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八角莲醇提物抑制MAPK信号通路引起肾癌细胞凋亡的作用机制 被引量:5
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作者 游赣花 何恋 +4 位作者 李凯 杨萌 文周 刘旺培 朱建国 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2305-2313,共9页
目的探讨八角莲醇提物对肾透明细胞癌OS-RC-2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法八角莲给药,CCK-8及克隆形成实验检测给药后OS-RC-2细胞增殖情况;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移情况;活性氧(Reactive oxygen species,ROS)检测... 目的探讨八角莲醇提物对肾透明细胞癌OS-RC-2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法八角莲给药,CCK-8及克隆形成实验检测给药后OS-RC-2细胞增殖情况;划痕实验及Transwell实验检测细胞迁移情况;活性氧(Reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测细胞ROS水平。网络药理学进行八角莲及ROS共同靶点的获取,并进行KEGG分析。流式细胞仪检测细胞凋亡及周期水平,Western blot对MAPK信号通路关键蛋白及凋亡相关蛋白进行检测。结果八角莲可明显抑制OS-RC-2细胞增殖、迁移能力,并升高细胞ROS水平。网络药理学分析显示,共得到165个八角莲-ROS的共同靶点,KEGG分析发现,MAPK信号通路变化明显。Western blot结果显示,八角莲给药后,明显降低JNK蛋白水平及p-ERK/ERK比值;降低caspase-9及Bcl-2蛋白水平,而升高cleaved caspase-9及Bax蛋白表达。流式结果显示,八角莲给药可促进细胞凋亡,降低G 1期而升高G 2/M期细胞量。回复实验结果显示,ROS抑制剂NAC与八角莲联合给药可明显逆转八角莲单独给药对OS-RC-2的细胞活力及凋亡作用,以及对细胞凋亡关键蛋白、MAPK信号通路蛋白的表达改变。结论八角莲可能通过影响ROS水平发挥MAPK信号通路抑制作用,并进一步对OS-RC-2细胞产生促凋亡及抑制增殖作用。 展开更多
关键词 八角莲 肾癌 os-RC-2细胞 活性氧 mapk信号通路 凋亡
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粗糙脉孢菌转录因子LAH-3参与渗透压调控
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作者 高文双 王志隽 王颖 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期984-991,共8页
【目的】通过构建转录因子lah-3基因缺失突变体,研究lah-3基因缺失突变体菌株的渗透压表型,进而探究lah-3基因在渗透压调控中的作用。【方法】采用同源基因重组敲除技术构建lah-3基因缺失突变体。用4%NaCl和1 mol/L Sorbitol进行渗透压... 【目的】通过构建转录因子lah-3基因缺失突变体,研究lah-3基因缺失突变体菌株的渗透压表型,进而探究lah-3基因在渗透压调控中的作用。【方法】采用同源基因重组敲除技术构建lah-3基因缺失突变体。用4%NaCl和1 mol/L Sorbitol进行渗透压处理。利用Northern blot检测渗透压应答基因的表达。利用Westhern blot检测LAH-3蛋白磷酸化修饰水平,OS-2蛋白的表达水平及其磷酸化修饰水平。【结果】在转录因子lah-3基因缺失突变体中,渗透压应答基因gcy-1、stl-1以及pck-1的表达水平都明显降低,而且在渗透压刺激下,LAH-3蛋白磷酸化修饰水平升高。LAH-3的磷酸化修饰不受OS-2调控。lah-3基因的缺失既不影响OS-2蛋白的表达水平,也不影响其在渗透压刺激后的磷酸化修饰。【结论】粗糙脉孢菌中转录因子LAH-3参与调控渗透压应答基因的转录,但其响应过程不依赖于OS-2 MAPK信号通路。 展开更多
关键词 粗糙脉孢菌 渗透压 os-2 mapk 转录因子LAH-3
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