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omp25c基因对马耳他布鲁菌疫苗株M5的毒力及免疫保护性的影响 被引量：1
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作者 曲勍 王玉飞 +8 位作者 乔凤 钟志军 徐杰 杜昕颖 汪舟佳 赵瑾 黄留玉 于雅琴 陈泽良 《生物技术通讯》 CAS 2009年第5期639-642,共4页
目的:初步评价马耳他布鲁菌M5疫苗株omp25c基因对其毒力及免疫保护性的影响。方法:利用同源重组的方法,用卡那霉素抗性基因替换M5的omp25c(BMEI1829)基因,得到缺失突变株M5Δomp25c;分别用M5Δomp25c和M5免疫小鼠,在免疫后不同时间点处... 目的:初步评价马耳他布鲁菌M5疫苗株omp25c基因对其毒力及免疫保护性的影响。方法:利用同源重组的方法,用卡那霉素抗性基因替换M5的omp25c(BMEI1829)基因,得到缺失突变株M5Δomp25c;分别用M5Δomp25c和M5免疫小鼠,在免疫后不同时间点处死小鼠,通过脾脏细菌计数分析缺失突变株在小鼠体内的毒力,通过检测IgG和IFN-γ的水平分析缺失突变株在小鼠体内诱导的体液和细胞免疫应答能力,通过攻毒实验评价突变株的免疫保护效果。结果:与M5株相比,M5Δomp25c在小鼠脾脏内的存活时间较短,在第4周时未能检出;M5Δomp25c免疫小鼠诱导产生的IgG水平在第4周达到最高,第6周开始下降;M5Δomp25c免疫小鼠诱导分泌的IFN-γ水平在第4周达到最高为790pg/mL,第6周时浓度降至530pg/mL,整体趋势显著低于阳性对照组;接种了M5Δomp25c的小鼠用布鲁菌强毒株16M攻毒后,免疫保护效果也下降。结论:缺失omp25c的突变株毒力减弱,诱导的体液和细胞免疫水平及免疫保护效果下降,说明omp25c基因是马耳他布鲁菌M5疫苗株的毒力相关基因,对疫苗株M5的免疫应答和免疫保护效果有一定的影响。 展开更多
关键词 马耳他布鲁菌 omp25c基因 毒力 免疫保护性
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新疆天山马鹿布氏杆菌病流行病学调查 被引量：3
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作者 武军元 康强 钱文熙 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第9期235-237,共3页
采用平板凝集试验、试管凝集试验对采自新疆3个集约化养殖鹿场、1个散养鹿群的410份血清样本进行布氏杆菌特异性抗体检测;采用分子生物学方法,根据Gen Bank公布的布氏杆菌外膜蛋白Omp25c的基因序列设计特异性引物,对疑似布氏杆菌阳性的1... 采用平板凝集试验、试管凝集试验对采自新疆3个集约化养殖鹿场、1个散养鹿群的410份血清样本进行布氏杆菌特异性抗体检测;采用分子生物学方法,根据Gen Bank公布的布氏杆菌外膜蛋白Omp25c的基因序列设计特异性引物,对疑似布氏杆菌阳性的10份羊水病料进行PCR扩增,并将扩增产物克隆到p GEM-T Easy Vector进行测序。结果表明,血清稀释比例为1∶25时,平板凝集试验、试管凝集试验的抗体阳性率分别为15.1%、14.6%,4份羊水样本的PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上均观察到预期149 bp大小的扩增条带,BLAST比对分析显示该扩增序列与布氏杆菌基因组的核苷酸序列同源性为100%,从而判定新疆集约化养殖的天山马鹿存在布氏杆菌病的感染。 展开更多
关键词 布氏杆菌 天山马鹿 平板凝集 试管凝集 omp25c
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