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中间苍白杆菌SCUEC4菌株中尼古丁降解相关ocnC基因的克隆与表达 被引量：2
1
作者 夏珍珍 姚家成 +3 位作者 黄粤 冯喆 赵新颖 李晓华 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2020年第1期18-23,共6页
对中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnC基因进行克隆和表达,并对OcnC蛋白的表达条件进行优化,通过PCR扩增获得ocnC基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnC,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用不同的IPTG浓度、诱导温度... 对中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnC基因进行克隆和表达,并对OcnC蛋白的表达条件进行优化,通过PCR扩增获得ocnC基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnC,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,采用不同的IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对OcnC蛋白进行诱导表达.结果表明:ocnC基因大小为1344 bp,编码蛋白分子量为48.0 kDa,重组表达菌株在IPTG浓度为1.0 mmol·L^-1、诱导温度在37℃及诱导表达时间在20 h的优化表达条件时,OcnC蛋白的表达量较高. 展开更多
关键词 中间苍白杆菌scuec4菌株 尼古丁降解 ocnC基因 克隆与表达
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中间苍白杆菌尼古丁降解相关基因ocnH的克隆及功能分析 被引量：1
2
作者 王萌蕾 许倍滔 +3 位作者 夏珍珍 王力 张建国 李晓华 《中南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第4期457-461,共5页
通过PCR扩增获得中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnH基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,并对表达条件进行优化,用高效液相色谱法测定重组表达菌株的马来酸异构酶活性.结果表明:ocnH... 通过PCR扩增获得中间苍白杆菌SCUEC4菌株中与尼古丁降解相关的ocnH基因,构建重组质粒pET28a(+)-ocnH,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株进行异源表达,并对表达条件进行优化,用高效液相色谱法测定重组表达菌株的马来酸异构酶活性.结果表明:ocnH基因大小为585 bp,编码蛋白分子量约为20.6 kDa.重组表达菌株在IPTG浓度为0.6 mmol·L^(-1)、诱导温度为25℃、诱导表达时间为20 h时,OcnH蛋白的表达量较高.转入pET28a(+)-ocnH的大肠杆菌BL21(DE3)菌株具有将马来酸转化为富马酸的功能. 展开更多
关键词 中间苍白杆菌scuec4菌株 尼古丁降解 ocnH基因 克隆与表达 功能分析
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