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沙眼衣原体OmcBc基因的克隆、表达与抗原性研究 被引量：4
1
作者 王洁 张颖骞 +1 位作者 钟光明 余平 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期1558-1561,共4页
目的探讨重组沙眼衣原体OmcB基因C端编码蛋白的抗原性,为衣原体感染性疾病的早期诊断和疫苗研究提供新的靶标。方法采用PCR技术从沙眼衣原体基因组中扩增OmcB的C端(T270-Y553)序列,并构建pGEX-6p-CtOmcBc原核表达质粒,转染大肠杆菌XL-1b... 目的探讨重组沙眼衣原体OmcB基因C端编码蛋白的抗原性,为衣原体感染性疾病的早期诊断和疫苗研究提供新的靶标。方法采用PCR技术从沙眼衣原体基因组中扩增OmcB的C端(T270-Y553)序列,并构建pGEX-6p-CtOmcBc原核表达质粒,转染大肠杆菌XL-1blue,IPTG诱导表达重组GST-OmcBc融合蛋白;收集120例Ct生殖道感染患者血清,以CtD血清型灭活的EB分别于皮下和腹腔免疫7只新西兰大白兔和5只Balb/C小鼠,以CtD血清型活的EB滴鼻感染9只Balb/C小鼠,分别收集这些动物免疫血清;间接免疫荧光法检测各血清中抗衣原体特异性抗体的效价;ELISA法检测重组GST-OmcBc融合蛋白与各免疫血清的反应性。结果成功构建了pGEX-6p-CtOmcBc原核表达质粒,经测序显示插入基因长度为852bp,编码284个氨基酸。IPTG成功诱导表达了重组GST-OmcBc融合蛋白,其分子质量约为57kDa;所制备和收集的各免疫血清均含高滴度抗衣原体特异性抗体;ELISA结果显示重组GST-OmcBc融合蛋白对各免疫血清均具有强的抗原性。结论 CtOmcBc是衣原体的一个免疫优势蛋白,重组GST-OmcBc融合蛋白的成功表达及其良好的抗原性为进一步开展衣原体感染早期诊断研究和疫苗的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 omcb 抗原性
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McCoy和Hela229细胞沙眼衣原体持续感染模型及omcB与Euo基因的表达
2
作者 周细玉 陈文韬 +5 位作者 杨结仪 赵云虎 廖仪文 方铭恒 薛耀华 郑和平 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1451-1455,共5页
目的比较阿奇霉素诱导McCoy细胞与Hela229细胞建立的沙眼衣原体持续性感染模型及omcB和Euo基因表达情况。方法用相同浓度的沙眼衣原体分别感染McCoy和Hela229细胞,在感染22h后加入0.08μg/ml阿奇霉素,构建沙眼衣原体持续性感染模型;通... 目的比较阿奇霉素诱导McCoy细胞与Hela229细胞建立的沙眼衣原体持续性感染模型及omcB和Euo基因表达情况。方法用相同浓度的沙眼衣原体分别感染McCoy和Hela229细胞,在感染22h后加入0.08μg/ml阿奇霉素,构建沙眼衣原体持续性感染模型;通过荧光显微镜观察细胞形态,反转录PCR(RT-PCR)检测omcB和Euo基因表达。结果 McCoy细胞和Hela229细胞内,未加阿奇霉素处理组,沙眼衣原体包涵体较大,加入阿奇霉素处理组,沙眼衣原体包涵体均较小。持续性感染时,Hela229细胞omcB基因的表达较急性感染下调0.138±0.042倍,差异有统计学意义(t=35.120,P<0.001);McCoy和Hela229细胞Euo基因的表达较急性感染分别上调2.445±0.460倍和3.317±0.556倍,差异均有统计学意义(t=5.441,P=0.006;t=7.210,P=0.002);在McCoy和Hela229细胞持续感染时,Euo/omcB比值较急性感染分别上升2.100±0.050倍和24.820±2.630倍,差异均有统计学意义(t=32.201,11.240;均P<0.001)。结论在阿奇霉素诱导下,Hela229比McCoy细胞更容易建立沙眼衣原体持续性感染模型。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 持续感染 阿奇霉素 omcb基因 Euo基因 McCoy细胞 HELA229细胞
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沙眼衣原体外膜复合物蛋白B的研究进展
3
作者 孙悠娴 齐蔓莉 《皮肤性病诊疗学杂志》 2024年第2期123-128,共6页
沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外... 沙眼衣原体(CT)是最常见的引起性传播疾病的病原体,由于其症状的隐匿性,感染者往往无法在疾病早期得到诊疗,最终导致疾病慢性迁延,出现一系列严重的并发症和后遗症。沙眼衣原体外膜复合物蛋白B(OmcB)是衣原体中含量第二丰富的多功能外膜蛋白。OmcB在衣原体内丰富的含量以及在衣原体感染过程中表现出的强大的免疫原性,使其在帮助CT感染的诊断以及疫苗研发方面具有很好的应用前景。本文对OmcB的结构、定位及CT感染过程中的相关机理进行综述。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 外膜复合物蛋白B 免疫优势蛋白
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泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清抗衣原体免疫优势蛋白抗体的检测 被引量：4
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作者 肖萌 王敬 +1 位作者 刘全忠 齐蔓莉 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期889-891,共3页
目的检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清中的抗衣原体质粒编码蛋白3（Pgp3）、抗外膜蛋白复合物B蛋白c端肽（OmcBc）、抗ct841编码蛋白（CT841）和抗热休克蛋白60（HSP60）抗体。方法将编码上述4种蛋白基因的重组质粒和空质粒转化人大... 目的检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染者血清中的抗衣原体质粒编码蛋白3（Pgp3）、抗外膜蛋白复合物B蛋白c端肽（OmcBc）、抗ct841编码蛋白（CT841）和抗热休克蛋白60（HSP60）抗体。方法将编码上述4种蛋白基因的重组质粒和空质粒转化人大肠杆菌，IPTG诱导表达，并用谷胱甘肽磁珠进行纯化后包被ELISA孔板。收集天津医科大学总医院性病门诊泌尿生殖道沙眼衣原体感染者和未感染者血清各20份。ELISA法检测血清中上述蛋白抗体。结果20份沙眼衣原体感染者血清中Pgp3、OmcBc、CT841和HSP60抗体的检出率分别是14例（70％）、9例（45％）、8例（40％）、5例（25％）；20份无沙眼衣原体感染者血清中，仅1例检测到HSP60抗体。结论上述4种衣原体蛋白中，Pgp3的抗原性最强，抗体检出率最高；HSP60的抗原性最弱，抗体检出率最低。 展开更多
关键词 衣原体 沙眼 监控蛋白60 Pgp3 omcb CT841
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