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羊口疮病毒119蛋白表达、纯化和多克隆抗体的制备 被引量：3
1
作者 陈慧芹 罗树红 +4 位作者 梁婉菲 陈瑜 梁振明 高其庆 郝文波 《生物技术》 北大核心 2017年第2期112-116,173,共6页
[目的]克隆表达羊口疮病毒ORFV119蛋白,以纯化重组蛋白为免疫原制备鼠多克隆抗体,并鉴定抗体的特性。[方法]PCR扩增ORFV119基因,克隆入原核表达载体p ET-28a(+)中构建重组质粒p ET28a-119。经双酶切和测序正确后,转化感受态大肠杆菌BL21... [目的]克隆表达羊口疮病毒ORFV119蛋白,以纯化重组蛋白为免疫原制备鼠多克隆抗体,并鉴定抗体的特性。[方法]PCR扩增ORFV119基因,克隆入原核表达载体p ET-28a(+)中构建重组质粒p ET28a-119。经双酶切和测序正确后,转化感受态大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白表达情况。表达产物进行超声破碎和Ni柱纯化,之后目的蛋白免疫BALB/c小鼠,制备ORFV119多克隆抗体并对其通过中和实验进行鉴定。[结果]成功构建重组质粒p ET28a-119,在大肠杆菌BL21中ORFV119融合蛋白以部分可溶形式表达。可溶性目的蛋白纯化后作为免疫原制备鼠多克隆抗体,抗体效价达1∶12 800,中和实验显示该多抗具有保护作用,可减轻宿主细胞在病毒感染时的病变效应(中和效价66 ND50/m L)。[结论]成功诱导表达、纯化ORFV119蛋白并制备其多克隆抗体,为深入研究ORFV感染、发病机理及羊口疮疾病的临床诊断奠定基础。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 orfv119 纯化 多克隆抗体 中和实验
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羊口疮病毒编码的NF-κB抑制基因研究进展 被引量：9
2
作者 庞峰 龙琴琴 程振涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期813-817,823,共6页
羊口疮又称为羊传染性脓疱,是由羊口疮病毒(orf virus,ORFV)引起的一种人兽共患病,给全球畜牧业造成了重大经济损失。核转录因子NF-κB(nuclear factor kappa B)是一种蛋白复合物,在宿主早期抗病毒反应、先天免疫,炎症和细胞凋亡过程中... 羊口疮又称为羊传染性脓疱,是由羊口疮病毒(orf virus,ORFV)引起的一种人兽共患病,给全球畜牧业造成了重大经济损失。核转录因子NF-κB(nuclear factor kappa B)是一种蛋白复合物,在宿主早期抗病毒反应、先天免疫,炎症和细胞凋亡过程中扮演着重要角色。ORFV编码多个基因抑制宿主细胞NF-κB信号通路,从而免疫逃逸。本文将对ORFV编码的多个NF-κB抑制基因(ORFV024,ORFV002,ORFV121,ORFV073,ORFV119和锚蛋白)的研究进展进行综述,使大家对ORFV抑制NF-κB信号通路的策略和机制有更全面的认识,为ORFV防控提供新的思路。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 NF-ΚB ORFV024 ORFV002 ORFV121 ORFV073 orfv119 锚蛋白
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