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融合表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因的DNA疫苗的构建及其免疫应答 被引量:3
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作者 陈关平 吴涛 +1 位作者 黄勤锋 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期973-977,共5页
用小鼠模型评价融合表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因的DNA疫苗和不同免疫策略的免疫应答。用PCR方法扩增牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因,分别克隆到pMD18-T载体并测序验证正确后将其克隆到质粒p... 用小鼠模型评价融合表达牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因的DNA疫苗和不同免疫策略的免疫应答。用PCR方法扩增牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因和O型口蹄疫病毒P12A3C基因,分别克隆到pMD18-T载体并测序验证正确后将其克隆到质粒pcDNA的相应位点获得质粒pcDNA-VP22-P12A3C。然后将BALB/c小鼠分成7组进行免疫。结果表明,DNA疫苗pcDNA-VP22-P12A3C诱导的细胞免疫水平超过了灭活疫苗,DNA疫苗与灭活疫苗联合免疫组体液免疫水平接近灭活疫苗组而细胞免疫水平远高于灭活疫苗组,为进一步研究VP22和P12A3C融合表达的基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 牛疱疹病毒Ⅰ型VP22基因 O型口蹄疫病毒p12a3c基因 DNA疫苗 免疫应答
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牛α-IFN及FMDV P12A3C双表达载体的构建及其在BHK-21细胞中的表达
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作者 杨彬 兰喜 +3 位作者 李宝玉 殷相平 李学瑞 柳纪省 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期80-84,共5页
从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成... 从口蹄疫病毒Asia I/Jiangsu毒株的细胞毒中提取总RNA,通过RT-PCR方法分别获得FMDV的P12A及3C基因;同时以pMD18-T-α-IFN质粒为模板,PCR扩增得到α-IFN基因。将α-IFN基因及FMDV P12A及3C基因连接至双启动子表达载体pBudCE4.1上,构建成双效表达质粒pBudCE4.1-α-IFN-P12A3C,经电泳、PCR、双酶切和DNA测序鉴定表明双效质粒载体构建成功。用此重组质粒转染BHK-21细胞后并对其表达情况进行检测,表明该双表达质粒在BHK-21细胞中能够成功表达。以此重组质粒免疫乳鼠后12 h,按100 TCID50/0.1 mL的量进行攻毒,结果发现该质粒能够抑制病毒的增殖,对乳鼠有一定的保护作用。结果表明成功构建了牛α-IFN及FMDV P12A3C组合基因双表达载体,为进一步研究口蹄疫基因疫苗提供前期基础。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 P12A基因 3C基因 Α-干扰素 pBudCE4.1载体
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OMⅢ株口蹄疫病毒P1-2A-3C腺病毒载体的构建
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作者 李杨 柳纪省 《湖南农业科学》 2010年第6期125-127,130,共4页
选取O型口蹄疫病毒(FMDV)OMⅢ株的P1-2A和3C作为目的基因,分别扩增出目的片断后,定向亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,得到重组载体pAdTrack-P12A3C,重组穿梭质粒和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞... 选取O型口蹄疫病毒(FMDV)OMⅢ株的P1-2A和3C作为目的基因,分别扩增出目的片断后,定向亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV中,得到重组载体pAdTrack-P12A3C,重组穿梭质粒和腺病毒骨架载体pAdeasy-1共同电转化入大肠杆菌BJ5183感受态细胞,同源重组后得到重组腺病毒质粒(pAd-P12A3C)。将重组腺病毒质粒线性化后转染至HEK293细胞中可观察到典型的绿色荧光,从重组腺病毒的基因组中可扩增到P12A3C基因,证实获得了含有P12A3C的重组腺病毒。 展开更多
关键词 口蹄疫病毒 p12a3c基因 重组腺病毒
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Transformation of Two VP1 Genes of O-and Asia 1-Type Foot-and-Mouth Disease Virus into Maize 被引量:2
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作者 ZHANG Su-zhi ZHANG Gui-ling +3 位作者 RONG Ting-zhao PAN Li ZHOU Peng ZHANG Yong-guang 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2011年第5期661-667,共7页
The expression of antigens in transgenic plants has increasingly been used as an alternative to the classical methodologies for the development of experimental vaccines.This paper reports here the development of a nov... The expression of antigens in transgenic plants has increasingly been used as an alternative to the classical methodologies for the development of experimental vaccines.This paper reports here the development of a novel oral immunization system for foot-and-mouth disease (FMD) in transgenic maize with two serotypes of the structural protein VP1 of the foot-and-mouth disease virus (FMDV) viz.,O-and Asia 1-type,respectively.The transgenic plantlets were identified and investigated by polymerase chain reaction (PCR),Southern blot,and real-time PCR.Moreover,it was found that the VP1 genes in transgenic plants could be transmitted stably to the next generation through PCR detection.To our knowledge,this is the first report in an attempt to induce a protective systemic antibody response in animals by feeding the transgenic plants in which two serotypes antigen protein of FMDV expressed together.Results of the experiment provide the possibility of using plant-based vaccines as feedstuff or feedstuff additives. 展开更多
关键词 FMDV p12a3c gene MAIZE TRANSFORMATION edible vaccine
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