期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到4篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
HHV-8 ORF73C基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
1
作者 张心声 董辉 +3 位作者 许建红 张梅红 宋玮 齐眉 《山东医药》 CAS 北大核心 2006年第16期45-46,共2页
利用PCR技术获得人疱疹病毒8型(HHV-8)ORF 73C基因,克隆至pGEM T-easy载体,进一步克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中,构建含HHV-8 ORF 73C基因的重组表达质粒pGEXORF 73;重组表达质粒pGEXORF 73在大肠杆菌中得到有效表达。
关键词 疱疹病毒8型 人 基因 orf73c 大肠杆菌
暂未订购
KSHV ORF73C基因原核表达产物的纯化与免疫原性分析 被引量：1
2
作者 汤巧 卢春 +3 位作者 黄丽 钱超 曾怡 张玲 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期364-366,共3页
目的　纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒 (KSHV)潜伏相关核抗原 (LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性。方法　含重组质粒pGEX 6p 1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL2 1经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。用glutath... 目的　纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒 (KSHV)潜伏相关核抗原 (LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性。方法　含重组质粒pGEX 6p 1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL2 1经异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达。用glutathioneSepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后 ,以重组 3C蛋白酶对融合蛋白进行解离 ,SDS PAGE对表达及纯化产物进行鉴定。以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清 ,建立ELISA检测其免疫原性。结果　SDS PAGE显示蛋白条带大小分别为 4 90 0 0和 2 30 0 0 ,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致 ;ELISA检测显示 ,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清 2倍以上。结论　成功获得了纯化的ORF73C蛋白 ,经ELISA显示其有较强免疫原性。 展开更多
关键词 C蛋白 免疫原性 纯化 原核表达产物 C基因 免疫小鼠 核抗原 IPTG 诱导表达 SDS-PAGE
暂未订购
卡波济肉瘤相关疱疹病毒潜伏相关核抗原编码基因的克隆及表达 被引量：1
3
作者 黄丽 卢春 曾怡 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期292-296,共5页
目的:分离卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核心抗原(LANA)羧基端基因(ORF73C),并在大肠杆菌中克隆和表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamH I和EcoR I酶切位点,提取稳定状态的BCBL-1细胞的总DNA作模板,通过PCR扩... 目的:分离卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核心抗原(LANA)羧基端基因(ORF73C),并在大肠杆菌中克隆和表达。方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入BamH I和EcoR I酶切位点,提取稳定状态的BCBL-1细胞的总DNA作模板,通过PCR扩增KSHV ORF73C,PCR产物经双酶切后按正确的读码框克隆进原核表达质粒pGEX-6p-1中,并转化大肠杆菌感受态细胞BL21,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白。结果:经核酸序列测定及分析,分离、克隆的ORF73C基因与基因数据库中登记的ORF73基因的羧基端的621bp的序列有99％同源性。经IPTG诱导的重组质粒转化菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳显示有大小约为46ku的融合蛋白表达。结论:初步表明ORF73C基因在大肠杆菌中获得正确表达。 展开更多
关键词 卡波济肉瘤相关疱疹病毒 潜伏相关核抗原(LANA) orf73c 原核表达
暂未订购
人疱疹病毒8型感染的间接ELISA检测方法的建立
4
作者 仇岩 朱海峰 张心声 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2008年第8期747-750,755,共5页
目的建立人疱疹病毒8型(HHV-8)感染的间接ELISA检测方法,并初步探讨其应用价值。方法利用PCR技术获得HHV-8 ORF73C基因,插入到原核表达载体pGEX-6P-1中,在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达;以纯化的GST-ORF73C融合蛋白为包被抗原,利... 目的建立人疱疹病毒8型(HHV-8)感染的间接ELISA检测方法,并初步探讨其应用价值。方法利用PCR技术获得HHV-8 ORF73C基因,插入到原核表达载体pGEX-6P-1中,在大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导蛋白表达;以纯化的GST-ORF73C融合蛋白为包被抗原,利用方阵滴定法确定包被抗原和抗血清的最适工作浓度,并通过阻断试验、交叉试验、特异性试验、重复性试验及与Chou等建立的K8.1合成多肽-ELISA检测方法进行试验比较等评价其效果。结果SDS-PAGE及Western-blot检测结果显示,目的基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到高效表达,且表达产物能被KS阳性血清[HIV(+)/KS(+)血清]特异性识别;方阵滴定试验显示:包被抗原的最佳浓度为1.5μg/mL,血清抗体的最佳稀释度为1∶80;阻断试验、交叉试验、特异性试验、重复性试验等表明该方法特异性强、重复性好;对86份HIV(+)/KS(-)血清样品进行检测的结果显示,该方法与Chou等建立的K8.1合成多肽-ELISA检测方法的符合率为98.8%。结论GST-ORF73C-ELISA检测方法具有良好的特异性和重复性,可用于HHV-8感染的血清学检测及流行病学调查。 展开更多
关键词 人疱疹病毒8型 orf73c基因 酶联免疫吸附测定
暂未订购
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部