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2014年中国不同地区对虾白斑综合征病毒ORF14/15和ORF23/24缺失区序列比较 被引量:4
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作者 孙新颖 刘庆慧 +1 位作者 万晓媛 黄倢 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2016年第4期140-146,共7页
对虾养殖面临诸多病害威胁,对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是养殖对虾主要病原之一,WSSV不同地理株的变异可能导致WSSV毒力的变化。为了解2014年中国大部分地区WSSV ORF14/15和ORF23/24的变异情况,本研究选择2014... 对虾养殖面临诸多病害威胁,对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)是养殖对虾主要病原之一,WSSV不同地理株的变异可能导致WSSV毒力的变化。为了解2014年中国大部分地区WSSV ORF14/15和ORF23/24的变异情况,本研究选择2014年1月–8月期间采集的48份WSSV阳性样本,用特异引物扩增ORF14/15和ORF23/24片段,连接于T载体,转化至Top10中,筛选阳性克隆,测序分析不同样本之间的缺失差异。结果显示,能够扩增ORF14/15和ORF23/24样品的比例分别为43.75%和33.33%。在ORF14/15扩增中,分别扩增出1260 bp、1270 bp、1892 bp和2662 bp片段,与TH-96-Ⅱ比对共有4种缺失情况,即缺失6540 bp、6530 bp、5908 bp和5138 bp。而在ORF23/24扩增中,分别扩增出1140 bp和1146 bp片段,与中国台湾株(TW)比对有两种缺失情况,即缺失12070 bp和12064 bp。研究结果表明,WSSV在中国大部分地区存在一定程度的变异,而不同毒株之间在ORF14/15可变区差异比较明显,在ORF23/24可变区差异不大,但均具有大片段缺失。 展开更多
关键词 WSSV ORF14/15 orf23/24 序列分析
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湖北地区克氏原螯虾白斑综合征病毒变异区ORF14/15、ORF23/24基因序列比较分析
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作者 杨星 刘文枝 +3 位作者 马杰 周勇 范玉顶 曾令兵 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2017年第5期64-71,共8页
试验扩增、克隆了在湖北地区采集的19份克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)阳性样品的变异区ORF14/15和ORF23/24基因,通过测序比较分析了湖北各WSSV毒株与Gen Bank公布的标准毒株间在变异... 试验扩增、克隆了在湖北地区采集的19份克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)阳性样品的变异区ORF14/15和ORF23/24基因,通过测序比较分析了湖北各WSSV毒株与Gen Bank公布的标准毒株间在变异区ORF14/15及ORF23/24基因的差异性。结果显示,19份WSSV阳性样品中有部分样品在变异区扩增出ORF14/15、ORF23/24基因片段,变异区基因序列分析发现,与Gen Bank已公布的标准毒株相比,存在大片段缺失。在变异区ORF14/15,有3个毒株扩增出1 442 bp的片段,4个毒株扩增出630 bp的片段,基于变异区ORF14/15构建的系统进化树显示,这些毒株归属两个不同的分支。在变异区ORF23/24,有2个毒株扩增出大小为2 096 bp的片段,进化分析发现这2个毒株在变异区ORF23/24的遗传距离较近。 展开更多
关键词 克氏原螯虾(Procambarus clarkii) 白斑综合征病毒 ORF14/15 orf23/24 序列分析
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绵羊痘病毒甘肃流行株膜蛋白ORF23基因的克隆及序列分析
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作者 张冬峰 郑亚东 +6 位作者 骆学农 王晓霞 陈轶霞 李辉 侯俊玲 景志忠 才学鹏 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2009年第1期44-48,共5页
从甘肃景泰县疑似患羊痘的绵羊皮肤组织中提取基因组DNA,PCR扩增膜蛋白ORF23基因.序列分析表明,该基因由1113个核苷酸组成,编码370个氨基酸,A+T含量占69.90%,G+C含量仅占30.10%.绵羊痘病毒甘肃株ORF23基因与A株、NISKHI株之间的核苷酸... 从甘肃景泰县疑似患羊痘的绵羊皮肤组织中提取基因组DNA,PCR扩增膜蛋白ORF23基因.序列分析表明,该基因由1113个核苷酸组成,编码370个氨基酸,A+T含量占69.90%,G+C含量仅占30.10%.绵羊痘病毒甘肃株ORF23基因与A株、NISKHI株之间的核苷酸同源性分别为99.6%和99.5%,氨基酸同源性分别为98.7%和98.4%;与皮肤疙瘩病病毒NW-LW株和山羊痘病毒Pellor株之间的核苷酸同源性均为98.2%.结构预测显示,ORF23膜蛋白为非分泌蛋白,具有一个O连结糖基化位点.可见,ORF23膜蛋白在不同的绵羊痘病毒流行株之间非常保守,具有潜在的疫苗和诊断研究价值. 展开更多
关键词 绵羊痘病毒 orf23 膜蛋白
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抗戊型肝炎病毒重组蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
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作者 陶薇 杨连华 +2 位作者 何卓晶 洪艳 陈勇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2009年第10期2227-2229,共3页
目的:制备能够特异性识别戊型肝炎病毒重组蛋白ORF23的单克隆抗体并分析其生物学特性。方法:利用纯化的戊型肝炎病毒(HEV)ORF23基因工程重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并对其单克隆抗体的相关性质进行... 目的:制备能够特异性识别戊型肝炎病毒重组蛋白ORF23的单克隆抗体并分析其生物学特性。方法:利用纯化的戊型肝炎病毒(HEV)ORF23基因工程重组蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体,并对其单克隆抗体的相关性质进行鉴定。结果:获得两株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株A8和A11。间接ELISA方法测定,杂交瘤细胞培养上清效价均为1:32000,接种小鼠的腹水效价均为1:2×106。两株单抗均能特异性识别重组ORF23蛋白,但它们识别ORF23蛋白的不同表位。结论:获得的单克隆抗体可以为诊断HEV提供敏感、特异、稳定的诊断试剂,并为HEV ORF23重组蛋白抗原表位的精确定位以及基于表位的基因工程疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 戊型肝炎病毒 orf23重组蛋白 单克隆抗体(McAb)
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安徽省克氏原螯虾白斑综合征病毒缺失区序列分析
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作者 陈红莲 王永杰 +1 位作者 程云生 宋光同 《水产科技情报》 2018年第4期206-210,共5页
为了解安徽省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)缺失区ORF23/24和ORF14/15的遗传差异及其与世界各地WSSV的遗传进化关系,2016年4月—8月,在安徽省6个市采集了9个养殖克氏原螯虾样本进行W... 为了解安徽省克氏原螯虾(Procambarus clarkii)白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)缺失区ORF23/24和ORF14/15的遗传差异及其与世界各地WSSV的遗传进化关系,2016年4月—8月,在安徽省6个市采集了9个养殖克氏原螯虾样本进行WSSV套式PCR检测,扩增病毒缺失区ORF23/24和ORF14/15,将获得的序列进行比较分析。结果显示,9个样本均在第1轮PCR扩增中获得阳性结果,其ORF23/24区与中国台湾株(TW)比对,缺失5 892 bp或9 310 bp,其ORF14/15区与WSSV祖先株(TH-96-Ⅱ)比对,缺失5138 bp或5948 bp。其中8个样本中WSSV与2008至2010年在江苏的克氏原螯虾中检测到的一些毒株的ORF23/24和ORF14/15区缺失情况相同,且这些病毒ORF14/15区均缺失5 138 bp,与TW株缺失情况相同。 展开更多
关键词 克氏原螯虾 白斑综合征病毒 orf23/24 ORF14/15 序列分析
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白斑综合征病毒广西株缺失区基因的比较分析 被引量:8
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作者 童桂香 黎小正 +5 位作者 韦信贤 杨先乐 张益峰 吴祥庆 叶欣宇 黄国秋 《上海海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期8-14,共7页
为了解广西养殖凡纳滨对虾中白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的感染流行情况,并探讨WSSV广西株缺失区ORF23/24基因的遗传进化差异及其与各地WSSV毒株间的遗传进化关系,2010年5月至2013年9月在广西凡纳滨对虾主产区北海... 为了解广西养殖凡纳滨对虾中白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的感染流行情况,并探讨WSSV广西株缺失区ORF23/24基因的遗传进化差异及其与各地WSSV毒株间的遗传进化关系,2010年5月至2013年9月在广西凡纳滨对虾主产区北海、钦州和防城港共采集306份患病虾样品,应用世界动物卫生组织(OIE)推荐的套式聚合酶链式反应(nested-PCR)方法进行WSSV检测;选取第一轮PCR为阳性的53份样品进行缺失区ORF23/24基因的PCR扩增,并将12份阳性PCR产物进行克隆、序列测定与比较分析。结果显示:306份患病虾样品中有82份为WSSV感染阳性,阳性率为26.8%;12株WSSV广西株缺失区ORF23/24基因大小均为2 096 bp,相对于此区域最为完整的WSSV-TW株,广西株均在中间缺失了10 970 bp;12株WSSV广西株的缺失区ORF23/24基因差异小,核苷酸同源性均在99.6%以上,仅存在少数碱基的替换,没有缺失和插入,其中BH-3、QZ-1、FCG-1和FCG-2的核苷酸序列完全一致;基于缺失区构建的系统发育进化树显示,WSSV广西地方株在遗传上相距较近,全部与印度株IN-05-Ⅰ聚在一个大的分支,而与台湾株、中国株及韩国株在遗传上相距较远。研究表明,WSSV感染在广西凡纳滨对虾主要养殖地区存在一定程度的流行;广西WSSV毒株缺失区ORF23/24基因的变异类型为中间大片段缺失,各毒株间无明显的地域和时间差异;WSSV广西株与印度株IN-05-Ⅰ的遗传进化关系最近。 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 白斑综合征病毒 orf23 24基因 序列分析
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2017年中国部分地区白斑综合征病毒高变异区的序列分析 被引量:4
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作者 刘晓娉 孙新颖 +2 位作者 刘庆慧 万晓媛 黄倢 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2019年第3期329-337,共9页
白斑综合征病毒(WSSV)自暴发以来给全球范围内的对虾养殖产业带来了巨大的损失。为了解我国凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖区WSSV的流行变异情况,选取2017年中国部分地区的42个WSSV阳性样本,对ORF14/15、ORF23/24、ORF75、ORF94... 白斑综合征病毒(WSSV)自暴发以来给全球范围内的对虾养殖产业带来了巨大的损失。为了解我国凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖区WSSV的流行变异情况,选取2017年中国部分地区的42个WSSV阳性样本,对ORF14/15、ORF23/24、ORF75、ORF94和ORF125共5个可变区进行PCR特异性扩增,分析其序列的缺失变异和重复单元(Ru)中单核苷酸多态性的变化。研究结果显示,在ORF14/15的扩增中共出现4种缺失片段;ORF23/24只出现11945bp的缺失片段;ORF75扩增中,总RUs数目为3、4、9,其中45bp的RUs在12、27、80位点发生多核苷酸多态性;ORF94的RUs数目为6,其各重复单元在48位发生单核苷酸多态性;ORF125的RUs数目为4、6、7不等,其各重复单元分别在20、27、50、53、61位发生碱基突变。研究结果表明,2017年样本中,WSSV在中国大部分地区均出现一定程度的缺失变异,其中部分可变区表现出缺失情况的稳定性,某些可变区的重复单元数目及SNP表现出地区的差异性以及不稳定性。 展开更多
关键词 WSSV ORF14/15 orf23/24 ORF75 ORF94 ORF125 序列分析
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Genotyping of White Spot Syndrome Virus in Chinese Cultured Shrimp during 1998-1999 被引量:8
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作者 Yan-wei Tan Zheng-li Shi 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第2期123-130,共8页
Recent studies showed that white spot syndrome virus(WSSV) isolates from different geographic locations share a high genetic similarity except the variable regions in ORF23/24 and ORF14/15,and variable number of tande... Recent studies showed that white spot syndrome virus(WSSV) isolates from different geographic locations share a high genetic similarity except the variable regions in ORF23/24 and ORF14/15,and variable number of tandem repeats(VNTR) within ORF94.In this study,genotyping was performed according to these three variable regions among WSSV isolates collected during 1998/1999 from Southern China.These WSSV isolates contain a deletion of 1168,5657,5898,9316 and 11093 bp,respectively in the variable region ORF23/24 compared with WSSV-TW,and a deletion of 4749 or 5622 bp in the variable region ORF14/15 relative to TH-96-II.Four types of repeat units(RUs)(6,8,9 and 13 RUs) in ORF94 were detected in these isolates,with the shortest 6 RUs as the most prevalent type.Our results provide important information for a better understanding of the spatio-temporal transmission mode and the WSSV genetic evolution lineage. 展开更多
关键词 WSSV GENOTYPING Variable region orf23/24 ORF 14/15 ORF94 China
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