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禽腺病毒血清4型ORF22蛋白转录组分析及功能验证
1
作者 王晨阳 王金恩 +5 位作者 鲁鹏飞 孙子龙 张鼎 席义博 杨勃 李炜 《核农学报》 北大核心 2026年第4期692-702,共11页
禽腺病毒血清4型(FAdV-4)是鸡肝炎-心包积液综合征(HHS)的主要病原体,其非结构蛋白ORF22缺失毒株感染会导致病毒噬斑变小且在动物体内复制能力下降,但具体机制尚不明确。为了探究ORF22蛋白在FAdV-4感染过程中的作用,本研究以鸡肝癌细胞(... 禽腺病毒血清4型(FAdV-4)是鸡肝炎-心包积液综合征(HHS)的主要病原体,其非结构蛋白ORF22缺失毒株感染会导致病毒噬斑变小且在动物体内复制能力下降,但具体机制尚不明确。为了探究ORF22蛋白在FAdV-4感染过程中的作用,本研究以鸡肝癌细胞(LMH)为试验模型,利用转录组测序技术进行解析。结果显示,与对照组相比,ORF22过表达组共筛选到362个差异表达基因(DEGs)。其中,321个DEGs表达上调,41个DEGs表达下调。对这些差异表达基因进行GO分析发现,下调的DEGs主要与小分子代谢过程、膜区域、蛋白质结合相关,而上调的DEGs主要与细胞过程的调节、细胞外区域和信号受体结合相关。KEGG通路分析显示,DEGs主要富集在TGF-β信号通路、MAPK信号通路、钙离子信号通路、细胞因子-细胞因子受体相互作用等。此外,通过蛋白质相互作用网络分析发现,HSP90AA1、HSPA8、BAG3等多个关键蛋白位于整个网络中心。过表达ORF22显著降低了宿主细胞天然免疫相关蛋白cGAS、STING、TBK1的表达。综上所述,本研究揭示了ORF22蛋白在FAdV-4感染中与宿主细胞的相互作用,为解析FAdV-4致病机制提供了参考。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 orf22 鸡肝癌细胞 转录组测序
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CGSIV病毒ORF22R序列分析,克隆及大肠杆菌表达 被引量：1
2
作者 张欣 赵高翔 +1 位作者 李蔚 周天鸿 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期118-123,共6页
中国大鲵虹彩病毒是近年来造成驯养大鲵大规模的发病及死亡的病原体之一．以病毒基因组为模板，分离了ORF22R DNA序列．蛋白氨基酸序列信息分析结果表明中国大鲵虹彩病毒与蛙病毒属中类两栖类蛙病毒组的成员有很高的同源性，达到95.9％... 中国大鲵虹彩病毒是近年来造成驯养大鲵大规模的发病及死亡的病原体之一．以病毒基因组为模板，分离了ORF22R DNA序列．蛋白氨基酸序列信息分析结果表明中国大鲵虹彩病毒与蛙病毒属中类两栖类蛙病毒组的成员有很高的同源性，达到95.9％～98.2％；而与蛙病毒属类GIV病毒组成员的同源性相对较低，为31.7％；与淋巴囊肿病毒属的成员的同源性最低，只有16％左右．将PCR技术分离的ORF22R DNA序列克隆至原核表达质粒pET22b．重组质粒pET22b-ORF22R转化于 Rosetta 大肠杆菌菌，经 IPTG诱导，表达重组蛋白．镍柱纯化后 SDS-PAGE检测ORF22R蛋白分子量为65 kD，CGSIV ORF22R蛋白原核表达成功． 展开更多
关键词 中国大鲵虹彩病毒 orf22R 序列分析 原核表达
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重组人C22orf37融合蛋白的克隆、表达、纯化及鉴定
3
作者 叶星明 姜昌丽 张英起 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第12期1057-1059,共3页
目的:构建人C22orf37基因的原核表达载体,表达并纯化C22orf37重组蛋白.方法:应用PCR方法从人外周血白细胞cDNA文库中获得人C22orf37基因,成功构建人C22orf37融合表达载体,诱导表达His-C22orf37融合表达蛋白并对表达产物进行SDS-PAGE电... 目的:构建人C22orf37基因的原核表达载体,表达并纯化C22orf37重组蛋白.方法:应用PCR方法从人外周血白细胞cDNA文库中获得人C22orf37基因,成功构建人C22orf37融合表达载体,诱导表达His-C22orf37融合表达蛋白并对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western Blot鉴定.应用镍螯合层析法纯化重组融合蛋白,并对纯化产物进行纯度分析.结果:成功构建了人C22orf37重组融合载体pQE30-C22orf37,工程菌pQE30-C22orf37/DH5α经IPTG诱导后的菌体蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在Mr约18 000处出现了一条新生的蛋白条带,Western Blot结果显示该条带能够与His抗体特异性结合.应用Ni-NTA层纯化出目的蛋白,纯化后的蛋白经Primer Premier软件分析纯度约80%.结论:成功构建了人C22orf37的融合蛋白原核表达载体并成功表达与纯化了人C22orf37的融合蛋白,为下一步的C22orf37 mAb的制备和C22orf37蛋白表达的组织分布及功能研究奠定了基础. 展开更多
关键词 人C22orf37基因 原核表达 重组融合蛋白质类/分离和提纯
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