR激活通过上调CYP3A4加速RTV代谢为毒性产物,后者触发ER应激,促进肝细胞毒性。本研究揭示了PXR-CYP3A4轴通过触发ER应激在RTV肝毒性中的核心作用,为靶向调控PXR以减轻药物性肝损伤提供新策略。 展开更多

关键词 孕烷X受体 细胞色素p4503a4 利托那韦 代谢活化 内质网应激 肝毒性

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以睾酮为探针采用高效液相色谱法测定细胞色素CYP450 3A4的酶活性 被引量：19

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作者 张荣 刘昌辉 +1 位作者 王宁生 宓穗卿 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期80-83,共4页

建立了一种快速、高效的以睾酮作为探针药物评价细胞色素P450 3A4（CYP3A4）酶活性的高效液相色谱-紫外检测方法。采用的色谱柱为Phenomenex C18柱（4.6mm×150mm,5μm）,梯度洗脱,流速1.0mL/min,紫外检测波长245nm,柱温30℃。睾酮... 建立了一种快速、高效的以睾酮作为探针药物评价细胞色素P450 3A4（CYP3A4）酶活性的高效液相色谱-紫外检测方法。采用的色谱柱为Phenomenex C18柱（4.6mm×150mm,5μm）,梯度洗脱,流速1.0mL/min,紫外检测波长245nm,柱温30℃。睾酮与大鼠肝微粒体温孵后,过已活化好的C18固相萃取小柱,收集甲醇洗脱液,于37℃水浴中通N2吹干,用50%甲醇复溶后进样分析测定。研究结果表明,6β-羟基睾酮的保留时间为11.60min,线性范围为0.5-32μg/mL,最低检出质量浓度为0.02μg/mL,提取率为88.41%-92.73%,方法的回收率为99.07%-101.30%;睾酮的保留时间为19.27min,线性范围为0.5-40μg/mL,最低检出质量浓度为0.01μg/mL,提取率为89.59%-92.66%,方法的回收率为96.50%-98.03%。两者的日内、日间相对标准偏差均小于10%,温孵体系中的其他内源性物质不干扰测定。该方法快速、稳定、灵敏度高,适合体外睾酮及其代谢物6β-羟基睾酮的测定,可应用于体外CYP3A4酶活性的评价及酶动力学的研究。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 睾酮 6β-羟基睾酮 细胞色素p4503a4 肝微粒体

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中国大陆汉族人群CYP3 A4基因变异分析 被引量：14

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作者 黄敏 汪晖 +1 位作者 平洁 刘志苏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第3期300-304,共5页

目的:研究中国大陆汉族人群中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的基因变异及其分布。方法:140例血样本来自中国大陆25个省份的汉族人口,用聚合式酶链反应-非放射性单链构象多态性(PCR-SS-CP)-直接测序方法检测CYP3A4基因的变异。结果:中国大陆... 目的:研究中国大陆汉族人群中细胞色素P4503A4(CYP3A4)的基因变异及其分布。方法:140例血样本来自中国大陆25个省份的汉族人口,用聚合式酶链反应-非放射性单链构象多态性(PCR-SS-CP)-直接测序方法检测CYP3A4基因的变异。结果:中国大陆汉族人群存在CYP3A4基因内含子2T4127G变异。140例人群中有31人存在此变异,变异频率为22.1%。中国大陆汉族人群未发现CYP3A4基因13个外显子的变异。结论:中国大陆汉族人群CYP3A4基因存在内含子2的多态性分布,其基因变异不同于其他种族。 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 基因变异 PCR-SSCP DNA测序 汉族

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5种抗肿瘤中药注射液对CYP3A4酶代谢的影响 被引量：14

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作者 杨旭平 赖丹 +1 位作者 黄毅岚 钟小燕 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期550-552,共3页

目的以睾酮为探针药物,于体外研究5种抗肿瘤中药注射液(康艾、消癌平、华蟾素、参附、注射用香菇多糖)对大鼠细胞色素P4503A4(CYP3A4)亚型酶活性的影响。方法采用大鼠肝微粒体体外孵育法,用HPLC法测定5种抗肿瘤中药注射液孵育体系中6β... 目的以睾酮为探针药物,于体外研究5种抗肿瘤中药注射液(康艾、消癌平、华蟾素、参附、注射用香菇多糖)对大鼠细胞色素P4503A4(CYP3A4)亚型酶活性的影响。方法采用大鼠肝微粒体体外孵育法,用HPLC法测定5种抗肿瘤中药注射液孵育体系中6β-羟基睾酮的生成量,反映其对CYP3A4酶活性的影响。结果与空白组相比,参附对CYP3A4酶活性无明显影响;华蟾素对CYP3A4有诱导作用;康艾、香菇多糖、消癌平对CYP3A4有抑制作用,消癌平的IC50为0.69%。结论在临床上经CYP3A4代谢的药物联合应用时,应警惕华蟾素、康艾、香菇多糖、消癌平潜在的药-药相互作用。 展开更多

关键词 抗肿瘤中药注射液 肝微粒体 细胞色素p4503a4 药-药相互作用

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建立一种测定细胞色素P450 3A4活性的方法 被引量：5

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作者 戴春岭 李苏 +3 位作者 梁永钜 廖海 闫琳 符立梧 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第18期1420-1423,共4页

目的 建立一种细胞色素P450 3A4（cytochrome P450 3A4,CYP3A4）活性定量的新方法.方法 将CYP3A4底物硝苯地平与人肝微粒体进行体外温孵,以高效液相色谱法测定硝苯地平及其氧化产物,以甲醇-水（64：36）为流动相,流速为0.5 mL·min^... 目的 建立一种细胞色素P450 3A4（cytochrome P450 3A4,CYP3A4）活性定量的新方法.方法 将CYP3A4底物硝苯地平与人肝微粒体进行体外温孵,以高效液相色谱法测定硝苯地平及其氧化产物,以甲醇-水（64：36）为流动相,流速为0.5 mL·min^-1,检测波长为254 nm.结果 在所建立的HPLC条件下,硝苯地平及其氧化产物的出峰时间分别在8.44和6.15 min,能够完全分离,且无其他生物基质峰干扰;氧化硝苯地平在人肝微粒体的最低检测限为25μg·L-1（S/N=3）,线性范围是0.25～32 mg·L^-1（r=0.999 4）,符合检测要求;在0.5,4.0,20.0 mg·L^-1时的萃取率分别为（67.05±3.49）%,（66.63±3.60）%,（67.08±2.78）%（n=5）;方法回收率分别为（100.17±6.97）%,（91.96±3.71）%,（96.55±3.98）%（n=5）;日内及日间RSD均小于7%.结论 本实验所建立的HPLC能够准确、快速检测出硝苯地平及其在人肝微粒体中的氧化产物,能够对CYP 3A4活性进行快速评价,适合于体外药物代谢动力学研究和第三代多药抗药性逆转剂的筛选. 展开更多

关键词 细胞色素p4503a4 硝苯地平 高效液相色谱法 肝微粒体 代谢

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金铃子散不同配比方对大鼠肝药酶CYP450 3A4活性的影响 被引量：5

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作者 成龙 王岚 +8 位作者 王彦礼 梁日欣 杨伟鹏 王伟 胡楠 殷小杰 翁小刚 王怡薇 杨庆 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第22期117-122,共6页

目的:通过比较金铃子散不同配比方对肝细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,简称CYP 3A4)活性的影响,探讨其配伍规律。方法:按L9(34)正交表,设计9个不同配比组方。体外实验采用大鼠肝微粒体孵育体系,测定不同配比方对CYP 3A4的半数抑... 目的:通过比较金铃子散不同配比方对肝细胞色素P450 3A4(cytochrome P450 3A4,简称CYP 3A4)活性的影响,探讨其配伍规律。方法:按L9(34)正交表,设计9个不同配比组方。体外实验采用大鼠肝微粒体孵育体系,测定不同配比方对CYP 3A4的半数抑制浓度(IC50);体内实验采用大鼠,口服给予金铃子散不同配比方5 d后注射探针药物睾酮,通过微透析探针采集肝脏部位样品,HPLC测定6-β-羟基-睾酮和原型物睾酮浓度,二者浓度之比作为CYP 3A4酶活性指标。结果:川楝子、延胡索单味提取物和配比方1～9体外对肝药酶CYP 3A4的IC50分别为(2.59±0.33),(0.87±0.30),(1.14±0.20),(1.00±0.13),(1.19±0.10),(2.33±0.15),(1.39±0.19),(1.14±0.20),(1.29±0.14),(1.43±0.32),(1.49±0.28)mg.L-1;体内实验结果显示:与正常对照组比较,金铃子散不同配比方、川楝子和延胡索单味提取物处理组大鼠CYP 3A4的酶活性均降低,金铃子散配比方抑制CYP 3A4酶活性的强弱顺序:方1(方4)>方7>方2(方5)>方8>方3>方9。结论:不同配比方对CYP 3A4酶的活性均有影响,川楝子和延胡索配伍显示出协同抑制作用。 展开更多

关键词 金铃子散 细胞色素p4503a4 中药配伍 微透析

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健康志愿者多剂量服用六味地黄丸对CYP3A4活性的影响 被引量：3

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作者 裘福荣 赵亚男 +3 位作者 孙华 高成璐 马越鸣 蒋健 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第13期983-986,共4页

目的在健康志愿者体内研究多剂量口服六味地黄丸对细胞色素P450(CYP)3A4活性的影响作用。方法采用随机开放两周期试验设计,8例健康志愿者口服六味地黄丸14d(每天3次,每次8粒)的前后单剂量口服咪达唑仑15mg,HPLC测定给药后咪达唑仑10h内... 目的在健康志愿者体内研究多剂量口服六味地黄丸对细胞色素P450(CYP)3A4活性的影响作用。方法采用随机开放两周期试验设计,8例健康志愿者口服六味地黄丸14d(每天3次,每次8粒)的前后单剂量口服咪达唑仑15mg,HPLC测定给药后咪达唑仑10h内的不同时间点的血浆浓度。结果口服六味地黄丸前与口服六味地黄丸14d后的咪达唑仑ρmax,AUC0-10,CL/F和t1/2比值的90%可信区间分别为(44.5,78.5)ng·mL-1,(58.9,85.8)ng.h.mL-1,(116.4,170.7)L.h-1和(88.1,124.9)h,口服六味地黄丸前后咪达唑仑tmax无明显差异。结论口服六味地黄丸14d对肠道CYP3A4有诱导作用。 展开更多

关键词 六味地黄丸 咪达唑仑 药物相互作用 细胞色素p4503a4

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