细粒棘球绦虫(中国大陆株)诊断抗原P-29基因的表达、纯化及免疫原性初步分析 被引量：4

1

作者 师志云 李昭宇 +4 位作者 卜阳 王娅娜 李宗吉 马锐 赵巍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1065-1067,共3页

目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构... 目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构建基因工程菌株,并表达、纯化重组蛋白,经Western-blot、ELISA分析重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核重组表达载体EgP-29/pET-28a/BL21(DE3)plysS,并纯化出浓度较高的重组蛋白。ELISA检测显示,用表达、纯化的重组蛋白免疫小鼠,诱导产生了特异性抗体IgG,Western-blotting鉴定该抗体能识别重组抗原及天然抗原原头蚴。结论重组蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多

关键词 细粒棘球绦虫 诊断抗原p-29基因 蛋白表达 纯化 免疫原性

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细粒棘球蚴重组抗原P-29结构与功能的生物信息学分析 被引量：1

2

作者 丁淑琴 师志云 +1 位作者 朱佳佳 赵巍 《国外医学（医学地理分册）》 CAS 2011年第2期87-90,共4页

目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴重组抗原P-29氨基酸序列的结构与功能。方法应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及DNAstar、Rasmol等软件包分析P-29与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对;预测二级结构、三级结构;预测... 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴重组抗原P-29氨基酸序列的结构与功能。方法应用NCBI、Expasy等在线生物信息学网站及DNAstar、Rasmol等软件包分析P-29与其他物种的同源序列,进行多序列同源比对;预测二级结构、三级结构;预测主要抗原表位等。结果细粒棘球绦虫重组抗原P-29与其他物种的同源性比对结果表明与多房棘球绦虫同源性最高为97%,依次为日本血吸虫73.9%,冈比亚按蚊70.5%,埃及伊蚊66.2%;预测该蛋白分子质量约为27 ku,PI为5.69,具有1个跨膜区,位于212-215,8个抗原表位,其结构域位于5-238位。结论生物信息学预测结果提示该可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 p-29 生物信息学 结构 功能

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细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因的克隆和序列分析 被引量：6

3

作者 师志云 王娅娜 +4 位作者 马锐 于晶晶 于辛酉 高岭 赵巍 《宁夏医学院学报》 2007年第4期337-339,共3页

目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)诊断抗原(diagnostic antigen)P-29基因并进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GenBank公共数据库检索出细粒棘球蚴诊断抗原P-29基因的已知序列设计一对引物,通过RT-... 目的获得细粒棘球蚴(E.granulosus)诊断抗原(diagnostic antigen)P-29基因并进行序列分析。方法从包虫病患者体内获取细粒棘球蚴原头蚴提取总RNA,根据GenBank公共数据库检索出细粒棘球蚴诊断抗原P-29基因的已知序列设计一对引物,通过RT-PCR技术扩增出细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因,将其重组到pGEM-T载体后进行序列测定和分析。结果成功扩增出细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因,测序表明该片段由717bp组成,与已发表基因核苷酸序列相比,同源性为100%,推导编码氨基酸序列同源性为100%。结论成功克隆细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29基因序列,可做为包虫病重组抗原的候选基因。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴 诊断抗原p-29基因 克隆 序列分析

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细粒棘球绦虫(中国大陆株)特异性抗原P-29重组蛋白的生物信息学分析 被引量：1

4

作者 王元 王娅娜 +2 位作者 师志云 刘丽华 赵巍 《宁夏医科大学学报》 2012年第7期673-675,691,F0003,共5页

目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29氨基酸序列,了解该蛋白的特性,预测其抗原表位,为P-29进一步应用研究提供理论依据。方法应用DNAStar、BIOSUN、EXPASY/SignalP、protparam、psite/softberry生物分析软... 目的应用生物信息学分析软件预测细粒棘球蚴中国大陆株诊断抗原P-29氨基酸序列,了解该蛋白的特性,预测其抗原表位,为P-29进一步应用研究提供理论依据。方法应用DNAStar、BIOSUN、EXPASY/SignalP、protparam、psite/softberry生物分析软件对P-29的二级结构、抗原表位、信号肽、极性进行预测分析,用EXPASY/SWISSMODEL对蛋白的三维结构进行模拟。结果 P-29基因开放阅读框编码一个由238个氨基酸残基组成的多肽,分子式为C1180H1906N324O386S9,其蛋白分子量为27095.58 Da,等电点为5.649,有37个碱性氨基酸,41个酸性氨基酸,68个极性氨基酸和76个疏水性氨基酸,半衰期是30 h,结构稳定,呈亲水性且为带负电荷的酸性蛋白,α-螺旋水平较高,有15个抗原决定簇,无信号肽,有2个N-糖基化位点,6个蛋白激酶C磷酸化位点,11个酪蛋白激酶II磷酸化位点及7个微体羧基端目标信号位点。结论根据生物信息学预测的结果表明,P-29可能是免疫诊断、药物作用及疫苗潜在的靶分子。 展开更多

关键词 细粒棘球蚴中国大陆株 p-29 生物信息学

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甲基对硫磷降解菌P-29的筛选及降解特性研究 被引量：2

5

作者 华菊玲 邱星辉 +3 位作者 黄瑞荣 罗任华 李小美 涂雪琴 《江西农业学报》 CAS 2007年第2期66-67,共2页

采用富集培养法,从长期受农药污染的土壤中分离得到1株能高效降解甲基对硫磷的菌株P-29,经鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。该菌株以甲基对硫磷为唯一碳源时,30℃培养30h降解率达84.69%,其酶活性随培养时间的增加呈上升趋势。

关键词 甲基对硫磷 降解 PSEUDOMONAS AERUGINOSA p-29 筛选

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亚洲带绦虫包虫诊断抗原P-29基因克隆表达

6

作者 周灵贵 戴佳琳 +5 位作者 黄江 廖兴江 胡旭初 余新炳 申萍香 郎书源 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1090-1092,共3页

目的识别亚洲带绦虫包虫诊断抗原P-29(Hydatid disease diagnostic antigen P-29)的已知序列并行克隆和蛋白表达及免疫学研究。方法利用在线生物信息学工具序列分析后以亚洲带绦虫成虫包虫诊断抗原P-29基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)... 目的识别亚洲带绦虫包虫诊断抗原P-29(Hydatid disease diagnostic antigen P-29)的已知序列并行克隆和蛋白表达及免疫学研究。方法利用在线生物信息学工具序列分析后以亚洲带绦虫成虫包虫诊断抗原P-29基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。结果重组体构建成功并以包涵体形式存在,破包涵体纯化蛋白并得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫病人血清识别,表明其具有免疫反应性。结论亚洲带绦虫成虫包虫诊断抗原P-29可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达。 展开更多

关键词 亚洲带绦虫 包虫诊断抗原p-29 基因克隆 原核表达 免疫反应性

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过表达miRNA-291b-3p诱导H9C2细胞胰岛素抵抗 被引量：3

7

作者 隋小芳 李雪杰 +4 位作者 王凤玲 索树珍 杨军 董天崴 张磊艺 《中国实验诊断学》 2016年第2期182-185,共4页

目的研究过表达miRNA-291b-3p对诱导H9C2细胞胰岛素抵抗的影响。方法 1用10ng/ml TNF-α处理心肌细胞系H9C2细胞24h,通过Real time PCR检测miR-291b-3p表达水平,Western blot分析AKT/GSK信号通路活性,用蒽酮法检测细胞糖原水平;2构建miR... 目的研究过表达miRNA-291b-3p对诱导H9C2细胞胰岛素抵抗的影响。方法 1用10ng/ml TNF-α处理心肌细胞系H9C2细胞24h,通过Real time PCR检测miR-291b-3p表达水平,Western blot分析AKT/GSK信号通路活性,用蒽酮法检测细胞糖原水平;2构建miR-291b-3p mimics腺病毒载体,感染H9C2细胞48h,分析miR-291b-3p水平、AKT/GSK信号通路活性和糖原水平的变化。结果 1TNF-α处理H9C2细胞24h,miR-291b-3p的表达水平明显升高,同时AKT/GSK信号通路活性受到抑制,心肌细胞糖原水平升高;2miR-291b-3p mimics腺病毒感染H9C2细胞48h,miR-291表达水平升高,AKT/GSK信号通路活性降低,心肌细胞糖原水平升高。结论 H9C2细胞中TNF-α或过表达miR-291b-3p可抑制AKT/GSK信号通路活性,出现胰岛素抵抗。 展开更多

关键词 心肌细胞 胰岛素抵抗 miR-291b-3p TNF-α

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^(31)P、^(29)Si MAS NMR 法研究磷酸盐催化剂的结构

8

作者 杨一青 孔祥铭 +3 位作者 朱志荣 黄尔峰 陈永福 姚亚平 《石油化工》 CAS CSCD 北大核心 1997年第8期520-523,共4页

用３１Ｐ、２９ＳｉＭＡＳＮＭＲ法研究磷酸盐催化剂在制备过程中形成的结构及吸潮对催化剂结构的影响。结果表明，原料混合后立即生成添加元素的磷酸盐；干燥后，ＳｉＯ２与磷酸以无定型状态相结合；焙烧后大部分转化为焦磷酸硅和正磷... 用３１Ｐ、２９ＳｉＭＡＳＮＭＲ法研究磷酸盐催化剂在制备过程中形成的结构及吸潮对催化剂结构的影响。结果表明，原料混合后立即生成添加元素的磷酸盐；干燥后，ＳｉＯ２与磷酸以无定型状态相结合；焙烧后大部分转化为焦磷酸硅和正磷酸硅，并且ＳｉＯ２也转化，不同于原料中的ＳｉＯ２；活化后大部分焦磷酸硅转化为正磷酸硅与游离磷酸，一部分正磷酸硅进一步转化为ＳｉＯ２与游离磷酸，转化生成的ＳｉＯ２不同于原料中的ＳｉＯ２，与焙烧后产生的ＳｉＯ２相同；在整个过程中添加元素的磷酸盐结构较为稳定。吸潮试验表明吸潮对催化剂结构无明显影响。将催化剂结构与活性关联，认为在一定范围内充分活化，有利于形成高活性催化剂，并推断吸潮后催化剂经干燥可复原。 展开更多

关键词 ^31P MAS NMR ^29Si MAS NMR 磷酸盐催化剂

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塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29增殖和凋亡的影响

9

作者 彭杰 张桂英 肖志强 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期261-265,共5页

目的 :体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9细胞增殖和凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法采用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,流式细胞仪 (FCM)、吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术 ,研究塞来昔布对HT 2 9细胞... 目的 :体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9细胞增殖和凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法采用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,流式细胞仪 (FCM)、吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术 ,研究塞来昔布对HT 2 9细胞增殖抑制的影响。结果 :体外塞来昔布抑制HT 2 9细胞生长 ,呈浓度和时间依赖性。DNA直方图示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率在 (7.31± 2 .37) %～ (4 8.30± 2 .86 ) % ;塞来昔布使G0 /G1期细胞比例升高 ,S期和G2 /M期比例下降 ,呈一定剂量效应关系。典型的凋亡形态学改变 :细胞体积缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。塞来昔布下调细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2 ,CDK4蛋白表达、上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制因子P2 1WAF1/CIP1蛋白表达。结论 :塞来昔布抑制HT 2 9细胞增殖、诱导凋亡可能与阻止细胞周期进展有关。 展开更多

关键词 塞来昔布 大肠癌 细胞株 HT-29增殖 细胞凋亡 细胞增殖 CDK2 肿瘤

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不同磷钾肥对黔油29号品质及产量的影响 被引量：3

10

作者 罗莉斯 陈德珍 +3 位作者 周应友 曾令琴 曾兵 李大雄 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第9期72-75,共4页

为了探索不同种类磷钾肥对优质杂交油菜主要品质性状和产量的影响,指导优质杂交油菜生产,采用田间试验方法,比较了不同种类磷、钾肥料与黔油29号品质性状及产量的关系。结果表明:统一施用氮肥的条件下,增施磷、钾肥均可改善黔油29号植... 为了探索不同种类磷钾肥对优质杂交油菜主要品质性状和产量的影响,指导优质杂交油菜生产,采用田间试验方法,比较了不同种类磷、钾肥料与黔油29号品质性状及产量的关系。结果表明:统一施用氮肥的条件下,增施磷、钾肥均可改善黔油29号植株性状、增加一次有效分枝、单株有效角果数和每角粒数;在试验范围内,油菜产量随着施用磷钾肥用量的增大而增加;施用不同种类磷钾肥对黔油29号的芥酸、硫苷、含油量和粗蛋白含量的影响均不显著。 展开更多

关键词 黔油29号 磷钾肥 品质 产量

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磷对铝胁迫下尾巨桉生长生理方面的缓解作用 被引量：8

11

作者 侯文娟 胡厚臻 +3 位作者 鲁莹莹 李桃祯 滕维超 王凌晖 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期5-9,19,共6页

实验以尾巨桉DH32-29(E.urophylla×E.grandis DH32-29)为实验材料,用沙培法研究外源磷(P)对铝胁迫下尾巨桉生长和生理方面的缓解作用。结果表明:(1)5 mmol·L^(-1)铝显著抑制尾巨桉的根、茎、叶生物量,显著提高根冠比。(2)铝... 实验以尾巨桉DH32-29(E.urophylla×E.grandis DH32-29)为实验材料,用沙培法研究外源磷(P)对铝胁迫下尾巨桉生长和生理方面的缓解作用。结果表明:(1)5 mmol·L^(-1)铝显著抑制尾巨桉的根、茎、叶生物量,显著提高根冠比。(2)铝胁迫抑制叶片叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素质量分数,降低ω(叶绿素a)/ω(叶绿素b)值。(3)铝胁迫下叶片细胞膜透性显著增大,膜脂过氧化的产物丙二醛显著增加,细胞可溶性糖和可溶性蛋白质量分数显著降低,游离脯氨酸质量分数显著增大。(4)P缓解铝胁迫对光合色素的影响以及调节活性氧代谢以维持细胞膜结构稳定,有效缓解铝胁迫对尾巨桉生长、光合色素以及抗性生理造成的伤害,磷铝互作有利于缓解铝胁迫,P施用浓度为200μmol·L^(-1)时,缓解铝胁迫效果较好。 展开更多

关键词 尾巨桉DH32-29 铝胁迫 磷 生长 生理

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TiC颗粒增强钛基复合材料的形变断裂 被引量：20

12

作者 毛小南 周廉 +1 位作者 曾泉浦 魏海荣 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期217-220,共4页

通过对 Ti C颗粒增强钛基复合材料断裂研究表明 :Ti C颗粒的缺陷比例对复合材料的断裂裂纹扩展速率有较大影响。形状规则且无缺陷的粒子在受力的初期不易破断 ,可较大提高裂纹扩展所需能量。反之 ,易破碎的粒子则增加了裂纹尖端的扩展应... 通过对 Ti C颗粒增强钛基复合材料断裂研究表明 :Ti C颗粒的缺陷比例对复合材料的断裂裂纹扩展速率有较大影响。形状规则且无缺陷的粒子在受力的初期不易破断 ,可较大提高裂纹扩展所需能量。反之 ,易破碎的粒子则增加了裂纹尖端的扩展应力 ,提高了裂纹扩展速率。适当的热处理可提高裂纹扩展所需塑性功 ,从而在一定范围内改善复合材料塑性。 展开更多

关键词 塑性功 应力 颗粒增强钛基复合材料 断裂

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Cr对TiMn基贮氢电极合金活化性能及电化学容量的影响 被引量：5

13

作者 张勇 郭生武 +1 位作者 罗东 柳永宁 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期262-265,共4页

探讨了 Cr部分取代 V对 Ti Mn基贮氢电极合金活化性能的影响 ,并对合金电极的微观组织进行了分析和讨论。结果表明 ,Cr部分取代 V能够提高 Ti Mn基合金的活化性能 ,当 Cr含量为 0 .0 1时 ,获得了 397m Ah/g的放电容量。但随着 Cr含量的... 探讨了 Cr部分取代 V对 Ti Mn基贮氢电极合金活化性能的影响 ,并对合金电极的微观组织进行了分析和讨论。结果表明 ,Cr部分取代 V能够提高 Ti Mn基合金的活化性能 ,当 Cr含量为 0 .0 1时 ,获得了 397m Ah/g的放电容量。但随着 Cr含量的提高 ,合金的电化学容量及活化性能反而有所下降。只有加入适量的 Cr,才能使得合金的电化学容量和活化性能达到最佳。XRD分析表明 ,该合金有两个主相 :富 V的 V3Ni2 相和富 Ti的 Ti Mn2 相。 展开更多

关键词 贮氢电极合金 活化性能 电化学容量 铬

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镍基单晶超合金的剪切强度研究 被引量：4

14

作者 岳珠峰 陶仙德 吕震宙 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期221-224,共4页

通过设计滑移系直接受分切应力的剪切试样形式 ,对镍基单晶超合金在 70 0℃、850℃和 950℃时的瞬时剪切强度和剪切蠕变性能进行了研究。试验结果表明 ,本研究试样形式可以直接测量单滑移系的滑移规律 ,未发现晶体取向相关性。通过转换... 通过设计滑移系直接受分切应力的剪切试样形式 ,对镍基单晶超合金在 70 0℃、850℃和 950℃时的瞬时剪切强度和剪切蠕变性能进行了研究。试验结果表明 ,本研究试样形式可以直接测量单滑移系的滑移规律 ,未发现晶体取向相关性。通过转换公式 ,瞬时剪切强度与圆棒试验结果相吻合。应用扫描电镜 (SEM)对试样断口分析表明 ,断口由平整的小刻面组成 ,从而进一步验证本试验的有效性 ,同时发现 ,由夹杂形成的空洞和平行受载方向的裂纹对瞬时和蠕变强度起着重要影响。 展开更多

关键词 镍基单晶超合金 剪切试样形式 瞬时剪切强度

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化学沉积显示法在近α钛合金研究中的应用 被引量：1

15

作者 毛冕卿 朱玉斌 王克光 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第4期279-282,共4页

在常规的水基腐蚀剂不能有效地显示一些近α钛合金的晶界时 ,应用化学沉积法可以真实、完整、清晰地显示它们的晶粒形态 ,并且能充分表现孪晶形貌。实验结果表明 ,两种化学沉积配方显示的金相组织在显微镜下可得到彩色金相图片 ,在黑白... 在常规的水基腐蚀剂不能有效地显示一些近α钛合金的晶界时 ,应用化学沉积法可以真实、完整、清晰地显示它们的晶粒形态 ,并且能充分表现孪晶形貌。实验结果表明 ,两种化学沉积配方显示的金相组织在显微镜下可得到彩色金相图片 ,在黑白摄影的条件下同样可获得满意的效果。 展开更多

关键词 晶界 化学沉积法 Α钛合金 金相分析

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GaAs/Si异质外延的新进展

16

作者 黄善祥 林金庭 +6 位作者 陆正 沈浩瀛 王翠莲 郑有(火斗 张荣 严勇 冯端 《固体电子学研究与进展》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期324-331,共8页

本工作从原理和实验技术上证实了氯化物VPE技术可用于CaAs/Si异质外延.CaAs/Si外延层表面平整光亮.对外延层进行了组分测量、高分辨率电镜和X-射线衍射分析.结果表明,外延层是符合化学计量比的CaAs单晶,外延层浓度可控范围为10^(14)～10... 本工作从原理和实验技术上证实了氯化物VPE技术可用于CaAs/Si异质外延.CaAs/Si外延层表面平整光亮.对外延层进行了组分测量、高分辨率电镜和X-射线衍射分析.结果表明,外延层是符合化学计量比的CaAs单晶,外延层浓度可控范围为10^(14)～10^(17)cm^(-3),纵向掺杂分布平坦.用这种材料制成MESFET样管,跨导为40mS/mm. 展开更多

关键词 GAAS/SI 异质外延 外延生长

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日本文化遗产体系(下) 被引量：6

17

作者 孙洁 《西北民族研究》 CSSCI 北大核心 2013年第4期29-42,9,共15页

日本在漫长的历史发展历程中,孕育了众多世代传承、守护至今的文化遗产,日语把这些文化遗产称为"文化财"。在日本1992年加入《保护世界文化和自然遗产国际公约》之后",文化遗产"作为一个新近普及开来的词语与"... 日本在漫长的历史发展历程中,孕育了众多世代传承、守护至今的文化遗产,日语把这些文化遗产称为"文化财"。在日本1992年加入《保护世界文化和自然遗产国际公约》之后",文化遗产"作为一个新近普及开来的词语与"文化财"一词在含义上基本相通,但也略有差别。本文将在对有关概念作解释的基础上,从法规的发展历程、具体分类、管理保护机构、宣传活动、遗产教育、研究成果等多方面,综合介绍日本文化遗产体系的概况。 展开更多

关键词 日本 文化遗产体系 文化财

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