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OSF1在毕赤酵母菌中的分泌表达及其生物活性
1
作者 康东红 王燕 +3 位作者 张洪美 冯潇雨 曹维 王萍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期274-283,共10页
为了研究人成骨细胞刺激因子(Human osteoblast-stimulating factor,OSF-1)的生物学活性,构建OSF-1高效毕赤酵母表达菌株并表达纯化具有生物活性的OSF-1。首先通过全基因人工合成的方法合成人osf-1基因,并克隆至毕赤酵母分泌表达载体pPI... 为了研究人成骨细胞刺激因子(Human osteoblast-stimulating factor,OSF-1)的生物学活性,构建OSF-1高效毕赤酵母表达菌株并表达纯化具有生物活性的OSF-1。首先通过全基因人工合成的方法合成人osf-1基因,并克隆至毕赤酵母分泌表达载体pPIC9K,构建重组表达质粒pPIC9K/osf-1,线性化后电转化酵母宿主菌GS115,构建P.pastoris GS115/pPIC9K/osf-1,经MD、G418-YPD平板和PCR法筛选,获得多拷贝转化子。阳性表达菌株在25℃,经1%的甲醇诱导表达96 h,重组蛋白的表达量达到最大。经SDS-PAGE电泳分析所表达的重组蛋白约为18 kDa,与人成骨细胞刺激因子相符。表达上清经SP-Sephadex C-50离子交换层析进行纯化,得到纯度达98%以上的OSF-1。Western blotting鉴定该蛋白对人成骨细胞刺激因子抗体具有良好的抗原性。生物活性测定表明提纯的OSF-1能促进鼠成骨细胞MC3T3-E1的增殖和分化。利用重组毕赤酵母高效分泌表达了有生物活性的OSF-1,为进一步开展其抗骨质疏松活性研究及产业化开发奠定了基础。 展开更多
关键词 osf-1 毕赤酵母 蛋白表达 纯化 生物活性
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口腔粘膜下纤维化中ET-1mRNA表达的研究 被引量：1
2
作者 彭解英 邢泉 王静 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2006年第3期239-242,共4页
目的:通过研究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在口腔粘膜下纤维化中mRNA的表达,探讨ET-1与OSF(oral submucous fibrosis)病变发生发展的关系。方法:选取30例OSF患者,其中早、中、晚期组各10例,5例健康志愿者作为对照组,每例研究对象取其... 目的:通过研究内皮素-1(endothelin-1,ET-1)在口腔粘膜下纤维化中mRNA的表达,探讨ET-1与OSF(oral submucous fibrosis)病变发生发展的关系。方法:选取30例OSF患者,其中早、中、晚期组各10例,5例健康志愿者作为对照组,每例研究对象取其口腔颊粘膜,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)研究ET-1在OSF中mRNA的表达水平。结果:ET-1的mRNA在OSF各期中的表达均较正常口腔粘膜高(P<0.05);ET-1mRNA在OSF早期的表达均明显低于中、晚期(P<0.05),其中期的表达与晚期相比差异无显著性(P>0.05)。结论:各种调节因素在基因转录水平对ET-1表达的上调以及由此造成的ET-1基因的异常表达可能与OSF病变的发生发展密切相关。 展开更多
关键词 口腔粘膜下纤维化 内皮素-1 MRNA 逆转录聚合酶链反应
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口腔黏膜下纤维性变及相关口腔癌患者血清SCC-Ag、Cyfra21-1、NSE及CEA的水平变化和意义 被引量：13
3
作者 于然 宋江园 +1 位作者 丁玉梅 许智 《临床口腔医学杂志》 2020年第9期533-536,共4页
目的:探讨血清鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及癌胚抗原(CEA)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)及OSF相关口腔癌(OSF-OSCC)中的表达和意义。方法:纳入2018年8月~2019年12月在华中科技大学... 目的:探讨血清鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、细胞角蛋白19片段(Cyfra21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及癌胚抗原(CEA)在口腔黏膜下纤维性变(OSF)及OSF相关口腔癌(OSF-OSCC)中的表达和意义。方法:纳入2018年8月~2019年12月在华中科技大学同济医学院附属协和医院接受诊治疗的72例OSF患者以及50例健康体检者,并根据OSF是否伴有口腔黏膜癌变,分为OSF组50例和OSF-OSCC组22例。检测不同组别的SCC-Ag、Cyfra21-1、NSE及CEA水平,分析各肿瘤标志物的血清表达水平与疾病临床病理的相关性,探讨血清SCC-Ag、Cyfra21-1、NSE及CEA水平对口腔黏膜下纤维性变病情变化中的意义。结果:3组血清SCC-Ag、Cyfra21-1水平含量差异具有统计学意义(P<0.05),OSF组与健康对照组对比,SCC-Ag水平含量差异具有统计学意义;与OSF组对比,OSF-OSCC组患者血清SCC-Ag、Cyfra21-1水平明显升高(P<0.05);3组患者NSE及CEA水平无显著差异(P>0.05)。结论:在OSF及其相关口腔癌的患者中,体内血清SCC-Ag、Cyfra21-1含量差异较为明显,其检测有利于OSF及其相关口腔癌的早期诊断,提示SCC-Ag、Cyfra21-1与OSF及OSF相关口腔癌的发生发展有一定关联。 展开更多
关键词 肿瘤标记物 口腔黏膜下纤维性变 SCC-AG CYFRA21-1 口腔癌
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口腔黏膜上皮癌变过程中内皮素Ⅰ表达的定量研究
4
作者 许春姣 彭解英 +2 位作者 刘蜀凡 姚志刚 王树芝 《临床口腔医学杂志》 2002年第5期334-336,共3页
目的 了解正常口腔黏膜,癌前病变及癌组织中内皮素I(ET-I)表达特点及其变化规律。方法采用免疫组化和图象分析技术,对人正常口腔黏膜(NOR)10例、口腔黏膜下纤维化(OSF)10例、鳞状细胞癌(SCC)15例上皮细胞的ET-I含量进行图像分析。结果 ... 目的 了解正常口腔黏膜,癌前病变及癌组织中内皮素I(ET-I)表达特点及其变化规律。方法采用免疫组化和图象分析技术,对人正常口腔黏膜(NOR)10例、口腔黏膜下纤维化(OSF)10例、鳞状细胞癌(SCC)15例上皮细胞的ET-I含量进行图像分析。结果 ①ET-I在OSF、OLK、SCC组织中的表达增强,阳性物质主要位于上皮棘细胞、基质细胞的胞浆胞膜上,且ET-I含量显著高于正常对照组(p<0.01)。②OLK、SCC上皮细胞ET-I含量呈显著增加趋势(p<0.05)。③OSF上皮细胞ET-I含量显著高于OLK(p<0.05),与SCC相比无显著性差异(p>0.05)。结论 ET-I含量在口腔癌前病变至癌变过程中可能存在一种量变关系,OSF中ET-I过量表达可能提示其上皮细胞的癌变潜能。 展开更多
关键词 口腔黏膜上皮癌变 内皮素I 口腔黏膜下纤维化 白斑 鳞状细胞癌 免疫组织化学
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