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新孢子虫病P43蛋白质(包涵体)的纯化及rELISA方法的建立 被引量:12
1
作者 杨帆 王莲芳 +1 位作者 陈亮 巴音查汗 《新疆农业大学学报》 CAS 北大核心 2010年第4期294-298,共5页
为建立新孢子虫病间接酶联免疫吸附试验(rELISA)检测方法,先诱导表达GST-P43包涵体蛋白,并对其进行提取、纯化、复性处理,再以复性后的P43蛋白作为抗原,优化rELISA检测方法。结果表明,这种包涵体处理方法,可使其纯度达到87%,复性后的目... 为建立新孢子虫病间接酶联免疫吸附试验(rELISA)检测方法,先诱导表达GST-P43包涵体蛋白,并对其进行提取、纯化、复性处理,再以复性后的P43蛋白作为抗原,优化rELISA检测方法。结果表明,这种包涵体处理方法,可使其纯度达到87%,复性后的目的蛋白具有良好的免疫活性。通过对rELISA各反应条件的优化,确定了最佳反应条件,血清稀释倍数为1∶100,抗原包被浓度为7μg/mL,封闭液为0.5%脱脂乳,酶标抗体的工作浓度为1∶4000,酶标抗体作用时间为1 h,底物作用时间25 min。且该方法不与弓形虫和布鲁氏菌病发生交叉反应。 展开更多
关键词 新孢子虫 p43蛋白 纯化 rELISA
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旋毛虫肌幼虫p43cDNA的克隆及鉴定 被引量:8
2
作者 郭恒 李莲瑞 +7 位作者 刘明远 吴秀萍 孙树民 付宝权 高长玲 卢强 陈启军 P.Boireau 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期432-436,440,共6页
目的克隆旋毛虫肌幼虫p43cDNA并对其表达的融合蛋白酶活性进行鉴定与分析。方法用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因,克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希菌NovaBlue,序列测定后克隆到原核表达载体pET28a并转入表达菌DE3中。经... 目的克隆旋毛虫肌幼虫p43cDNA并对其表达的融合蛋白酶活性进行鉴定与分析。方法用PCR技术从旋毛虫肌幼虫cDNA文库中扩增靶基因,克隆到pMD-18T载体,转化至大肠埃希菌NovaBlue,序列测定后克隆到原核表达载体pET28a并转入表达菌DE3中。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后提取包涵体并复性,通过降解双链λDNA测定其融合蛋白脱氧核糖核酸酶II(DNase II)活性。结果成功克隆到p43 cDNA序列,该cDNA序列与美国发表的存在两个核苷酸的变异,分别为第210位的C变为T,第604位的A变为G。基于3名研究者从旋毛虫T.spiralis美国分离株获得的序列相同、6名国内研究者(含本课题组)从T.spiralis中国分离株获得的序列也相同,由此可以确定这两个核苷酸的变异为T.spiralis中国分离株特异性和特征性单核苷酸多态性(SNP)标记。p43重组蛋白能够降解双链λDNA,表明其有DNase II酶活性。结论成功克隆到p43cDNA,T.spiralis中国分离株的p43cDNA具有两个SNP标记,其表达的重组蛋白具有DNase II酶活性。 展开更多
关键词 旋毛虫 p43cDNA 克隆 表达 脱氧核糖核酸酶Ⅱ
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下调MSC p43抑制前脂肪细胞分化 被引量:2
3
作者 张婷 王铁鹏 +4 位作者 刘宗智 田云云 李巧彦 张君 谢建新 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2016年第2期187-193,共7页
为探讨多合成酶复合体蛋白43(multisynthetase complex protein 43,MSC p43)对前脂肪细胞分化的调节作用。建立了"cocktail"诱导剂处理3T3-L1细胞的分化模型;通过western bolt和q PCR法检测MSC p43在前脂肪细胞分化过程中的... 为探讨多合成酶复合体蛋白43(multisynthetase complex protein 43,MSC p43)对前脂肪细胞分化的调节作用。建立了"cocktail"诱导剂处理3T3-L1细胞的分化模型;通过western bolt和q PCR法检测MSC p43在前脂肪细胞分化过程中的表达特征;利用RNA干扰技术下调MSC p43蛋白表达,并检测干扰对前脂肪细胞分化的影响;利用油红O染色法鉴定前脂肪细胞的成脂作用;通过qPCR法定量促成脂早期转录因子C/EBPβ、C/EBPδ,晚期转录因子C/EBPα、PPARγ及脂肪细胞特征性标记物Glut4、LDLR的表达。结果显示,MSC p43在前脂肪细胞分化早期(1-6d)高表达,随后(7 d以后)降低;下调该蛋白不影响C/EBPβ、C/EBPδ表达,但显著抑制C/EBPα及PPARγ表达,并降低诱导细胞的油红O染色水平及Glut4、LDLR表达。由此可知,下调MSC p43抑制前脂肪细胞3T3-L1的诱导分化,其作用机制是通过下调促成脂转录因子C/EBPα及PPARγ实现的。 展开更多
关键词 MSC p43 前脂肪细胞分化 成脂作用 C/EBPα PPARγ
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旋毛虫p43与p53核酸疫苗的构建及其免疫保护性 被引量:1
4
作者 庞宇 李巍 +4 位作者 韩彩霞 伊娜娜 刘畅 俞昭旸 宋铭忻 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期310-314,共5页
为探讨旋毛虫p43、p53基因的核酸疫苗对小鼠的免疫保护效果与免疫保护机制,将p43、p53基因分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,分3次肌肉注射免疫3组昆明小鼠。于三免后2周经口感染旋毛虫肌幼虫(100蚴/只),在攻虫后第7天和第35天剖杀... 为探讨旋毛虫p43、p53基因的核酸疫苗对小鼠的免疫保护效果与免疫保护机制,将p43、p53基因分别克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,分3次肌肉注射免疫3组昆明小鼠。于三免后2周经口感染旋毛虫肌幼虫(100蚴/只),在攻虫后第7天和第35天剖杀小鼠,计算成虫减虫率、肌幼虫减虫率和繁殖力指数,评估其免疫效果。在各时间点上取小鼠血清用于检测抗体水平和脂肪酸结合蛋白(H-FABP)。结果显示,试验各组成虫减虫率与对照组相比差异显著(P<0.05),LPG及RCI减虫率与对照组相比均差异极显著(P<0.01);IgG抗体水平提高,与PBS组差异显著(P<0.05);各组H-FABP检测结果均低于70pg/mL。结果表明旋毛虫p43与p53基因的核酸疫苗具有较好的抗旋毛虫的免疫保护效果,且两核酸疫苗对小鼠心肌无损伤。 展开更多
关键词 旋毛虫 p43 P53 核酸疫苗 免疫保护性
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线粒体激素受体P43在甲状腺乳头状癌中的表达及其临床价值 被引量:2
5
作者 邵国安 李仕亮 +2 位作者 徐雷 马斌林 祝兰华 《新疆医科大学学报》 CAS 2016年第6期707-711,共5页
目的探讨线粒体激素受体P43(MT-P43)所在片段在甲状腺乳头状癌组织及结节性甲状腺肿组织中的转录水平及其与甲状腺乳头状癌临床病理的关系。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR),在mRNA水平检测31例甲状腺乳头状癌和31例结节性甲状腺肿... 目的探讨线粒体激素受体P43(MT-P43)所在片段在甲状腺乳头状癌组织及结节性甲状腺肿组织中的转录水平及其与甲状腺乳头状癌临床病理的关系。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR),在mRNA水平检测31例甲状腺乳头状癌和31例结节性甲状腺肿新鲜标本及其各自对应的病变旁组织中MT-P43mRNA的转录表达情况。结果结节性甲状腺肿组织和甲状腺癌组织MT-P43mRNA转录水平均较各自配对的病变旁组织明显上升。31例结节性甲状腺肿较其病变旁组织MT-P43 mRNA转录水平明显上升,其相对倍比关系为(3.26±0.43),差异有统计学意义(t=4.35,P=0.000)。31例甲状腺癌较癌旁组织MT-P43mRNA转录水平明显上升,其相对倍比关系为(4.04±0.19),差异有统计学意义(t=3.375,P=0.001)。甲状腺癌较结节性甲状腺肿MT-P43mRNA转录水平明显上升,其相对倍比关系为(5.52±0.30),差异有统计学意义(t=2.040,P=0.025)。MT-P43mRNA的转录水平与患者性别、年龄及肿瘤大小无关(P>0.05);而与患者淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.05)。结论 MT-P43mRNA转录水平上升可能对甲状腺恶性病变的发生有促进作用,转录水平越高,越容易发生恶变,这对于甲状腺癌的诊断及鉴别诊断有一定的提示价值。 展开更多
关键词 甲状腺癌 结节性甲状腺肿 mt-p43 RT-PCR
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P43基因在造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断中的应用
6
作者 周永安 余新炳 +4 位作者 徐劲 郑焕钦 吴忠道 陈观今 乔振华 《热带医学杂志》 CAS 2003年第1期35-37,共3页
目的建立快速、特异、敏感诊断造血干细胞移植(HSCT)患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并讨论其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对56例造血干细胞移植受者及20例正常供者同时进行检测。结果检测造血干细胞移植受者56例,PCR和ELISA方... 目的建立快速、特异、敏感诊断造血干细胞移植(HSCT)患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并讨论其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对56例造血干细胞移植受者及20例正常供者同时进行检测。结果检测造血干细胞移植受者56例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为10及7例;其阳性率分别为17.86%和14.3%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为造血干细胞移植患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。 展开更多
关键词 p43基因 造血干细胞移植 弓形虫感染 诊断 应用
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抗血管生成活性的重组人proEMAPⅡ/p43蛋白缺失突变体的构建和筛选(英文)
7
作者 邢玉华 刘大涛 +4 位作者 谭俊杰 胡立德 刘刚 付学奇 陈惠鹏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2014年第6期567-574,共8页
proEMAPⅡ(又称p43蛋白)是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子,近年来发现,p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用,具有潜在的抗肿瘤疗效.p43的C端结构域即为EMAPⅡ,其结构和功能都已知,具有细胞因子和抗血管生成的双重... proEMAPⅡ(又称p43蛋白)是哺乳动物氨酰tRNA合成酶的辅助因子,近年来发现,p43具有细胞因子活性以及抗新生血管生成的作用,具有潜在的抗肿瘤疗效.p43的C端结构域即为EMAPⅡ,其结构和功能都已知,具有细胞因子和抗血管生成的双重功能.但是N端的结构还不清楚,研究表明全长的p43比EMAPⅡ具有更高的生物学活性,但是p43的结构和作用机制尚不明确.此外,作为蛋白质药物,更小的分子能够减少免疫原性和副作用,从而发挥更好的活性.本文利用生物信息学方法,对p43 N端的二级结构进行预测,并且在不破坏二级结构的前提下,构建了10个p43的缺失突变体,在体外对10个缺失突变体与全长的p43蛋白进行抗新生血管生成活性验证比较,最终我们获得了3个活性高的p43缺失突变体,并且发现N端的1~16,1~79位氨基酸和C端的264~312位氨基酸不是p43发挥抗血管生成功能所必需的,而且它们的删除使得活性位点更好地呈现并发挥活性.通过我们的研究,有助于揭示p43蛋白结构和功能的关系以及其作用机制,同时为临床筛选肿瘤治疗候选药物奠定基础. 展开更多
关键词 proEMAPⅡ p43 缺失突变体 抗血管生成剂 内皮细胞迁移 管腔形成
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含P43启动子aiiA基因重组枯草芽孢杆菌的构建与表达
8
作者 陈嘉蔚 赵培静 +5 位作者 邓锦波 李姣清 明飞平 张淑霞 卢悄佳 张玲华 《广东农业科学》 CAS 2018年第11期21-27,共7页
细菌群体可以通过响应N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones, AHLs)激活某些致病基因的表达,而芽胞杆菌可以表达AiiA(Autoinducer inactivation)蛋白降解病原菌的AHLs从而减低损害。为构建外源高效表达AiiA蛋白的工程菌,利用A... 细菌群体可以通过响应N-酰基高丝氨酸内酯(N-acyl-homoserine lactones, AHLs)激活某些致病基因的表达,而芽胞杆菌可以表达AiiA(Autoinducer inactivation)蛋白降解病原菌的AHLs从而减低损害。为构建外源高效表达AiiA蛋白的工程菌,利用AiiA蛋白降解AHLs分子来防治细菌性植物病害,通过搭桥PCR扩增P43-aiiA联合片段,连接pHY300PLK载体,构建P43-aiiA-C11枯草芽孢杆菌菌株,验证其AiiA酶活。结果成功克隆得到P43-aiiA片段,经鉴定P43-aiiA-pHY300PLK成功转入C11菌株,通过AiiA活性检测,野生菌株组指示菌全部变蓝,3个平行实验组的蓝色指示菌至条状培养基中间变浅,至下端全部为白色菌落,说明实验所构建的P43-aiiA-C11菌株具有高于野生型C11菌株的淬灭酶活性,能明显降解信号分子。与野生型菌株相比,构建菌株P43-aiiA-C11表达产物具有显著降解AHLs的能力,研究结果为推动植物病害防治提供了重要理论基础。 展开更多
关键词 p43启动子 AIIA基因 群体感应 枯草芽孢杆菌
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TRa1基因转录后小片段P28、P43在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义
9
作者 李仕亮 徐雷 +3 位作者 邵国安 孙纷纷 孙林庸 薛军 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2017年第4期294-298,共5页
目的分析TRa1基因转录后小片段P28、P43在甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达水平及其与临床病理的关系。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)和凝胶电泳法分别扩增目的片段和分离不同片段的条带,再利用紫外... 目的分析TRa1基因转录后小片段P28、P43在甲状腺乳头状癌(Papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达水平及其与临床病理的关系。方法采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)和凝胶电泳法分别扩增目的片段和分离不同片段的条带,再利用紫外透射分析仪扫描各条带的光密度来检测31例PTC组织及癌旁组织中Mt-P28、Mt-P43的表达情况。结果甲状腺癌组Mt-P28平均灰度值(0.77±0.34)明显高于癌旁组(0.31±0.18);Mt-P43平均灰度值(0.85±0.21)明显高于癌旁组(0.34±0.15),差异均具有统计学意义(P<0.05);Mt-P28表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期无关(P>0.05);Mt-P43表达水平与患者性别、年龄、肿瘤大小、淋巴结转移无关(P>0.05)而与临床分期有关(P<0.05)。Mt-P28与Mt-P43两者表达水平不具有相关性(r=0.266,P=0.071)。结论 Mt-P28、Mt-P43表达水平的升高倾向于病变恶性程度更高,对预测PTC不良预后有一定的临床应用价值,两种因子对于PTC的预防和治疗有指导意义。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 Mt-P28 Mt-p43 RT-PCR
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线粒体甲状腺激素受体基因P28及P43与甲状腺疾病的相关研究进展 被引量:3
10
作者 张虎 刘贵峰 邵国安 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期243-245,共3页
甲状腺疾病近年来发病率呈上升趋势,线粒体在肿瘤发生中的作用正日益受到重视。有文献报道线粒体结构功能的异常,如线粒体生物氧化功能的改变、激活介导的细胞凋亡途径异常、DNA突变等均与肿瘤发生、发展密切相关。线粒体内存在甲状腺... 甲状腺疾病近年来发病率呈上升趋势,线粒体在肿瘤发生中的作用正日益受到重视。有文献报道线粒体结构功能的异常,如线粒体生物氧化功能的改变、激活介导的细胞凋亡途径异常、DNA突变等均与肿瘤发生、发展密切相关。线粒体内存在甲状腺激素受体P28及P43,故本文就线粒体内甲状腺激素受体P28及P43与甲状腺良恶性疾病的关系研究进行综述。 展开更多
关键词 甲状腺疾病 受体 甲状腺激素 基因组 线粒体 P28 p43
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重组人p43蛋白抗血管生成活性及其机制 被引量:1
11
作者 周力强 孙立 +4 位作者 林森森 梁文璐 刘大涛 袁胜涛 朱丹妮 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期467-472,共6页
为了研究重组人p43(YS-1)蛋白对血管生成的影响及其机制,并考察其对肺癌实体瘤的抑制作用。采用内皮细胞增殖实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、大鼠动脉环体外实验、鸡胚尿囊膜体内实验考察YS-1的抗血管生成作用;采用Western印迹法检... 为了研究重组人p43(YS-1)蛋白对血管生成的影响及其机制,并考察其对肺癌实体瘤的抑制作用。采用内皮细胞增殖实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、大鼠动脉环体外实验、鸡胚尿囊膜体内实验考察YS-1的抗血管生成作用;采用Western印迹法检测细胞内磷酸化MEK1/2、Akt蛋白质的表达;选用人肺腺癌A-549裸小鼠移植瘤模型检测YS-1的体内抗肿瘤活性。结果发现,YS-1能明显抑制内皮细胞迁移和管腔形成,可以抑制体外培养的大鼠动脉环微血管样结构及鸡胚尿囊膜血管,YS-1可以明显抑制血管内皮生长因子(VEGF)诱导的内皮细胞中VEGFR2及下游MEK1/2及Akt的磷酸化,YS-1高剂量(10 mg/kg)能显著抑制肺癌A549移植瘤的生长。研究结果表明:YS-1能抑制人肺腺癌A-549裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能跟抑制VEGF引起的VEGFR2活化及信号转导而影响血管生成有关。 展开更多
关键词 重组人p43蛋白 血管生成抑制剂 YS-1 肿瘤
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地高辛标记探针检测重组人p43蛋白宿主DNA残留量的研究 被引量:9
12
作者 黄相红 胡立德 +2 位作者 梁文璐 谭小钉 刘大涛 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期356-359,共4页
目的:建立重组人p43蛋白原液中宿主DNA残留量的检测方法。方法:以重组人p43工程菌基因组DNA为模板,制备地高辛标记的探针,并以此探针与阳性对照品及供试品进行杂交及显色反应。结果:3批次重组人p43蛋白原液中每人份剂量的宿主DNA残留量... 目的:建立重组人p43蛋白原液中宿主DNA残留量的检测方法。方法:以重组人p43工程菌基因组DNA为模板,制备地高辛标记的探针,并以此探针与阳性对照品及供试品进行杂交及显色反应。结果:3批次重组人p43蛋白原液中每人份剂量的宿主DNA残留量均小于10 ng。结论:该方法灵敏度高,特异性强,重复性好,操作安全简便,可用于重组人p43制备过程中的原液检定及质量监控。 展开更多
关键词 DNA残留量 地高辛 重组人p43蛋白 斑点杂交
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P43基因在白血病患者弓形虫感染诊断中的应用 被引量:2
13
作者 杨丽萍 周永安 《临床医药实践》 2005年第12期889-891,共3页
目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8... 目的建立快速、特异、敏感诊断白血病患者弓形虫感染情况的DNA检测方法,并分析其临床意义。方法利用ELISA和PCR方法对46例白血病及20名正常人同时进行检测。结果检测白血病40例,PCR和ELISA方法检测弓形虫P43基因片段和其抗原,阳性各为8例及6例,其阳性率分别为17.4%和13.1%。作为阴性对照的20名正常者同时进行弓形虫的检测,其结果均为阴性。结论体外扩增弓形虫P43基因的方法具有准确、快速、特异和敏感的优点,可以作为白血病患者弓形虫感染诊断的有价值的方法之一。 展开更多
关键词 白血病 弓形虫PCR ELISA p43基因
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疏水作用层析在重组大肠杆菌表达的rProEMAPⅡ/P43蛋白纯化中的作用
14
作者 魏健 刘大涛 +3 位作者 谭小钉 储炬 庄英萍 张嗣良 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期73-76,共4页
目的建立rProEMAPⅡ/P43蛋白的纯化工艺,明确疏水作用层析(HIC)在纯化中的作用。方法采用由疏水作用层析、离子交换层析、亲和肝素层析组成的工艺对rProEMAPⅡ/P43蛋白进行纯化,并与由离子交换层析和亲和肝索层析组成的工艺相比... 目的建立rProEMAPⅡ/P43蛋白的纯化工艺,明确疏水作用层析(HIC)在纯化中的作用。方法采用由疏水作用层析、离子交换层析、亲和肝素层析组成的工艺对rProEMAPⅡ/P43蛋白进行纯化,并与由离子交换层析和亲和肝索层析组成的工艺相比较,分别进行总蛋白含量测定、SDS-PAGE分析目的蛋白含量及纯度检测。结果在pH为7.4—7.5时。采用HIC方法纯化的蛋白较不采用HIC法回收率提高了28.4%,纯化后rProEMAPⅡ/P43蛋白纯度为92%。结论在rPmEMAPⅡ/P43蛋白纯化过程中增加疏水作用层析,可以提高rProEMAPⅡ/P43蛋白收率。 展开更多
关键词 rProEMAP Ⅱ/p43 HIC 回收率 纯度
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GST-p43/AIMP1融合蛋白表达和纯化以及与NF-L的相互作用
15
作者 张珍珍 尹延青 +1 位作者 周嘉伟 乐卫东 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期580-584,共5页
目的构建人p43/AIMP1蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达纯化,通过GST-pulldown方法验证其与神经中间丝轻链(NF-L)的体外直接相互作用。方法以重组质粒pcDNA3.1-p43为模板,扩增p43/AIMP1基因,产物经纯化回... 目的构建人p43/AIMP1蛋白与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体并进行表达纯化,通过GST-pulldown方法验证其与神经中间丝轻链(NF-L)的体外直接相互作用。方法以重组质粒pcDNA3.1-p43为模板,扩增p43/AIMP1基因,产物经纯化回收后与原核表达载体pGEX4T-1连接构建成新载体GST-p43/AIMP1,经鉴定完全正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)进行诱导表达,并纯化获得目的蛋白;将myc-NF-L体外转染HEK293T细胞,利用GST pull-down原理和方法验证人p43蛋白与神经中间丝轻链蛋白NF-L之间的相互作用。结果酶切鉴定和测序结果显示,成功构建了GST-p43/AIMP1融合蛋白原核表达载体;考马斯亮蓝染色和Western blotting结果显示,成功获得有生物活性的GST-p43/AIMP1融合蛋白;GST pull-down实验结果证实,p43/AIMP1与NF-L存在直接相互作用。结论获得有生物活性的GST-p43/AIMP1蛋白,并成功应用GST pull-down方法证实p43/AIMP1与NF-L在体外存在直接的相互作用。 展开更多
关键词 p43/AIMP1 蛋白表达纯化 GST pull-down 神经中间丝轻链蛋白
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proEMAPⅡ/p43蛋白对干扰素诱导蛋白10的调控
16
作者 王磊 谭俊杰 +5 位作者 王微 董桂福 凌婧怡 阚乃鹏 刘刚 陈惠鹏 《生物技术通讯》 CAS 2014年第6期779-782,共4页
目的:研究p43蛋白对干扰素诱导蛋白10(IP10)的调控。方法:用实时定量PCR方法检测p43蛋白作用于HMEC-1细胞后IP10基因水平的变化,并找到p43蛋白作用的最佳浓度范围及最佳作用时间;同时用ELISA方法检测p43蛋白是否促进IP10蛋白的分泌,并检... 目的:研究p43蛋白对干扰素诱导蛋白10(IP10)的调控。方法:用实时定量PCR方法检测p43蛋白作用于HMEC-1细胞后IP10基因水平的变化,并找到p43蛋白作用的最佳浓度范围及最佳作用时间;同时用ELISA方法检测p43蛋白是否促进IP10蛋白的分泌,并检测p43蛋白对可能引起IP10上调的相关因子γ干扰素(IFNγ)、白细胞介素1β(IL1β)及肿瘤坏死因子α(TNFα)的调控作用,试图找到p43蛋白诱导IP10表达上调的原因。结果及结论:p43蛋白能显著上调IP10的表达,并具有一定的量效关系,在p43浓度为70μg/m L、作用时间为6 h时达到峰值;p43蛋白能够诱导IFNγ的分泌,p43蛋白诱导IP10的表达可能是通过上调IFNγ的分泌,并经由JAK-STAT途径实现的。 展开更多
关键词 p43蛋白 干扰素诱导蛋白10 Γ干扰素
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重组人p43蛋白通过JAK-STAT信号通路抑制新生血管生成 被引量:3
17
作者 王磊 张汉彬 +3 位作者 张平 余文 刘刚 尉承泽 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1043-1049,共7页
目的探讨p43蛋白抑制新生血管的生成的具体机制。方法将重组人p43蛋白作用于HMEC-1细胞后利用基因芯片进行分析,而后利用qPCR和Western Blot方法检测JAK-STAT信号通路中关键基因表达水平的变化,利用体外管腔形成实验和细胞迁移分析检测... 目的探讨p43蛋白抑制新生血管的生成的具体机制。方法将重组人p43蛋白作用于HMEC-1细胞后利用基因芯片进行分析,而后利用qPCR和Western Blot方法检测JAK-STAT信号通路中关键基因表达水平的变化,利用体外管腔形成实验和细胞迁移分析检测重组人p43蛋白抑制新生血管生成活性的变化。结果重组人p43蛋白可以使JAK1、STAT1、IP-10等JAK-STAT信号通路中关键基因表达水平上调,并使JAK1和JAK2的磷酸化水平增强。体外管腔形成和细胞迁移实验结果显示,加入JAK特异性抑制剂AG490阻断JAK-STAT通路后,重组人p43抑制新生血管生成的活性降低。结论重组人p43蛋白通过JAK-STAT通路、诱导IP-10表达,发挥其抑制血管生成的活性。 展开更多
关键词 重组人p43蛋白 JAK-STAT信号通路 IP-10 新生血管生成
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Amplification of Surface Antigen P43 Gene and Its Application in Detection of Toxoplasma Gondii in Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplantation 被引量:2
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作者 ZHOUYongan YUXinbing 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2002年第4期238-240,共3页
Objective:To establish a rapid,specific and sensitive diagnostic technique for the human Toxoplasma gondii infection in the recipi-ents with allogeneic hematopoietic stem cell transplantation and discuss its clinical ... Objective:To establish a rapid,specific and sensitive diagnostic technique for the human Toxoplasma gondii infection in the recipi-ents with allogeneic hematopoietic stem cell transplantation and discuss its clinical significance.Methods:30 patients undergoing allogeneic hematopoietic stem cell transplantation were detected by using ELISA and PCR.Results:Among 30 recipients undergiong allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,3 were positive for Toxoplasma gondiii antigen and 5 for surface antigen p43 gene with the positive rate being 13.3% and 16.67% respectively.20 healthy people(negative for anti-Tox antibody)were also tested by using ELISA and PCR.Conclusion:PCR is an accurate,relatively rapid,sensitive and specific method for detecting P43 gene of Toxoplasma gondii.Be-canuse PCR can be applied to a variety of different clinical samples,it can be considered as a valuable additional tool for identification of Toxoplasma gondii infections. 展开更多
关键词 同种异基因造血干细胞移植 鼠弓形体 检测 表面抗原 p43 基因扩增
暂未订购
强悍超频 华硕超高性价比P43上市
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作者 韩杰 《数码世界(A)》 2008年第12期63-63,共1页
P43芯片作为新一代芯片组,相对于P35虽然价格稍贵,但是对主流处理器的支持更完善。故此,P43主板在中低端主板市场相当受关注。知名品牌华硕对P43相当的重视,近日,它又推出了一款P43主板P5QL。这款P5QL采用了摩卡色PCB板,并支持华... P43芯片作为新一代芯片组,相对于P35虽然价格稍贵,但是对主流处理器的支持更完善。故此,P43主板在中低端主板市场相当受关注。知名品牌华硕对P43相当的重视,近日,它又推出了一款P43主板P5QL。这款P5QL采用了摩卡色PCB板,并支持华硕颇受好评的人性化技术express gate,有着良好的超频性能,性价比相当高。 展开更多
关键词 华硕 p43芯片 价格 市场分析 PCB板
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重组人proEMAPⅡ/p43体外抑制新生血管生成活性方法的建立 被引量:2
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作者 邢玉华 刘大涛 +4 位作者 刘刚 邹亮 胡立德 付学奇 陈惠鹏 《军事医学科学院院刊》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期317-320,共4页
目的建立proEMAPⅡ/p43蛋白体外检测抑制新生血管生成活性的方法。方法利用内皮细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验等体外检测血管生成的模型,研究p43蛋白抑制血管生成的活性。结果 p43蛋白... 目的建立proEMAPⅡ/p43蛋白体外检测抑制新生血管生成活性的方法。方法利用内皮细胞增殖实验、细胞周期实验、细胞迁移实验、管腔形成实验、鸡胚绒毛尿囊膜实验等体外检测血管生成的模型,研究p43蛋白抑制血管生成的活性。结果 p43蛋白能明显抑制内皮细胞迁移和管腔形成,但对内皮细胞增殖和细胞周期没有明显的量效关系。结论最终选用细胞迁移实验和管腔形成实验作为主要活性检测方法,细胞迁移实验作为p43蛋白活性的定量检测方法,迁移抑制率作为活性高低的评价标准,管腔形成实验用于p43蛋白活性的定性研究。 展开更多
关键词 proEMAPⅡ/p43 新生血管生成 细胞增殖 鸡胚绒毛尿囊膜实验 细胞迁移 管腔形成
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