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硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病K562细胞bcr/abl融合基因表达的影响 被引量：11
1
作者 邓守恒 李芳 +4 位作者 李林均 王贤和 陈萍 徐华 潘东风 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2011年第1期106-109,共4页
目的:研究硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响,探讨这种作用与bcr/abl融合基因表达的关系。方法:应用磺酰罗丹明B(SRB)法和集落形成法检测硒化壳聚糖对细胞增殖的影响;应用Western blot(免疫印迹)法检测细胞P210bcr/abl融... 目的:研究硒化壳聚糖对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖的影响,探讨这种作用与bcr/abl融合基因表达的关系。方法:应用磺酰罗丹明B(SRB)法和集落形成法检测硒化壳聚糖对细胞增殖的影响;应用Western blot(免疫印迹)法检测细胞P210bcr/abl融合蛋白含量;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测bcr/abl融合基因信使RNA(mRNA)水平。结果:50,100,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用K562细胞48 h可明显抑制细胞增殖和降低其存活率(P<0.05,P<0.01);50,100,200 mg·L-1硒化壳聚糖作用48 h或200 mg·L-1硒化壳聚糖作用12,24,48 h后K562细胞内P210bcr/abl蛋白含量呈时间和剂量依赖性下降(P<0.05,P<0.01),而bcr/abl融合基因mRNA水平未见明显改变。结论:硒化壳聚糖可通过下调bcr/abl融合基因表达的P210bcr/abl融合蛋白对K562细胞增殖产生抑制作用。 展开更多
关键词 硒化壳聚糖 K562细胞 增殖 BCR/ABL融合基因 p210bcr/abl蛋白
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人参皂甙Rg1对人慢性粒细胞白血病p210 bcr/abl融合蛋白表达的影响 被引量：4
2
作者 曲惠青 刁汇玲 +1 位作者 张慧 孙建荣 《现代生物医学进展》 CAS 2010年第10期1851-1853,共3页
目的:研究人参皂甙Rg1对人慢性髓细胞白血病敏感株K562细胞p210bcr/abl融合蛋白表达的影响。方法:体外培养K562细胞,经人参皂甙Rg1处理不同时间后,用流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western印迹技术检测细胞内p210bcr/abl融合蛋白表达。结果... 目的:研究人参皂甙Rg1对人慢性髓细胞白血病敏感株K562细胞p210bcr/abl融合蛋白表达的影响。方法:体外培养K562细胞,经人参皂甙Rg1处理不同时间后,用流式细胞仪检测细胞凋亡;用Western印迹技术检测细胞内p210bcr/abl融合蛋白表达。结果:人参皂甙Rg1可诱导细胞凋亡,凋亡率并随时间延长而升高;人参皂甙Rg1可下调p210bcr/abl蛋白表达量,并具时间依赖性。结论:人参皂甙Rg1可通过降低p210bcr/abl蛋白水平来诱导K562细胞凋亡,达到有效抗人慢性髓细胞白血病的效果。 展开更多
关键词 人参皂甙RG1 p210bcr/abl融合蛋白 K562细胞
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趋化因子MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达 被引量：2
3
作者 王伟良 沈悌 +2 位作者 惠玉荣 顾惜春 李蓉生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期433-436,共4页
本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采... 本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采用半定量RT-PCR方法检测MIP-1α、MCP-1、CCR-1、CCR-2mRNA的表达水平。结果表明MIP-1αmRNA和CCR-1mRNA在bcr/abl融合基因阳性细胞中不表达,但在bcr/abl融合基因阴性细胞中表达,而MCP-1mRNA和CCR-2mRNA在bcr/abl融合基因阳性和阴性细胞中均不表达。当P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶被抑制后,MIP-1α和CCR-1的mRNA表达水平恢复至正常水平。结论:P210bcr/abl融合蛋白抑制慢性髓系白血病细胞中MIP-1α和CCR-1mRNA的表达,但对MCP-1和CCR-2mRNA的表达无影响。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 BCR/ABL融合基因 p210bcr/abl融合蛋白 MIP-1Α CCR-1 MCP-1 CCR-2
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慢病毒介导shRNA稳定干扰P210^(bcr/abl)基因表达的体内外研究 被引量：1
4
作者 朱玉峰 王元占 孟凡义 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1090-1094,共5页
P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用。针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性。P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点。本研究通... P210bcr/abl融合基因在慢性髓系白血病(CML)发生、发展中起重要作用。针对P210bcr/abl融合基因的小分子抑制剂(如伊马替尼)治疗CML非常有效,但容易产生耐药性。P210bcr/abl基因的融合区为RNA干扰其表达提供了一个特异性靶点。本研究通过病毒载体建立能同时表达P210bcr/ablshRNA和P210bcr/abl基因的BaF3细胞系,并探讨慢病毒介导的shRNA对P210bcr/abl基因表达的作用。用荧光显微镜检测慢病毒对BaF3细胞的感染率,用台盼蓝拒染法检测细胞的增殖能力;用RT-PCR和Western blot分别检测P210bcr/ablmRNA和蛋白的表达。结果发现,P210bcr/ablshRNA能使BaF3-P210bcr/abl细胞中的P210bcr/ablmRNA及蛋白表达明显下降,并且能增强BaF3-P210bcr/abl细胞对伊马替尼的敏感性,与不表达P210bcr/ablshRNA的BaF3-P210bcr/abl细胞相比,伊马替尼对该细胞系的IC50下降50%以上。将该细胞由尾静脉移植到受致死剂量照射的裸小鼠体内,移植该细胞的小鼠生存期较移植BaF3-P210bcr/abl细胞的小鼠生存期明显延长。结论:稳定表达针对P210bcr/abl基因融合区的shRNA可能增强CML常规治疗的效果。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 p210bcr/abl融合基因 RNA干扰 慢病毒载体
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靶向bcr/abl融合基因的RNAi对慢性粒细胞白血病K562增殖活性的影响 被引量：2
5
作者 潘彦鹏 曹献英 +4 位作者 武昭颖 常志杰 王银银 田博 郝新宝 《热带生物学报》 2014年第1期25-29,共5页
构建含bcr/abl RNAi慢病毒重组质粒载体并包装病毒,转染K562细胞,通过Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应。采用CCK-8法、软琼脂细胞集落形成实验检测RNAi对K562细胞的增殖影响作用。结果表明,慢病毒介导bcr/abl基因RNAi明显... 构建含bcr/abl RNAi慢病毒重组质粒载体并包装病毒,转染K562细胞,通过Real-time PCR及Western blotting验证干扰效应。采用CCK-8法、软琼脂细胞集落形成实验检测RNAi对K562细胞的增殖影响作用。结果表明,慢病毒介导bcr/abl基因RNAi明显下调K562细胞中bcr/abl mRNA及P210bcr/abl融合蛋白,显著抑制了K562细胞的增殖,这说明靶向bcr/abl融合基因的RNAi有望成为治疗慢性粒细胞白血病的有效方法。 展开更多
关键词 慢病毒 BCR abl基因 p210bcr ABL 增殖
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实时荧光定量PCR检测慢性髓性白血病患者BCR/ABL(P210)mRNA水平的价值分析
6
作者 陆晓辉 张君帅 +1 位作者 扎西普赤 央珍 《黑龙江医药》 2025年第2期445-448,共4页
目的:探讨实时荧光定量PCR(qPCR)检测慢性髓性白血病(CML)患者BCR/ABL(P210)mRNA水平的价值。方法:采集2022年1月—2024年8月在日喀则市人民医院确诊并收治的105例初诊CML患者的外周血标本,用qPCR测定其BCR/ABL(P210)mRNA水平并比较不... 目的:探讨实时荧光定量PCR(qPCR)检测慢性髓性白血病(CML)患者BCR/ABL(P210)mRNA水平的价值。方法:采集2022年1月—2024年8月在日喀则市人民医院确诊并收治的105例初诊CML患者的外周血标本,用qPCR测定其BCR/ABL(P210)mRNA水平并比较不同分期患者间的表达差异,以及BCR/ABL(P210)mRNA水平与临床指标的相关性。结果:不同分期CML患者的WBC、Hb、PLT、BCR/ABL(P210)mRNA水平存在差异(P<0.05);从慢性期到急变期,WBC和BCR/ABL(P210)mRNA水平逐渐上升,Hb、PLT水平逐渐下降(P<0.05)。CML患者BCR/ABL(P210)mRNA表达与WBC呈正比,与Hb和PLT呈反比(P<0.05)。结论:CML患者的BCR/ABL(P210)mRNA水平随着CML病情的进展而逐渐升高,且CML患者BCR/ABL(P210)mRNA表达与WBC呈正比,与Hb和PLT呈反比,可以用于临床辅助评估疾病进展和治疗反应。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR 慢性髓性白血病 BCR/ABL(P210) MRNA水平
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p210^(bcr-abl)抗原的T细胞表位鉴定及其特异性CTL细胞检测 被引量：1
7
作者 张俊 王丽珩 +3 位作者 龚卫娟 钱亚云 姜扬文 季明春 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1161-1163,1166,共4页
目的:探讨p210bcr-abl抗原的免疫原性,预测并鉴定该蛋白来源的HLA-A2限制性T细胞表位,并在慢性粒细胞白血病患者中检测其特异性CTL细胞分布。方法:首先利用生物信息学软件预测并选取2个p210bcr-abl来源的表位:BCR-ABL642与BCR-ABL926m;T... 目的:探讨p210bcr-abl抗原的免疫原性,预测并鉴定该蛋白来源的HLA-A2限制性T细胞表位,并在慢性粒细胞白血病患者中检测其特异性CTL细胞分布。方法:首先利用生物信息学软件预测并选取2个p210bcr-abl来源的表位:BCR-ABL642与BCR-ABL926m;T2细胞亲和力实验鉴定短肽与HLA-A2分子的亲和力;然后制备分别锚合这2种表位的可溶性HLA-A2四聚体,流式检测术检测其特异性CTL细胞在CML患者外周血CD8+T细胞中的频率。结果:与健康人群相比,BCR-ABL642和BCR-ABL926m肽表位限制性CTL细胞的频率在CML患者均明显升高(P<0.01);而来自流感病毒短肽的特异性CTL细胞在两个群体中无统计学差异(P>0.05);另外,BCR-ABL642特异性CTL细胞的频率在CML慢性期和急变期之间有统计学差异(P<0.05)。结论:所选2种肽表位均具有免疫原性,可建立基于这2种短肽的免疫治疗措施。 展开更多
关键词 p210bcr-abl 表位 可溶性HLA四聚体 CTL 慢性粒细胞白血病
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定量检测bcr—abl（P210）转录本水平多中心比对研究 被引量：11
8
作者 秦亚溱 程辉 +10 位作者 岑建农 耿素霞 李庆华 李小青 林振兴 马道新 乔纯 王云贵 李金兰 李玲娣 黄晓军 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期104-108,共5页
目的探讨国内不同医院bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值的可比性。方法2010年4月至2011年8月，10家医院进行了4次样本派发以比对bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值。由北京大学人民医院统一制备4个梯度（10倍系列稀释）的bcr—... 目的探讨国内不同医院bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值的可比性。方法2010年4月至2011年8月，10家医院进行了4次样本派发以比对bcr—abl（P210）转录本水平定量检测值。由北京大学人民医院统一制备4个梯度（10倍系列稀释）的bcr—abl（P210）转录本水平细胞样本，加入TRIzol中，每个梯度每家医院各派发3份平行样品，每份样品细胞数为8×10^6，各单位分别按照自身实验方案采用实时定量PCR技术检测bcr—abl转录本水平。应用回归方程计算各单位转换系数（CF）。结果每次比对，各医院检测结果之间均存在差异。除个别医院外，各医院检测结果总体一致并与细胞稀释度一致。各家医院的CF均存在波动，其中3家医院比较稳定，4次比对CF范围分别为2．8～5．2、1．2—2．8和2．2～6．8；两家医院的CF变化较大，范围分别为0．76～7．0和2．1～18．7；三家医院各有1～2次检测结果明显偏离实际水平而无法计算出CF，能够算出的CF范围分别为1．9～19．2、3．6～7．6和0．18～14．7；一家医院因为中途更换主要试剂只有2次比对的CF（3．3和5．0）。结论通过比对获得CF能够实现不同医院bcr—abl转录本水平检测值的可比性。检测体系稳定可靠是获得准确CF的前提。 展开更多
关键词 融合基因 bcr—abl(P210) 聚合酶链反应 实时定量 转换系数
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