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题名山羊痘病毒ORF037基因的克隆与原核表达
被引量:1
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作者
张雪萍
米丽开姆·托合提尼亚孜
李庆辉
李有文
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机构
塔里木大学生命科学学院
新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室
塔里木大学动物科学学院
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出处
《黑龙江畜牧兽医》
CAS
北大核心
2018年第10期101-104,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(31360616
31760741)
塔里木畜牧科技兵团重点实验室开放课题项目(HS201307)
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文摘
山羊痘是由山羊痘病毒引起羊的一种急性、热性、接触性传染病。山羊痘病毒推测的核心蛋白(ORF037)是其结构蛋白之一。为了研究ORF037基因的生物学特性,试验采用PCR技术扩增出NJ-2010株的ORF037基因,将其插入pET42b载体构建原核表达载体,对经酶切鉴定的阳性重组质粒进行测序和序列分析,并转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导表达蛋白质,表达产物经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析。结果表明:PCR扩增出了ORF037基因,并构建了pET42b-037原核表达载体,测序分析表明其大小为393 bp,与参考株Peller株的相似度为99.35%,NJ-2010株与山羊痘毒株在同一个分枝上,大肠杆菌中表达的蛋白质分子质量约15 ku,与预期结果大小相符。说明NJ-2010株与山羊痘毒的亲缘关系最近,且可以在大肠杆菌中表达。
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关键词
山羊痘病毒
orf037
克隆
核心蛋白
原核表达载体
蛋白表达
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Keywords
Goatpox virus
orf037
cloning
core protein
prokaryotic expression vector
protein expression
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分类号
S852.654
[农业科学—基础兽医学]
Q78
[生物学—分子生物学]
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